Решение Коллегии ЕЭК №150 от 25.10.2022 О внесении изменений в Фармакопею Евразийского экономического союза

2 5. В нумерации раздела 2.2. «Реактивы, стандартные растворы, буферные растворы» цифры «2.2.» заменить на «2.2.1.». 6. В общей фармакопейной статье 2.2.1.1. код «202010001-2019» заменить на «202010001-2022». 7. В общей фармакопейной статье 2.2.1.2. код «202010002-2019» заменить на «202010002-2022». 8. Общую фармакопейную статью 2.3.1.2. с кодом «203010002- 2019» заменить на общую фармакопейную статью 2.3.1.2. с кодом «203010002-2022», указанную в пункте 10 настоящих изменений. 9. В общей фармакопейной статье 2.3.5.0. в рисунке 2.3.5.0.-1 слова «Субстанции для фармацевтического применения (2034)» заменить цифрами «2.3.18.0.». 10. Дополнить общими фармакопейными статьями следующего содержания: 2. ÎÁÙÈÅ ÔÀÐÌÀÊÎÏÅÉÍÛÅ ÑÒÀÒÜÈ 3 2.1. ÌÅÒÎÄÛ ÀÍÀËÈÇÀ 4 2.1.2. ÔÈÇÈ×ÅÑÊÈÅ È ÔÈÇÈÊÎ-ÕÈÌÈ×ÅÑÊÈÅ ÌÅÒÎÄÛ ÀÍÀËÈÇÀ 201020044-2022 2.1.2.44. Òåìïåðàòóðà êàïëåïàäåíèÿ Òåìïåðàòóðà êàïëåïàäåíèÿ ïðåäñòàâëÿåò ñî- áîé òåìïåðàòóðó, ïðè êîòîðîé â óñëîâèÿõ, ïðè- âåäåííûõ íèæå, ïåðâàÿ êàïëÿ ðàñïëàâëåííîãî èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïàäàåò èç ÷àøêè. Îïðåäåëåíèå òåìïåðàòóðû êàïëåïàäåíèÿ ïðîâîäÿò äëÿ îáðàçöîâ, íå ðàñòèðàþùèõñÿ â ïî- ðîøîê è ïëàâÿùèõñÿ íèæå òåìïåðàòóðû êèïå- íèÿ âîäû, òàêèõ, êàê æèðû, âîñê, ïàðàôèí, âàçå- ëèí, ñìîëû. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå è (èëè) íîðìàòèâíîì äî- êóìåíòå ïî êà÷åñòâó ïðèìåíÿþò ìåòîä 1. Çàìåíà ìåòîäà 1 íà ìåòîä 2 äîëæíà áûòü ïîäòâåðæäåíà äàííûìè ïî âàëèäàöèè. ÌÅÒÎÄ 1 Ïðèáîð. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ èñ- ïîëüçóþò ïðèáîð, ïðåäñòàâëåííûé íà ðèñóíêå 2.1.2.44.-1. Ïðèáîð ñîñòîèò èç äâóõ ìåòàëëè÷å- ñêèõ ãèëüç (À è Á), ñîåäèíåííûõ îäíà ñ äðóãîé ïîñðåäñòâîì ðåçüáû. Ãèëüçà À ïðèêðåïëåíà ê ðòóòíîìó òåðìîìåòðó.  íèæíåé ÷àñòè ãèëüçû Á ñ ïîìîùüþ äâóõ óïëîòíèòåëåé Ä ñâîáîäíî çà- 5 Ðèñóíîê 2.1.2.44.-1. — Ïðèáîð äëÿ îïðåäåëåíèÿ òåìïåðàòóðû êàïëåïàäåíèÿ. Ðàçìåðû â ìèëëèìåòðàõ. À — âåðõíÿÿ ìåòàëëè÷åñêàÿ ãèëüçà; Á — íèæíÿÿ ìåòàëëè÷åñêàÿ ãèëüçà;  — îòâåðñòèå äëÿ óðàâíîâåøèâàíèÿ äàâ- ëåíèÿ; à — ôèêñàòîðû; Ä — óïëîòíèòåëè; Å — ìåòàëëè÷åñêàÿ ÷àøêà êðåïëåíà ìåòàëëè÷åñêàÿ ÷àøêà Å. Òî÷íîå ïîëî- æåíèå ÷àøêè îïðåäåëÿåòñÿ ôèêñàòîðàìè à äëè- íîé 2 ìì, èñïîëüçóåìûìè òàêæå äëÿ öåíòðîâêè òåðìîìåòðà. Îòâåðñòèå  â ñòåíêå ãèëüçû Á ïðåäíàçíà÷åíî äëÿ âûðàâíèâàíèÿ äàâëåíèÿ. Îò- âîäÿùàÿ ïîâåðõíîñòü ÷àøêè äîëæíà áûòü ïëî- ñêîé, à êðàÿ âûõîäíîãî îòâåðñòèÿ — ïîä ïðÿ- ìûì óãëîì ê ïîâåðõíîñòè. Íèæíÿÿ ÷àñòü ðòóò- íîãî òåðìîìåòðà èìååò ôîðìó è ðàçìåð, êàê ïîêàçàíî íà ðèñóíêå 2.1.2.44.-1; ïðåäåëû èçìå- ðåíèÿ òåðìîìåòðà îò 0 °Ñ äî 110 °Ñ, ðàññòîÿíèå íà øêàëå â 1 ìì ñîîòâåòñòâóåò ðàçíîñòè òåìïå- ðàòóð â 1 °Ñ. Øàðèê òåðìîìåòðà èìååò äèàìåòð (3,5 ± 0,2) ìì è âûñîòó (6,0 ± 0,3) ìì. Ïðèáîð óñòàíàâëèâàþò ïî îñè ïðîáèðêè äëèíîé îêîëî 200 ìì è íàðóæíûì äèàìåòðîì îêîëî 40 ìì. Ïðèáîð ïðèêðåïëÿþò ê ïðîáèðêå ñ ïîìî- ùüþ ïðîáêè, â êîòîðóþ âñòàâëåí òåðìîìåòð è êîòîðàÿ èìååò áîêîâóþ ïðîðåçü. Îòâåðñòèå ÷àøêè äîëæíî íàõîäèòüñÿ íà ðàññòîÿíèè îêîëî 15 ìì îò äíà ïðîáèðêè. Âñå óñòðîéñòâî ïîãðó- æàþò â ñòàêàí âìåñòèìîñòüþ îêîëî 1 ë, çàïîë- íåííûé âîäîé. Äíî ïðîáèðêè äîëæíî íàõîäèòü- ñÿ íà ðàññòîÿíèè îêîëî 25 ìì îò äíà ñòàêàíà. Óðîâåíü âîäû äîëæåí äîñòèãàòü âåðõíåé ÷àñòè ãèëüçû À. Äëÿ ðàâíîìåðíîãî ðàñïðåäåëåíèÿ òåìïåðàòóðû â ñòàêàíå èñïîëüçóþò ìåøàëêó. Ìåòîäèêà. Èñïûòóåìûé îáðàçåö ïîäãîòàâ- ëèâàþò â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüè è (èëè) íîðìàòèâíîãî äî- êóìåíòà ïî êà÷åñòâó. Çàïîëíÿþò ÷àøêó äî êðàåâ èñïûòóåìûì îáðàçöîì. Èçáûòîê îáðàçöà óäàëÿ- þò ñ îáåèõ ñòîðîí øïàòåëåì. Ïîñëå òîãî, êàê ãèëüçû À è Á ñîåäèíåíû, ïðîòàëêèâàþò ÷àøêó âíóòðü íà åå ìåñòî â ãèëüçå Á äî óïîðà. Óäàëÿþò øïàòåëåì îáðàçåö, âûäàâëåííûé òåðìîìåòðîì.

Ïðèáîð ïîìåùàþò â âîäÿíóþ áàíþ, êàê îïèñà- íî âûøå. Âîäÿíóþ áàíþ íàãðåâàþò äî òåìïåðà- òóðû ïðèìåðíî íà 10 °Ñ íèæå ïðåäïîëàãàåìîé òåìïåðàòóðû êàïëåïàäåíèÿ è óñòàíàâëèâàþò ñêîðîñòü íàãðåâà îêîëî 1 °Ñ/ìèí. Îòìå÷àþò òåìïåðàòóðó ïàäåíèÿ ïåðâîé êàïëè. Ïðîâîäÿò íå ìåíåå òðåõ îïðåäåëåíèé, êàæäûé ðàç ñ íîâûì îáðàçöîì. Ðàçíîñòü ìåæäó ïîêàçàíèÿìè íå äîëæíà ïðåâûøàòü 3 °Ñ. Çà òåìïåðàòóðó êàïëå- ïàäåíèÿ ïðèíèìàþò ñðåäíåå çíà÷åíèå òðåõ èç- ìåðåíèé. ÌÅÒÎÄ 2 — ÀÂÒÎÌÀÒÈ×ÅÑÊÈÉ ÌÅÒÎÄ Ïðèáîð. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ èñ- ïîëüçóþò ïðèáîð, ïðåäñòàâëåííûé íà ðèñóíêå 2.1.2.44.-2, êîòîðûé ñîñòîèò èç ñáîðíîãî êàð- òðèäæà, âêëþ÷àþùåãî äåðæàòåëü, â êîòîðîì ñâîáîäíî ôèêñèðóåòñÿ ÷àøêà ñ èñïûòóåìûì îá- ðàçöîì, è ïðèåìíèêà ñ ãîðèçîíòàëüíûì ïðîñâå- òîì, êîòîðûé ôèêñèðóåòñÿ ïîä ÷àøêîé. Äàííûé êàðòðèäæ âñòàâëÿþò â áëîê íàãðåâàíèÿ. Áëîê ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ìåòàëëè÷åñêèé öèëèíäð ñ öèëèíäðè÷åñêîé ùåëüþ âäîëü åãî âåðòèêàëü- íîé îñè, âíóòðè êîòîðîé ïîìåùàþò ñáîðíûé êàðòðèäæ. Êðîìå òîãî, èìååòñÿ äðóãàÿ, áîëåå óç- êàÿ öèëèíäðè÷åñêàÿ âåðòèêàëüíàÿ ùåëü, â êîòî- ðóþ óñòàíàâëèâàþò òåìïåðàòóðíûé äàò÷èê íà óðîâíå ÷àøêè äëÿ ïðîá. Ñíàðóæè íàãðåâàòåëü- íîãî áëîêà ðàñïîëàãàåòñÿ ýëåêòðè÷åñêèé íàãðå- âàòåëüíûé ýëåìåíò. Ïîä íàãðåâàòåëüíûé áëîê óñòàíàâëèâàþò ëàìïó òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû ïî- òîê ñâåòà ïðîõîäèë ÷åðåç ïðîñâåò â ïðèåìíèê íà óñòàíîâëåííûé íàïðîòèâ ôîòîäàò÷èê. Áëîê íà- ãðåâàíèÿ ñ ïîìîùüþ íàãðåâàòåëüíîãî ýëåìåíòà ñïîñîáåí ïîääåðæèâàòü òî÷íî óñòàíîâëåííóþ òåìïåðàòóðó, à òàêæå íàãðåâàòüñÿ ìåäëåííî ñ ïîñòîÿííîé îïðåäåëåííîé ñêîðîñòüþ ïîñëå íà÷àëüíîãî èçîòåðìè÷åñêîãî ïåðèîäà. 6 Ðèñóíîê 2.1.2.44.-2. — Ïðèìåð ïðèáîðà àâòîìàòè÷å- ñêîãî îïðåäåëåíèÿ òåìïåðàòóðû êàïëåïàäåíèÿ. À — äåðæàòåëü ÷àøêè; Á — áëîê íàãðåâàíèÿ;  — èñòî÷- íèê ñâåòà; à — ùåëü; Ä — ñáîðíûé êàðòðèäæ; Å — íàãðåâàòåëüíûé ýëåìåíò; Æ — ÷àøêà ñ èñïûòóåìûì îáðàçöîì; Ç — ôîòîäàò÷èê; È — ïðèåìíèê; Ê — òåìïåðàòóðíûé äàò÷èê Ìåòîäèêà. Èñïûòóåìûé îáðàçåö ïîäãîòàâ- ëèâàþò ñîãëàñíî óêàçàíèÿì ÷àñòíîé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüè è(èëè) íîðìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïî êà÷åñòâó è ïðîâîäÿò èñïûòàíèå êàê óêàçàíî íèæå èëè â ñîîòâåòñòâèè ñ èíñòðóêöèÿìè ïðî- èçâîäèòåëÿ. Èçáûòîê îáðàçöà óäàëÿþò ñ îáåèõ ñòîðîí ÷àøêè øïàòåëåì. ×àøêó ïîìåùàþò â äåðæàòåëü è ïðèñîåäèíÿþò ðóêàâ. Ñáîðíûé êàðòðèäæ ïîìåùàþò â áëîê íàãðåâàíèÿ. Íà ïðè- áîðå âûñòàâëÿþò ïåðâîíà÷àëüíûå èçîòåðìè÷å- ñêèå óñëîâèÿ è ñêîðîñòü ïîñòåïåííîãî íàãðåâà- íèÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüè è (èëè) íîðìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïî êà÷åñòâó. Âêëþ÷àþò ïðîãðàììó òåìïåðàòóðíîãî ðåæèìà. Êîãäà ïåðâàÿ êàïëÿ ðàñïëàâëåííîãî îáðàçöà óïàäåò ÷åðåç ùåëü íà äíî ÷àøêè, òåì ñàìûì ïðåðûâàÿ ïîòîê ñâåòà, ñèãíàë ôîòîäàò÷èêà ïðèâåäåò ê àâòîìàòè÷åñêîé ðåãèñòðàöèè òåìïåðàòóðû áëîêà íàãðåâàíèÿ. Êàëèáðîâêà ïðèáîðà. Ïðèáîð èñïîëüçóþò â ñîîòâåòñòâèè ñ èíñòðóêöèÿìè ïðîèçâîäèòåëÿ.  çàâèñèìîñòè îò èñïîëüçîâàíèÿ ïðèáîðà è èñ- ïûòóåìûõ îáðàçöîâ, ðåãóëÿðíî ïðîâîäÿò ïðåä- ïèñàííóþ êàëèáðîâêó è ïðîâåðêó ýêñïëóàòàöè- îííûõ õàðàêòåðèñòèê ñèñòåìû. Îáû÷íî èñïîëü- çóþò ñåðòèôèöèðîâàííûå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû áåíçîéíîé êèñëîòû è áåíçîôåíîíà. Äîïóñêàåò- ñÿ ïðèìåíåíèå äðóãèõ âåùåñòâ ïðè óñëîâèè, ÷òî îíè íå ïðîÿâëÿþò ïîëèìîðôèçì. Êàëèáðîâêó ïðîâîäÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ èíñòðóêöèÿìè ïðîèç- âîäèòåëÿ èëè ñëåäóþùèì îáðàçîì. Äëÿ êàæäîãî èç äâóõ ñåðòèôèöèðîâàííûõ ñòàíäàðòíûõ îá- ðàçöîâ ãîòîâÿò ïî òðè ÷àøêè è ðàçìåùàþò èõ íà ÷èñòîé ïîâåðõíîñòè.  êàæäóþ ÷àøêó ïîìåùà- þò íåáîëüøîå êîëè÷åñòâî ñåðòèôèöèðîâàííîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è óïëîòíÿþò ñòåðæíåì (äèàìåòð îêîëî 4,5 ìì). Ïðîâåðÿþò, ÷òîáû îò- âåðñòèå áûëî ïîëíîñòüþ çàïîëíåíî. Íàïîëíÿþò ÷àøêó ïðèìåðíî íàïîëîâèíó è óïëîòíÿþò îá- ðàçöû ñ ïîìîùüþ ñòåðæíÿ (äèàìåòð îêîëî 9 ìì).

×àøêó íàïîëíÿþò è óïëîòíÿþò, ïðè íå- îáõîäèìîñòè äîáàâëÿÿ îáðàçåö, ïîêà ÷àøêà íå áóäåò ïîëíîñòüþ çàïîëíåíà. Òåìïåðàòóðíàÿ ïðîãðàììà äëÿ áåíçîéíîé êèñëîòû: íà÷àëüíàÿ òåìïåðàòóðà — 118,0 °Ñ; ñêîðîñòü íàãðåâà — 0,2 °Ñ/ìèí; êîíå÷íàÿ òåì- ïåðàòóðà — 126,0 °Ñ. Ïîñëå óñòàíîâêè ÷àøêè âûäåðæèâàþò â òå÷åíèå 30 ñ ïðè òåìïåðàòóðå 118 °Ñ äî íà÷àëà íàãðåâàíèÿ. Òåìïåðàòóðíàÿ ïðîãðàììà äëÿ áåíçîôåíîíà: íà÷àëüíàÿ òåìïåðàòóðà — 44,0 °Ñ; ñêîðîñòü íà- ãðåâà — 0,2 °Ñ/ìèí; êîíå÷íàÿ òåìïåðàòóðà — 56,0 °Ñ. Ïîñëå óñòàíîâêè ÷àøêè âûäåðæèâàþò â òå÷åíèå 30 ñ ïðè òåìïåðàòóðå 44 °Ñ äî íà÷àëà íàãðåâàíèÿ. Ïðîâåðÿþò òðè îòäåëüíûõ ðåçóëüòàòà. Ðå- çóëüòàòû èñïûòàíèÿ ñ÷èòàþò äîñòîâåðíûìè, åñëè ïîëó÷åííûå çíà÷åíèÿ íàõîäÿòñÿ â ïðåäå- ëàõ ±0,3 °C îò ñðåäíåãî çíà÷åíèÿ. Èñïðàâëåííîå ñðåäíåå çíà÷åíèå òåìïåðàòó- ðû (T2) ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå: T1 – F, ãäå: T1 — ñðåäíÿÿ òåìïåðàòóðà êàïëåïàäåíèÿ ïî òðåì èçìåðåíèÿì, â ãðàäóñàõ Öåëüñèÿ; F — ïîïðàâêà íà ðàçíèöó òåìïåðàòóð îá- ðàçöà è ìåñòà èçìåðåíèÿ òåìïåðàòóðû â íàãðåâàòåëüíîì áëîêå (åå çíà÷åíèå èçìåíÿåòñÿ â çàâèñèìîñòè îò êîíñò- ðóêöèè ïðèáîðà àâòîìàòè÷åñêîãî îï- ðåäåëåíèÿ òåìïåðàòóðû êàïëåïàäåíèÿ è ïðåäñòàâëÿåòñÿ ïðîèçâîäèòåëåì). Ïðèíèìàÿ â ðàñ÷åò òåìïåðàòóðó êàïëåïàäå- íèÿ (T0) ñåðòèôèöèðîâàííîãî ñòàíäàðòíîãî îá- ðàçöà, òî÷íîñòü òåìïåðàòóðíîé øêàëû ñ÷èòàåò- ñÿ óäîâëåòâîðèòåëüíîé, åñëè |T2 – T0| íå ïðåâû- øàåò 0,3 °Ñ. 201020045-2022 2.1.2.45. Ñïåêòðîìåòðèÿ ÿäåðíîãî ìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà Ñïåêòðîìåòðèÿ ÿäåðíîãî ìàãíèòíîãî ðåçî- íàíñà (ßÌÐ) — àíàëèòè÷åñêèé ìåòîä, ïîçâî- ëÿþùèé èññëåäîâàòü õèìè÷åñêóþ ñòðóêòóðó îð- ãàíè÷åñêèõ ìîëåêóë ïî èíòåðïðåòàöèè èõ ñïåê- òðîâ ßÌÐ ïî ìàãíèòíûì ìîìåíòàì èçîòîïîâ 1Í, 13C, 19F, 15N, 31P. Ñïåêòðû ßÌÐ ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû äëÿ êà÷åñòâåííûõ è êîëè÷åñòâåí- íûõ àíàëèçîâ.  ñîîòâåòñòâóþùèõ ýêñïåðèìåíòàëüíûõ óñ- ëîâèÿõ èíòåãðèðîâàííàÿ èíòåíñèâíîñòü ñèãíà- ëîâ ßÌÐ ïðÿìî ïðîïîðöèîíàëüíà ÷èñëó ñïèíîâ ÿäåð ìîëåêóëÿðíîé ãðóïïû, îòâåòñòâåííîé çà ñèãíàë. Ýòè èíòåãðàëû ìîãóò èñïîëüçîâàòüñÿ äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî àíàëèçà. ÎÁÙÈÅ ÏÐÈÍÖÈÏÛ Ïðè ïîìåùåíèè ãðóïïèðîâêè ÿäåð ñ óãëî- âûì ìîìåíòîì è ìàãíèòíûì ìîìåíòîì â ñòàòè- ÷åñêîå ìàãíèòíîå ïîëå (Â0) ÿäðà çàíèìàþò ïî 7 îòíîøåíèþ ê îñè ìàãíèòíîãî ïîëÿ îïðåäåëåí- íûå îðèåíòàöèè, ðàçðåøåííûå â êâàíòîâîé ìå- õàíèêå. Ýòè óðîâíè ýíåðãåòè÷åñêè ðàçëè÷íû. Êîëåáàòåëüíîå âûñîêî÷àñòîòíîå ìàãíèòíîå ïîëå (B1), ïåðïåíäèêóëÿðíîå ìàãíèòíîìó ïîëþ Â0, âûçûâàåò ïåðåõîäû ìåæäó ýòèìè óðîâíÿìè ñ ïîëíûì ïîãëîùåíèåì ýíåðãèè. Ñîãëàñíî óñëî- âèþ ðåçîíàíñà w0 = gB0, (ãäå g — ãèðîìàãíèòíîå îòíîøåíèå, w0 — ëàðìîðîâà ÷àñòîòà), ìàãíèò- íîå ïîëå Â0 èëè ÷àñòîòà w0 ïîëÿ B1 ìîãóò èçìå- íÿòüñÿ äëÿ ïîëó÷åíèÿ ñïåêòðà (ìåòîä íåïðåðûâ- íîé âîëíû (ÌÍÂ)).  íàñòîÿùåå âðåìÿ èçëó÷å- íèå B1 ïîëó÷àþò ïðè ïîìîùè ðàäèî÷àñòîòíîãî èìïóëüñà (ìåòîä Ôóðüå ïðåîáðàçîâàíèÿ). Êîãå- ðåíòíîå èçëó÷åíèå, èñïóñêàåìîå ïðè âîçâðàùå- íèè â èñõîäíîå ñîñòîÿíèå, ðåãèñòðèðóþò â âèäå çàòóõàþùåé êðèâîé, íàçûâàåìîé ñïàäîì ñâî- áîäíîé èíäóêöèè (ÑÑÈ). Ïîñëåäóþùåå Ôó- ðüå-ïðåîáðàçîâàíèå äàåò ñïåêòð â îáëàñòè ÷àñòîòû, ïðåäîñòàâëÿÿ èíôîðìàöèþ î ìîëåêó- ëÿðíîé ñòðóêòóðå. Äîïîëíèòåëüíûå ðàäèî÷àñ- òîòíûå îáëàñòè ïðèìåíÿþòñÿ âî âðåìÿ ðåãèñò- ðàöèè ñèãíàëà ÑÑÈ ïîäàâëåíèÿ ñêàëÿðíûõ âçàèìîäåéñòâèé (ïðÿìàÿ ñâÿçü) ìåæäó ÿäðàìè (òàê íàçûâàåìîå «ðàñïàðèâàíèå»). Äëÿ êà÷åñò- âåííîãî è êîëè÷åñòâåííîãî àíàëèçà æèäêèõ èëè òâåðäûõ îáðàçöîâ ìîæíî ïðèìåíèòü îäíî- è ìíîãîìåðíûå ìåòîäû. Âàæíóþ èíôîðìàöèþ î ñòðóêòóðå âåùåñòâà ïîëó÷àþò èç ñëåäóþùèõ ñïåêòðîñêîïè÷åñêèõ ïàðàìåòðîâ, ïðèâåäåííûõ â òàáëèöå 2.1.2.45.-1.

Êîððåëÿöèè ðàçëè÷íûõ ñïåêòðàëüíûõ ïàðà- ìåòðîâ (íàïðèìåð, õèìè÷åñêèé ñäâèã è êîí- ñòàíòà ñïèí-ñïèíîâîãî âçàèìîäåéñòâèÿ, èëè õè- ìè÷åñêèå ñäâèãè ðàçëè÷íûõ ÿäåð â ïðåäåëàõ îä- íîé ìîëåêóëÿðíîé ñèñòåìû) ìîãóò áûòü ïîëó÷åíû ãîìî- è ãåòåðîÿäåðíûìè äâóìåðíûìè è áîëåå ìíîãîìåðíûìè ìåòîäàìè. Èíôîðìàöèþ î âðåìåíè ðåëàêñàöèè T1 è T2, î ÿäåðíûõ ýôôåê- òàõ Îâåðõàóçåðà è êèíåòèêå ïðîöåññîâ, çàâèñÿ- ùèõ îò âðåìåíè, òàêæå ìîæíî ïîëó÷èòü ñ ïîìî- ùüþ ñîîòâåòñòâóþùèõ ýêñïåðèìåíòîâ. ÏÐÈÁÎÐ ßÌÐ-ñïåêòðîìåòð ñ âûñîêîé ðàçðåøàþùåé ñïîñîáíîñòüþ ñîñòîèò èç ñëåäóþùèõ ÷àñòåé: – ìàãíèò äëÿ ñîçäàíèÿ ïîñòîÿííîãî ìàãíèò- íîãî ïîëÿ; – òåðìîñòàòèðóåìûé äàò÷èê ñ äåðæàòåëåì îáðàçöà, ïðåäíàçíà÷åííûé äëÿ ïîäà÷è âûñîêî- ÷àñòîòíîãî èìïóëüñà è îïðåäåëåíèÿ èçëó÷åíèÿ, èñïóñêàåìîãî îáðàçöîì; – ýëåêòðîííîå óñòðîéñòâî äëÿ ñîçäàíèÿ ìîùíûõ âûñîêî÷àñòîòíûõ èìïóëüñîâ, ðåãèñò- ðàöèè è ïðåîáðàçîâàíèÿ ñèãíàëà ÑÑÈ â öèôðî- âóþ ôîðìó; ýòî óñòðîéñòâî òàêæå ïîääåðæèâàåò ñòàáèëüíîñòü ýëåêòðîíèêè ïðèáîðà; – óñòðîéñòâà ñáîðà è îáðàáîòêè äàííûõ (êîìïüþòåð); òàêæå âêëþ÷àåò: – ïðîòî÷íóþ êþâåòó äëÿ ïðîâåäåíèÿ æèä- êîñòíîé õðîìàòîãðàôèè ßÌÐ èëè ïðîòî÷íî- èíúåêöèîííîãî àíàëèçà; – ñèñòåìó äëÿ ñîçäàíèÿ èìïóëüñíîãî ãðàäè- åíòà ìàãíèòíîãî ïîëÿ ßÌÐ. Ñèëüíîå ìàãíèòíîå ïîëå ãåíåðèðóåòñÿ êà- òóøêîé ñâåðõïðîâîäèìîñòè â ñîñóäå Äüþàðà, çàïîëíåííîãî æèäêèì ãåëèåì. Äàò÷èê, êàê ïðà- âèëî, ñîäåðæèò îáðàçåö â ïðîáèðêå ñ âíåøíèì äèàìåòðîì 5 ìì èëè â ïðîòî÷íîé êþâåòå, è ñî- åäèíåí ðàäèî÷àñòîòíûìè êàáåëÿìè ñ ýëåêòðîí- íûì áëîêîì, íàñòðîåííûì íà ÷àñòîòó 1Í-ÿäåð è èçîòîïîâ Õ-ÿäåð. Íåîáõîäèìûìè ÿâëÿþòñÿ äî- ïîëíèòåëüíûå óñòðîéñòâà äëÿ íàñòðîéêè è ðåãó- 8 Òàáëèöà 2.1.2.45.-1. Ðåçîíàíñíàÿ ÷àñòîòà Îïðåäåëÿåòñÿ âèä ÿäåð Êîëè÷åñòâî ðåçîíàíñíûõ ñèãíàëîâ (ñèíãëåòû, ìóëüòè- ïëåòû) Êîëè÷åñòâî îòäåëüíûõ õèìè÷åñêèõ ãðóïï ÿäåð Õèìè÷åñêèé ñäâèã d (ppm) Îïðåäåëÿåòñÿ õèìè÷åñêàÿ ïðèðîäà è îêðóæåíèå ñòðóêòóðíûõ ãðóïï Èíòåíñèâíîñòü ðåçîíàíñíûõ ñèãíàëîâ Îòíîñèòåëüíîå êîëè÷åñòâî ðåçîíàíñíûõ ÿäåð â îò- äåëüíîé õèìè÷åñêîé ãðóïïå Ìóëüòèïëåòíîñòü ñîïðÿæåííîé ñòðóêòóðû Êîëè÷åñòâî ÿäåð, ñêàëÿðíî ñâÿçàííûõ ñ íàáëþäàåìûì ÿäðîì Êîíñòàíòà ñïèí-ñïèíîâîãî âçàèìîäåéñòâèÿ nJ (Ãö) Êîëè÷åñòâî âçàèìîäåéñòâóþùèõ ÿäåð è ãåîìåòðèÿ ñâÿçåé ëèðîâêè ýëåêòðîííûõ êîíòóðîâ; êðîìå òîãî, ÷àñòî èñïîëüçóþò òåðìîñòàòèðîâàíèå îáðàçöîâ. Ñëåäóåò ïîäòâåðäèòü íàäëåæàùåå ôóíêöèî- íèðîâàíèå ßÌÐ-ñïåêòðîìåòðà. Äëÿ ýòîãî èñ- ïîëüçóþò ñîîòâåòñòâóþùèå èñïûòàíèÿ, âêëþ- ÷àþùèå, êàê ïðàâèëî, èçìåðåíèå øèðèíû ñïåê- òðàëüíîé ëèíèè íà ïîëóâûñîòå îïðåäåëåííûõ ïèêîâ ïðè îïðåäåëåííûõ óñëîâèÿõ, îòíîøåíèå ñèãíàë/øóì (S/N) äëÿ ñòàíäàðòíûõ ñìåñåé, èí- òåíñèâíîñòü èìïóëüñà (èçìåðåííàÿ êàê 90° øè- ðèíû èìïóëüñà), è âîñïðîèçâîäèìîñòü èìïóëü- ñà. Âñå èçãîòîâèòåëè ïðèáîðîâ ïðåäîñòàâëÿþò ñïåöèôèêàöèè è ïðîòîêîëû èçìåðåíèÿ óêàçàí- íûõ ïàðàìåòðîâ äëÿ îïðåäåëåííûõ êîìáèíàöèé ïðèáîð/äàò÷èê, è íåîáõîäèìî ïðîâîäèòü ïðî- âåðêó ñîîòâåòñòâèÿ ýòèì ñïåöèôèêàöèÿì. ßÌÐ Ñ ÔÓÐÜÅ-ÏÐÅÎÁÐÀÇÎÂÀÍÈÅÌ (ßÌÐ-ÔÏ) Êàê ïðàâèëî, â ñîâðåìåííûõ ñïåêòðîìåòðàõ èñïîëüçóåòñÿ ïðèíöèï Ôóðüå-ïðåîáðàçîâàíèÿ: ïîñëå âîçáóæäåíèÿ îáðàçöà âûñîêî÷àñòîòíûì èìïóëüñîì ñîîòâåòñòâóþùåé ÷àñòîòû (n), àì- ïëèòóäû (B1) è ïðîäîëæèòåëüíîñòè (tp) è ïîñëå- äóþùåé êîðîòêîé ïàóçû (td) (âðåìÿ âîññòàíîâ- ëåíèÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòè ïðèåìíèêà), óñèëåí- íûé àíàëîãîâûé ñèãíàë ÑÑÈ ðåãèñòðèðóþò â òå÷åíèå îïðåäåëåííîãî âðåìåíè (tac) è ïåðåâî- äÿò â öèôðîâóþ ôîðìó àíàëîãîâî-öèôðîâûì ïðåîáðàçîâàòåëåì (ÀÖÏ), ðåçóëüòàòû ñîõðàíÿ- þò â ïàìÿòè ñïåêòðîìåòðà. Âûõîäíîé ñèãíàë óñèëèâàåòñÿ ïåðåä îöèôðîâêîé äëÿ ìàêñèìàëü- íîãî ïîâûøåíèÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòè, íå ïåðåãðó- æàÿ ÀÖÏ.

Ïðè íàáëþäåíèè çà Õ-ÿäðàìè ñòàí- äàðòíûé ýêñïåðèìåíò âêëþ÷àåò, ïðè íåîáõîäè- ìîñòè, øèðîêîïîëîñíîå 1Í ðàñïàðèâàíèå (âîçáóæäåíèå) âñåõ ïðîòîíîâ. Äëÿ óâåëè÷åíèÿ îòíîøåíèÿ ñèãíàë/øóì, ìíîãîêðàòíûå ñèãíàëû ÑÑÈ ìîãóò áûòü êîãåðåíòíî íàêîïëåíû è ñóì- ìèðîâàíû. Ïðè Ôóðüå-ïðåîáðàçîâàíèè äàííûõ ýòîãî âðåìåííîãî èíòåðâàëà ïîëó÷àþò ñïåêòð îáëàñòè ÷àñòîò. ÏÀÐÀÌÅÒÐÛ Ñëåäóþùèå ïàðàìåòðû âëèÿþò íà ðåçóëüòàò ýêñïåðèìåíòà Ôóðüå-ïðåîáðàçîâàíèÿ, è äîëæíû êîíòðîëèðîâàòüñÿ. Øèðèíà èìïóëüñà (tp). Èìïóëüñ âîçáóæäå- íèÿ íàïðàâëåí âäîëü îñè x òàê íàçûâàåìîé ðàì- êè âðàùåíèÿ, åãî ïðîäîëæèòåëüíîñòü (èëè «øè- ðèíà») îïðåäåëÿåò óãîë ïåðåâîðîòà è, òàêèì îá- ðàçîì, èíòåíñèâíîñòü ðåçîíàíñíîãî ñèãíàëà: q g t= ¢× ×B p1 , (1) ãäå:tp — ïðîäîëæèòåëüíîñòü («øèðèíà») èì- ïóëüñà; q — óãîë ïîâîðîòà ðàìêè âðàùåíèÿ; g¢ — ãèðîìàãíèòíîå îòíîøåíèå. M My = ×o sin q, (2) ãäå: Ì — íàáëþäàåìàÿ íàìàãíè÷åííîñòü; Ìo — îáùàÿ íàìàãíè÷åííîñòü; q — óãîë ïîâîðîòà ðàìêè âðàùåíèÿ. Íàáëþäàåìàÿ íàìàãíè÷åííîñòü ìàêñèìàëü- íà ïðè q = 90°. Ïðîäîëæèòåëüíîñòü èìïóëüñà äîëæíà áûòü êîðîòêîé, ÷òîáû ãàðàíòèðîâàòü, ÷òî âñå ñèãíàëû âîçáóæäåíèÿ â ñïåêòðàëüíîé øèðèíå èìåþò îäèíàêîâóþ èíòåíñèâíîñòü. Íà- ìàãíè÷åííîñòü çàòóõàåò âñëåäñòâèå ïðîöåññîâ ðåëàêñàöèè. Äëèòåëüíîñòü ïàóçû (td). Ïàóçà — âðåìÿ ìåæäó îêîí÷àíèåì ïîäà÷è èìïóëüñà è íà÷àëîì ñáîðà äàííûõ, íåîáõîäèìîå ïî òåõíè÷åñêèì ïðè÷èíàì, ïîñêîëüêó åå äëèòåëüíîñòü ìîæåò âëèÿòü íà èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà è ôàçó ïèêà. Áûñòðî çàòóõàþùèå ñèãíàëû (äàþùèå íà÷àëî øèðîêèì ñïåêòðàëüíûì ëèíèÿì) óìåíüøàþòñÿ â èíòåíñèâíîñòè áîëüøå, ÷åì ìåäëåííî çàòó- õàþùèå ñèãíàëû (êîòîðûå äàþò íà÷àëî óçêèì ñïåêòðàëüíûì ëèíèÿì). Âðåìÿ ñáîðà äàííûõ (tac). Âðåìÿ ñáîðà äàí- íûõ ñâÿçàíî ñî ñïåêòðàëüíîé øèðèíîé (òî åñòü âñåé íàáëþäàåìîé îáëàñòüþ) è êîëè÷åñòâîì òî- ÷åê öèôðîâîãî ðàçðåøåíèÿ, ñîáðàííûõ âî âðåìÿ îáíàðóæåíèÿ ñèãíàëà. t DP SW ac = 2 , (3) ãäå: SW — ñïåêòðàëüíàÿ øèðèíà; DP — êîëè÷åñòâî òî÷åê öèôðîâîãî ðàçðå- øåíèÿ. Ìàêñèìàëüíàÿ èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà è îò- íîøåíèå ñèãíàëà ê øóìó áóäóò äîñòèãíóòû, åñëè âðåìÿ ñáîðà äàííûõ ïðèáëèçèòåëüíî ðàâ- íÿåòñÿ 1,2/(pn1/2), ãäå n1/2 — ïîëíàÿ øèðèíà íà ïîëóâûñîòå, íî äëÿ ìèíèìèçàöèè èñêàæåíèÿ ñèãíàëà ýòà âåëè÷èíà äîëæíà áûòü áîëåå 5/(pn1/2). Âðåìÿ ïîâòîðåíèÿ (tr). Ñïèí-ðåøåòî÷íàÿ ðåëàêñàöèÿ âëèÿåò íà âðåìÿ, òðåáóåìîå äëÿ ñïè- íîâîé ñèñòåìû, ÷òîáû ïðèéòè â ðàâíîâåñèå ïîñëå èìïóëüñà. Ðåëàêñàöèÿ ìîæåò áûòü óìåíü- øåíà ïðè ïîìîùè ñïåöèàëüíûõ ðåàêòèâîâ. 9  êîëè÷åñòâåííîì àíàëèçå èñïîëüçóåìîå âðåìÿ ïîâòîðåíèÿ äîëæíî óñòàíàâëèâàòüñÿ îòíîñè- òåëüíî ñïèí-ðåøåòî÷íîé ðåëàêñàöèè è óãëà ïî- âîðîòà ðàìêè âðàùåíèÿ, âî èçáåæàíèå ýôôåêòîâ íàñûùåíèÿ. Óñèëåíèå ïðèåìíèêà. Àíàëîãîâûé ñèãíàë, äåòåêòèðóåìûé äàò÷èêîì, óñèëèâàþò äî îöèô- ðîâêè è õðàíåíèÿ. Óñèëåíèå ñèãíàëà äîëæíî áûòü îòðåãóëèðîâàíî ëèáî àâòîìàòè÷åñêè, ëèáî âðó÷íóþ, ÷òîáû ñèãíàë íå ïåðåãðóæàë ÀÖÏ, ÷òî ìîæåò âûçûâàòü â ñâîþ î÷åðåäü èñêàæåíèå ñèãíàëà, è ïîçâîëèò îöèôðîâûâàòü ñëó÷àéíûé øóì, ïðîèçâåäåííûé ïðè èññëåäîâàíèè (òî åñòü áûòü îòëè÷íûì îò íóëÿ). ÎÏÒÈÌÈÇÀÖÈß ÏÀÐÀÌÅÒÐΠÑÁÎÐÀ È ÎÁÐÀÁÎÒÊÈ ÄÀÍÍÛÕ ÏÐÈ ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÌ ÀÍÀËÈÇÅ Ïîìèìî ïàðàìåòðîâ ñáîðà äàííûõ, èíòåí- ñèâíîñòü ñèãíàëà çàâèñèò åùå îò íåñêîëüêèõ ïà- ðàìåòðîâ. Ïîñëå ñáîðà äîñòàòî÷íîãî êîëè÷åñòâà öèêëîâ ñêàíèðîâàíèÿ, ñâîäíûé ñèãíàë ÑÑÈ ïðåîáðàçîâûâàåòñÿ ñ ïîìîùüþ Ôóðüå-ïðåîáðà- çîâàíèÿ. Äëÿ äîñòîâåðíîãî êîëè÷åñòâåííîãî îï- ðåäåëåíèÿ äîëæíû áûòü îïòèìèçèðîâàíû ñëå- äóþùèå ïàðàìåòðû. Öèôðîâîå ðàçðåøåíèå. Öèôðîâîå ðàçðåøå- íèå — ÷àñòîòíîå ðàçäåëåíèå ìåæäó èçìåðåííû- ìè òî÷êàìè. Îáðàáîòàííûé ñèãíàë äîëæåí èìåòü íå ìåíåå 5 èçìåðåííûõ òî÷åê âûøå ïîëó- âûñîòû èíòåãðèðóåìûõ ñèãíàëîâ.

Äëÿ óëó÷øå- íèÿ öèôðîâîãî ðàçðåøåíèÿ ïåðåä ïðåîáðàçîâà- íèåì ê êîíöó ýêñïåðèìåíòàëüíîé ÑÑÈ ìîãóò áûòü ïðèáàâëåíû äîïîëíèòåëüíûå òî÷êè íóëå- âîé èíòåíñèâíîñòè («íóëåâîå çàïîëíåíèå»). Îòíîøåíèå ñèãíàë/øóì. Ýòî îòíîøåíèå ìåæäó èíòåíñèâíîñòüþ (âûñîòîé ïèêà) îïðåäå- ëåííîãî ñèãíàëà â ßÌÐ-ñïåêòðå è ñëó÷àéíûõ êîëåáàíèé, êîòîðûå îáû÷íî èçìåðÿþòñÿ â îá- ëàñòè ñïåêòðà, êîòîðûé íå ñîäåðæèò ñèãíàëîâ îò àíàëèçèðóåìîãî âåùåñòâà. Íèçêîå çíà÷åíèå îòíîøåíèÿ ñèãíàë/øóì îãðàíè÷èâàåò òî÷íîñòü èíòåãðèðîâàíèÿ ïèêà è êîëè÷åñòâåííûõ îïðåäå- ëåíèé. Ïðè îòíîøåíèè ñèãíàë/øóì ðàâíûì èëè áîëåå 150:1 ñòàíäàðòíîå îòíîñèòåëüíîå îòêëî- íåíèå ïðè èíòåãðèðîâàíèè ïèêà ìîæåò áûòü ìå- íåå 1 %.  ïðîãðàììíîì îáåñïå÷åíèè ñîâðå- ìåííûõ ñïåêòðîìåòðîâ èìåþòñÿ àëãîðèòìû ïî îïðåäåëåíèþ îòíîøåíèÿ ñèãíàë/øóì ñîîòâåò- ñòâóþùèõ ïèêîâ. Ïðè àíàëèçå ðàçáàâëåííûõ ðàñòâîðîâ ïîëó÷èòü äîñòàòî÷íî âûñîêîå îòíî- øåíèå ñèãíàë/øóì äîâîëüíî òðóäíî, îñîáåííî ïðè äåòåêòèðîâàíèè ÿäåð, îòëè÷íûõ îò 1Í. Ñïî- ñîáû óâåëè÷åíèÿ îòíîøåíèÿ ñèãíàë/øóì âêëþ- ÷àþò â ñåáÿ: – óâåëè÷åíèå êîëè÷åñòâà ñóììèðóåìûõ èç- ìåðåíèé (n), ïîñêîëüêó îòíîøåíèå ñèãíàë/øóì óâåëè÷èâàåòñÿ ñ óâåëè÷åíèåì n; – èñïîëüçîâàíèå ýêñïîíåíöèàëüíîãî óìíî- æåíèÿ ñèãíàëà ÑÑÈ ïåðåä Ôóðüå-ïðåîáðàçîâà- íèåì: ýêñïîíåíöèàëüíûé êîýôôèöèåíò óìíîæå- íèÿ äîëæåí áûòü â çîíå ïîëíîé ïèêîâîé øèðè- íû íà ïîëóâûñîòå; – èñïîëüçîâàíèå ñïåêòðîìåòðîâ ñ áîëåå âû- ñîêèì ïîñòîÿííûì ìàãíèòíûì ïîëåì (B0), òàê êàê îòíîøåíèå ñèãíàë/øóì ïðîïîðöèîíàëüíî B0 3 2/ ; – èñïîëüçîâàíèå öèôðîâîãî ôèëüòðà äëÿ óìåíüøåíèÿ øóìà; – èñïîëüçîâàíèå äàò÷èêîâ, êîòîðûå ìàêñè- ìèçèðóþò ôàêòîð çàïîëíåíèÿ; – èñïîëüçîâàíèå êðèîäàò÷èêîâ, ñíèæàþ- ùèõ òåïëîâûå ïîìåõè. Îáëàñòü èíòåãðèðîâàíèÿ. Èíòåíñèâíîñòü ßÌÐ-ñèãíàëîâ ïîëó÷àþò èíòåãðèðîâàíèåì êâà- çè-àíàëîãîâîãî ñèãíàëà èëè ñ ïîìîùüþ ñòóïåí- ÷àòîãî ãðàôèêà, èëè áîëåå òî÷íûì èíòåãðèðîâà- íèåì îòäåëüíûõ ëèíèé è öèôðîâûì ïðåäñòàâëå- íèåì äàííûõ. Ïðè èññëåäîâàíèè æèäêèõ îáðàçöîâ ïîëó÷àþò ßÌÐ-ñèãíàëû â âèäå ëèíèé ëîðåíöåâîé ôîðìû. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêà- çàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå è (èëè) íîðìàòèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó èëè êîãäà ïðîèñõîäèò ïåðåêðûâàíèå ïèêà, äëÿ èñïûòóåìî- ãî ïèêà è ïèêà ñðàâíåíèÿ äîëæåí èñïîëüçîâàòü- ñÿ îäèíàêîâûé äèàïàçîí èíòåãðèðîâàíèÿ, âûðà- æåííûé â âèäå êðàòíîãî ÷èñëà ïîëíîé øèðèíå íà ïîëóâûñîòå ïèêà. Äèíàìè÷åñêèé äèàïàçîí. Äèíàìè÷åñêèé äèàïàçîí àíàëîãîâî-öèôðîâîãî ïðåîáðàçîâàòå- ëÿ (ÀÖÏ) îïðåäåëÿåò ìèíèìàëüíóþ ëèíèþ èí- òåíñèâíîñòè, êîòîðóþ ìîæíî íàáëþäàòü èëè êî- ëè÷åñòâåííî îïðåäåëèòü, ïðè èíòåãðèðîâàíèè äâóõ ñèãíàëîâ ñ òîé æå ñàìîé øèðèíîé ñïåê- òðàëüíîé ëèíèè. 16-áèòîâûé ÀÖÏ ïîçâîëÿåò èäåíòèôèöèðîâàòü ñèãíàë èíòåíñèâíîñòüþ 0,003 % îòíîñèòåëüíî ñèëüíîãî ñèãíàëà, ïîëíî- ñòüþ çàïîëíÿþùåãî äèíàìè÷åñêèé äèàïàçîí ÀÖÏ. ßÌÐ ÑÏÅÊÒÐÎÑÊÎÏÈß ÎÁÐÀÇÖΠ ÐÀÑÒÂÎÐÀÕ Áîëüøèíñòâî ßÌÐ èññëåäîâàíèé ïðîâîäÿò íà ðàçáàâëåííûõ ðàñòâîðàõ (ïðèáëèçèòåëüíî 10 1 %) èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ñîîòâåòñòâóþùåì ðàñòâîðèòåëå, ê êîòîðîìó ìîæåò áûòü ïðèáàâ- ëåí â èçâåñòíîé êîíöåíòðàöèè ïîäõîäÿùèé ñòàíäàðò äëÿ êàëèáðîâêè õèìè÷åñêîãî ñäâèãà. Ðàñòâîðèòåëè. Ðàñòâîðèòåëü äîëæåí ðàñ- òâîðÿòü èñïûòóåìûé îáðàçåö áåç äàëüíåéøåãî âçàèìîäåéñòâèÿ, åñëè èíîå íå óêàçàíî â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå è (èëè) íîðìàòèâíîì äî- êóìåíòå ïî êà÷åñòâó. Äëÿ ìèíèìèçàöèè èíòåí- ñèâíûõ ñèãíàëîâ ðàñòâîðèòåëåé èñïîëüçóþò ïîëíîñòüþ äåéòåðèðîâàííûå ðàñòâîðèòåëè (äåéòåðèÿ îêñèä Ð, äåéòåðèðîâàííûé õëîðî- ôîðì Ð, äåéòåðèðîâàííûé äèìåòèëñóëüôîêñèä Ð, äåéòåðèðîâàííûé àöåòîí Ð, äåéòåðèðîâàí- íûé ìåòàíîë Ð è ò.ä.).

Àòîìû ðàñòâîðèòåëÿ äàþò ñèãíàëû, êîòîðûå ëåãêî èäåíòèôèöèðóþò- ñÿ ïî èõ õèìè÷åñêîìó ñäâèãó, è ìîãóò èñïîëüçî- âàòüñÿ äëÿ êàëèáðîâêè îñè õèìè÷åñêîãî ñäâèãà (âòîðè÷íûé ñòàíäàðò). Ñðàâíåíèå. Ñïåêòðàëüíàÿ õàðàêòåðèñòèêà, íàèáîëåå çàâèñÿùàÿ îò õèìè÷åñêîãî îêðóæåíèÿ àòîìà â ìîëåêóëå, íàçûâàåòñÿ õèìè÷åñêèì ñäâè- ãîì, îáîçíà÷àåòñÿ áóêâîé ä è èçìåðÿåòñÿ â ìèë- ëèîííûõ äîëÿõ (ppm). Õèìè÷åñêèé ñäâèã ðåçî- íàíñíîé ÷àñòîòû äëÿ ßÌÐ àêòèâíîãî ÿäðà X èç- ìåðÿåòñÿ â ìèëëèîííûõ äîëÿõ (ppm), êàê ðàçíîñòü ìåæäó ðåçîíàíñíîé ÷àñòîòîé ýòîãî ÿäðà è ðåçîíàíñíîé ÷àñòîòîé âíóòðåííåãî ñòàí- äàðòà ñäâèãà, âûðàæåííàÿ â ãåðöàõ, äåëåííàÿ íà îñíîâíóþ ðàáî÷óþ ÷àñòîòó ñïåêòðîìåòðà, â ìå- ãàãåðöàõ, ïðè äàííîì ïîñòîÿííîì ìàãíèòíîì ïîëå: d n n n X X X , , , îáðàçåö îáðàçåö ñðàâíåíèå ïðèáîð = - , (4) ãäå: dX, îáðàçåö — õèìè÷åñêèé ñäâèã ðåçîíàíñ- íîé ÷àñòîòû äëÿ ßÌÐ àêòèâíî- ãî ÿäðà X, â ppm; nX, îáðàçåö — ðåçîíàíñíàÿ ÷àñòîòà àêòèâíî- ãî ÿäðà X, â ãåðöàõ; nX, ñðàâíåíèå — ðåçîíàíñíàÿ ÷àñòîòà âíóòðåí- íåãî ñòàíäàðòà ñäâèãà, â ãåð- öàõ; nïðèáîð — îñíîâíàÿ ðàáî÷àÿ ÷àñòîòà ñïåêòðîìåòðà, â ìåãàãåðöàõ. Óñëîâíî ïðèíÿòî, ÷òî òî÷íûé õèìè÷åñêèé ñäâèã óñòàíàâëèâàåòñÿ ïî 1Í ðåçîíàíñíîé ÷àñ- òîòå òåòðàìåòèëñèëàíà Ð (ÒÌÑ), è îáîçíà÷à- åòñÿ êàê dÒÌÑ = 0 ppm. Óñòàíîâèâ øêàëó ñäâèãîâ 1Í îòíîñèòåëüíî ÒÌÑ ìîæíî âû÷èñëèòü òî÷- íóþ ÷àñòîòó ëþáîãî äðóãîãî X ðåçîíàíñà, è îò- êàëèáðîâàòü ìàñøòàá åãî õèìè÷åñêîãî ñäâèãà. ×àñòîòó (âòîðè÷íîãî) ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà ïðè dÕ = 0 ppm ðàññ÷èòûâàþò ïî 1Í ÷àñòîòå ÒÌÑ è òàáëè÷íîìó çíà÷åíèþ îòíîøåíèÿ ÷àñòîòû, îï- ðåäåëåííîé äëÿ èçîòîïà, ê ÷àñòîòå 1Í â ÒÌÑ: n nX X, , ,ñðàâíåíèå H ÒÌÑ ñðàâíåíèå= ×X , (5) ãäå: nX, ñðàâíåíèå — ÷àñòîòà (âòîðè÷íîãî) ñòàíäàðò- íîãî îáðàçöà ïðè dÕ = 0 ppm; nH, ÒÌÑ — 1Í ÷àñòîòà òåòðàìåòèëñèëàíà; XX, ñðàâíåíèå — òàáëè÷íîå çíà÷åíèå îòíîøå- íèÿ ÷àñòîòû, îïðåäåëåííîé äëÿ èçîòîïà, ê ÷àñòîòå 1Í â òåòðàìåòèëñèëàíå. Ñòàíäàðòíûå îáðàçöû ïðè dX = 0 ppm è ñî- îòâåòñòâóþùèå çíà÷åíèÿ XX, ñðàâíåíèå ïðèâåäåíû â òàáëèöå 2.1.2.45.-2. Íà ïðàêòèêå õèìè÷åñêèå ñäâèãè X ñðàâíèâà- þò, íåïîñðåäñòâåííî èñïîëüçóÿ ñîîòâåòñòâóþ- ùèé ñòàíäàðò.  1Í è 13Ñ ßÌÐ ãëàâíûì îáðàçîì èñïîëüçóåòñÿ âíóòðåííèé ñòàíäàðò, êîòîðûé ïðè èññëåäîâàíèè íåïîñðåäñòâåííî ïðèáàâëÿ- þò ê èñïûòóåìîìó îáðàçöó. B 15N, 19F è 31Ð ßÌÐ ÷àñòî èñïîëüçóåòñÿ âíåøíèé ñòàíäàðò, êîãäà îá- ðàçåö è ñòàíäàðò íàõîäÿòñÿ â îòäåëüíûõ êîàêñè- àëüíûõ öèëèíäðè÷åñêèõ ïðîáèðêàõ. Ñòàáèëèçàöèÿ. Äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ ñìå- ùåíèÿ ñïåêòðà âî âðåìåíè âûïîëíÿþò ïðîöåäó- ðó ñòàáèëèçàöèè (äåéòåðèåâàÿ ñòàáèëèçàöèÿ). 11 Òàáëèöà 2.1.2.45.-2. ßäðà Âîäà1 XX, ñðàâíåíèå Äðóãèå ðàñòâîðèòåëè XX, ñðàâíåíèå 1H DSS2 1,00000000 ÒÌÑ 1,00000000 13C DSS2 0,25144953 ÒÌÑ 0,25145020 15N NH3 0,10132912 CH3NO2 0,10136767 19F CF3COOH íå óêàçàí CCl3F 0,94094011 31P H3PO4 (85 %) 0,40480742 (CH3O)3PO 0,40480864 1 õèìè÷åñêèé ñäâèã çàâèñèò îò çíà÷åíèÿ pH. 2 DSS — íàòðèÿ 2,2-äèìåòèë-2-ñèëàïåíòàí-5-ñóëüôîíàò. Äëÿ ýòîãî, åñëè èíîå íå óêàçàíî â ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüå è (èëè) íîðìàòèâíîì äîêó- ìåíòå ïî êà÷åñòâó, èñïîëüçóþò ñèãíàë 2Í (äåé- òåðèÿ), âûçûâàåìûé äåéòåðèðîâàííûìè ðàñòâî- ðèòåëÿìè. ÊÀ×ÅÑÒÂÅÍÍÛÉ ÀÍÀËÈÇ Êà÷åñòâåííûå ßÌÐ ñïåêòðû èñïîëüçóþòñÿ êàê èñïûòàíèÿ íà ïîäëèííîñòü, ïðè êîòîðîì 1Í èëè 13Ñ ñïåêòð èñïûòóåìîãî îáðàçöà ñðàâíèâà- þòñÿ ñî ñïåêòðîì ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà èëè, ðåæå, ñ îïóáëèêîâàííûì ñòàíäàðòíûì ñïåê- òðîì. Ñïåêòðû ñòàíäàðòíûõ è èñïûòóåìûõ îá- ðàçöîâ äîëæíû áûòü ïîëó÷åíû ñ èñïîëüçîâàíè- åì òåõ æå ñàìûõ ìåòîäèê è óñëîâèé ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ. Ïèêè â ýòèõ 2 ñïåêòðàõ èëè õàðàêòå- ðèñòè÷íûõ îáëàñòÿõ ñïåêòðîâ äîëæíû ñîâïà- äàòü ïî ïîëîæåíèþ, èíòåíñèâíîñòè è ìóëüòè- ïëåòíîñòè.

 ñîîòâåòñòâóþùèõ ñëó÷àÿõ ìîæåò áûòü ïðîâåäåíî ìàòåìàòè÷åñêîå ñîïîñòàâëåíèå, íàïðèìåð, âû÷èñëåíèå êîýôôèöèåíòà êîððåëÿ- öèè. Ïðè îòñóòñòâèè ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà èñ- ïîëüçóþò ðàáî÷èé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, èäåí- òè÷íîñòü êîòîðîãî áûëà ïîäòâåðæäåíà àëüòåð- íàòèâíûìè ìåòîäàìè, èëè ïóòåì ïîäòâåðæäåíèÿ òîãî, ÷òî ßÌÐ ñïåêòð ïîëíî- ñòüþ ñîâïàäàåò ñ çàÿâëåííîé ñòðóêòóðîé ìàòå- ðèàëà. ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÛÉ ÀÍÀËÈÇ Èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà â èñïûòàíèè ßÌÐ êàê ïðàâèëî ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé èíòåãðèðîâàí- íóþ ïëîùàäü ïîä êðèâîé èçìåðåííîãî ñèãíàëà. Âûñîòà ñèãíàëà ìîæåò áûòü ìåðîé èíòåíñèâíî- ñòè òîëüêî ïðè îäèíàêîâîì çíà÷åíèè ïîëíîé øèðèíû íà ïîëóâûñîòå è îäèíàêîâîé ìóëüòè- ïëåòíîñòè äâóõ ñèãíàëîâ.  óñëîâèÿõ ïðàêòè÷å- ñêè ïîëíîé ðåëàêñàöèè ìåæäó ðåãèñòðèðóåìû- ìè ñèãíàëàìè èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà ÿâëÿåòñÿ èñòèííîé ìåðîé êîëè÷åñòâà ÿäåð, îòâåòñòâåí- íûõ çà ñîîòâåòñòâóþùèé ñèãíàë: I K N I K NA S A A S A= × = × , (6) ãäå:IA — èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà; NA — êîëè÷åñòâî ÿäåð, îòâåòñòâåííûõ çà ñèãíàë; KS — êîíñòàíòà, âêëþ÷àþùàÿ ôóíäàìåí- òàëüíûå ïîñòîÿííûå, ñâîéñòâà îáðàç- öà è ïàðàìåòðû ïðèåìíèêà; ìîæåò íå ó÷èòûâàòüñÿ â ñëó÷àÿõ, êîãäà èíòåíñèâ- íîñòè ñèãíàëîâ ñîïîñòàâèìû è ìîæíî ïîëó÷èòü ïðÿìóþ çàâèñèìîñòü ìåæäó êîëè÷åñòâîì ÿäåð â äâóõ ñðàâíèâàåìûõ ñòðóêòóðíûõ ãðóïïàõ A è B: I I N N A B A B = , (7) ãäå:Ni — êîëè÷åñòâà ÿäåð, ïðèíàäëåæàùèõ ðàç- ëè÷íûì ñòðóêòóðíûì ãðóïïàì îäíîé ìîëåêóëû. Êîëè÷åñòâà ÿäåð, ïðèíàäëåæàùèõ ðàçëè÷- íûì ñòðóêòóðíûì ãðóïïàì îäíîé ìîëåêóëû, ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé íåáîëüøèå öåëûå ÷èñëà. Èçìåðåííûå çíà÷åíèÿ îêðóãëÿþò äî öåëûõ ÷è- ñåë. Îäíàêî ïðàâèëüíîå ôóíêöèîíèðîâàíèå áëîêà ñáîðà è îáðàáîòêè äàííûõ ëåãêî ïðîâåðÿ- åòñÿ ïóòåì ñðàâíåíèÿ òî÷íîé èíòåíñèâíîñòè â ïðåäåëàõ ñïåêòðà ëþáîãî ïîäõîäÿùåãî îðãà- íè÷åñêîãî ñîåäèíåíèÿ èçâåñòíîé ñòðóêòóðû. Ïîìèìî òîãî, ÷òî èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëîâ, ïîëó÷åííûõ îò êàæäîãî êîìïîíåíòà â ñìåñè, ñâÿçàíà äðóã ñ äðóãîì íåáîëüøèìè öåëûìè ÷èñ- ëàìè, îòíîñèòåëüíûå ìîëÿðíûå êîëè÷åñòâà ýòèõ êîìïîíåíòîâ ìîãóò áûòü èçìåðåíû ñðàâíå- íèåì íîðìàëèçîâàííûõ èíòåíñèâíîñòåé ðåçî- íàíñîâ ðàçëè÷íûõ êîìïîíåíòîâ. Ìîëÿðíîå îò- íîøåíèå äâóõ êîìïîíåíòîâ ñìåñè âû÷èñëÿþò ñ ïîìîùüþ ñëåäóþùåãî óðàâíåíèÿ: n n I I N N A B A B B A = × . (8) Ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ ÿâëÿþòñÿ äîñòîâåð- íûìè òîëüêî â ñëó÷àÿõ, êîãäà ñòðóêòóðû ìîëå- êóë, äëÿ êîòîðûõ îïðåäåëåíû IA è IB, èçâåñòíû (èëè, ïî êðàéíåé ìåðå, èçâåñòíû çíà÷åíèÿ N äëÿ êîíòðîëèðóåìûõ ãðóïï). Îïðåäåëåíèÿ ïðîâî- äÿò, èñïîëüçóÿ ìåòîä âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà èëè ìåòîä íîðìàëèçàöèè ïèêîâ. Ìåòîä âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà. Ìàññó îá- ðàçöà À ìîæíî îïðåäåëèòü, åñëè ê ðàñòâîðó â êà÷åñòâå ñòàíäàðòà èíòåíñèâíîñòè ïðèáàâëÿ- þò èçâåñòíóþ ìàññó âåùåñòâà  ñ èçâåñòíûì åãî ïðîöåíòíûì ñîäåðæàíèåì. Óðàâíåíèå (8) ìîæåò áûòü ïðåîáðàçîâàíî â óðàâíåíèå (9): m I I N N M M m P A A B B A A B B B = × × × × 100, (9) ãäå:Ìi — ìîëåêóëÿðíûå ìàññû; mÀ — ìàññà îáðàçöà À; mB — èçâåñòíàÿ ìàññà îáðàçöà B; PB — ÷èñòîòà îáðàçöà Â, âûðàæåííàÿ â ïðî- öåíòàõ. Ñòàíäàðò èíòåíñèâíîñòè äîëæåí áûòü òùà- òåëüíî âûáðàí; îí äîëæåí áûòü ïîëíîñòüþ ðàñ- òâîðèì â ðàñòâîðèòåëå, èñïîëüçóåìîì äëÿ îá- ðàçöà, äîëæåí ïðîèçâîäèòü ëèøü íåáîëüøîå êî- 12 ëè÷åñòâî ñèãíàëîâ, è ó «êîíòðîëèðóåìîé ãðóïïû» äîëæåí áûòü ñèãíàë â ïóñòîé ñïåê- òðàëüíîé îáëàñòè. Äëÿ ýòèõ öåëåé ðåêîìåíäóåò- ñÿ âûáèðàòü ñîåäèíåíèå ñ âûñîêîé ÷èñòîòîé è ñ îòíîñèòåëüíî âûñîêîé ìîëåêóëÿðíîé ìàñ- ñîé. Ìåòîä âíóòðåííåé íîðìàëèçàöèè. Îòíî- ñèòåëüíîå ñîäåðæàíèå êîìïîíåíòîâ â ñìåñè, ñòåïåíü çàìåùåíèÿ â ñòðóêòóðíî-èçìåíåííîì ïîëèìåðå èëè êîëè÷åñòâî ïðèìåñè ìîæíî îïðå- äåëèòü ïóòåì ñðàâíåíèÿ îòíîñèòåëüíûõ èíòåí- ñèâíîñòåé ïîëó÷åííûõ ðåçîíàíñîâ.

Ìåòîäèêà äîëæíà áûòü âàëèäèðîâàíà â îò- íîøåíèè îòñóòñòâèÿ íàëîæåíèÿ ñîîòâåòñòâóþ- ùèõ ñèãíàëîâ. Êîãäà â îáðàçöå ïðèñóòñòâóþò âåùåñòâà ñ íå ÷åòêî óñòàíîâëåííîé ñòðóêòóðîé èëè ìîëåêóëÿðíîé ìàññîé (íàïðèìåð, ýìóëüãà- òîð), ïðèáàâëåíèå èçâåñòíîãî êîëè÷åñòâà ýòîãî ìàòåðèàëà â ïðîáèðêó äëÿ ßÌÐ ïîçâîëÿåò ïî- ñòðîèòü êàëèáðîâî÷íóþ êðèâóþ. ÌÅÒÎÄ Ïîäãîòîâêà îáðàçöà. Èñïûòóåìûé îáðàçåö ðàñòâîðÿþò â ðàñòâîðèòåëå, ê êîòîðîìó ìîæåò áûòü ïðèáàâëåí ñîîòâåòñòâóþùèé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö äëÿ êàëèáðîâêè õèìè÷åñêîãî ñäâèãà, êàê óêàçàíî â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî àíàëèçà ðàñòâîðû íå äîëæíû ñîäåðæàòü íåðàñòâîðåííûõ ÷àñòèö. Ïðè íåêîòîðûõ êîëè÷åñòâåííûõ îïðåäåëåíèÿõ ìî- æåò ïîòðåáîâàòüñÿ ïðèáàâëåíèå âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà äëÿ ñðàâíåíèÿ èíòåãðèðîâàííûõ ðå- çîíàíñîâ èñïûòóåìîãî è ñòàíäàðòíîãî îáðàç- öîâ. Ñîîòâåòñòâóþùèå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû è èõ êîíöåíòðàöèè óêàçàíû â ÷àñòíûõ ôàðìàêî- ïåéíûõ ñòàòüÿõ.  äðóãèõ êîëè÷åñòâåííûõ îï- ðåäåëåíèÿõ ðåçóëüòàò ïîëó÷àþò ïóòåì ñðàâíå- íèÿ îòíîñèòåëüíîé èíòåíñèâíîñòè äâóõ èëè âñåõ ðåçîíàíñîâ, ïîëó÷åííûõ ïðè èññëåäîâàíèè îáðàçöà. Ïîñëå ïîìåùåíèÿ îáðàçöà â ïðîáèðêó è óêóïîðêè, îáðàçåö ââîäÿò â ìàãíèò ßÌÐ óñòà- íîâêè, óñòàíàâëèâàþò ïàðàìåòðû èñïûòàíèÿ è ïðîâîäÿò èçìåðåíèÿ. Îñíîâíûå ïàðàìåòðû èñ- ïûòàíèÿ ïðèâîäÿòñÿ â ÷àñòíûõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòüÿõ. Ïðîöåäóðà èçìåðåíèÿ. Óðàâíîâåøèâàþò îáðàçåö â äàò÷èêå è ðåãóëèðóþò ïðèáîð äëÿ ïî- ëó÷åíèÿ íàèáîëåå îïòèìàëüíûõ óñëîâèé ðåçî- íàíñà è ìàêñèìàëüíîãî îòíîøåíèÿ ñèãíàë/øóì ïóòåì ïîäáîðà íàñòðîéêè äàò÷èêà äëÿ äàííîãî îáúåìà îáðàçöà äëÿ îáåñïå÷åíèÿ ìàêñèìàëüíîé îäíîðîäíîñòè ìàãíèòíîãî ïîëÿ âî âñåì îáúåìå èñïûòóåìîãî îáðàçöà (ïðîöåäóðà «øèììèðîâà- íèÿ»). Ïàðàìåòðû íàñòðîéêè çàïèñûâàþò èëè ñîõðàíÿþò â êîìïüþòåðå. Óñëîâèÿ èñïûòàíèÿ ìîãóò âêëþ÷àòü âûïîëíåíèå ìíîãîêðàòíûõ ïî- ñëåäîâàòåëüíûõ öèêëîâ «èìïóëüñ — ñáîð äàí- íûõ — ïàóçà», è îòäåëüíûå ÑÑÈ ñèãíàëû ñóì- ìèðóþòñÿ â ïàìÿòè êîìïüþòåðà, ñ óñðåäíåíèåì óðîâíÿ øóìà. Êîãäà ñîîòâåòñòâóþùèé óðîâåíü îòíîøåíèÿ ñèãíàë/øóì äîñòèãíóò, ÑÑÈ ñîõðà- íÿþò è ñïåêòð îáëàñòè ÷àñòîò ïîëó÷àþò ïóòåì Ôóðüå-ïðåîáðàçîâàíèÿ ñóììèðîâàííûõ ÑÑÈ ñèãíàëîâ. ßÌÐ ÑÏÅÊÒÐÎÌÅÒÐÈß ÎÁÐÀÇÖΠ ÒÂÅÐÄÎÌ ÑÎÑÒÎßÍÈÈ Àíàëèç îáðàçöîâ â òâåðäîì ñîñòîÿíèè ìî- æåò áûòü âûïîëíåí ñ ïîìîùüþ ñïåöèàëüíî îáî- ðóäîâàííûõ ßÌÐ ñïåêòðîìåòðîâ. Îïðåäåëåí- íûå òåõíè÷åñêèå ïðîöåäóðû îáåñïå÷èâàþò âû- äåëåíèå îòäåëüíûõ ëèíèé äëÿ îïðåäåëåííûõ ïîëîæåíèé àòîìîâ, à òàêæå ïîçâîëÿþò èñïîëü- çîâàòü ßÌÐ äëÿ îöåíêè íåîðãàíè÷åñêèõ ìàòå- ðèàëîâ. Îäíà èç òàêèõ ïðîöåäóð — áûñòðîå âðàùå- íèå (4 – 30 êÃö) ïîðîøêîîáðàçíîãî îáðàçöà â ðîòîðå (âíåøíèé äèàìåòð îêîëî 4 ìì) íàõîäÿ- ùåãîñÿ ïîä óãëîì 54,7° («ìàãè÷åñêèé óãîë») ê îñè ìàãíèòíîãî ïîëÿ Â0. Ýòîò ñïîñîá íàçûâà- åòñÿ âðàùåíèåì ïîä ìàãè÷åñêèì óãëîì. Âòîðîé ýôôåêòèâíûé ñïîñîá — ñèëîâîå ðàñïàðèâàíèå, è òðåòèé ñïîñîá — ïåðåíîñ ïîëÿðèçàöèè îò ëåã- êîâîçáóäèìûõ ÿäåð ê ìåíåå ïîëÿðèçóåìûì ÿä- ðàì, òî åñòü êðîññ-ïîëÿðèçàöèÿ. Êîìáèíàöèÿ òàêèõ ïðîöåäóð ïîçâîëÿåò ïîëó÷èòü ñïåêòðû ñ âûñîêèì ðàçðåøåíèåì, ñîäåðæàùèå áîëüøîå êîëè÷åñòâî èíôîðìàöèè î õèìè÷åñêèõ è ñòðóê- òóðíûõ õàðàêòåðèñòèêàõ òâåðäûõ ñòåêëîâèäíûõ òåë, âåùåñòâ â àìîðôíîì ñîñòîÿíèè, êðèñòàë- ëîâ êåðàìè÷åñêîé, ïîëèìåðíîé èëè ìèíåðàëü- íîé ïðèðîäû. Ïðè èñïîëüçîâàíèè ßÌÐ ñïåêòðîìåòðèè äëÿ îöåíêè îáðàçöà â òâåðäîì ñîñòîÿíèè, ïîë- íîå îïèñàíèå ïðîöåäóðû ïðèâîäÿò â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. 201020046-2022 2.1.2.46. Òåðìè÷åñêèé àíàëèç Äàííàÿ îáùàÿ ôàðìàêîïåéíàÿ ñòàòüÿ ðàñ- ïðîñòðàíÿåòñÿ íà ãðóïïó ìåòîäîâ òåðìè÷åñêîãî àíàëèçà (ÌÒÀ), ïðè ïîìîùè êîòîðûõ îïðåäåëÿ- åòñÿ çàâèñèìîñòü ðàçëè÷íûõ ôèçè÷åñêèõ ñâîéñòâ âåùåñòâ îò òåìïåðàòóðû.

Îáû÷íî 13 â áîëüøèíñòâå èñïîëüçóåìûõ ìåòîäîâ îïðåäå- ëÿþò èçìåíåíèå ýíåðãèè èëè ìàññû èñïûòóåìî- ãî îáðàçöà. Ýòè ìåòîäû èìåþò ðàçëè÷íûå ïðèìåíåíèÿ: – îïðåäåëåíèå ôàçîâûõ èçìåíåíèé; – îïðåäåëåíèå èçìåíåíèé â õèìè÷åñêîì ñî- ñòàâå; – îïðåäåëåíèå ÷èñòîòû. Ê ÌÒÀ îòíîñÿò òåðìîãðàâèìåòðèþ (ÒÃ), òåðìîìåòðè÷åñêîå òèòðîâàíèå (ÒÒ), äèôôåðåí- öèàëüíûé òåðìè÷åñêèé àíàëèç (ÄÒÀ), äèôôå- ðåíöèàëüíóþ ñêàíèðóþùóþ êàëîðèìåòðèþ (ÄÑÊ), äåðèâàòîãðàôèþ (ÄÃ), òåðìîìèêðîñêî- ïèþ (ÒÌ). ÌÒÀ, êàê ïðàâèëî, íå òðåáóþò áîëüøèõ êî- ëè÷åñòâ âåùåñòâ, íåïðîäîëæèòåëüíû ïî âðåìå- íè èñïûòàíèÿ.  ñëó÷àå ïðèìåíåíèÿ ÌÒÀ, â ÷à- ñòíûõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòüÿõ è (èëè) íîðìà- òèâíûõ äîêóìåíòàõ ïî êà÷åñòâó ñëåäóåò óêàçûâàòü ïàðàìåòðû, íåîáõîäèìûå äëÿ êîð- ðåêòíîãî âûïîëíåíèÿ ìåòîäèêè, íàïðèìåð: ñêî- ðîñòü è òåìïåðàòóðó íàãðåâàíèÿ, èíåðòíûé ãàç è ñêîðîñòü åãî ïîòîêà. ÒÅÐÌÎÃÐÀÂÈÌÅÒÐÈß Òåðìîãðàâèìåòðèÿ (ÒÃ) èëè òåðìîãðàâèìåò- ðè÷åñêèé àíàëèç (ÒÃÀ) ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ìå- òîä, ïðè ïîìîùè êîòîðîãî ðåãèñòðèðóþò èçìå- íåíèå ìàññû èñïûòóåìîãî îáðàçöà îò ïðîãðàì- ìèðîâàííîãî èçìåíåíèÿ òåìïåðàòóðû. Ïðèáîð. Îñíîâíûìè ñîñòàâëÿþùèìè ÷àñ- òÿìè ïðèáîðà ÿâëÿþòñÿ: óñòðîéñòâî äëÿ íàãðå- âàíèÿ èëè îõëàæäåíèÿ îáðàçöà â ñîîòâåòñòâèè ñ çàäàííîé òåìïåðàòóðíîé ïðîãðàììîé, êàìåðà äëÿ îáðàçöà ñ êîíòðîëèðóåìîé ñðåäîé, ýëåê- òðîííûå âåñû è óñòðîéñòâà äëÿ ðåãèñòðàöèè. Ïðîâåðêà òåìïåðàòóðíîé øêàëû. Ïîâåð- êó òåìïåðàòóðíîãî äàò÷èêà, íàõîäÿùåãîñÿ áëèç- êî ê îáðàçöó èëè êîíòàêòèðóþùåãî ñ íèì, ïðî- âîäÿò, èñïîëüçóÿ òåìïåðàòóðó ôàçîâîãî ïåðåõî- äà âòîðîãî ðîäà (òî÷êà Êþðè) ôåððîìàãíèòíîãî âåùåñòâà (íàïðèìåð, íèêåëÿ).  ñëó÷àå ïðèáîðà, ïîçâîëÿþùåãî îäíîâðåìåííî ïðîâîäèòü ÒÃ/ÒÃÀ è ÄÒÀ èëè ÄÑÊ, ìîãóò áûòü èñïîëüçî- âàíû òå æå ñåðòèôèöèðîâàííûå (àòòåñòîâàí- íûå) ñòàíäàðòíûå îáðàçöû, ÷òî è äëÿ ÄÒÀ è ÄÑÊ, íàïðèìåð, èíäèé, îëîâî è (èëè) öèíê. Êàëèáðîâêà ýëåêòðîííûõ âåñîâ. Íåîáõî- äèìîå êîëè÷åñòâî ïîäõîäÿùåãî ñåðòèôèöèðî- âàííîãî (àòòåñòîâàííîãî) ñòàíäàðòíîãî âåùåñò- âà (íàïðèìåð, ÑÎ ÔÅÀÝÑ êàëüöèÿ îêñàëàòà ìîíîãèäðàòà) ïîìåùàþò â äåðæàòåëü è ðåãèñò- ðèðóþò åãî ìàññó. Óñòàíàâëèâàþò ñêîðîñòü íà- ãðåâàíèÿ ñîîòâåòñòâåííî èíñòðóêöèè èçãîòîâèòåëÿ (íàïðèìåð, 5 °Ñ/ìèí) è íà÷èíàþò ïîâûøåíèå òåìïåðàòóðû. Òåðìîãðàâèìåòðè÷å- ñêóþ êðèâóþ ðåãèñòðèðóþò â âèäå ãðàôèêà: âå- ëè÷èíû òåìïåðàòóðû èëè âðåìåíè óêàçûâàþò ïî îñè àáñöèññ ïî âîçðàñòàíèþ çíà÷åíèé ñëåâà íàïðàâî; ïîêàçàíèÿ ìàññû — ïî îñè îðäèíàò ïî âîçðàñòàíèþ çíà÷åíèé ñíèçó ââåðõ. Ïðè òåìïå- ðàòóðå îêîëî 250 °Ñ ïîâûøåíèå òåìïåðàòóðû îñòàíàâëèâàþò. Íà ãðàôèêå èçìåðÿþò ðàññòîÿ- íèå ìåæäó íà÷àëüíûì è êîíå÷íûì ïëàòî ìàñ- ñà-òåìïåðàòóðà èëè ïëàòî ìàññà-âðåìÿ, ÷òî ñîîòâåòñòâóåò èçìåíåíèþ ìàññû îáðàçöà. Ïîëó- ÷åííóþ âåëè÷èíó ïîòåðè â ìàññå àòòåñòîâàííî- ãî ñòàíäàðòíîãî âåùåñòâà ñîïîñòàâëÿþò ñ âåëè- ÷èíîé, óêàçàííîé íà ìàðêèðîâêå. Ìåòîäèêà. Äëÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïðîâî- äÿò òó æå ïðîöåäóðó â óñëîâèÿõ, óêàçàííûõ â ÷à- ñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå è (èëè) íîðìàòèâ- íîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó. Ïîòåðþ â ìàññå èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà îïðåäåëÿþò, èçìåðÿÿ ðàññòîÿíèå ìåæäó íà÷àëüíûì è êîíå÷íûì ïëàòî íà ãðàâèìåòðè÷åñêîé êðèâîé, è âûðàæàþò â ïðîöåíòàõ (Dì/ì). Ïðè ðåãóëÿðíîì èñïîëüçîâàíèè ïðèáîðà ïå- ðèîäè÷åñêè ïðîâîäÿò êàëèáðîâêó è ïðîâåðêó òåìïåðàòóðíîé øêàëû.  ïðîòèâíîì ñëó÷àå ýòè îïåðàöèè ïðîâîäÿò ïåðåä êàæäûì èñïîëüçîâà- íèåì. Òàê êàê óñëîâèÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ ÿâ- ëÿþòñÿ êðèòè÷íûìè, äëÿ êàæäîãî èçìåðåíèÿ îò- ìå÷àþò ñëåäóþùèå ïàðàìåòðû: äàâëåíèå èëè ñêîðîñòü ïîòîêà; ñîñòàâ ãàçà, ìàññà îáðàçöà, ñêîðîñòü íàãðåâàíèÿ, äèàïàçîí òåìïåðàòóðû è ïðåäâàðèòåëüíàÿ îáðàáîòêà îáðàçöà, âêëþ÷àÿ ëþáîé èçîòåðìè÷åñêèé ïåðèîä.

ÄÈÔÔÅÐÅÍÖÈÀËÜÍÀß ÑÊÀÍÈÐÓÞÙÀß ÊÀËÎÐÈÌÅÒÐÈß ÄÑÊ ÿâëÿåòñÿ ìåòîäîì, êîòîðûé èñïîëüçó- åòñÿ äëÿ äåìîíñòðàöèè ýíåðãåòè÷åñêèõ ÿâëå- íèé, ïðîèñõîäÿùèõ ïðè íàãðåâàíèè (èëè îõëàæ- äåíèè) âåùåñòâà (èëè ñìåñè âåùåñòâ) è äëÿ îï- ðåäåëåíèÿ èçìåíåíèé â ýíòàëüïèè è óäåëüíîé òåïëîåìêîñòè, à òàêæå òåìïåðàòóð, ïðè êîòîðûõ ýòè èçìåíåíèÿ ïðîèñõîäÿò. Äàííûé ìåòîä èñïîëüçóþò äëÿ óñòàíîâëå- íèÿ ðàçëè÷èé â êîëè÷åñòâå òåïëîòû (îòíîñè- òåëüíî òåìïåðàòóðû), âûäåëåííîé èëè ïîãëî- 14 ùåííîé èñïûòóåìûì îáðàçöîì è ñ ÿ÷åéêîé ñðàâíåíèÿ â çàâèñèìîñòè îò òåìïåðàòóðû. Ñó- ùåñòâóåò 2 òèïà ïðèáîðîâ äëÿ ÄÑÊ: ïðèáîðû, èñïîëüçóþùèå êîìïåíñàöèþ ýíåðãèè äëÿ óäåð- æèâàíèÿ íóëåâîé ðàçíèöû òåìïåðàòóðû ìåæäó èñïûòóåìûì îáðàçöîì è ÿ÷åéêîé ñðàâíåíèÿ; ïðèáîðû, ïîääåðæèâàþùèå ïîñòîÿííóþ ñêî- ðîñòü íàãðåâàíèÿ è îïðåäåëÿþùèå òåìïåðàòóð- íûé äèôôåðåíöèàë êàê ðàçíîñòü â òåïëîâîì ïî- òîêå ìåæäó èñïûòóåìûì îáðàçöîì è ÿ÷åéêîé ñðàâíåíèÿ. Ïðèáîð. Äëÿ ÄÑÊ ñ êîìïåíñàöèåé ýíåðãèè èñïîëüçóþò ïðèáîð, ñîñòîÿùèé èç ïå÷è, èìåþ- ùåé äåðæàòåëü îáðàçöîâ ñ èñïûòóåìîé ÿ÷åéêîé è ÿ÷åéêîé ñðàâíåíèÿ. Ïðèáîð äëÿ ÄÑÊ ñ òåïëî- âûì ïîòîêîì ñîñòîèò èç ïå÷è, ñîäåðæàùåé åäèíñòâåííóþ ÿ÷åéêó ñ äåðæàòåëåì îáðàçöà äëÿ èñïûòóåìîãî òèãëÿ è òèãëÿ ñðàâíåíèÿ. Ê ïðèáîðó ïðèñîåäèíÿþò: óñòðîéñòâî äëÿ ïðîãðàììèðîâàíèÿ òåìïåðàòóðû, òåìïåðàòóð- íûé äåòåêòîð (äåòåêòîðû) è ðåãèñòðèðóþùóþ ñèñòåìó, ïîäñîåäèíåííóþ ê êîìïüþòåðó. Èçìå- ðåíèÿ ïðîâîäÿòñÿ â êîíòðîëèðóåìîé ñðåäå. Êàëèáðîâêà ïðèáîðà. Ïðèáîð êàëèáðóþò íà ïðåäìåò èçìåíåíèÿ òåìïåðàòóðû è ýíòàëüïèè ñ èñïîëüçîâàíèåì ñåðòèôèöèðîâàííûõ (àòòå- ñòîâàííûõ) ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ. Êàëèáðîâêà òåìïåðàòóðû. Êàëèáðîâêà òåì- ïåðàòóðû ìîæåò áûòü ïðîâåäåíà ñ èñïîëüçîâà- íèåì ñåðòèôèöèðîâàííûõ (àòòåñòîâàííûõ) ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ, èìåþùèõ õàðàêòåðèñòè- ÷åñêîå òåïëîôèçè÷åñêîå ñâîéñòâî, òàêîå êàê òåìïåðàòóðà ïëàâëåíèÿ ÷èñòûõ ìåòàëëîâ èëè îðãàíè÷åñêèõ âåùåñòâ èëè òåìïåðàòóðà ôàçîâî- ãî ïåðåõîäà êðèñòàëëè÷åñêèõ íåîðãàíè÷åñêèõ ñîëåé èëè îêñèäîâ. Îáû÷íî äëÿ êàëèáðîâêè èñ- ïîëüçóþò çíà÷åíèÿ òåìïåðàòóðû ïëàâëåíèÿ èí- äèÿ, îëîâà è (èëè) öèíêà. Êàëèáðîâêà êîëè÷åñòâà òåïëîòû. Äëÿ òî÷- íîé îöåíêè èçìåíåíèÿ êîëè÷åñòâà òåïëîòû (èç- ìåíåíèå ýíòàëüïèè) èñïûòóåìîãî îáðàçöà, âû- çâàííîãî îïðåäåëåííûì ôèçè÷åñêèì èçìåíåíè- åì, ïðîèñõîäÿùèì ïðè èçìåíåíèè òåìïåðàòóðû, íåîáõîäèìî ïðîâîäèòü êàëèáðîâêó ïðèáîðà ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîäõîäÿùèõ ñåðòèôèöèðî- âàííûõ (àòòåñòîâàííûõ) ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ. Ïî àíàëîãèè ñ êàëèáðîâêîé òåìïåðàòóðû êàëèá- ðîâêà êîëè÷åñòâà òåïëîòû ìîæåò áûòü âûïîëíå- íà ñ èñïîëüçîâàíèåì ñåðòèôèöèðîâàííûõ (àòòå- ñòîâàííûõ) ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ ñ èçâåñòíû- ìè óñòàíîâëåííûìè çíà÷åíèÿìè èçìåíåíèÿ ýíòàëüïèè, âûçâàííîãî ôèçè÷åñêèìè èçìåíå- íèÿìè, òàêèìè êàê ïëàâëåíèå ÷èñòûõ ìåòàëëîâ è (èëè) îðãàíè÷åñêèõ âåùåñòâ èëè ôàçîâûé ïå- ðåõîä êðèñòàëëè÷åñêèõ íåîðãàíè÷åñêèõ ñîëåé. Îáû÷íî äëÿ êàëèáðîâêè èñïîëüçóþò çíà÷åíèÿ òåïëîòû ïëàâëåíèÿ èíäèÿ, îëîâà è (èëè) öèíêà. Ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ.  ïîäõîäÿùèé òè- ãåëü âçâåøèâàþò èñïûòóåìûé îáðàçåö â êîëè÷å- ñòâå, óêàçàííîì â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòà- òüå è (èëè) íîðìàòèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó, è ïîìåùàþò â äåðæàòåëü îáðàçöà. Ïóñòîé òè- ãåëü ïîìåùàþò â äåðæàòåëü äëÿ òèãëÿ ñðàâíå- íèÿ. Óñòàíàâëèâàþò òåìïåðàòóðó íà÷àëà è êîíöà èñïûòàíèÿ è ñêîðîñòü íàãðåâà, óêàçàííûå â ÷à- ñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå è (èëè) íîðìàòèâ- íîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó. 15 Ðèñóíîê 2.1.2.46.-1. — Òåðìîãðàììà Íà÷èíàþò èñïûòàíèå è ðåãèñòðèðóþò êðè- âóþ ÄÑÊ ñ óêàçàíèåì âåëè÷èíû òåìïåðàòóðû èëè âðåìåíè ïî îñè àáñöèññ (ïî âîçðàñòàíèþ çíà÷åíèé ñëåâà íàïðàâî) è èçìåíåíèÿ ýíåðãèè ïî îñè îðäèíàò (óòî÷íÿþò, ïðîöåññ ýíäîòåðìè- ÷åñêèé èëè ýêçîòåðìè÷åñêèé).

Òåìïåðàòóðà, ïðè êîòîðîé ïðîèñõîäèò ÿâëå- íèå (íà÷àëüíàÿ òåìïåðàòóðà), ñîîòâåòñòâóåò òî÷êå ïåðåñå÷åíèÿ (À) ïðîäîëæåíèÿ áàçîâîé ëè- íèè è êàñàòåëüíîé ê òî÷êå íàèáîëüøåãî íàêëîíà (òî÷êå ïåðåãèáà) êðèâîé (ñì. ðèñóíîê 2.1.2.46.-1). Êîíå÷íàÿ òåìïåðàòóðà òåïëîâîãî ÿâëåíèÿ ñîîòâåòñòâóåò ïèêó íà êðèâîé. Çíà÷åíèå ýíòàëüïèè ïðîïîðöèîíàëüíî çíà- ÷åíèþ ïëîùàäè ïîä êðèâîé, îãðàíè÷åííîé áà- çîâîé ëèíèåé; êîýôôèöèåíò ïðîïîðöèîíàëüíî- ñòè íàõîäÿò ïóòåì èçìåðåíèÿ òåïëîòû ïëàâëå- íèÿ èçâåñòíîãî âåùåñòâà (íàïðèìåð, èíäèÿ) ïðè òåõ æå óñëîâèÿõ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ. Êàæäàÿ òåðìîãðàììà ñîïðîâîæäàåòñÿ ñëå- äóþùèìè äàííûìè: óñëîâèÿ èñïûòàíèÿ, çàïèñü ïîñëåäíåé êàëèáðîâêè, ìàññà èñïûòóåìîãî îá- ðàçöà, èäåíòèôèêàöèÿ (âêëþ÷àÿ òåïëîâûå èçìå- íåíèÿ) îáðàçöà, åìêîñòü (êîíòåéíåð), ñðåäà (ñî- ñòàâ, ñêîðîñòü ïîòîêà, äàâëåíèå), íàïðàâëåíèå è ñêîðîñòü òåìïåðàòóðíûõ èçìåíåíèé, ÷óâñòâè- òåëüíîñòü ïðèáîðà è ðåãèñòðèðóþùåãî óñòðîé- ñòâà. ÎÁËÀÑÒÜ ÏÐÈÌÅÍÅÍÈß Ôàçîâûå èçìåíåíèÿ. Îïðåäåëåíèå òåìïåðà- òóðû, èçìåíåíèÿ òåïëîåìêîñòè è ýíòàëüïèè ïðè ôàçîâûõ èçìåíåíèÿõ, ïðîèñõîäÿùèõ ñ âåùåñò- âîì â çàâèñèìîñòè îò òåìïåðàòóðû.  òàáëèöå 2.1.2.46.-1 ïðèâåäåíû âîçìîæíûå íàáëþäàåìûå ïåðåõîäû. Èçìåíåíèÿ õèìè÷åñêîãî ñîñòàâà. Èçìåðÿÿ òåïëîòó è òåìïåðàòóðó ðåàêöèè ïðè äàííûõ óñ- ëîâèÿõ, îïðåäåëÿþò, íàïðèìåð, êèíåòèêó ðàçëî- æåíèÿ èëè äåñîëüâàòàöèþ. Èñïîëüçîâàíèå äëÿ ïîñòðîåíèÿ äèàãðàìì ôàçîâîãî ðàâíîâåñèÿ. Ïîñòðîåíèå äèàãðàìì ôà- çîâîãî ðàâíîâåñèÿ äëÿ òâåðäûõ ñìåñåé. Ñîçäà- íèå ôàçîâîé äèàãðàììû ìîæåò áûòü âàæíûì ýòàïîì ïðè ïðåäâàðèòåëüíîé ðàçðàáîòêå è îïòè- ìèçàöèè ïðîöåññà ëèîôèëèçàöèè. Îïðåäåëåíèå ÷èñòîòû. Èçìåðåíèå òåïëîòû ïëàâëåíèÿ è òåìïåðàòóðû ïëàâëåíèÿ ñ ïîìîùüþ ÄÑÊ äåëàåò âîçìîæíûì îïðåäåëåíèå ñîäåðæà- íèÿ ïðèìåñåé â âåùåñòâå ïî îäíîé äèàãðàììå, ñ èñïîëüçîâàíèåì íåñêîëüêèõ ìèëëèãðàìì îá- ðàçöà, è áåç íåîáõîäèìîñòè ïðîâåäåíèÿ ïîâòîð- íûõ òî÷íûõ èçìåðåíèé èñòèííîé òåìïåðàòóðû. Òåîðåòè÷åñêè, ïëàâëåíèå ïîëíîñòüþ ÷èñòî- ãî êðèñòàëëè÷åñêîãî âåùåñòâà ïðè ïîñòîÿííîì äàâëåíèè õàðàêòåðèçóåòñÿ òåïëîòîé ïëàâëåíèÿ â áåñêîíå÷íî óçêîì äèàïàçîíå, ñîîòâåòñòâóþ- ùåì òåìïåðàòóðå ïëàâëåíèÿ. Ðàñøèðåíèå ýòîãî äèàïàçîíà ÿâëÿåòñÿ ÷óâñòâèòåëüíûì èíäèêàòî- ðîì ïðèñóòñòâèÿ ïðèìåñåé. Òàêèì îáðàçîì, ïðè èñïûòàíèè îáðàçöîâ îäíîãî è òîãî æå âåùåñòâà ñ ñîäåðæàíèåì ïðèìåñåé, îòëè÷àþùèìñÿ íà íå- ñêîëüêî äåñÿòûõ ïðîöåíòà, ïîëó÷àþò âèçóàëüíî îòëè÷àþùèåñÿ äðóã îò äðóãà òåðìè÷åñêèå äèà- ãðàììû (ñì. ðèñóíîê 2.1.2.46.-2). Îïðåäåëåíèå ìîëÿðíîé ÷èñòîòû ñ ïîìîùüþ ÄÑÊ îñíîâàíî íà èñïîëüçîâàíèè ìàòåìàòè÷å- ñêîãî ïðèáëèæåíèÿ èíòåãðàëüíîé ôîðìû óðàâ- íåíèÿ Âàíò-Ãîôôà ïðèìåíèòåëüíî ê êîíöåíòðà- öèÿì (íå ê àêòèâíîñòÿì) â áèíàðíîé ñèñòåìå [ln( )1 2 2- = -x x è T T T× »0 0 2 ]. Äëÿ íåáîëüøèõ ñî- äåðæàíèé ïðèìåñåé (x2 ^ 1) è äëÿ çíà÷åíèé òåìïåðàòóðû, áëèçêèõ ê òåìïåðàòóðå ïëàâëåíèÿ, óðàâíåíèå ìîæåò áûòü ïðåäñòàâëåíî, êàê ïðèâå- äåíî íèæå, ãäå òåìïåðàòóðà îáðàçöà è ìîëÿðíàÿ äîëÿ ïðèìåñè ÿâëÿþòñÿ ïåðåìåííûìè: 16 Òàáëèöà 2.1.2.46.-1.

Ïåðåõîä òâåðäîå âåùåñòâî — òâåðäîå âåùåñòâî: àëëîòðîïèÿ-ïîëèìîðôèçì äåñîëüâàòàöèÿ àìîðôíîñòü – êðèñòàëëè÷íîñòü Ïåðåõîä òâåðäîå âåùåñòâî — æèäêîñòü: ïëàâëåíèå ñòåêëî — ïåðåõîä Ïåðåõîä òâåðäîå âåùåñòâî — ãàç: ñóáëèìàöèÿ Ïåðåõîä æèäêîñòü — òâåðäîå âåùåñòâî: çàìåðçàíèå ïåðåêðèñòàëëèçàöèÿ ñòåêëî — ïåðåõîä Ïåðåõîä æèäêîñòü — ãàç: èñïàðåíèå T T RT H x f = - ×0 0 2 2 D , (1) ãäå: Ò — òåìïåðàòóðà îáðàçöà, â êåëüâèíàõ Ò0 — òåìïåðàòóðà ïëàâëåíèÿ õèìè÷åñêè ÷èñòîãî âåùåñòâà, â êåëüâèíàõ; R — ãàçîâàÿ ïîñòîÿííàÿ äëÿ èäåàëüíûõ ãàçîâ, â äæîóëü·êåëüâèí–1·ìîëü–1; DÍf — ìîëÿðíàÿ òåïëîòà ïëàâëåíèÿ âåùåñò- âà, â äæîóëü·ìîëü–1 õ2 — ìîëÿðíàÿ äîëÿ ïðèìåñè, òî åñòü ÷èñ- ëî ìîëåêóë ïðèìåñè, ðàçäåëåííîå íà îáùåå ÷èñëî ìîëåêóë â æèäêîé ôàçå (èëè â ðàñïëàâëåííîé ôàçå) ïðè òåì- ïåðàòóðå Ò (âûðàæåííîé â êåëüâè- íàõ). Òàêèì îáðàçîì, îïðåäåëåíèå ÷èñòîòû ñ ïî- ìîùüþ ÄÑÊ îãðàíè÷åíî îáíàðóæåíèåì ïðèìå- ñåé, îáðàçóþùèõ ýâòåêòè÷åñêèå ñìåñè ñ îñíîâ- íûì âåùåñòâîì è ïðèñóòñòâóþùèõ â èñïûòóå- ìîì îáðàçöå ñ ìîëÿðíîé äîëåé ìåíåå 2 %. Äàííûé ìåòîä íå ïðèìåíÿþò äëÿ: – àìîðôíûõ âåùåñòâ; – ñîëüâàòîâ èëè ïîëèìîðôíûõ ñîåäèíåíèé, êîòîðûå íåñòàáèëüíû â ïðåäåëàõ, èñïîëüçóå- ìûõ ïðè èñïûòàíèè òåìïåðàòóð; – ïðèìåñåé, îáðàçóþùèõ òâåðäûå ðàñòâîðû ñ îñíîâíûì âåùåñòâîì; – ïðèìåñåé, êîòîðûå íåðàñòâîðèìû â æèä- êîé ôàçå èëè â ðàñïëàâå îñíîâíîãî âåùåñòâà. Âî âðåìÿ íàãðåâàíèÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïðèìåñè ïîëíîñòüþ ïëàâÿòñÿ ïðè òåìïåðàòóðå ýâòåêòè÷åñêîé ñìåñè. Âûøå ýòîé òåìïåðàòóðû òâåðäàÿ ôàçà ñîäåðæèò òîëüêî ÷èñòîå âåùåñòâî. Òàê êàê òåìïåðàòóðà ïîñòåïåííî óâåëè÷èâàåòñÿ îò òåìïåðàòóðû ýâòåêòè÷åñêîé ñìåñè äî òåìïå- ðàòóðû ïëàâëåíèÿ ÷èñòîãî âåùåñòâà, ìîëÿðíàÿ äîëÿ ïðèìåñè â æèäêîé ôàçå ïîñòîÿííî ïàäàåò ïî ïðè÷èíå óâåëè÷åíèÿ êîëè÷åñòâà ðàñïëàâëåí- íîãî ÷èñòîãî âåùåñòâà. Äëÿ âñåõ òåìïåðàòóð âûøå ýâòåêòè÷åñêîé òî÷êè: x F x2 2 1 = × * , (2) ãäå: F — ðàñïëàâëåííàÿ äîëÿ àíàëèçèðóåìîãî îáðàçöà; x 2 * — ìîëÿðíàÿ äîëÿ ïðèìåñè â àíàëèçèðóå- ìîì îáðàçöå. Åñëè îáðàçåö ðàñïëàâëåí ïîëíîñòüþ, òî F = 1 è x 2 = x 2 * . Ïðè îáúåäèíåíèè óðàâíåíèé (1) è (2) ïîëó- ÷àåòñÿ ñëåäóþùåå âûðàæåíèå: T T RT H F x f = - × ×0 0 2 2 1 D * . Çíà÷åíèå òåïëîòû ïëàâëåíèÿ ïîëó÷àþò ïó- òåì èíòåãðèðîâàíèÿ ïèêà ïëàâëåíèÿ. Òåìïåðàòóðà ïëàâëåíèÿ ÷èñòîãî âåùåñòâà ýêñòðàïîëèðóåòñÿ èç ãðàôèêà çàâèñèìîñòè 1/F îò òåìïåðàòóðû, âûðàæåííîé â êåëüâèíàõ. Íà- êëîí ãðàôèêà, ïðè íåîáõîäèìîñòè ïîëó÷åííîãî ïîñëå ëèíåàðèçàöèè, ñîîòâåòñòâóþùèé 17 Ðèñóíîê 2.1.2.46.-2. — Òåðìîãðàììà âåùåñòâà â çàâèñèìîñòè îò ÷èñòîòû RT x H f 0 2 2 * D , ïîçâîëÿåò îïðåäåëèòü çíà÷åíèå ìî- ëÿðíîé äîëè ïðèìåñè â àíàëèçèðóåìîì îáðàçöå. Ìîëÿðíàÿ äîëÿ ïðèìåñè â àíàëèçèðóåìîì îáðàçöå, óìíîæåííàÿ íà 100, äàåò ìîëÿðíóþ äîëþ âñåõ ýâòåêòè÷åñêèõ ïðèìåñåé â ïðîöåí- òàõ. 201020047-2022 2.1.2.47. Ïîòåíöèîìåòðè÷åñêîå îïðåäåëåíèå êîíöåíòðàöèè èîíîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì èîíîñåëåêòèâíûõ ýëåêòðîäîâ Òåîðåòè÷åñêè ýëåêòðîäíûé ïîòåíöèàë (Å) èîíîñåëåêòèâíîãî ýëåêòðîäà íàõîäèòñÿ â ëè- íåéíîé çàâèñèìîñòè îò ëîãàðèôìà àêòèâíîñòè äàííîãî èîíà, ÷òî âûðàæàåòñÿ óðàâíåíèåì Íåðíñòà: E E RT z F a i i= +0 2 303, lg , ãäå:Å0 — ñòàíäàðòíûé ýëåêòðîäíûé ïîòåíöèàë èñïîëüçóåìîãî ýëåêòðîäà; R — óíèâåðñàëüíàÿ ãàçîâàÿ ïîñòîÿííàÿ; Ò — àáñîëþòíàÿ òåìïåðàòóðà; F — ÷èñëî Ôàðàäåÿ; zi — âåëè÷èíà çàðÿäà èîíà ñ îáîçíà÷åíèåì åãî çíàêà; ai — àêòèâíîñòü èîíà. Ïðè ïîñòîÿííîé èîííîé ñèëå âûïîëíÿåòñÿ óðàâíåíèå: E E k z fC i i= +0 lg , ãäå:Ñi — ìîëÿðíàÿ êîíöåíòðàöèÿ èîíà; f — êîýôôèöèåíò àêòèâíîñòè (ai = f·Ci); k — RT F . Åñëè: E k z f E i 0 0+ = ¢lg è b k z i = , ãäå b — íà- êëîí êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé ýëåêòðîäà (íàêëîí ýëåêòðîäíîé ôóíêöèè), â òàêîì ñëó÷àå âûïîëíÿ- åòñÿ óðàâíåíèå: E E b C i= ¢ +0 lg è äëÿ - =lgC pCi i : E E bpC i= ¢ -0 .

Ïîòåíöèîìåòðè÷åñêîå îïðåäåëåíèå êîíöåí- òðàöèè èîíîâ ïðîâîäÿò ïóòåì èçìåðåíèÿ ðàçíè- öû ïîòåíöèàëîâ ìåæäó äâóìÿ ïîäõîäÿùèìè ýëåêòðîäàìè, ïîãðóæåííûìè â èñïûòóåìûé ðàñòâîð; èíäèêàòîðíûé ýëåêòðîä ÿâëÿåòñÿ ñå- ëåêòèâíûì ïî îòíîøåíèþ ê îïðåäåëÿåìîìó èîíó, äðóãîé ÿâëÿåòñÿ ýëåêòðîäîì ñðàâíåíèÿ. Ïðèáîð. Èñïîëüçóþò âîëüòìåòð, ïîçâîëÿþ- ùèé âûïîëíÿòü èçìåðåíèÿ ñ òî÷íîñòüþ 0,1 ìÂ, ñ âõîäíûì ñîïðîòèâëåíèåì â 100 ðàç ïðåâû- øàþùèì ñîïðîòèâëåíèå èñïîëüçóåìûõ ýëåê- òðîäîâ.  êà÷åñòâå èîíîñåëåêòèâíûõ ýëåêòðîäîâ èñ- ïîëüçóþò ïðåèìóùåñòâåííî ýëåêòðîäû ñ êðè- ñòàëëè÷åñêîé èëè íåêðèñòàëëè÷åñêîé ìåìáðà- íîé èëè ñ òâåðäîé îñíîâîé (íàïðèìåð, ñòåêëÿí- íûå ýëåêòðîäû), èëè ýëåêòðîäû ñ çàðÿæåííûìè (ïîëîæèòåëüíî èëè îòðèöàòåëüíî) èëè ñ íåçàðÿ- æåííûìè ïîäâèæíûìè íîñèòåëÿìè, èëè ñåíñè- áèëèçèðîâàííûå ýëåêòðîäû (ôåðìåíòíûå ýëåê- òðîäû, ãàç-èíäèêàòîðíûå ýëåêòðîäû). Ýëåêòðî- äîì ñðàâíåíèÿ îáû÷íî ÿâëÿåòñÿ õëîðñåðåáðÿ- íûé ýëåêòðîä ñ ïîäõîäÿùèìè ñîåäèíÿþùèìè èíåðòíûìè æèäêîñòÿìè, èñêëþ÷àþùèìè èõ ïå- ðåìåøèâàíèå. Ìåòîäèêà. Èçìåðåíèÿ ïðîâîäÿò ïðè ïîñòî- ÿííîé òåìïåðàòóðå ñ òî÷íîñòüþ ±0,5 °Ñ, ó÷èòû- âàÿ èçìåíåíèå íàêëîíà ýëåêòðîäíîé ôóíêöèè ýëåêòðîäà â çàâèñèìîñòè îò òåìïåðàòóðû (ñì. òàáëèöó 2.1.2.47.-1). Èîííóþ ñèëó è, åñëè íåîáõîäèìî, ðÍ èñïû- òóåìîãî ðàñòâîðà êîððåêòèðóþò áóôåðíûìè ðàñòâîðàìè, óêàçàííûìè â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåé- íîé ñòàòüå è (èëè) íîðìàòèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó; äëÿ óðàâíîâåøèâàíèÿ ýëåêòðîä ïîãðó- æàþò â èñïûòóåìûé ðàñòâîð, êîòîðûé ìåäëåííî ïåðåìåøèâàþò ñ ïîñòîÿííîé ñêîðîñòüþ, è ðåãè- ñòðèðóþò óñòàíîâèâøååñÿ ïîêàçàíèå ïðèáîðà. Åñëè ýëåêòðîäíàÿ ñèñòåìà èñïîëüçóåòñÿ ÷àñ- òî, òî ðåãóëÿðíî ïðîâåðÿþò âîñïðîèçâîäèìîñòü è ñòàáèëüíîñòü ñèãíàëà, ëèíåéíîñòü êàëèáðî- âî÷íîé êðèâîé èëè ðàñ÷åòíîãî àëãîðèòìà â ïðå- äåëàõ êîíöåíòðàöèé èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà, åñëè íåò, òî ïðîâîäÿò ïðîâåðêó ïåðåä êàæäîé ñåðèåé èçìåðåíèé. 18 Òàáëèöà 2.1.2.47.-1. — Çíà÷åíèÿ k ïðè ðàçëè÷íûõ òåìïåðàòóðàõ Òåìïåðàòóðà, °Ñ k 20 0,0582 25 0,0592 30 0,0602 Ïîêàçàíèÿ ïðèáîðà ñ÷èòàþò ëèíåéíûìè, åñëè íàêëîí êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé ïðèáëèçè- òåëüíî ðàâåí îòíîøåíèþ: k z pC i i / . ÌÅÒÎÄ 1 (ÌÅÒÎÄ ÊÀËÈÁÐÎÂÎ×ÍÎÉ ÊÐÈÂÎÉ) Ïîñëåäîâàòåëüíî èçìåðÿþò íå ìåíåå òðåõ ðàç ïîòåíöèàëû íå ìåíåå òðåõ ðàñòâîðîâ ñðàâ- íåíèÿ â äèàïàçîíå îæèäàåìîé êîíöåíòðàöèè èñ- ïûòóåìîãî ðàñòâîðà. Ðàññ÷èòûâàþò óðàâíåíèå êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé èëè ñòðîÿò ãðàôèê çàâè- ñèìîñòè ñðåäíåãî çíà÷åíèÿ ïîòåíöèàëà îò ñîîò- âåòñòâóþùåãî åìó çíà÷åíèÿ êîíöåíòðàöèè îï- ðåäåëÿåìîãî èîíà, âûðàæåííîãî êàê –lgCi èëè pCi. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð ãîòîâÿò â ñîîòâåòñò- âèè ñ óêàçàíèÿìè ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòà- òüè è (èëè) íîðìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïî êà÷åñò- âó; òðè ðàçà èçìåðÿþò ïîòåíöèàë è ðàññ÷èòûâà- þò êîíöåíòðàöèþ îïðåäåëÿåìîãî èîíà ïî ñðåäíåìó çíà÷åíèþ ïîòåíöèàëà, èñïîëüçóÿ êà- ëèáðîâî÷íóþ êðèâóþ. ÌÅÒÎÄ 2 (ÌÅÒÎÄ ÌÍÎÃÎÊÐÀÒÍÛÕ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÕ ÄÎÁÀÂÎÊ) Èñïûòóåìûé ðàñòâîð ãîòîâÿò â ñîîòâåòñò- âèè ñ óêàçàíèÿìè ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòà- òüè è (èëè) íîðìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïî êà÷åñò- âó. Èçìåðÿþò ïðè óñòàíîâèâøåìñÿ ðàâíîâåñèè ïîòåíöèàë â îáúåìå ýòîãî ðàñòâîðà ñ íåèçâåñò- íîé êîíöåíòðàöèåé îïðåäåëÿåìîãî èîíà. Ê èç- âåñòíîìó îáúåìó èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà íå ìå- íåå òðåõ ðàç ïîñëåäîâàòåëüíî ïðèáàâëÿþò îáú- åì ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ, íåçíà÷èòåëüíûé â ñðàâíåíèè ñ îáúåìîì èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà (íå áîëåå 0,01 îò îáúåìà èñïûòóåìîãî ðàñòâî- ðà), ñ èçâåñòíîé êîíöåíòðàöèåé, çíà÷åíèÿ êîòî- ðîé íàõîäÿòñÿ â ïðåäåëàõ ëèíåéíîé ÷àñòè êà- ëèáðîâî÷íîé êðèâîé. Ïîñëå êàæäîãî ïðèáàâëå- íèÿ èçìåðÿþò ïîòåíöèàë è ðàññ÷èòûâàþò ðàçíîñòü ïîòåíöèàëîâ DÅ ìåæäó èçìåðÿåìûì ïîòåíöèàëîì è ïîòåíöèàëîì ïðè óñòàíîâèâ- øåìñÿ ðàâíîâåñèè.

Âåëè÷èíà ðàçíîñòè ïîòåí- öèàëîâ ñâÿçàíà ñ êîíöåíòðàöèåé îïðåäåëÿåìîãî èîíà óðàâíåíèåì: DE b C V C V S S T T = + æ è ç ö ø ÷lg 1 èëè 10 1 DE b S S T T C V C V = + , ãäå: VT — îáúåì èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà; CT — êîíöåíòðàöèÿ îïðåäåëÿåìîãî èîíà â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå; VS — îáúåì ïðèáàâëÿåìîãî ðàñòâîðà ñðàâ- íåíèÿ; CS — êîíöåíòðàöèÿ îïðåäåëÿåìîãî èîíà â ðàñòâîðå ñðàâíåíèÿ; b — íàêëîí ýëåêòðîäíîé ôóíêöèè, óñòà- íîâëåííûé ýêñïåðèìåíòàëüíî ïðè ïî- ñòîÿííîé òåìïåðàòóðå ïóòåì èçìåðå- íèÿ ðàçíîñòè ïîòåíöèàëîâ, ïîëó÷åí- íîé ïðè èçìåðåíèè äâóõ ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ, êîíöåíòðàöèè êîòîðûõ îò- ëè÷àþòñÿ â 10 ðàç è íàõîäÿòñÿ â ïðå- äåëàõ ëèíåéíîé ÷àñòè êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé. Ñòðîÿò ãðàôèê çàâèñèìîñòè 10 DE b (îñü îðäè- íàò) îò îáúåìà ïðèáàâëÿåìîãî ðàñòâîðà ñðàâíå- íèÿ (îñü àáñöèññ) è ýêñòðàïîëèðóþò ïîëó÷åí- íóþ ëèíèþ äî ïåðåñå÷åíèÿ ñ îñüþ àáñöèññ.  òî÷êå ïåðåñå÷åíèÿ êîíöåíòðàöèþ îïðåäåëÿå- ìîãî èîíà â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå ðàññ÷èòûâà- þò ïî ôîðìóëå: C C V V T S S T = . ÌÅÒÎÄ 3 (ÌÅÒÎÄ ÎÄÍÎÊÐÀÒÍÎÉ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÎÉ ÄÎÁÀÂÊÈ) Ê èçâåñòíîìó îáúåìó èñïûòóåìîãî ðàñòâî- ðà, ïðèãîòîâëåííîãî â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿ- ìè ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüè è (èëè) íîð- ìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïî êà÷åñòâó, ïðèáàâëÿþò îáúåì ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ èçâåñòíîé êîíöåí- òðàöèè îïðåäåëÿåìîãî èîíà, íàõîäÿùåéñÿ â ëè- íåéíîé ÷àñòè êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé. Ïàðàë- ëåëüíî â òåõ æå óñëîâèÿõ ãîòîâÿò êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Ïîòåíöèàëû èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è êîíòðîëüíîãî ðàñòâîðà èçìåðÿþò íå ìåíåå òðåõ ðàç äî ïðèáàâëåíèÿ è ïîñëå ïðèáàâëåíèÿ ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ. Ðàññ÷èòûâàþò êîíöåíòðà- öèþ îïðåäåëÿåìîãî èîíà, èñïîëüçóÿ óðàâíåíèå è ó÷èòûâàÿ êîíòðîëüíûé ðàñòâîð: C C V V V V T S S E b T S T = + -10 D ( ) , 19 ãäå:VT — îáúåì èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà èëè êîí- òðîëüíîãî ðàñòâîðà; CT — êîíöåíòðàöèÿ îïðåäåëÿåìîãî èîíà â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå; VS — îáúåì ïðèáàâëÿåìîãî ðàñòâîðà ñðàâ- íåíèÿ; CS — êîíöåíòðàöèÿ îïðåäåëÿåìîãî èîíà â ðàñòâîðå ñðàâíåíèÿ; DÅ— ñðåäíåå çíà÷åíèå ðàçíèöû ïîòåíöèà- ëîâ, èçìåðåííûõ äî è ïîñëå ïðèáàâëå- íèÿ îáúåìà VS; 201020048-2022 2.1.2.48. Ðåíòãåíîôëóîðåñöåíòíàÿ ñïåêòðîìåòðèÿ Ìåòîä ðåíòãåíîôëóîðåñöåíòíîé ñïåêòðî- ìåòðèè îñíîâàí íà èçìåðåíèè ðåíòãåíîâñêîãî èçëó÷åíèÿ, èñïóñêàåìîãî àòîìàìè ïðè èõ îáëó- ÷åíèè âíåøíèì èñòî÷íèêîì èçëó÷åíèÿ, è èñ- ïîëüçóåòñÿ äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ õèìè- ÷åñêèõ ýëåìåíòîâ ñ àòîìíûìè íîìåðàìè îò 4 äî 92. Èçìåðåíèå ðåíòãåíîâñêîãî èçëó÷åíèÿ ïðî- âîäÿò ñ ïîìîùüþ âîëíîäèñïåðñèîííûõ èëè ýíåðãîäèñïåðñèîííûõ ðåíòãåíîôëóîðåñöåíò- íûõ ñïåêòðîìåòðîâ, ðàçëè÷àþùèõñÿ ñïîñîáîì äåòåêòèðîâàíèÿ.  âîëíîäèñïåðñèîííûõ ðåíòãåíîôëóîðåñ- öåíòíûõ ñïåêòðîìåòðàõ ðåíòãåíîâñêîå èçëó÷å- íèå, èñïóñêàåìîå îáðàçöîì, íàïðàâëÿåòñÿ íà êðèñòàëë, ãäå ïðîèñõîäèò åãî ïðåëîìëåíèå íà óãîë, çàâèñÿùèé îò ýíåðãèè èçëó÷åíèÿ. Èíòåí- ñèâíîñòü ïðåëîìëåííîãî ðåíòãåíîâñêîãî èçëó- ÷åíèÿ ïîñëåäîâàòåëüíî èçìåðÿåòñÿ äåòåêòîðîì.  ýíåðãîäèñïåðñèîííûõ ðåíòãåíîôëóîðåñ- öåíòíûõ ñïåêòðîìåòðàõ ðåíòãåíîâñêîå èçëó÷å- íèå îáðàçöà íàïðàâëÿåòñÿ íà òâåðäîòåëüíûé äå- òåêòîð, ãåíåðèðóþùèé ýëåêòðè÷åñêèå èìïóëü- ñû ñ àìïëèòóäîé, ïðîïîðöèîíàëüíîé ýíåðãèè êàæäîãî äåòåêòèðóåìîãî ôîòîíà ðåíòãåíîâñêîãî èçëó÷åíèÿ. Ñïåêòðîìåòðû òàêîãî òèïà ïîçâîëÿ- þò ïîëó÷èòü ñïåêòð èññëåäóåìîãî îáðàçöà, ñî- äåðæàùèé ïîëíóþ èíôîðìàöèþ î åãî ñîñòàâå. Èíòåíñèâíîñòü ôëóîðåñöåíöèè ýëåìåíòà çà- âèñèò îò åãî êîíöåíòðàöèè â îáðàçöå, à òàêæå îò ïîãëîùåíèÿ ìàòðèöåé âîçáóæäàþùåãî è èñïóñ- êàåìîãî èçëó÷åíèÿ.

Åñëè êîíöåíòðàöèÿ ñëåäî- âûõ êîëè÷åñòâ îïðåäåëÿåìîãî ýëåìåíòà âõîäèò â îáëàñòü ëèíåéíîñòè êàëèáðîâî÷íîãî ãðàôèêà, èíòåíñèâíîñòü èçìåðåííîé ïðè îïðåäåëåííîé äëèíå âîëíû ôëóîðåñöåíöèè ýëåìåíòà, íàõîäÿ- ùåãîñÿ â ìàòðèöå îïðåäåëåííîãî ñîñòàâà, ïðÿìî ïðîïîðöèîíàëüíà êîíöåíòðàöèè äàííîãî ýëå- ìåíòà è îáðàòíî ïðîïîðöèîíàëüíà ìàññîâîìó êîýôôèöèåíòó îñëàáëåíèÿ (ïîãëîùåíèÿ) ìàòðè- öû ïðè ýòîé äëèíå âîëíû, êîòîðûé ìîæåò áûòü îáóñëîâëåí ïðèñóòñòâèåì è êîíöåíòðàöèåé äðó- ãèõ ýëåìåíòîâ â îáðàçöå, ñîñòàâîì ìàòðèöû îá- ðàçöà è ðàçìåðîì ÷àñòèö ìàòåðèàëà. Ìåòîäèêà. Íàñòðîéêó è èñïîëüçîâàíèå ïðè- áîðà ïðîâîäÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ èíñòðóêöèÿìè ïðîèçâîäèòåëÿ. Æèäêèå îáðàçöû èçìåðÿþò íå- ïîñðåäñòâåííî; òâåðäûå îáðàçöû ìîãóò áûòü èç- ìåðåíû íåïîñðåäñòâåííî, ïîñëå ïðåäâàðèòåëü- íîãî ïðåññîâàíèÿ â òàáëåòêè (ãðàíóëû), èíîãäà ïîñëå ñìåøèâàíèÿ ñ ïîäõîäÿùèì ñâÿçûâàþùèì ìàòåðèàëîì ëèáî ñïëàâëåíèÿ. Íåîáõîäèìî, ÷òî- áû îáðàçåö èìåë äîñòàòî÷íóþ òîëùèíó äëÿ òîãî, ÷òîáû âîçìîæíûå íåáîëüøèå îòêëîíåíèÿ â òîëùèíå íå âëèÿëè íà èçìåðÿåìîå ðåíòãåíîâ- ñêîå èçëó÷åíèå. Äëÿ ïîâûøåíèÿ ÷óâñòâèòåëüíî- ñòè ïðè êîëè÷åñòâåííîì îïðåäåëåíèè ëåãêèõ ýëåìåíòîâ èçìåðåíèÿ ìîãóò ïðîâîäèòüñÿ â âà- êóóìå, â ñðåäå àçîòà èëè ãåëèÿ. Äëÿ êàëèáðîâêè ïðèáîðà, ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè ñèñòåìû è êîí- òðîëÿ ðàáîòîñïîñîáíîñòè èñïîëüçóþò ïîäõîäÿ- ùèå ñåðòèôèöèðîâàííûå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû, ïðè ýòîì ïðè àíàëèçå ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ ïðåäïî÷òèòåëüíî èñïîëüçîâàòü ñòàíäàðòíûå îá- ðàçöû ñ âûñîêèì ñîäåðæàíèåì óãëåðîäà. Ïðîâåðêà ïðèãîäíîñòè ñèñòåìû. Ïåðåä ïðîâåäåíèåì èñïûòàíèÿ äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ïðàâèëüíîñòè ðàáîòû ñèñòåìû ïðîâåðÿþò åå ïðèãîäíîñòü. Ïðîâåðêà ñ÷èòàåòñÿ ïðîéäåííîé, åñëè ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû íå îòëè÷àþòñÿ îò äåéñòâèòåëüíîãî çíà÷åíèÿ áîëåå ÷åì íà 5 % â ñëó÷àå êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ñîäåð- æàíèÿ êîìïîíåíòîâ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ èëè âñïîìîãàòåëüíûõ âåùåñòâ, è áîëåå ÷åì íà 20 % â ñëó÷àå êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ñîäåð- æàíèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòà. Ñðàâíåíèå ñ ðåçóëü- òàòàìè, ïîëó÷åííûìè àëüòåðíàòèâíûì ìåòî- äîì, íàïðèìåð, ñ ïîìîùüþ àòîìíî-àáñîðáöèîí- 20 b — íàêëîí ýëåêòðîäíîé ôóíêöèè, óñòà- íîâëåííûé ýêñïåðèìåíòàëüíî ïðè ïî- ñòîÿííîé òåìïåðàòóðå ïóòåì èçìåðå- íèÿ ðàçíîñòè ïîòåíöèàëîâ, ïîëó÷åí- íûé èç äâóõ ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ, êîíöåíòðàöèè êîòîðûõ îòëè÷àþòñÿ â 10 ðàç è íàõîäÿòñÿ â ïðåäåëàõ ëèíåé- íîé ÷àñòè êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé. íîé ñïåêòðîìåòðèè, òàêæå ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàíî äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè ñèñòå- ìû, ïðè ýòîì â ñëó÷àå êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäå- ëåíèÿ êðèòåðèé ïðèåìëåìîñòè ìîæåò áûòü ïðè- íÿò ðàâíûì 10 %. Êîíòðîëü ðàáîòîñïîñîáíîñòè ïðèáîðà. Äëÿ îáåñïå÷åíèÿ äîñòîâåðíîñòè ðåçóëüòàòîâ èç- ìåðåíèé íåîáõîäèìî ãàðàíòèðîâàòü ñòàáèëü- íóþ ðàáîòó ïðèáîðà â òå÷åíèå ïðîäîëæèòåëüíî- ãî ïåðèîäà âðåìåíè. Âûáîð ïðîöåäóð, êðèòåðè- åâ ïðèåìëåìîñòè è âðåìåííûõ èíòåðâàëîâ äëÿ ýòîãî äîëæåí îòòàëêèâàòüñÿ îò òèïà èñïîëüçóå- ìîãî îáîðóäîâàíèÿ è åãî ïðåäïîëàãàåìîãî èñ- ïîëüçîâàíèÿ. Íàïðèìåð, êîíòðîëü ìîæíî îñó- ùåñòâëÿòü ïóòåì îöåíêè x-îñè (óãîë èëè ýíåð- ãèÿ) è y-îñè (èíòåíñèâíîñòü), à òàêæå ðàçðåøàþùåé ñïîñîáíîñòè äåòåêòîðà (ñ òðåáî- âàíèÿìè, ÷òî çíà÷åíèÿ ðàçðåøàþùåé ñïîñîáíî- ñòè íå äîëæíû îòêëîíÿòüñÿ îò çíà÷åíèÿ, îïðåäå- ëåííîãî ïðè êàëèáðîâêå îáîðóäîâàíèÿ, áîëåå ÷åì íà 20 % äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ êîìïîíåíòîâ è áîëåå ÷åì íà 25 % äëÿ ïîäëèííî- ñòè è êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ). Âàëèäàöèîííûå òðåáîâàíèÿ.  ñëó÷àå ìåòî- äèê îïðåäåëåíèÿ ïðèìåñåé ðóêîâîäñòâóþòñÿ òðåáîâàíèÿìè ê âàëèäàöèè, ïðåäñòàâëåííûìè â îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå 2.1.4.23. Îïðå- äåëåíèå ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ.  îñòàëüíûõ ñëó- ÷àÿõ ïîëüçóþòñÿ îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüåé 2.3.14.0. Âàëèäàöèÿ àíàëèòè÷åñêèõ ìåòîäèê.

Åñëè ïðè ïðîâåäåíèè èñïûòàíèÿ òðåáóåòñÿ ïðîâåäåíèå ïðîáîïîäãîòîâêè, òî ââåäåíèå äîáà- âîê â èñïûòóåìûé îáðàçåö îñóùåñòâëÿþò äî íà- ÷àëà åå ïåðâîé ñòàäèè. 201020049-2022 2.1.2.49. Ìîëåêóëÿðíî-ìàññîâîå ðàñïðåäåëåíèå äåêñòðàíîâ Îïðåäåëåíèå ïðîâîäÿò ìåòîäîì ýêñêëþçè- îííîé õðîìàòîãðàôèè (2.1.2.29). Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. 0,200 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàñòâîðÿþò â ïîäâèæíîé ôàçå è äîâî- äÿò òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî îáúåìà 10 ìë. Ìàðêåðíûé ðàñòâîð. 5 ìã ãëþêîçû Ð è 2 ìã ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà V0 ðàñòâîðÿþò â 1 ìë ïîäâèæíîé ôàçû. Êàëèáðîâî÷íûå ðàñòâîðû. Íàâåñêó êàæäîãî èç óêàçàííûõ ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ: 15 ìã ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà 4 äëÿ êàëèáðîâêè, 15 ìã ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà 10 äëÿ êàëèáðîâêè, 20 ìã ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà 40 äëÿ êàëèáðîâêè, 20 ìã ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà 70 äëÿ êàëèáðîâêè è 20 ìã ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà 250 äëÿ êàëèáðîâêè ïî îòäåëüíîñòè ðàñòâîðÿþò â 1 ìë ïîäâèæíîé ôàçû. Ðàñòâîð äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðîìà- òîãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû. 20 ìã ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåê- ñòðàíà 40 äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðîìàòî- ãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû (äëÿ àíàëèçà ñóáñòàíöèè äåêñòðàíà 40) èëè 20 ìã ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà 60/70 äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðîìàòîãðà- ôè÷åñêîé ñèñòåìû (äëÿ àíàëèçà ñóáñòàíöèé äåêñòðàíà 60 è äåêñòðàíà 70) ðàñòâîðÿþò â 1 ìë ïîäâèæíîé ôàçû. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçî- âàòü ñëåäóþùèå óñëîâèÿ õðîìàòîãðàôèðîâàíèÿ: – êîëîíêà äëèíîé 0,3 ì è âíóòðåííèì äèà- ìåòðîì 10 ìì, çàïîëíåííàÿ àãàðîçîé ïîïåðå÷íî- ñøèòîé äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð, èëè ñåðèÿ êîëî- íîê äëèíîé 0,3 ì è âíóòðåííèì äèàìåòðîì 10 ìì êàæäàÿ, çàïîëíåííûõ ïîëèýôèðíûì ãèä- ðîêñèëèðîâàííûì ãåëåì äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð; – ïîäâèæíàÿ ôàçà: ðàñòâîð 7 ã íàòðèÿ ñóëüôàòà áåçâîäíîãî Ð è 1 ã õëîðáóòàíîëà Ð â 1 ë âîäû Ð; – ñêîðîñòü ïîäâèæíîé ôàçû: îò 0,5 ìë/ìèí äî 1 ìë/ìèí, ïîääåðæèâàåìàÿ ïîñòîÿííî ñ òî÷- íîñòüþ ±1 % â ÷àñ; – äåòåêòîð: äèôôåðåíöèàëüíûé ðåôðàêòî- ìåòðè÷åñêèé; – ïåòëåâîé äîçàòîð: îáúåì îò 100 ìêë äî 200 ìêë; – òåìïåðàòóðà ñèñòåìû: ïîääåðæèâàþò ïîñòîÿííîé ñ òî÷íîñòüþ ±0,1 °Ñ. ÊÀËÈÁÐÎÂÊÀ ÕÐÎÌÀÒÎÃÐÀÔÈ×ÅÑÊÎÉ ÑÈÑÒÅÌÛ Õðîìàòîãðàôèðóþò íåñêîëüêî ðàç âûáðàí- íûé îáúåì ìàðêåðíîãî ðàñòâîðà. Íà õðîìàòî- ãðàììå äîëæíû ïðèñóòñòâîâàòü 2 ïèêà: ïåðâûé ïèê ñîîòâåòñòâóåò ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà V0, âòîðîé ïèê — ãëþêîçå Ð. Èñõîäÿ èç îáúåìà ýëþèðîâàíèÿ äåêñòðàíà V0, ðàññ÷èòûâàþò îáú- åì ýêñêëþçèè V0; ïîëíûé îáúåì Vt ðàññ÷èòûâà- þò ïî ïèêó, ñîîòâåòñòâóþùåìó ãëþêîçå. Õðîìàòîãðàôèðóþò îïðåäåëåííûé îáúåì êàæäîãî èç êàëèáðîâî÷íûõ ðàñòâîðîâ. Äëÿ êàæ- 21 äîé ïîëó÷åííîé õðîìàòîãðàììû ïðîâîäÿò áàçî- âóþ ëèíèþ. Êàæäóþ õðîìàòîãðàììó äåëÿò âåð- òèêàëüíûìè ðàâíîóäàëåííûìè ëèíèÿìè íà ð ñåêöèé (êîëè÷åñòâîì íå ìåíåå 60), ÷òî ñîîòâåò- ñòâóåò ðàâíûì îáúåìàì ýëþèðîâàíèÿ. Äëÿ êàæ- äîé ñåêöèè i, ñîîòâåòñòâóþùåé îáúåìó ýëþèðî- âàíèÿ Vi, èçìåðÿþò âûñîòó (yi) îò áàçîâîé ëèíèè äî ëèíèè õðîìàòîãðàììû è ðàññ÷èòûâàþò êîýô- ôèöèåíò ðàñïðåäåëåíèÿ (Ki) ïî ôîðìóëå: ( ) ( ) V V V V i t - - 0 0 , (1) ãäå:V0 — îáúåì ýêñêëþçèè, îïðåäåëåííûé ïî ïèêó, ñîîòâåòñòâóþùåìó ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà V0 íà õðîìàòîãðàììå ìàð- êåðíîãî ðàñòâîðà; Vt — ïîëíûé îáúåì êîëîíêè, îïðåäåëåííûé ïî ïèêó, ñîîòâåòñòâóþùåìó ãëþêîçå íà õðîìàòîãðàììå ìàðêåðíîãî ðàñòâî- ðà; Vi — îáúåì ýëþèðîâàíèÿ äëÿ ñåêöèè i, ïî- ëó÷åííûé äëÿ õðîìàòîãðàììû êàæäî- ãî èç êàëèáðîâî÷íûé ðàñòâîðîâ. Êàëèáðîâêó ïðîâîäÿò, èñïîëüçóÿ îäèí èç ñëåäóþùèõ ìåòîäîâ. Êàëèáðîâêà ïóòåì ïîñòðîåíèÿ êàëèáðîâî÷- íîãî ãðàôèêà. Ïî óðàâíåíèþ (1) äëÿ êàæäîãî èç äåêñòðàíîâ äëÿ êàëèáðîâêè ðàññ÷èòûâàþò êîýô- ôèöèåíò ðàñïðåäåëåíèÿ Kmax, ñîîòâåòñòâóþùèé ìàêñèìàëüíîé âûñîòå ëèíèè õðîìàòîãðàììû.

Íà ïîëóëîãàðèôìè÷åñêîé áóìàãå ñòðîÿò çàâèñè- ìîñòü çíà÷åíèé Kmax (îñü àáñöèññ) îò ìîëåêó- ëÿðíîé ìàññû äëÿ ìàêñèìàëüíîé âûñîòû ëèíèè õðîìàòîãðàììû (Ìmax) êàæäîãî èç äåêñòðàíîâ äëÿ êàëèáðîâêè è ãëþêîçû (îñü îðäèíàò). ×åðåç âñå ïîëó÷åííûå òî÷êè ïðîâîäÿò ïåðâóþ êàëèá- ðîâî÷íóþ ëèíèþ, ýêñòðàïîëèðóÿ åå èç òî÷êè Kmax, ïîëó÷åííîé äëÿ ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà 250 äëÿ êàëèáðîâêè, äî áîëåå íèçêèõ çíà÷åíèé K, ïîëó÷åííûõ äëÿ òåõ æå ñòàíäàðòíûõ ðàñòâî- ðîâ (ñì. ðèñóíîê 2.1.2.49.-1). Èñïîëüçóÿ ïîëó÷åííûé ïåðâûé êàëèáðîâî÷- íûé ãðàôèê, íàõîäÿò äëÿ âñåõ çíà÷åíèé Ki äëÿ âñåõ õðîìàòîãðàìì ñîîòâåòñòâóþùèå çíà÷åíèÿ ìîëåêóëÿðíûõ ìàññ Ìi, ïîëó÷àÿ òàêèì îáðàçîì ãðàôè÷åñêóþ çàâèñèìîñòü äëÿ ðàñ÷åòà ìîëåêó- ëÿðíî-ìàññîâîãî ðàñïðåäåëåíèÿ. Äëÿ êàæäîãî äåêñòðàíà äëÿ êàëèáðîâêè ðàññ÷èòûâàþò ñðåä- íþþ ìîëåêóëÿðíóþ ìàññó ïî óðàâíåíèþ (3), ïðèâåäåííîìó íèæå. Êàëèáðîâî÷íûé ãðàôèê ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí äëÿ ðàñ÷åòîâ, åñëè ðàñ- ñ÷èòàííûå çíà÷åíèÿ äëÿ êàæäîãî èç äåêñòðàíîâ äëÿ êàëèáðîâêè íå îòëè÷àþòñÿ îò óêàçàííûõ â ñîïðîâîäèòåëüíîé äîêóìåíòàöèè çíà÷åíèé áîëüøå ÷åì íà 5 % è ñðåäíåå îòêëîíåíèå äëÿ âñåõ äåêñòðàíîâ íå ïðåâûøàåò ±3 %. Åñëè äàí- íûå óñëîâèÿ íå âûïîëíÿþòñÿ, êàëèáðîâî÷íûé ãðàôèê ñìåùàþò âäîëü îñè îðäèíàò è ïîâòîðÿ- þò âûøåîïèñàííûå îïåðàöèè, ïîêà ðàññ÷èòàí- íûå è óêàçàííûå â ñîïðîâîäèòåëüíîé äîêóìåí- òàöèè çíà÷åíèÿ áóäóò îòëè÷àòüñÿ íå áîëåå ÷åì íà 5 %. Êàëèáðîâêà ïðè ïîìîùè ðàñ÷åòíîãî ìåòîäà. Ïðè ïîìîùè óðàâíåíèé (2) è (3), ïðèâåäåííûõ íèæå, è ïîäõîäÿùåãî ìåòîäà (âîçìîæíî èñïîëü- çîâàíèå èòåðàòèâíîãî ìåòîäà, òàêîãî êàê ìîäè- ôèöèðîâàííîãî Õàðòëè ìåòîäà Ãàóññà-Íüþòî- íà; òàêæå âîçìîæíî ïîñòðîåíèå êðèâîé ïðè ïî- 22 Ðèñóíîê 2.1.2.49.-1. — Ïðèìåð êàëèáðîâî÷íîãî ãðà- ôèêà. Ïóíêòèðîì îáîçíà÷åíà ÷àñòü êàëèáðîâî÷íîãî ãðàôèêà, ïîëó÷åííàÿ ýêñòðàïîëèðîâàíèåì. Ãîðèçîí- òàëüíûìè ëèíèÿìè â íèæíåé ÷àñòè ðèñóíêà óêàçàíû øèðèíà è ïîëîæåíèÿ õðîìàòîãðàôè÷åñêèõ ëèíèé, ïî- ëó÷åííûõ äëÿ êàæäîãî äåêñòðàíà äëÿ êàëèáðîâêè ìîùè êîìïüþòåðíûõ ïðîãðàìì, êîòîðûå èñïîëüçóþò ïðèíöèï íåëèíåéíîãî ðåãðåññèîí- íîãî àíàëèçà) ðàññ÷èòûâàþò çíà÷åíèÿ êîýôôè- öèåíòîâ b1, b2, b3, b4 è b5, êîòîðûå äîëæíû ñî- ñòàâëÿòü äëÿ ãëþêîçû 180 ± 2, à äëÿ äåêñòðàíîâ äëÿ êàëèáðîâêè ìîãóò îòëè÷àòüñÿ íå áîëåå ÷åì íà 5 % îò ñîîòâåòñòâóþùèõ çíà÷åíèé, óêàçàí- íûõ â ñîïðîâîäèòåëüíîé äîêóìåíòàöèè. M b ei b b K b K b Ki i i= + + + + 5 4 1 2 2 3 3( ) , (2) M y M y i i p i i i pw = = = å å ( ) 1 1 , (3) ãäå: p — ÷èñëî ñåêöèé, íà êîòîðûå ïîäåëåíà õðîìàòîãðàììà; yi — âûñîòà õðîìàòîãðàôè÷åñêîé ëèíèè íàä áàçîâîé ëèíèåé â i-òîé ñåêöèè; Ìi — ìîëåêóëÿðíàÿ ìàññà äëÿ ñåêöèè i. ÏÐÈÃÎÄÍÎÑÒÜ ÕÐÎÌÀÒÎÃÐÀÔÈ×ÅÑÊÎÉ ÑÈÑÒÅÌÛ Õðîìàòîãðàôèðóþò ïîäõîäÿùèé îáúåì ñî- îòâåòñòâóþùåãî ðàñòâîðà äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîä- íîñòè õðîìàòîãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû. Ñðåäíÿÿ ìîëåêóëÿðíàÿ ìàññà ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðîìàòî- ãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû. Ðàññ÷èòûâàþò çíà÷åíèå Mw, êàê óêàçàíî â ðàçäåëå «Êàëèáðîâêà õðîìàòî- ãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû», èñïîëüçóÿ êàëèáðîâî÷- íûé ãðàôèê èëè çíà÷åíèÿ êîýôôèöèåíòîâ b1, b2, b3, b4 è b5. Ðåçóëüòàòû àíàëèçà ñ÷èòàþòñÿ äîñòî- âåðíûìè, åñëè ïîëó÷åííîå çíà÷åíèå íàõîäèòñÿ â ïðåäåëàõ: – îò 41 000 äî 47 000 (äëÿ ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåê- ñòðàíà 40 äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðîìàòî- ãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû); – îò 67 000 äî 75 000 (äëÿ ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåê- ñòðàíà 60/70 äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðîìà- òîãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû). Ñðåäíÿÿ ìîëåêóëÿðíàÿ ìàññà 10 % âûñîêî- ìîëåêóëÿðíîé ôðàêöèè äåêñòðàíà.

Çíà÷åíèå Mw äëÿ 10 % âûñîêîìîëåêóëÿðíîé ôðàêöèè äåêñò- ðàíà, êîòîðàÿ ýëþèðóåòñÿ â ñåêöèÿõ îò 1 äî n âêëþ÷èòåëüíî, ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå: M y M y i i n i i i nw = = = å å ( ) 1 1 , (4) ãäå n îïðåäåëÿåòñÿ íåðàâåíñòâàìè: y yi i n i i p = = å å£ æ è çç ö ø ÷÷ 1 1 01, , (5) y yi i n i i p = + = å å> æ è çç ö ø ÷÷ 1 1 1 01, , (6) ãäå:ð — êîëè÷åñòâî ñåêöèé, íà êîòîðûå ðàçäå- ëåíà õðîìàòîãðàììà; ói — âûñîòà õðîìàòîãðàôè÷åñêîé ëèíèè íàä áàçîâîé ëèíèåé äëÿ ñåêöèè i; Ìi — ìîëåêóëÿðíàÿ ìàññà äëÿ ñåêöèè i. Ðåçóëüòàòû àíàëèçà ñ÷èòàþòñÿ äîñòîâåðíû- ìè, åñëè ïîëó÷åííîå çíà÷åíèå äëÿ 10% âûñîêî- ìîëåêóëÿðíîé ôðàêöèè äåêñòðàíà íàõîäèòñÿ â ïðåäåëàõ: – îò 110 000 äî 130 000 (äëÿ ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåê- ñòðàíà 40 äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðîìàòî- ãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû); – îò 190 000 äî 230 000 (äëÿ ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðàíà 60/70 äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðî- ìàòîãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû). Ñðåäíÿÿ ìîëåêóëÿðíàÿ ìàññà 10 % íèçêîìî- ëåêóëÿðíîé ôðàêöèè äåêñòðàíà. Çíà÷åíèå äëÿ 10 % íèçêîêîìîëåêóëÿðíîé ôðàêöèè äåêñòðàíà, êîòîðàÿ ýëþèðóåòñÿ â ñåêöèè è ïîñëå ñåêöèè õðîìàòîãðàìì m, ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå: M y M y i i m p i i i m pw = = = å å ( ) , (7) ãäå m îïðåäåëÿåòñÿ íåðàâåíñòâàìè: y yi i m p i i p = = å å£ æ è çç ö ø ÷÷01 1 , , (8) y yi i m p i i p = - = å å> æ è çç ö ø ÷÷ 1 1 01, , (9) ãäå: ð — êîëè÷åñòâî ñåêöèé, íà êîòîðûå ðàçäå- ëåíà õðîìàòîãðàììà; ói — âûñîòà õðîìàòîãðàôè÷åñêîé ëèíèè íàä áàçîâîé ëèíèåé äëÿ ñåêöèè i; Ìi — ìîëåêóëÿðíàÿ ìàññà äëÿ ñåêöèè i. 23 Ðåçóëüòàòû àíàëèçà ñ÷èòàþòñÿ äîñòîâåðíû- ìè, åñëè ïîëó÷åííîå çíà÷åíèå äëÿ 10 % íèçêî- ìîëåêóëÿðíîé ôðàêöèè äåêñòðàíà íàõîäèòñÿ â ïðåäåëàõ: – îò 6000 äî 8500 (äëÿ ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñòðà- íà 40 äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðîìàòîãðà- ôè÷åñêîé ñèñòåìû); – îò 7000 äî 11 000 (äëÿ ÑÎ ÔÅÀÝÑ äåêñò- ðàíà 60/70 äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè õðîìàòî- ãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû). ÌÎËÅÊÓËßÐÍÎ-ÌÀÑÑÎÂÎÅ ÐÀÑÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÈÑÏÛÒÓÅÌÎÃÎ ÄÅÊÑÒÐÀÍÀ Õðîìàòîãðàôèðóþò âûáðàííûé îáúåì èñ- ïûòóåìîãî ðàñòâîðà è ðàññ÷èòûâàþò: çíà÷åíèå Mw äëÿ ìîëåêóëÿðíî-ìàññîâîãî ðàñïðåäåëåíèÿ äåêñòðàíà, çíà÷åíèå Mw äëÿ 10 % âûñîêîìîëå- êóëÿðíîé ôðàêöèè äåêñòðàíà è çíà÷åíèå Mw äëÿ 10 % íèçêîìîëåêóëÿðíîé ôðàêöèè äåêñòðàíà ðàññ÷èòûâàþò, êàê îïèñàíî â ðàçäåëå «Ïðèãîä- íîñòü õðîìàòîãðàôè÷åñêîé ñèñòåìû». 201020050-2022 2.1.2.50. Êðóãîâîé äèõðîèçì Ïðè ïðîõîæäåíèè ïëîñêîïîëÿðèçîâàííîãî ñâåòà ÷åðåç îïòè÷åñêè àêòèâíîå âåùåñòâî âáëè- çè åãî ïîëîñ ïîãëîùåíèÿ ïðîèñõîäèò àíîìàëü- íîå èçìåíåíèå óãëà âðàùåíèÿ ïëîñêîñòè ïîëÿ- ðèçîâàííîãî ñâåòà, ÷òî ïðèâîäèò ê êðóãîâîìó äèõðîèçìó. Êðóãîâûì äèõðîèçìîì íàçûâàþò ðàçíîñòü ïîãëîùåíèé, ïðèñóùóþ îïòè÷åñêè àêòèâíûì âåùåñòâàì â ïðåäåëàõ ïîëîñû ïîãëîùåíèÿ äëÿ ñâåòà ñ ëåâîé è ïðàâîé êðóãîâîé ïîëÿðèçàöèåé. Èç ëèíåéíî ïîëÿðèçîâàííîãî ñâåòîâîé ëó÷ ñòàíîâèòñÿ ïðè âûõîäå èç ðàñòâîðà îïòè÷åñêè àêòèâíîãî âåùåñòâà ýëëèïòè÷åñêè ïîëÿðèçîâàí- íûì, ïðè÷åì ýëëèïòè÷íîñòü ïðîõîäèò ÷åðåç ìàêñèìóì â îáëàñòè ïîëîñû ïîãëîùåíèÿ (ýô- ôåêò Êîòòîíà). Ïîãëîùåíèå êðóãîâîãî äèõðîèçìà îïðåäåëÿ- åòñÿ ïðÿìûì èçìåðåíèåì ïîãëîùåíèÿ ñâåòà ñ ëåâîé è ïðàâîé êðóãîâîé ïîëÿðèçàöèåé: DA A AL R= - , ãäå: AL — ïîãëîùåíèå ñâåòà ñ ëåâîé êðóãîâîé ïî- ëÿðèçàöèåé; AR — ïîãëîùåíèå ñâåòà ñ ïðàâîé êðóãîâîé ïîëÿðèçàöèåé. Êðóãîâîé äèõðîèçì ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîð- ìóëå: D D e e e= - = × L R A c l, ãäå:De — ìîëÿðíûé êðóãîâîé äèõðîèçì èëè ìî- ëÿðíûé äèôôåðåíöèàëüíûé äèõðîè÷- íûé êîýôôèöèåíò ïîãëîùåíèÿ, ë·ìîëü–1·ñì–1; eL — ìîëÿðíûé êîýôôèöèåíò ïîãëîùåíèÿ (2.1.2.24) äëÿ ñâåòà ñ ëåâîé êðóãîâîé ïîëÿðèçàöèåé; eR — ìîëÿðíûé êîýôôèöèåíò ïîãëîùåíèÿ äëÿ ñâåòà ñ ïðàâîé êðóãîâîé ïîëÿðèçà- öèåé; c — ìîëÿðíàÿ êîíöåíòðàöèÿ âåùåñòâà â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå, ìîëü·ë–1; l — äëèíà îïòè÷åñêîãî ïóòè, ñì.

Äëÿ õàðàêòåðèñòèêè êðóãîâîãî äèõðîèçìà ìîãóò áûòü òàêæå èñïîëüçîâàíû ñëåäóþùèå âå- ëè÷èíû: Êîýôôèöèåíò äèññèììåòðèè: g = De e , ãäå: e — ìîëÿðíûé êîýôôèöèåíò ïîãëîùåíèÿ (2.1.2.24). Ìîëÿðíàÿ ýëëèïòè÷íîñòü: Ìîëÿðíîé ýëëèïòè÷íîñòüþ íàçûâàþò âåëè- ÷èíó óãëà â ãðàäóñàõ äëÿ 1 Ì ðàñòâîðà îïòè÷å- ñêè àêòèâíîãî âåùåñòâà ïðè äëèíå îïòè÷åñêîãî ïóòè 1 ì. Ìîëÿðíàÿ ýëëèïòè÷íîñòü ìîæåò áûòü ðàññ÷èòàíà ïî ïîêàçàíèÿì ïðèáîðîâ (äèõðîãðà- ôîâ), íåïîñðåäñòâåííî èçìåðÿþùèõ âåëè÷èíó ýëëèïòè÷íîñòè â ãðàäóñàõ, ïî ôîðìóëå: [ ]Q Q = × × × M c l 10, ãäå: [Q] — ìîëÿðíàÿ ýëëèïòè÷íîñòü, ãðàäóñ · ñì2 · äìîëü–1; Q — çíà÷åíèå ýëëèïòè÷íîñòè, ïîêàçûâàå- ìîå ïðèáîðîì; M — ìîëÿðíàÿ ìàññà èñïûòóåìîãî âåùåñò- âà; c — ìàññîâàÿ êîíöåíòðàöèÿ âåùåñòâà â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå, ã·ìë–1; l — äëèíà îïòè÷åñêîãî ïóòè, ñì. Ìîëÿðíàÿ ýëëèïòè÷íîñòü òàêæå ñâÿçàíà ñ ìîëÿðíûì êðóãîâûì äèõðîèçìîì ñëåäóþùèì óðàâíåíèåì: 24 Q D D= »2 303 4500 3300, e p e. Ìîëÿðíàÿ ýëëèïòè÷íîñòü ÷àñòî èñïîëüçóåò- ñÿ ïðè àíàëèçå áåëêîâ è íóêëåèíîâûõ êèñëîò.  ýòîì ñëó÷àå ìîëÿðíóþ êîíöåíòðàöèþ ðàñòâî- ðà ðàññ÷èòûâàþò ñ ó÷åòîì ñðåäíåé îòíîñèòåëü- íîé ìîëåêóëÿðíîé ìàññû ýëåìåíòàðíîãî çâåíà áåëêà èëè íóêëåèíîâîé êèñëîòû, íàéäåííîé ïî ôîðìóëå: M N r , ãäå: Mr — îòíîñèòåëüíàÿ ìîëåêóëÿðíàÿ ìàññà áåëêà èëè íóêëåèíîâîé êèñëîòû; N — ÷èñëî ýëåìåíòàðíûõ çâåíüåâ áåëêà èëè íóêëåèíîâîé êèñëîòû. Ñðåäíÿÿ îòíîñèòåëüíàÿ ìîëåêóëÿðíàÿ ìàññà ýëåìåíòàðíîãî çâåíà ñîñòàâëÿåò äëÿ áåëêîâ îò 100 äî 120 (â ñðåäíåì 115), äëÿ íóêëåèíîâûõ êèñëîò (â âèäå íàòðèåâîé ñîëè) — îêîëî 330. Ïðèáîð. Èñòî÷íèêîì ñâåòà (S) ÿâëÿåòñÿ êñå- íîíîâàÿ ëàìïà (ðèñóíîê 2.1.2.50.-1); ñâåò ïðîõî- äèò ÷åðåç äâîéíîé ìîíîõðîìàòîð (M), ñíàáæåí- íûé êâàðöåâûìè ïðèçìàìè (P1, P2). Ëèíåéíûé ëó÷ èç ïåðâîãî ìîíîõðîìàòîðà ðàñùåïëÿåòñÿ íà 2 êîìïîíåíòà, ïîëÿðèçóåìûå ïîä ïðàâûì óãëîì âòîðûì ìîíîõðîìàòîðîì. Äî- ïîëíèòåëüíûé ëó÷ óñòðàíÿåòñÿ âûõîäíîé ùå- ëüþ ìîíîõðîìàòîðà. Ïîëÿðèçîâàííûé è ìîíîõðîìàòè÷åñêèé ñâåò ïðîõîäèò ÷åðåç äâîÿêîïðåëîìëÿþùèé ìîäóëÿ- òîð (Cr); â ðåçóëüòàòå îáðàçóåòñÿ ïåðåìåííûé ñâåò ñ êðóãîâîé ïîëÿðèçàöèåé. Çàòåì ëó÷ ïðîõîäèò ÷åðåç èññëåäóåìûé îá- ðàçåö (C) è ïîïàäàåò íà ôîòîóìíîæèòåëü (P.M.), çà êîòîðûì ñëåäóåò óñèëèòåëü, ïðîèçâîäÿùèé 2 ýëåêòðè÷åñêèõ ñèãíàëà: îäèí — ïîñòîÿííîãî òîêà Vc, à äðóãîé — ïåðåìåííîãî òîêà ñ ÷àñòî- òîé ìîäóëÿöèè Vac, õàðàêòåðíîé äëÿ èññëåäóå- ìîãî îáðàçöà. Ôàçà ÿâëÿåòñÿ ïîêàçàòåëåì êðóãî- âîãî äèõðîèçìà. Îòíîøåíèå Vac/Vc ïðîïîðöèî- íàëüíî äèôôåðåíöèàëüíîé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè DA, êîòîðàÿ ñîçäàåòñÿ ñèãíàëîì. Äèõðîãðàô îáû÷íî ïîçâîëÿåò ïðîâîäèòü èçìå- ðåíèÿ â äèàïàçîíå äëèí âîëí îò 170 íì äî 800 íì. ÊÀËÈÁÐÎÂÊÀ ÏÐÈÁÎÐÀ Òî÷íîñòü øêàëû îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè. 10,0 ìã èçîàíäðîñòåðîíà Ð ðàñòâîðÿþò â äèîê- ñàíå Ð è äîâîäÿò òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî îáúå- ìà 10,0 ìë. Ñíèìàþò ñïåêòð êðóãîâîãî äèõðîèç- ìà ðàñòâîðà â äèàïàçîíå îò 280 íì äî 360 íì. Âåëè÷èíà De, èçìåðåííàÿ â ìàêñèìóìå ïðè 304 íì, ðàâíà +3,3. Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå ðàñòâîðà (1S)-(+)-10-êàìôîðñóëüôîíîâîé êèñëîòû Ð. Ëèíåéíîñòü ìîäóëÿöèè. 10,0 ìã (1S)-(+)- 10-êàìôîðñóëüôîíîâîé êèñëîòû Ð ðàñòâîðÿþò â âîäå Ð è äîâîäÿò òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî îáú- åìà 10,0 ìë. Îïðåäåëÿþò òî÷íóþ êîíöåíòðàöèþ êàìôîðñóëüôîíîâîé êèñëîòû â ðàñòâîðå ìåòî- äîì ñïåêòðîôîòîìåòðèè â óëüòðàôèîëåòîâîé îáëàñòè (2.1.2.24), èñïîëüçóÿ çíà÷åíèå óäåëüíî- ãî ïîêàçàòåëÿ ïîãëîùåíèÿ ïðè 285 íì, ðàâíîå 1,49. Ñíèìàþò ñïåêòð êðóãîâîãî äèõðîèçìà ðàñ- òâîðà â äèàïàçîíå îò 185 íì äî 340 íì. Âåëè÷è- íà De, èçìåðåííàÿ â ìàêñèìóìå ïðè 290,5 íì, 25 Ðèñóíîê 2.1.2.50.-1. — Îïòè÷åñêàÿ ñõåìà äèõðîãðàôà ñîñòàâëÿåò îò +2,2 äî +2,5, à èçìåðåííàÿ â ìàê- ñèìóìå ïðè 192,5 íì — îò –4,3 äî –5.

Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå àììîíèÿ (1S)-(+)-10-êàìôîðñóëüôîíàòà Ð èëè åãî îïòè- ÷åñêîãî èçîìåðà àììîíèÿ (1R)-(–)-10-êàìôîð- ñóëüôîíàòà Ð. 201020051-2022 2.1.2.51. Ìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ Ìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ îñíîâàíà íà ïðÿìîì èçìåðåíèè îòíîøåíèÿ ìàññû ê ÷èñëó ýëåìåí- òàðíûõ ïîëîæèòåëüíûõ èëè îòðèöàòåëüíûõ çà- ðÿäîâ èîíîâ (m/z), ïîëó÷åííûõ èç àíàëèçèðóå- ìîãî îáðàçöà, íàõîäÿùèõñÿ â ãàçîâîé ôàçå. Äàí- íîå îòíîøåíèå âûðàæàåòñÿ â àòîìíûõ åäèíèöàõ ìàññû (1 à.å.ì. = îäíîé äâåíàäöàòîé ìàññû íóê- ëèäà 12Ñ) èëè â äàëüòîíàõ (1 Äà = ìàññå àòîìà âîäîðîäà). Èîíû, îáðàçîâàâøèåñÿ â èîíèçàòîðå ïðèáî- ðà, óñêîðÿþòñÿ è ïåðåä ïîïàäàíèåì â äåòåêòîð ðàçäåëÿþòñÿ ñ ïîìîùüþ ìàññ-àíàëèçàòîðà. Âñå ýòè äåéñòâèÿ ïðîèñõîäÿò â êàìåðå, â êîòîðîé íà- ñîñíàÿ ñèñòåìà ïîääåðæèâàåò âàêóóì îò 10–3 äî 10–6 Ïà. Ðåçóëüòèðóþùèé ìàññ-ñïåêòð ÿâëÿåòñÿ ãðà- ôèêîì çàâèñèìîñòè îòíîñèòåëüíîãî êîëè÷åñòâà ðàçëè÷íûõ èîíîâ îò îòíîøåíèÿ m/z. Ñèãíàë, îò- âå÷àþùèé èîíó, ïðåäñòàâëåí íåñêîëüêèìè ïè- êàìè, ñîîòâåòñòâóþùèìè ñòàòèñòè÷åñêîìó ðàñ- ïðåäåëåíèþ ðàçëè÷íûõ èçîòîïîâ ýòîãî èîíà. Òàêàÿ äèàãðàììà íàçûâàåòñÿ èçîòîïíûì ïðîôè- ëåì, à ïèê (ïî êðàéíåé ìåðå, äëÿ íåáîëüøèõ ìî- ëåêóë), ïðåäñòàâëÿþùèé íàèáîëåå ðàñïðîñòðà- íåííûå èçîòîïû äëÿ êàæäîãî àòîìà, — ìîíîèçî- òîïíûì ïèêîì. Ìàññ-ñïåêòðîìåòðè÷åñêèé àíàëèç äàåò âàæ- íóþ êà÷åñòâåííóþ (îïðåäåëåíèå ìîëåêóëÿðíûõ ìàññ; èíôîðìàöèÿ, êàñàþùàÿñÿ ñòðóêòóðû îï- ðåäåëÿåìûõ ôðàãìåíòîâ) è êîëè÷åñòâåííóþ (ñ èñïîëüçîâàíèåì âíåøíåãî èëè âíóòðåííåãî ñòàíäàðòîâ) èíôîðìàöèþ ñ ïðåäåëîì îáíàðóæå- íèÿ îò ïèêîìîëÿ äî ôåìòîìîëÿ. ÂÂÎÄ ÎÁÐÀÇÖÀ Ïåðâîé ñòàäèåé àíàëèçà ÿâëÿåòñÿ ââîä îá- ðàçöà â ïðèáîð áåç çíà÷èòåëüíîãî íàðóøåíèÿ âàêóóìà.  øèðîêî ðàñïðîñòðàíåííîì ìåòîäå, íàçûâàåìîì ïðÿìûì ââîäîì æèäêîñòè, îáðàçåö ïîìåùàåòñÿ íà êîíöå öèëèíäðè÷åñêîãî øòîêà (â êâàðöåâîì òèãëå, íà ïðîâîëîêå èëè íà ìåòàëëè- ÷åñêîé ïîâåðõíîñòè). Ýòîò øòîê ÷åðåç âàêóóì- íûé øëþç, â êîòîðîì ïîääåðæèâàåòñÿ ïåðâè÷íûé ïðîìåæóòî÷íûé âàêóóì ìåæäó àò- ìîñôåðíûì äàâëåíèåì è âòîðè÷íûì âàêóóìîì ïðèáîðà, ââîäèòñÿ â ñïåêòðîìåòð. Äðóãèå ñèñòåìû ââîäà ïîçâîëÿþò ïðîàíàëè- çèðîâàòü êîìïîíåíòû ñìåñè, êîòîðûå ðàçäåëÿ- þòñÿ ñ ïîìîùüþ ñîîòâåòñòâóþùåãî ïðèáîðà, ñîåäèíåííîãî ñ ìàññ-ñïåêòðîìåòðîì. Ãàçîâàÿ õðîìàòîãðàôèÿ/ìàññ-ñïåêòðîìåò- ðèÿ. Ïðè èñïîëüçîâàíèè ïîäõîäÿùèõ êîëîíîê (êàïèëëÿðíûõ èëè ïîëóêàïèëëÿðíûõ) âîçìîæíî íåïîñðåäñòâåííîå ââåäåíèå êîíöà êîëîíêè â èî- íèçàòîð ïðèáîðà áåç ïðèìåíåíèÿ ñåïàðàòîðà. Æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ/ìàññ-ñïåê- òðîìåòðèÿ. Òàêàÿ êîìáèíàöèÿ îñîáåííî ïîëåç- íà äëÿ àíàëèçà ïîëÿðíûõ ñîåäèíåíèé, êîòîðûå ÿâëÿþòñÿ íåäîñòàòî÷íî ëåòó÷èìè ëèáî ñëèøêîì òåðìîëàáèëüíûìè äëÿ òîãî, ÷òîáû èõ ìîæíî áûëî ïðîàíàëèçèðîâàòü ìåòîäîì ãàçîâîé õðîìà- òîãðàôèè â ñî÷åòàíèè ñ ìàññ-ñïåêòðîìåòðèåé. Äàííûé ìåòîä îñëîæíÿåòñÿ òðóäíîñòüþ ïîëó÷å- íèÿ èîíîâ â ãàçîâîé ôàçå èç æèäêîé ôàçû, ÷òî òðåáóåò ïðèìåíåíèÿ ñïåöèàëüíûõ èíòåðôåéñîâ, òàêèõ, êàê: – ïðÿìîé ââîä æèäêîñòè: ïîäâèæíàÿ ôàçà ðàñïûëÿåòñÿ, è ðàñòâîðèòåëü èñïàðÿåòñÿ ïåðåä èîíèçàòîðîì ïðèáîðà; – èíòåðôåéñ ñ ïó÷êîì ÷àñòèö: ïîäâèæíàÿ ôàçà, ñêîðîñòü êîòîðîé ìîæåò äîñòèãàòü 0,6 ìë/ìèí, ðàñïûëÿåòñÿ â äåñîëüâàòàöèîííîé êàìåðå, â ðåçóëüòàòå â èîíèçàòîð ïðèáîðà ïîïà- äàþò ëèøü îïðåäåëÿåìûå âåùåñòâà â íåéòðàëü- íîé ôîðìå; äàííûé ñïîñîá ìîæåò áûòü èñïîëü- çîâàí äëÿ ñîåäèíåíèé ñ îòíîñèòåëüíî íèçêîé ïîëÿðíîñòüþ è ìîëåêóëÿðíûìè ìàññàìè ìåíåå 1000 Äà; – èíòåðôåéñ ñ äâèæóùåéñÿ ëåíòîé: ïîä- âèæíàÿ ôàçà, ñêîðîñòü êîòîðîé ìîæåò äîñòèãàòü 1 ìë/ìèí, íàíîñèòñÿ íà ïîâåðõíîñòü äâèæóùåé- ñÿ ëåíòû; ïîñëå âûïàðèâàíèÿ ðàñòâîðèòåëÿ, àíàëèçèðóåìûé îáðàçåö ïåðåíîñèòñÿ ê èîíèçà- òîðó ïðèáîðà, ãäå ïîäâåðãàåòñÿ èîíèçàöèè; äàí- íûé ñïîñîá ìàëî ýôôåêòèâåí äëÿ ñèëüíî ïîëÿð- íûõ èëè òåðìîëàáèëüíûõ ñîåäèíåíèé.

Äðóãèå âèäû èíòåðôåéñîâ (ýëåêòðîðàñïûëå- íèå, òåðìîðàñïûëåíèå, õèìè÷åñêàÿ èîíèçàöèÿ ïðè àòìîñôåðíîì äàâëåíèè) ìîãóò ðàññìàòðè- âàòüñÿ êàê ñàìîñòîÿòåëüíûå ìåòîäû èîíèçàöèè è îïèñàíû â ðàçäåëå, ïîñâÿùåííîì ñïîñîáàì èîíèçàöèè. 26 Ñâåðõêðèòè÷åñêàÿ ôëþèäíàÿ õðîìàòî- ãðàôèÿ/ìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ. Ïîäâèæíàÿ ôàçà, îáû÷íî ñîñòîÿùàÿ èç íàõîäÿùåãîñÿ â ñâåðõêðè- òè÷åñêîì ñîñòîÿíèè óãëåðîäà äèîêñèäà, ïåðåõî- äèò â ãàçîîáðàçíîå ñîñòîÿíèå ïîñëå ïðîõîæäå- íèÿ ÷åðåç íàãðåòóþ çàñëîíêó, íàõîäÿùóþñÿ ìå- æäó êîëîíêîé è èîíèçàòîðîì. Êàïèëëÿðíûé ýëåêòðîôîðåç/ìàññ-ñïåê- òðîìåòðèÿ. Ýëþåíò ââîäèòñÿ â èîíèçàòîð, â íå- êîòîðûõ ñëó÷àÿõ ïîñëå äîáàâëåíèÿ äîïîëíè- òåëüíîãî ðàñòâîðèòåëÿ, äëÿ äîñòèæåíèÿ ñêîðî- ñòè ïîòîêà ïîðÿäêà íåñêîëüêèõ ìèëëèëèòðîâ â ìèíóòó. Îãðàíè÷åíèÿìè äàííîãî ìåòîäà ÿâëÿ- þòñÿ ìàëûå êîëè÷åñòâà ââîäèìîãî îáðàçöà è íå- îáõîäèìîñòü èñïîëüçîâàíèÿ ëåòó÷èõ áóôåðíûõ ðàñòâîðîâ. ÑÏÎÑÎÁÛ ÈÎÍÈÇÀÖÈÈ Ýëåêòðîííûé óäàð. Îáðàçåö, íàõîäÿùèéñÿ â ãàçîîáðàçíîì ñîñòîÿíèè, èîíèçèðóåòñÿ ïîòî- êîì ýëåêòðîíîâ, ýíåðãèÿ êîòîðûõ (îáû÷íî 70 ýÂ) áîëüøå ýíåðãèè èîíèçàöèè îáðàçöà. Ïðè ýòîì êðîìå ìîëåêóëÿðíîãî èîíà M+ îáðàçóþòñÿ îñêîëî÷íûå èîíû, õàðàêòåðíûå äëÿ äàííîé ìî- ëåêóëÿðíîé ñòðóêòóðû. Ãëàâíûì îãðàíè÷åíèåì äàííîãî ñïîñîáà ÿâëÿåòñÿ íåîáõîäèìîñòü èñïà- ðåíèÿ îáðàçöà, ÷òî äåëàåò íåâîçìîæíûì åãî ïðèìåíåíèå äëÿ ïîëÿðíûõ, òåðìîëàáèëüíûõ èëè âûñîêîìîëåêóëÿðíûõ ñîåäèíåíèé. Èîíèçà- öèÿ ýëåêòðîííûì óäàðîì ìîæåò áûòü èñïîëüçî- âàíà â ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè, ñîåäèíåííîé ñ ìàññ-ñïåêòðîìåòðèåé, à â íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ è â æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèè. Õèìè÷åñêàÿ èîíèçàöèÿ. Ýòîò òèï èîíèçà- öèè ïðåäïîëàãàåò èñïîëüçîâàíèå ãàçà-ðåàêòèâà, òàêîãî, êàê ìåòàí, àììèàê, àçîòà ìîíîîêñèä, àçîòà äèîêñèä èëè êèñëîðîä. Ñïåêòð õàðàêòåðè- çóåòñÿ èîíàìè (M + H)+ èëè (M – H)– òèïîâ èëè èîíàìè-àääóêòàìè, îáðàçîâàííûìè èç îáðàçöà è èñïîëüçóåìîãî ãàçà. Îñêîëî÷íûå èîíû îáðàçó- þòñÿ ðåæå, ÷åì ïðè èîíèçàöèè ýëåêòðîííûì óäàðîì. Äëÿ òåðìîëàáèëüíûõ âåùåñòâ èñïîëü- çóåòñÿ ðàçíîâèäíîñòü äàííîãî ìåòîäà èîíèçà- öèè, ïðè êîòîðîé îáðàçåö, íàõîäÿùèéñÿ íà ïðî- âîëîêå, î÷åíü áûñòðî èñïàðÿåòñÿ âñëåäñòâèå ýôôåêòà Äæîóëÿ – Òîìñîíà (äåñîðáöèîííàÿ õè- ìè÷åñêàÿ èîíèçàöèÿ). Áîìáàðäèðîâêà áûñòðûìè àòîìàìè (FAB) èëè èîíèçàöèÿ áîìáàðäèðîâêîé áûñò- ðûìè èîíàìè (æèäêîñòíàÿ ìàññ-ñïåêòðîìåò- ðèÿ âòîðè÷íûõ èîíîâ — LSIMS). Îáðàçåö, ðàñòâîðåííûé â âÿçêîé ìàòðèöå (íàïðèìåð, â ãëèöåðèíå), íàíîñèòñÿ íà ìåòàëëè÷åñêóþ ïî- âåðõíîñòü è èîíèçèðóåòñÿ ïîòîêîì íåéòðàëü- íûõ àòîìîâ, íàïðèìåð, àðãîíà, êñåíîíà èëè îá- ëàäàþùèìè áîëüøîé êèíåòè÷åñêîé ýíåðãèåé èîíàìè öåçèÿ. Îáðàçóþòñÿ èîíû (M + H)+ èëè (M – H)– òèïîâ ëèáî èîíû-àääóêòû, ñôîðìèðî- âàííûå ìàòðèöåé èëè îáðàçöîì. Äàííûé òèï èî- íèçàöèè ïîäõîäèò äëÿ ïîëÿðíûõ, òåðìîëàáèëü- íûõ ñîåäèíåíèé, èìåþùèõ ìîëåêóëÿðíóþ ìàñ- ñó äî 10 000 Äà. Ïðè ïðèáàâëåíèè ê ïîäâèæíîé ôàçå îò 1 % äî 2 % ãëèöåðèíà îí ìîæåò áûòü èñ- ïîëüçîâàí äëÿ æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèè, îä- íàêî ñêîðîñòü ïîäâèæíîé ôàçû äîëæíà áûòü î÷åíü íèçêîé (íåñêîëüêî ìèêðîëèòðîâ â ìèíó- òó). Ïðè íàíåñåíèè òîíêîãî ñëîÿ ìàòðèöû íà ïî- âåðõíîñòü õðîìàòîãðàôè÷åñêèõ ïëàñòèíîê òà- êîé ñïîñîá èîíèçàöèè äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçî- âàòü è â òîíêîñëîéíîé õðîìàòîãðàôèè. Ïîëåâàÿ äåñîðáöèÿ èëè ïîëåâàÿ èîíèçà- öèÿ. Îáðàçåö èñïàðÿåòñÿ îêîëî âîëüôðàìîâîé ïðîâîëîêè, ïîêðûòîé ìèêðîèãëàìè (ïîëåâàÿ èî- íèçàöèÿ) èëè ïîìåùàåòñÿ íà ýòó ïðîâîëîêó (ïî- ëåâàÿ äåñîðáöèÿ). Ñèëüíîå ýëåêòðè÷åñêîå ïîëå (íàïðÿæåíèå îêîëî 10 êÂ), âîçíèêàþùåå ìåæäó ïðîâîëîêîé è ïðîòèâîýëåêòðîäîì, èîíèçèðóåò îáðàçåö. Ïðè äàííûõ ñïîñîáàõ èîíèçàöèè îáðà- çóþòñÿ ïðåèìóùåñòâåííî ìîëåêóëÿðíûå èîíû M+ è (M + H)+ èîíû. Ýòè ñïîñîáû èñïîëüçóþòñÿ äëÿ ìàëîïîëÿðíûõ è (èëè) òåðìîëàáèëüíûõ ñî- åäèíåíèé.

Ìàòðè÷íî-àêòèâèðîâàííàÿ ëàçåðíàÿ äå- ñîðáöèÿ/èîíèçàöèÿ (MALDI). Îáðàçåö, ñìå- øàííûé ñ ïîäõîäÿùåé ìàòðèöåé è ïîìåùåííûé íà ìåòàëëè÷åñêóþ ïîäëîæêó, èîíèçèðóåòñÿ èì- ïóëüñíûì ëàçåðíûì èçëó÷åíèåì ñ äëèíîé âîë- íû îò ÓÔ- äî ÈÊ-äèàïàçîíà (ïðîäîëæèòåëü- íîñòü èìïóëüñîâ ìîæåò ñîñòàâëÿòü îò ïèêîñå- êóíäû äî íåñêîëüêèõ íàíîñåêóíä). Äàííûé ñïîñîá èîíèçàöèè èãðàåò âàæíóþ ðîëü ïðè àíà- ëèçå ñîåäèíåíèé ñ ìîëåêóëÿðíîé ìàññîé áîëåå 100 000 Äà, íî îãðàíè÷åí èñïîëüçîâàíèåì âðå- ìÿïðîëåòíîãî àíàëèçàòîðà (ñì. íèæå). Ýëåêòðîðàñïûëèòåëüíàÿ èîíèçàöèÿ. Äàí- íûé ñïîñîá èîíèçàöèè ïðîâîäèòñÿ ïðè àòìî- ñôåðíîì äàâëåíèè. Îáðàçåö, íàõîäÿùèéñÿ â ðàñòâîðå, ââîäèòñÿ â èñòî÷íèê ÷åðåç êàïèëëÿð, êîíåö êîòîðîãî èìååò ïîòåíöèàë ïîðÿäêà 5 êÂ. Äëÿ îáëåã÷åíèÿ ðàñïûëåíèÿ ìîæåò èñïîëüçî- âàòüñÿ ãàç. Èñïàðåíèå ìîëåêóë ðàñòâîðèòåëÿ èç îáðàçóþùèõñÿ ìèêðîêàïåëü ïðèâîäèò ê îáðàçî- âàíèþ â ãàçîâîé ôàçå îäíîçàðÿäíûõ èëè ìíîãî- çàðÿäíûõ èîíîâ. Ñêîðîñòè ïîäâèæíîé ôàçû ïðè 27 äàííîì âèäå èîíèçàöèè ìîãóò èçìåíÿòüñÿ îò íå- ñêîëüêèõ ìèêðîëèòðîâ â ìèíóòó äî 1 ìë/ìèí. Òàêàÿ èîíèçàöèÿ ïîäõîäèò äëÿ ïîëÿðíûõ ñîåäè- íåíèé, à òàêæå äëÿ èññëåäîâàíèÿ áèîìîëåêóë ñ ìîëåêóëÿðíûìè ìàññàìè äî 100 000 Äà. Îíà ìîæåò ñî÷åòàòüñÿ ñ æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôè- åé èëè êàïèëëÿðíûì ýëåêòðîôîðåçîì. Õèìè÷åñêàÿ èîíèçàöèÿ ïðè àòìîñôåðíîì äàâëåíèè (APCI). Èîíèçàöèÿ ïðîâîäèòñÿ ïðè àòìîñôåðíîì äàâëåíèè ïîä äåéñòâèåì ýëåêòðî- äà, èìåþùåãî ïîòåíöèàë íåñêîëüêî êèëîâîëüò è ïîìåùåííîãî íà ïóòè ïîäâèæíîé ôàçû, êîòî- ðàÿ ðàñïûëÿåòñÿ êàê âñëåäñòâèå òåïëîâûõ ýô- ôåêòîâ, òàê è áëàãîäàðÿ èñïîëüçîâàíèþ ïîòîêà àçîòà. Îáðàçóþùèåñÿ èîíû ÿâëÿþòñÿ îäíîçà- ðÿäíûìè è îòíîñÿòñÿ ê (M + H)+ òèïó â ñëó÷àå ïîëîæèòåëüíîãî çàðÿäà è ê (M – H)– òèïó â ñëó- ÷àå îòðèöàòåëüíîãî. Âîçìîæíîñòü èñïîëüçîâà- íèÿ âûñîêèõ ñêîðîñòåé ïîäâèæíîé ôàçû (äî 2 ìë/ìèí) äåëàåò ýòîò ñïîñîá èîíèçàöèè èäå- àëüíûì äëÿ ñî÷åòàíèÿ ñ æèäêîñòíîé õðîìàòî- ãðàôèåé. Òåðìîðàñïûëèòåëüíàÿ èîíèçàöèÿ. Îáðà- çåö, íàõîäÿùèéñÿ â ïîäâèæíîé ôàçå, ñîñòîÿùåé èç âîäû è îðãàíè÷åñêèõ ìîäèôèêàòîðîâ è ñî- äåðæàùåé ëåòó÷èé ýëåêòðîëèò (îáû÷íî àöåòàò àììîíèÿ) ââîäèòñÿ â ðàñïûëåííîé ôîðìå ïîñëå ïðîõîæäåíèÿ ÷åðåç ìåòàëëè÷åñêèé êàïèëëÿð, òåìïåðàòóðà êîòîðîãî êîíòðîëèðóåòñÿ. Äîïóñ- êàþòñÿ ñêîðîñòè ïîäâèæíîé ôàçû ïîðÿäêà 1 – 2 ìë/ìèí. Èîíû ýëåêòðîëèòà èîíèçèðóþò àíàëèçèðóåìîå ñîåäèíåíèå. Òàêîé ïðîöåññ èî- íèçàöèè ìîæåò áûòü çàìåíåí èëè óñèëåí ýëåê- òðè÷åñêèì ðàçðÿäîì íàïðÿæåíèåì îêîëî 800 Â, îñîáåííî ïðè èñïîëüçîâàíèè òîëüêî îðãàíè÷å- ñêîãî ðàñòâîðèòåëÿ. Äàííûé ñïîñîá èîíèçàöèè ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí â ìåòîäå æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèè ñ ìàññ-ñïåêòðîìåòðèåé. ÀÍÀËÈÇÀÒÎÐÛ Ðàçëè÷èÿ â ðàáîòå àíàëèçàòîðîâ çàâèñÿò, ãëàâíûì îáðàçîì, îò äâóõ ïàðàìåòðîâ: – äèàïàçîíà, â êîòîðîì ìîãóò áûòü èçìåðå- íû îòíîøåíèÿ m/z (ìàññîâûé äèàïàçîí); – ðàçðåøàþùåé ñïîñîáíîñòè, õàðàêòåðè- çóþùååñÿ âîçìîæíîñòüþ ðàçäåëèòü äâà èîíà îäèíàêîâîé èíòåíñèâíîñòè ñ îòíîøåíèÿìè m/z, îòëè÷àþùèìèñÿ íà DM è ïåðåêðûâàþùèåñÿ ïðè îïðåäåëåííîì ïðîöåíòíîì ïðåâûøåíèè áàçî- âîé ëèíèè; íàïðèìåð, ðàçðåøàþùàÿ ñïîñîá- íîñòü (M/DM), ðàâíàÿ 1000 ñ 10 % ïðåâûøåíè- åì áàçîâîé ëèíèè, ïîçâîëÿåò ïðîâåñòè ðàçäåëå- íèå îòíîøåíèé m/z 1000 è 1001 ñ èíòåíñèâíî- ñòÿìè, íà 10 % ïðåâûøàþùèìè áàçîâóþ ëè- íèþ.  íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ (âðåìÿïðîëåòíûå àíàëèçàòîðû, êâàäðóïîëüíûå àíàëèçàòîðû, èîí- íûå ëîâóøêè) ðàçðåøàþùàÿ ñïîñîáíîñòü ìî- æåò áûòü îïðåäåëåíà êàê îòíîøåíèå ìåæäó ìî- ëåêóëÿðíîé ìàññîé è øèðèíîé ïèêà íà ïîëîâè- íå âûñîòû (50 % ïðåâûøåíèå áàçîâîé ëèíèè). Ìàãíèòíûå è ýëåêòðîñòàòè÷åñêèå àíàëè- çàòîðû.

Èîíû, îáðàçîâàâøèåñÿ â èîíèçàòîðå, óñêîðÿþòñÿ ïîòåíöèàëîì V è ñîñðåäîòà÷èâàþò- ñÿ, â çàâèñèìîñòè îò óñòðîéñòâà ïðèáîðà, ìåæäó ìàãíèòíûì (ìàãíèòíîå ïîëå B) èëè ýëåêòðîñòà- òè÷åñêèì àíàëèçàòîðàìè (ýëåêòðîñòàòè÷åñêîå ïîëå E).  ñîîòâåòñòâèè ñ çàêîíîì Ëàïëàñà îíè ïåðåìåùàþòñÿ ïî òðàåêòîðèè ñ ðàäèóñîì r: m z B r V = 2 2 2 . Äëÿ íàêîïëåíèÿ è èçìåðåíèÿ ðàçëè÷íûõ èî- íîâ, îáðàçîâàâøèõñÿ â èîíèçàòîðå, ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû äâà òèïà ñêàíèðîâàíèÿ: èçìåíå- íèå B ïðè ïîñòîÿííîé âåëè÷èíå V èëè èçìåíå- íèå V ïðè ïîñòîÿííîé âåëè÷èíå B. Çà ìàãíèò- íûì àíàëèçàòîðîì îáû÷íî ñëåäóåò ýëåêòðè÷å- ñêèé ñåêòîð, êîòîðûé äåéñòâóåò êàê ôèëüòð êèíåòè÷åñêîé ýíåðãèè è ïîçâîëÿåò çàìåòíî óâå- ëè÷èòü ðàçðåøàþùóþ ñïîñîáíîñòü ïðèáîðà. Ìàêñèìàëüíàÿ ðàçðåøàþùàÿ ñïîñîáíîñòü òàêî- ãî ïðèáîðà (äâîéíîé ñåêòîð) èçìåíÿåòñÿ îò 10 000 äî 150 000 è â áîëüøèíñòâå ñëó÷àåâ ïî- çâîëÿåò äîñòàòî÷íî òî÷íî îöåíèòü âåëè÷èíó îò- íîøåíèé m/z äëÿ îïðåäåëåíèÿ ýëåìåíòíîãî ñî- ñòàâà ñîîòâåòñòâóþùèõ èîíîâ. Äëÿ îäíîçàðÿä- íûõ èîíîâ ìàññîâûé äèàïàçîí ñîñòàâëÿåò îò 2000 Äà äî 15 000 Äà. Íåêîòîðûå èîíû ìîãóò ðàçðóøàòüñÿ ñïîíòàííî (ìåòàñòàáèëüíûå ïåðå- õîäû) èëè ïðè ñòîëêíîâåíèè ñ ãàçîì (äèññîöèà- öèÿ, àêòèâèðîâàííàÿ ñòîëêíîâåíèåì (CAD)) â îáëàñòÿõ ìåæäó èîíèçàòîðîì è äåòåêòîðîì, ãäå îòñóòñòâóåò ïîëå. Èññëåäîâàíèå ýòèõ ïðî- öåññîâ ðàçðóøåíèÿ î÷åíü ïîëåçíî äëÿ îïðåäåëå- íèÿ ñòðóêòóðû è õàðàêòåðèñòèêè îïðåäåëåííîãî ñîåäèíåíèÿ, âõîäÿùåãî â ñîñòàâ ñìåñè, è äåëàåò âîçìîæíûì èñïîëüçîâàíèå òàíäåìíîé ìàññ- ñïåêòðîìåòðèè.  çàâèñèìîñòè îò ìåñòà, â êîòî- ðîì ïðîòåêàþò ïðîöåññû ðàçðóøåíèÿ, èçâåñòíî ìíîãî ìåòîäèê åãî ïðîâåäåíèÿ: – ðåæèì äî÷åðíåãî èîíà (îïðåäåëåíèå ñî- ñòàâà èîíîâ, îáðàçîâàâøèõñÿ ïðè ðàçðóøåíèè îïðåäåëåííîãî ðîäèòåëüñêîãî èîíà): B/E = êîí- 28 ñòàíòà, MIKES (Mass-analysed Ion Kinetic Energy Spectroscopy); – ðåæèì ðîäèòåëüñêîãî èîíà (îïðåäåëåíèå âñåõ èîíîâ, îáðàçîâàâøèõñÿ ïðè ðàçðóøåíèè èîíà ñ îïðåäåëåííûì îòíîøåíèåì m/z): B2/E = êîíñòàíòà; – ðåæèì íåéòðàëüíûõ ÷àñòèö (îïðåäåëå- íèå âñåõ èîíîâ, êîòîðûå òåðÿþò èäåíòè÷íûå ôðàãìåíòû): B/E(1 – E/E0)1/2 = êîíñòàíòà, ãäå E0 — áàçîâûé ïîòåíöèàë ýëåêòðè÷åñêîãî ñåê- òîðà. Êâàäðóïîëüíûå àíàëèçàòîðû. Àíàëèçàòîð ñîñòîèò èç ÷åòûðåõ ïàðàëëåëüíûõ ìåòàëëè÷å- ñêèõ ñòåðæíåé, èìåþùèõ öèëèíäðè÷åñêîå èëè ãèïåðáîëè÷åñêîå ïîïåðå÷íîå ñå÷åíèå. Îíè ðàñ- ïîëîæåíû ñèììåòðè÷íî ïî îòíîøåíèþ ê òðàåê- òîðèè äâèæåíèÿ èîíîâ; ïàðû ïðîòèâîïîëîæíûõ ñòåðæíåé ïðèñîåäèíåíû ê ýëåêòðè÷åñêîìó èñ- òî÷íèêó. Ïîòåíöèàëû äâóõ ïàð ñòåðæíåé ïðîòè- âîïîëîæíû. Îíè ñîñòîÿò èç ïîñòîÿííîãî è èçìå- íÿþùåãîñÿ êîìïîíåíòîâ. Èîíû, îáðàçîâàâøèå- ñÿ â èîíèçàòîðå, ïðîïóñêàþòñÿ è ðàçäåëÿþòñÿ âñëåäñòâèå èçìåíåíèÿ ïîòåíöèàëîâ, ïðèëîæåí- íûõ ê ñòåðæíÿì, ïðè÷åì îòíîøåíèå ïîñòîÿííî- ãî ïîòåíöèàëà ê ïåðåìåííîìó äîëæíî îñòàâàòü- ñÿ íåèçìåííûì. Êâàäðóïîëüíûå àíàëèçàòîðû îáû÷íî èìåþò ìàññîâûé äèàïàçîí îò 1 à.å.ì. äî 2000 à.å.ì., õîòÿ â íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ îí ìîæåò äîñòèãàòü 4000 à.å.ì. Íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî òàêèå àíàëèçàòîðû èìåþò ìåíüøåå ðàçðåøåíèå, ÷åì ìàãíèòíûå, îíè ïîçâîëÿþò ïîëó÷àòü ìîíîèçî- òîïíûé ïðîôèëü îäíîçàðÿäíûõ èîíîâ âî âñåì ìàññîâîì äèàïàçîíå. Äëÿ ïîëó÷åíèÿ ñïåêòðîâ ìîæíî èñïîëüçîâàòü òðè êâàäðóïîëÿ, ñîåäèíåí- íûõ äðóã ñ äðóãîì, Q1, Q2, Q3 (Q2 ñëóæèò èîíè- çàöèîííîé êàìåðîé è â äåéñòâèòåëüíîñòè íå ÿâ- ëÿåòñÿ àíàëèçàòîðîì; ÷àùå âñåãî â êà÷åñòâå èî- íèçèðóþùåãî ãàçà ïðèìåíÿþò àðãîí).

Íàèáîëåå ÷àñòî èñïîëüçóåìûìè ðåæèìàìè ñêàíèðîâàíèÿ ÿâëÿþòñÿ: – ðåæèì äî÷åðíåãî èîíà: Q1 âûáèðàåò m/z èîí, ôðàãìåíòû êîòîðîãî, ïîëó÷åííûå ïðè èî- íèçàöèè â êâàäðóïîëå Q2, àíàëèçèðóþòñÿ êâàä- ðóïîëåì Q3; – ðåæèì ðîäèòåëüñêîãî èîíà: Q3 ïðîïóñêà- åò èîíû òîëüêî ñ îïðåäåëåííûì ñîîòíîøåíèåì m/z, â òî âðåìÿ êàê Q1 ñêàíèðóåò îïðåäåëåííûé ìàññîâûé äèàïàçîí. Äåòåêòèðóþòñÿ òîëüêî èîíû, ïðè ðàçðóøåíèè êîòîðûõ îáðàçóåòñÿ èîí, îòáèðàåìûé êâàäðóïîëåì Q3; – ðåæèì íåéòðàëüíûõ ÷àñòèö: Q1 è Q3 ñêà- íèðóþò îïðåäåëåííûé ìàññîâûé äèàïàçîí, íî â èíòåðâàëå, ñîîòâåòñòâóþùåì ôðàãìåíòàì, êî- òîðûå òåðÿåò îïðåäåëåííîå âåùåñòâî èëè ãðóï- ïà âåùåñòâ. Äëÿ ïîëó÷åíèÿ ñïåêòðîâ âîçìîæíî ñî÷åòà- íèå êâàäðóïîëüíûõ àíàëèçàòîðîâ ñ ìàãíèòíûìè èëè ýëåêòðîñòàòè÷åñêèìè. Òàêèå ïðèáîðû íàçû- âàþò ãèáðèäíûìè ìàññ-ñïåêòðîìåòðàìè. Èîííûå ëîâóøêè. Äàííûå àíàëèçàòîðû èìåþò òàêîé æå ïðèíöèï ðàáîòû, ÷òî è êâàäðó- ïîëüíûå, íî â íèõ èñïîëüçóþòñÿ òðåõìåðíûå ýëåêòðè÷åñêèå ïîëÿ. Àíàëèçàòîðû òàêîãî òèïà ïîçâîëÿþò ïîëó÷àòü ñïåêòðû èîíîâ íåñêîëüêèõ ãåíåðàöèé (MSn). Öèêëîòðîííî-ðåçîíàíñíûå ìàññ-àíàëèçà- òîðû. Èîíû, îáðàçîâàâøèåñÿ â ÿ÷åéêå è ïîä- âåðãíóòûå äåéñòâèþ èíòåíñèâíîãî ìàãíèòíîãî ïîëÿ, äâèæóòñÿ ïî êðóãîâûì òðàåêòîðèÿì ñ ÷àñ- òîòàìè, êîòîðûå ìîãóò áûòü íåïîñðåäñòâåííî ñâÿçàíû ñ âåëè÷èíàìè îòíîøåíèé m/z äëÿ ýòèõ èîíîâ ïðè ïîìîùè Ôóðüå ïðåîáðàçîâàíèÿ. Äàí- íîå ÿâëåíèå íàçûâàåòñÿ èîííî-öèêëîòðîííûì ðåçîíàíñîì. Àíàëèçàòîðû òàêîãî òèïà ñîñòîÿò èç ñâåðõïðîâîäÿùèõ ìàãíèòîâ è îáëàäàþò î÷åíü âûñîêîé ðàçðåøàþùåé ñïîñîáíîñòüþ (äî 1 000 000 è âûøå), à òàêæå ïîçâîëÿþò ïîëó÷àòü MSn ñïåêòðû. Èõ íåäîñòàòêîì ÿâëÿåòñÿ íåîáõî- äèìîñòü èñïîëüçîâàíèÿ î÷åíü ãëóáîêîãî âàêóó- ìà (ïîðÿäêà 10–7 Ïà). Âðåìÿïðîëåòíûå àíàëèçàòîðû. Èîíû, îá- ðàçîâàâøèåñÿ â èîíèçàòîðå, óñêîðÿþòñÿ ïîòåí- öèàëîì âåëè÷èíîé îò 10 ê äî 20 êÂ. Îíè ïðî- õîäÿò ÷åðåç àíàëèçàòîð, ñîñòîÿùèé èç áåñïîëå- âîé òðóáû äëèíîé îò 25 ñì äî 1,5 ì, îáû÷íî íàçûâàåìîé ïðîëåòíîé òðóáîé. Âðåìÿ (t), çà êî- òîðîå èîí äîñòèãàåò äåòåêòîðà, ïðîïîðöèîíàëü- íî êâàäðàòíîìó êîðíþ èç îòíîøåíèÿ m/z. Òåîðå- òè÷åñêè ìàññîâûé äèàïàçîí äëÿ òàêîãî àíàëèçà- òîðà áåñêîíå÷åí. Ïðàêòè÷åñêè îí îïðåäåëÿåòñÿ ìåòîäîì èîíèçàöèè èëè äåñîðáöèè. Âðåìÿïðî- ëåòíûå àíàëèçàòîðû èñïîëüçóþòñÿ, ãëàâíûì îá- ðàçîì, äëÿ âûñîêîìîëåêóëÿðíûõ ñîåäèíåíèé (âïëîòü äî íåñêîëüêèõ ñîòåí òûñÿ÷ äàëüòîí). Äàííûé àíàëèçàòîð îáëàäàåò î÷åíü âûñîêîé ÷óâñòâèòåëüíîñòüþ (äîñòàòî÷íî íåñêîëüêî ïè- êîìîëåé âåùåñòâà). Òî÷íîñòü èçìåðåíèé è ðàç- ðåøàþùàÿ ñïîñîáíîñòü òàêèõ ïðèáîðîâ ìîãóò áûòü çíà÷èòåëüíî óëó÷øåíû ïðè èñïîëüçîâàíèè ýëåêòðîñòàòè÷åñêîãî çåðêàëà (ðåôëåêòðîíà). 29 ÏÎËÓ×ÅÍÈÅ ÑÈÃÍÀËÀ Ñóùåñòâóåò òðè âîçìîæíûõ ðåæèìà ïîëó÷å- íèÿ ñèãíàëà. Ðåæèì ïîëíîãî ñïåêòðà. Çàïèñûâàåòñÿ ïîëíûé ñèãíàë, ïîëó÷åííûé äëÿ âûáðàííîãî ìàññîâîãî äèàïàçîíà. Ñïåêòð ïðåäñòàâëÿåò ñî- áîé çàâèñèìîñòü îòíîñèòåëüíîé èíòåíñèâíîñòè ðàçëè÷íûõ èîíîâ îò âåëè÷èíû m/z. Ïîëó÷àåìûå ðåçóëüòàòû ÿâëÿþòñÿ ãëàâíûì îáðàçîì êà÷åñò- âåííûìè. Äëÿ áîëåå áûñòðîé èäåíòèôèêàöèè âîçìîæíî èñïîëüçîâàíèå áèáëèîòåê ñïåêòðîâ ñðàâíåíèÿ. Ôðàãìåíòîìåòðè÷åñêèé ðåæèì (ñåëåê- òèâíîå ñêàíèðîâàíèå èîíîâ). Ïîëó÷àåìûé ñèãíàë îãðàíè÷åí îäíèì (ñêàíèðîâàíèå îäíîãî èîíà, single-ion monitoring (SIM)) èëè íåñêîëü- êèìè (ìíîæåñòâåííîå èîííîå ñêàíèðîâàíèå, multiple-ion monitoring (MIM)) èîíàìè, õàðàê- òåðíûìè äëÿ àíàëèçèðóåìîãî âåùåñòâà.  ýòîì ðåæèìå ïðåäåë îáíàðóæåíèÿ çíà÷èòåëüíî íèæå. Ïðè èñïîëüçîâàíèè âíóòðåííåãî èëè âíåøíåãî ñòàíäàðòîâ (íàïðèìåð, äåéòåðèðîâàííûå ñòàí- äàðòû) ìîãóò áûòü ïðîâåäåíû êîëè÷åñòâåííûå èëè ïîëóêîëè÷åñòâåííûå èçìåðåíèÿ. Ïðè èñ- ïîëüçîâàíèè âðåìÿïðîëåòíûõ àíàëèçàòîðîâ òà- êèå èçìåðåíèÿ íåâîçìîæíû.

Äâîéíîé ôðàãìåíòîìåòðè÷åñêèé ìàññ- ñïåêòðîìåòðè÷åñêèé ðåæèì (ìíîæåñòâåí- íûé ìîíèòîðèíã ðåàêöèé, multiple reaction monitoring (MRM)). Âêëþ÷àåò ñïåöèôè÷åñêóþ ìîíîìîëåêóëÿðíóþ èëè áèìîëåêóëÿðíóþ ðåàê- öèþ ðàçðóøåíèÿ âûáðàííîãî èîíà-ïðåäøåñò- âåííèêà, õàðàêòåðíîãî äëÿ àíàëèçèðóåìîãî âå- ùåñòâà. Ñåëåêòèâíîñòü è âûñîêàÿ ñïåöèôè÷- íîñòü äàííîãî ðåæèìà ïîëó÷åíèÿ ñèãíàëà îáåñïå÷èâàþò ïðåâîñõîäíóþ ÷óâñòâèòåëüíîñòü è äåëàþò åãî íàèáîëåå ïîäõîäÿùèì äëÿ êîëè÷å- ñòâåííûõ îïðåäåëåíèé ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîäõî- äÿùèõ âíóòðåííèõ ñòàíäàðòîâ (íàïðèìåð, äåé- òåðèðîâàííûõ). Äàííûé âèä àíàëèçà ìîæåò áûòü ïðîâåäåí òîëüêî ïðè èñïîëüçîâàíèè ïðè- áîðîâ, ñíàáæåííûõ òðåìÿ ñîåäèíåííûìè êâàä- ðóïîëÿìè, èîííûìè ëîâóøêàìè èëè öèêëîòðîí- íî-ðåçîíàíñíûìè àíàëèçàòîðàìè. ÊÀËÈÁÐÎÂÊÀ Êàëèáðîâêà ïîçâîëÿåò óñòàíîâèòü ñîîòâåò- ñòâèå ìåæäó âåëè÷èíîé m/z è äåòåêòèðóåìûì ñèãíàëîì. Êàê ïðàâèëî, îíà ïðîâîäèòñÿ ñ èñ- ïîëüçîâàíèåì âåùåñòâà ñðàâíåíèÿ. Êàëèáðîâêà ìîæåò áûòü âíåøíåé (äàííûå íàõîäÿòñÿ â îò- äåëüíîì ôàéëå) èëè âíóòðåííåé (âåùåñòâî (âå- ùåñòâà) ñðàâíåíèÿ ñìåøèâàåòñÿ ñ èññëåäóåìûì âåùåñòâîì è ðåçóëüòàòû âíîñÿòñÿ â ôàéë ñ äàí- íûìè àíàëèçà). ×èñëî èîíîâ èëè òî÷åê, íåîáõî- äèìîå äëÿ íàäåæíîé êàëèáðîâêè, çàâèñèò îò òèïà àíàëèçàòîðà è òðåáóåìîé òî÷íîñòè èçìåðå- íèé, íàïðèìåð, â ñëó÷àå ìàãíèòíîãî àíàëèçàòî- ðà, ãäå îòíîøåíèå m/z ýêñïîíåíöèàëüíî èçìåíÿ- åòñÿ ïðè èçìåíåíèè âåëè÷èíû ìàãíèòíîãî ïîëÿ, íåîáõîäèìî áðàòü íàñòîëüêî ìíîãî òî÷åê, íà- ñêîëüêî ýòî âîçìîæíî. ÎÁÍÀÐÓÆÅÍÈÅ ÑÈÃÍÀËÀ È ÎÁÐÀÁÎÒÊÀ ÄÀÍÍÛÕ Èîíû, ðàçäåëåííûå àíàëèçàòîðîì, ïðåîáðà- çóþòñÿ â ýëåêòðè÷åñêèå ñèãíàëû òàêèìè äåòåê- òèðóþùèìè ñèñòåìàìè, êàê ôîòîóìíîæèòåëü èëè ýëåêòðîííûé óìíîæèòåëü. Çàòåì äàííûå ñèãíàëû óñèëèâàþòñÿ è ïðåâðàùàþòñÿ â öèôðî- âûå ñèãíàëû, êîòîðûå èñïîëüçóþòñÿ ïðè îáðà- áîòêå äàííûõ è ïîçâîëÿþò ïðîâîäèòü ðàçëè÷- íûå îïåðàöèè: êàëèáðîâêó, ïîëó÷åíèå ñïåêòðîâ, àâòîìàòè÷åñêèå êîëè÷åñòâåííûå ðàñ÷åòû, àðõè- âèðîâàíèå äàííûõ, ñîçäàíèå èëè èñïîëüçîâàíèå áèáëèîòåê ìàññ-ñïåêòðîâ. Ðàçëè÷íûå ôèçè÷å- ñêèå ïàðàìåòðû, òðåáóåìûå äëÿ ðàáîòû ïðèáî- ðà, â öåëîì êîíòðîëèðóþòñÿ êîìïüþòåðîì. 201020052-2022 2.1.2.52. Ñâåðõêðèòè÷åñêàÿ ôëþèäíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ Ñâåðõêðèòè÷åñêàÿ ôëþèäíàÿ õðîìàòîãðà- ôèÿ (ÑÔÕ) — ýòî ìåòîä õðîìàòîãðàôè÷åñêîãî ðàçäåëåíèÿ, â êîòîðîì ïîäâèæíîé ôàçîé ÿâëÿåò- ñÿ æèäêîñòü (ôëþèä), íàõîäÿùàÿñÿ â ñâåðõêðè- òè÷åñêîì èëè ñóáêðèòè÷åñêîì ñîñòîÿíèè.  ýòîì ñîñòîÿíèè ñâîéñòâà âåùåñòâà ÿâëÿþòñÿ ïðîìåæóòî÷íûìè ìåæäó ñâîéñòâàìè ãàçà è æèäêîñòè. Íåïîäâèæíàÿ ôàçà, ñîäåðæàùàÿñÿ â êîëîíêå, ñîñòîèò ëèáî èç òîíêî èçìåëü÷åííûõ òâåðäûõ ÷àñòèö, òàêèõ êàê ñèëèêàãåëü èëè ïî- ðèñòûé ãðàôèò, õèìè÷åñêè ìîäèôèöèðîâàííîé íåïîäâèæíîé ôàçû, èñïîëüçóåìîé â æèäêîñò- íîé õðîìàòîãðàôèè, ëèáî, â ñëó÷àå êàïèëëÿð- íûõ êîëîíîê, ïîïåðå÷íî-ñøèòîé æèäêîé ïëåí- êè, ðàâíîìåðíî íàíåñåííîé íà ñòåíêè êîëîíêè. ÑÔÕ îñíîâàíà íà ìåõàíèçìàõ àäñîðáöèè èëè ðàñïðåäåëåíèÿ ïî ìàññå. Ñ òî÷êè çðåíèÿ ïðèìåíåíèÿ ôëþèäà â êà÷å- ñòâå ïîäâèæíîé ôàçû â õðîìàòîãðàôèè âàæíû 30 åãî ïëîòíîñòü, êîýôôèöèåíòû äèôôóçèè è âÿç- êîñòü: – êîýôôèöèåíòû äèôôóçèè â ñâåðõêðèòè÷å- ñêèõ ôàçàõ ïðèìåðíî íà ïîðÿäîê áîëüøå êîýô- ôèöèåíòîâ äèôôóçèè â æèäêîñòÿõ, íî ïðèìåðíî íà ïîðÿäîê ìåíüøå, ÷åì â ãàçàõ; – âÿçêîñòü ñâåðõêðèòè÷åñêèõ ôëþèäîâ ïðè- ìåðíî íà ïîðÿäîê ìåíüøå, ÷åì æèäêîñòåé, íî ïðèìåðíî íà ïîðÿäîê áîëüøå, ÷åì ãàçîâ; – ðàñòâîðÿþùàÿ ñïîñîáíîñòü âåùåñòâ â ñî- ñòîÿíèè ñâåðõêðèòè÷åñêîãî ôëþèäà áîëüøå, ÷åì ó ãàçîâ; – ïëîòíîñòü îñíîâíûõ ôëþèäîâ, èñïîëüçóå- ìûõ â õðîìàòîãðàôèè, ïðèìåðíî íà 2 – 3 ïîðÿä- êà áîëüøå ïëîòíîñòè ãàçîâ è â íåñêîëüêî ðàç ìåíüøå ïëîòíîñòè ñîîòâåòñòâóþùèõ æèäêî- ñòåé.

Ïðèìåíèòåëüíî ê ñâåðõêðèòè÷åñêîé ôëþèä- íîé õðîìàòîãðàôèè ýòî îçíà÷àåò ÷òî: – äîñòèãàþòñÿ ìåíüøèå âðåìåíà àíàëèçà ïî ñðàâíåíèþ ñ âûñîêîýôôåêòèâíîé æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèåé (ÂÝÆÕ); – îïòèìàëüíîå çíà÷åíèå ëèíåéíîé ñêîðîñòè ïîòîêà âûøå, ÷åì â ÂÝÆÕ; – ïàäåíèå äàâëåíèÿ íà êîëîíêå çíà÷èòåëüíî ìåíüøå, ÷åì â ÂÝÆÕ, ÷òî äàåò âîçìîæíîñòü èñ- ïîëüçîâàíèÿ êîëîíîê áîëüøåé äëèíû; – õðîìàòîãðàôè÷åñêàÿ ýôôåêòèâíîñòü â ñâåðõêðèòè÷åñêîé ôëþèäíîé õðîìàòîãðàôèè âûøå, ÷åì â ÂÝÆÕ (õîòÿ è íèæå, ÷åì â ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè); – âîçìîæíî ïðîâåäåíèå ðàçäåëåíèÿ ïðè áî- ëåå íèçêèõ òåìïåðàòóðàõ, ÷åì ýòî ïðèíÿòî â ãà- çîâîé õðîìàòîãðàôèè áåç ñóùåñòâåííîé ïîòåðè ýôôåêòèâíîñòè; – âîçìîæíî ïðîâåäåíèå ðàçäåëåíèÿ ñîåäè- íåíèé ñ áîëüøåé ìîëåêóëÿðíîé ìàññîé, ÷åì ýòî äîïóñêàåòñÿ â ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè. ÏÐÈÁÎÐ Ïðèáîð îáû÷íî ñîñòîèò èç îõëàæäàåìîé íà- ñîñíîé ñèñòåìû, óñòðîéñòâà äëÿ ââîäà ïðîá (èí- æåêòîðà), õðîìàòîãðàôè÷åñêîé êîëîíêè, ïîìå- ùåííîé â òåðìîñòàò, äåòåêòîðà, àâòîìàòè÷åñêî- ãî ðåãóëÿòîðà äàâëåíèÿ è ðåãèñòðèðóþùåãî óñòðîéñòâà ñáîðà äàííûõ. Íàñîñíàÿ ñèñòåìà Íàñîñíàÿ ñèñòåìà íåîáõîäèìà äëÿ ïîääåð- æàíèÿ ïîñòîÿííîé ñêîðîñòè ïîäâèæíîé ôàçû. Êîëåáàíèÿ äàâëåíèÿ äîëæíû áûòü ñâåäåíû ê ìèíèìóìó, íàïðèìåð, ïóòåì ïðîïóñêàíèÿ ñæà- òîãî ðàñòâîðèòåëÿ ÷åðåç óñòðîéñòâî, ïîäàâëÿþ- ùåå ïóëüñàöèþ. Òðóáû è ñîåäèíåíèÿ ñïîñîáíû âûäåðæèâàòü äàâëåíèå, ñîçäàâàåìîå íàñîñíîé ñèñòåìîé. Òî÷íàÿ äîñòàâêà ïîäâèæíîé ôàçû ïðè ïî- ñòîÿííûõ èëè èçìåíÿþùèõñÿ ïî îïðåäåëåííîé ïðîãðàììå óñëîâèÿõ îñóùåñòâëÿåòñÿ ñèñòåìà- ìè, êîíòðîëèðóåìûìè ìèêðîïðîöåññîðîì.  ñëó÷àå ãðàäèåíòíîãî ýëþèðîâàíèÿ ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû íàñîñíûå ñèñòåìû, äîñòàâëÿþ- ùèå ðàñòâîðèòåëü(è) èç íåñêîëüêèõ ðåçåðâóà- ðîâ. Ñìåøèâàíèå ðàñòâîðèòåëåé ìîæåò áûòü äîñòèãíóòî êàê ñî ñòîðîíû íàñîñà(îâ), èìåþùå- ãî íèçêîå äàâëåíèå, òàê è ñî ñòîðîíû íàñîñà(îâ), èìåþùåãî(èõ) âûñîêîå äàâëåíèå. Óñòðîéñòâî äëÿ ââîäà ïðîá (èíæåêòîðû) Ââîä ïðîáû îñóùåñòâëÿåòñÿ íåïîñðåäñòâåí- íî â êîëîíêó ñ ïîìîùüþ ñïåöèàëüíîãî êðà- íà-äîçàòîðà. Íåïîäâèæíûå ôàçû Íåïîäâèæíûå ôàçû íàõîäÿòñÿ â êîëîíêàõ, îïèñàííûõ â ðàçäåëàõ îáùèõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòåé 2.1.2.28. Âûñîêîýôôåêòèâíàÿ æèäêîñò- íàÿ õðîìàòîãðàôèÿ (íàáèâíûå êîëîíêè) è 2.1.2.27. Ãàçîâàÿ õðîìàòîãðàôèÿ (êàïèëëÿð- íûå êîëîíêè). Ìàêñèìàëüíûé âíóòðåííèé äèà- ìåòð (Æ) êàïèëëÿðíîé êîëîíêè ñîñòàâëÿåò 100 ìêì. Ïîäâèæíûå ôàçû Îáû÷íî â êà÷åñòâå ïîäâèæíîé ôàçû èñïîëü- çóþò óãëåðîäà äèîêñèä, êîòîðûé ìîæåò ñîäåð- æàòü ïîëÿðíûé ìîäèôèêàòîð, íàïðèìåð, ìåòà- íîë, 2-ïðîïàíîë èëè àöåòîíèòðèë. Ñîñòàâ, äàâ- ëåíèå (ïëîòíîñòü), òåìïåðàòóðà è ñêîðîñòü ïîòîêà ïîäâèæíîé ôàçû, óêàçàííûå â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå èëè íîðìàòèâíîì äîêó- ìåíòå ïî êà÷åñòâó, ìîãóò áûòü ëèáî ïîñòîÿííû- ìè â òå÷åíèå âñåãî õðîìàòîãðàôè÷åñêîãî ïðîöåññà (èçîêðàòè÷åñêîå, èçîòåðìè÷åñêîå ýëþèðîâàíèå, ýëþèðîâàíèå ïðè ïîñòîÿííîé ïëîòíîñòè), ëèáî èçìåíÿòüñÿ ïî îïðåäåëåííîé ïðîãðàììå (ãðàäèåíòíîå ýëþèðîâàíèå ìîäèôè- êàòîðà, äàâëåíèå (ïëîòíîñòü), òåìïåðàòóðà èëè ñêîðîñòü ïîòîêà).  êà÷åñòâå äðóãèõ ïîäâèæíûõ ôàç äîïóñêà- åòñÿ èñïîëüçîâàíèå àçîòà (I) îêñèäà, àììèàêà, ìåòàíîëà, í-áóòàíà, äèýòèëîâîãî ýôèðà, äè- ôòîðäèõëîðìåòàíà. 31 Äåòåêòîðû Íàèáîëåå ÷àñòî èñïîëüçóþòñÿ ñïåêòðîôîòî- ìåòðè÷åñêèå äåòåêòîðû, ðàáîòàþùèå â óëüòðà- ôèîëåòîâîé è âèäèìîé îáëàñòÿõ (UV/Vis), ìàññ-ñïåêòðîìåòðè÷åñêèé äåòåêòîð è ïëàìåí- íî-èîíèçàöèîííûå äåòåêòîðû. Äîïóñêàåòñÿ èñ- ïîëüçîâàíèå äåòåêòîðîâ ïî ñâåòîðàññåÿíèþ, ÈÊ-ñïåêòðîôîòîìåòðîâ, äåòåêòîðîâ ïî òåïëî- ïðîâîäíîñòè èëè äðóãèõ ñïåöèàëüíûõ äåòåêòî- ðîâ. ÌÅÒÎÄÈÊÀ Èñïûòóåìûé(ûå) ðàñòâîð(û) è ðàñòâîð(û) ñðàâíåíèÿ ãîòîâÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå è (èëè)íîðìà- òèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó.

Êðèòåðèè îöåíêè ïðèãîäíîñòè õðîìàòîãðà- ôè÷åñêîé ñèñòåìû îïèñàíû â îáùåé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüå 2.1.2.36. Õðîìàòîãðàôè÷åñêèå ìåòîäû ðàçäåëåíèÿ. Ïðåäåëû, â êîòîðûõ ìîãóò êîððåêòèðîâàòüñÿ ïàðàìåòðû õðîìàòîãðàôè÷å- ñêîé ñèñòåìû äëÿ ñîîòâåòñòâèÿ òðåáîâàíèÿì ïðèãîäíîñòè ñèñòåìû, òàêæå ïðèâåäåíû â óêà- çàííîé îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. 201020053-2022 2.1.2.53. Ðàìàíîâñêàÿ ñïåêòðîìåòðèÿ Ðàìàíîâñêàÿ ñïåêòðîìåòðèÿ (íåóïðóãîå ðàñ- ñåÿíèå ñâåòà èëè ñïåêòðîìåòðèÿ êîìáèíàöèîí- íîãî ðàññåÿíèÿ — ïðîöåññ ðàññåÿíèÿ ñâåòà, ïðè êîòîðîì èñïûòóåìûé îáðàçåö îáëó÷àåòñÿ èí- òåíñèâíûì ìîíîõðîìàòè÷åñêèì ñâåòîì (îáû÷- íî èçëó÷åíèå ëàçåðà) è äëÿ ñâåòà, ðàññåèâàåìîãî îáðàçöîì, îïðåäåëÿåòñÿ ñäâèã ÷àñòîòû. Ðàìàíîâñêàÿ ñïåêòðîìåòðèÿ ÿâëÿåòñÿ äîïîë- íèòåëüíûì ìåòîäîì ïî îòíîøåíèþ ê ÈÊ-ñïåê- òðîìåòðèè â òîì ñìûñëå, ÷òî îáà ýòèõ ìåòîäà îñíîâàíû íà ìîëåêóëÿðíûõ êîëåáàíèÿõ ÷àñòèö èñïûòóåìîãî âåùåñòâà. Îäíàêî ðàìàíîâñêàÿ è ÈÊ-ñïåêòðîìåòðèÿ îòëè÷àþòñÿ ïî îòíîñè- òåëüíîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè äëÿ ðàçëè÷íûõ ôóíê- öèîíàëüíûõ ãðóïï. Ðàìàíîâñêàÿ ñïåêòðîìåòðèÿ îñîáåííî ÷óâñòâèòåëüíà ê íåïîëÿðíûì ñâÿçÿì (íàïðèìåð, îäèíàðíûå èëè êðàòíûå ñâÿçè C–C), òîãäà êàê âîäà, äëÿ êîòîðîé õàðàêòåðíî ñèëüíîå ïîãëîùåíèå â ÈÊ-îáëàñòè, îáëàäàåò ñëàáûì ðà- ìàíîâñêèì ðàññåÿíèåì è ïîýòîìó õîðîøî ïîä- õîäèò íà ðîëü ðàñòâîðèòåëÿ â ðàìàíîâñêîé ñïåê- òðîìåòðèè. Ïðèáîð. Ñïåêòðîìåòðû äëÿ ïîëó÷åíèÿ ðàìà- íîâñêèõ ñïåêòðîâ îáû÷íî ñîñòîÿò èç ñëåäóþ- ùèõ êîìïîíåíòîâ: – èñòî÷íèê ìîíîõðîìàòè÷åñêîãî ñâåòà, ÷àùå âñåãî ëàçåð ñ äëèíîé âîëíû â óëüòðàôèî- ëåòîâîé, âèäèìîé èëè áëèæíåé èíôðàêðàñíîé îáëàñòè; – ïîäõîäÿùàÿ îïòèêà (ëèíçû, çåðêàëà, îïòè- êî-âîëîêîííûå óñòðîéñòâà), êîòîðûå íàïðàâëÿ- þò âîçáóæäàþùåå èçëó÷åíèå íà îáðàçåö è ñîáè- ðàþò ñâåò, ðàññåèâàåìûé îáðàçöîì; – îïòè÷åñêîå óñòðîéñòâî (ìîíîõðîìàòîð èëè ôèëüòð), êîòîðîå ïðîïóñêàåò ñäâèíóòîå ïî ÷àñòîòå ðàìàíîâñêîå ðàññåÿíèå è ïðåïÿòñòâóåò ïîïàäàíèþ íà äåòåêòîð èíòåíñèâíîãî ñâåòà, ÷àñòîòà êîòîðîãî ðàâíà ÷àñòîòå âîçáóæäàþùåãî ñâåòà (ðýëååâñêîå ðàññåÿíèå); – äèñïåðãèðóþùåå óñòðîéñòâî (äèôðàêöè- îííàÿ ðåøåòêà èëè ïðèçìà), ñîåäèíåííîå ñî ùå- ëüþ, ðåãóëèðóþùåé äëèíó âîëíû, è äåòåêòîðîì (îáû÷íî ôîòîóìíîæèòåëü); èëè: – äèñïåðãèðóþùåå óñòðîéñòâî (äèôðàêöè- îííàÿ ðåøåòêà èëè ïðèçìà), ñîåäèíåííîå ñ ìíî- ãîêàíàëüíûì äåòåêòîðîì (îáû÷íî ïðèáîð ñ çà- ðÿäîâîé ñâÿçüþ (ÏÇÑ, CCD)); èëè: – èíòåðôåðîìåòð ñ äåòåêòîðîì, ðåãèñòðè- ðóþùèé èíòåíñèâíîñòü ðàññåÿííîãî ñâåòà âî âðåìåíè (íàïðèìåð, êîìïüþòåð è ñîîòâåòñòâóþ- ùåå ïðîãðàììíîå îáåñïå÷åíèå), è óñòðîéñòâî îáðàáîòêè äàííûõ, êîòîðîå ñ ïîìîùüþ Ôó- ðüå-ïðåîáðàçîâàíèÿ ïåðåâîäèò äàííûå â äèàïà- çîí ÷àñòîò èëè âîëíîâûõ ÷èñåë. ÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ ÎÁÐÀÇÖÀ Ðàìàíîâñêèå ñïåêòðû ìîãóò áûòü ïîëó÷åíû äëÿ òâåðäûõ âåùåñòâ, æèäêîñòåé è ãàçîâ, ïðè- ÷åì êàê ïîìåùåííûõ â ñòåêëÿííûå êîíòåéíåðû èëè òðóáêè, êàê ïðàâèëî, áåç ïðåäâàðèòåëüíîé ïîäãîòîâêè îáðàçöà èëè ðàñòâîðåíèÿ, òàê è íà- ïðÿìóþ. Îñíîâíûì îãðàíè÷åíèåì ðàìàíîâñêîé ñïåê- òðîìåòðèè ÿâëÿåòñÿ ôëóîðåñöåíöèÿ ïðèìåñåé, êîòîðàÿ ìåøàåò äåòåêòîðó óëàâëèâàòü çíà÷è- òåëüíî áîëåå ñëàáûé ðàìàíîâñêèé ñèãíàë. Ôëóîðåñöåíöèè ìîæíî èçáåæàòü ïðè èñïîëüçî- âàíèè â êà÷åñòâå âîçáóæäàþùåãî ñâåòà ëàçåðíî- ãî èçëó÷åíèÿ ñ áîëüøîé äëèíîé âîëíû, íàïðè- ìåð, íàõîäÿùåéñÿ â áëèæíåé èíôðàêðàñíîé îá- 32 ëàñòè. Èíòåíñèâíîñòü íåêîòîðûõ ðàìàíîâñêèõ ëèíèé ìîæåò áûòü óñèëåíà íåñêîëüêèìè ñïîñî- áàìè, íàïðèìåð, ïóòåì èñïîëüçîâàíèÿ ðåçî- íàíñíîé ðàìàíîâñêîé ñïåêòðîìåòðèè (RR) èëè ïîâåðõíîñòíî-óñèëåííîé ðàìàíîâñêîé ñïåêòðî- ìåòðèè (SERS). Èç-çà óçîñòè ñâåòîâîãî ïîòîêà ïàäàþùåãî ëàçåðíîãî èçëó÷åíèÿ äëÿ ïîëó÷åíèÿ ñïåêòðà íå- îáõîäèìî âñåãî ëèøü íåñêîëüêî ìèêðîëèòðîâ îáðàçöà.

Òåì íå ìåíåå ñëåäóåò ó÷èòûâàòü íåîä- íîðîäíîñòü îáðàçöà, åñëè òîëüêî åãî îáúåì íå óâåëè÷åí, íàïðèìåð, ïóòåì âðàùåíèÿ. ÈÄÅÍÒÈÔÈÊÀÖÈß È ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÅ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ Ñ ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅÌ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÕ ÎÁÐÀÇÖΠÈñïûòóåìûé îáðàçåö è ñòàíäàðòíûé îáðà- çåö ïîäâåðãàþò îäèíàêîâîé îáðàáîòêå è çàòåì ïðè îäèíàêîâûõ óñëîâèÿõ ïîëó÷àþò èõ ñïåê- òðû. Ìàêñèìóìû â ñïåêòðå èñïûòóåìîãî îáðàç- öà äîëæíû ñîâïàäàòü ïî ðàñïîëîæåíèþ è èí- òåíñèâíîñòè ñ ñîîòâåòñòâóþùèìè ìàêñèìóìà- ìè â ñïåêòðå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà Ôàðìàêîïåè Åâðàçèéñêîãî ýêîíîìè÷åñêîãî ñîþçà (ÑÎ ÔÅÀÝÑ). Åñëè ñïåêòðû, ïîëó÷åííûå äëÿ òâåð- äûõ âåùåñòâ, èìåþò ðàçëè÷èÿ â ïîëîæåíèÿõ ìàêñèìóìîâ, èñïûòóåìûé îáðàçåö è ñòàíäàðò- íûé îáðàçåö ïîäâåðãàþò îäèíàêîâîé îáðàáîòêå äëÿ òîãî, ÷òîáû îíè âûêðèñòàëëèçîâàëèñü èëè îáðàçîâàëèñü â îäèíàêîâîé ôîðìå, ëèáî ïîñòó- ïàþò òàê, êàê îïèñàíî â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, è çàòåì ñíèìàþò ñïåêòðû. Ïîñêîëüêó çàêîí Áåðà-Ëàìáåðòà äëÿ ðàìà- íîâñêîé ñïåêòðîñêîïèè íå âûïîëíÿåòñÿ, èíòåí- ñèâíîñòü ðàìàíîâñêîãî èçëó÷åíèÿ ïðÿìî ïðî- ïîðöèîíàëüíà êîíöåíòðàöèè ðàññåèâàþùèõ ÷àñòèö. Êàê è â ñëó÷àå äðóãèõ ñïåêòðîñêîïè÷å- ñêèõ ìåòîäîâ, êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå ìî- æåò áûòü ïðîâåäåíî ñ èñïîëüçîâàíèåì èçâåñò- íûõ êîëè÷åñòâ èëè êîíöåíòðàöèé ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ. Âñëåäñòâèå íåáîëüøîãî ïðîñòðàíñò- âåííîãî ðàçðåøåíèÿ ìåòîäà ñëåäóåò îáðàùàòü âíèìàíèå íà êà÷åñòâî èñïûòóåìûõ îáðàçöîâ è ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ — íàïðèìåð, íåîáõî- äèìî áûòü óâåðåííûì â òîì, ÷òî îíè íàõîäÿòñÿ â îäíîì è òîì æå ôèçè÷åñêîì ñîñòîÿíèè ëèáî èñïîëüçîâàòü âíóòðåííèé ñòàíäàðò äëÿ æèäêèõ îáðàçöîâ. ÈÄÅÍÒÈÔÈÊÀÖÈß È ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÅ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ Ñ ÈÑÏÎËÜÇÎÂÀÍÈÅÌ ÑÏÅÊÒÐÀËÜÍÛÕ ÁÈÁËÈÎÒÅÊ È ÑÒÀÒÈÑÒÈ×ÅÑÊÈÕ ÌÅÒÎÄΠÄËß ÊËÀÑÑÈÔÈÊÀÖÈÈ È ÊÀËÈÁÐÎÂÊÈ Êîíòðîëü çà ðàáîòîé ïðèáîðà. Ïðè èñïîëü- çîâàíèè ïðèáîðà ñëåäóþò èíñòðóêöèÿì ïðîèç- âîäèòåëÿ; ðåãóëÿðíî, â çàâèñèìîñòè îò ïðèìåíå- íèÿ ïðèáîðà è èñïûòóåìûõ îáðàçöîâ, ïðîâîäÿò ïðåäïèñàííûå êàëèáðîâêè è èñïûòàíèÿ ðàáîòû ñèñòåìû. Ïðè èñïîëüçîâàíèè ðàìàíîâñêîé ñïåê- òðîìåòðèè äëÿ êîëè÷åñòâåííûõ îïðåäåëåíèé ëèáî ïðè ñîçäàíèè ñïåêòðàëüíûõ áèáëèîòåê ñðàâíåíèÿ äëÿ (õåìîìåòðè÷åñêîé) êëàññèôèêà- öèè èëè êàëèáðîâêè íåîáõîäèìî îáðàùàòü îñî- áîå âíèìàíèå íà òî, ÷òîáû áûëè ñäåëàíû âñå ïîïðàâêè ê èçìåðåíèÿì ëèáî ïðåäïðèíÿòû ìåðû äëÿ êîíòðîëÿ çà èçìåíÿåìîñòüþ âåëè÷èí âîëíîâûõ ÷èñåë è èíòåíñèâíîñòè ñèãíàëà ïðè- áîðà. Ïðîâåðêà øêàëû âîëíîâûõ ÷èñåë. Øêàëó âîëíîâûõ ÷èñåë ðàìàíîâñêèõ ñäâèãîâ (îáû÷íî âûðàæàåìóþ â îáðàòíûõ ñàíòèìåòðàõ) ïðîâåðÿ- þò ñ ïîìîùüþ ïîäõîäÿùèõ ñòàíäàðòîâ, êîòîðûå èìåþò õàðàêòåðíûå ìàêñèìóìû ïðè èññëåäóå- ìûõ âåëè÷èíàõ âîëíîâûõ ÷èñåë (íàïðèìåð, îð- ãàíè÷åñêîå âåùåñòâî, íåîíîâàÿ ëàìïà èëè ëè- íèè Ar+ ïëàçìû èç àðãîí-èîííîãî ëàçåðà). Êàëèáðîâêà ïðèáîðà äîëæíà ñîîòâåòñòâî- âàòü òèïó îáðàçöà, ò.å. äëÿ òâåðäûõ èñïûòóåìûõ îáðàçöîâ ñëåäóåò èñïîëüçîâàòü òâåðäûå ñòàí- äàðòíûå îáðàçöû, à äëÿ æèäêèõ — æèäêèå. Âû- áèðàþò ïîäõîäÿùåå âåùåñòâî (íàïðèìåð, ïîëè- ñòèðîë, ïàðàöåòàìîë, öèêëîãåêñàí), äëÿ êîòîðî- ãî óñòàíîâëåíû òî÷íûå çíà÷åíèÿ ñäâèãîâ âîëíîâûõ ÷èñåë. Ïðîâåðêà øêàëû èíòåíñèâíîñòåé. Íà àáñî- ëþòíóþ è îòíîñèòåëüíóþ èíòåíñèâíîñòü ðàìà- íîâñêèõ ïîëîñ ìîãóò îêàçûâàòü âëèÿíèå ñëå- äóþùèå ôàêòîðû: – ïîëÿðèçàöèÿ ïàäàþùåãî ñâåòà; – ïîëÿðèçàöèÿ ñîáèðàþùåé îïòèêè; – èíòåíñèâíîñòü ïàäàþùåãî ñâåòà; – ðàçëè÷èÿ â îòêëèêå ïðèáîðà; – ðàçëè÷èÿ â ôîêóñå è ãåîìåòðèè îáðàçöà; – ðàçëè÷èÿ â íàñûïíîé ïëîòíîñòè äëÿ òâåð- äûõ îáðàçöîâ; 33 – ïîêàçàòåëü ïðåëîìëåíèÿ n èëè èçìåíåíèå n (Dn ) ìåæäó îáðàçöîì è îêðóæàþùåé ñðåäîé; – ðàçìåð ÷àñòèö è ðàñïðåäåëåíèå ÷àñòèö ïî ðàçìåðàì; – ñå÷åíèå ðàññåÿíèÿ; – ñå÷åíèå ïîãëîùåíèÿ.

Ïîäõîäÿùèå êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè ìîãóò èçìåíÿòüñÿ â çàâèñèìîñòè îò ïðèìåíåíèÿ, íî â áîëüøèíñòâå ñëó÷àåâ äîïóñòèìû êîëåáàíèÿ (èçî äíÿ â äåíü) â îòíîñèòåëüíûõ èíòåíñèâíî- ñòÿõ ïîëîñ ±10 %. Ñîçäàíèå ñïåêòðàëüíûõ áèáëèîòåê ñðàâíå- íèÿ. Ñíèìàþò ñïåêòðû ïîäõîäÿùåãî ÷èñëà ïîë- íîñòüþ èññëåäîâàííûõ (íàïðèìåð, òàê, êàê îïè- ñàíî â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå) âåùåñòâ, èìåþùèõ îòëè÷èÿ â ïðîèçâîäèòåëå, ñåðèè, êðè- ñòàëëè÷åñêîé ìîäèôèêàöèè, ðàçìåðàõ ÷àñòèö è ò.ä., òèïè÷íûå äëÿ àíàëèçèðóåìîãî ìàòåðèàëà. Íàáîð ñïåêòðîâ äàåò èíôîðìàöèþ, îïðåäåëÿþ- ùóþ ãðàíèöû ïîäîáèÿ èëè êîëè÷åñòâåííîãî îï- ðåäåëåíèÿ, êîòîðûå ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû äëÿ òîãî, ÷òîáû, íàïðèìåð, èäåíòèôèöèðîâàòü âåùåñòâî èëè ïðîêîíòðîëèðîâàòü åãî êîëè÷åñò- âî, îáðàçîâàâøååñÿ â ïðîöåññå ïðîèçâîäñòâà. Êîëè÷åñòâî âåùåñòâ â áàçå äàííûõ çàâèñèò îò îñîáåííîñòåé åå ïðèìåíåíèÿ. Ïîäõîäÿùåå ìà- òåìàòè÷åñêîå ïðåîáðàçîâàíèå ñïåêòðà ðàññåÿ- íèÿ ìîæåò îáëåã÷èòü êà÷åñòâåííîå ñðàâíåíèå ñïåêòðîâ (íàïðèìåð, êîððåêöèÿ áàçîâîé ëèíèè, íîðìàëèçàöèÿ ìèíèìóìà-ìàêñèìóìà, íîðìàëè- çàöèÿ âåêòîðà, ïðîèçâîäíûå). Ñåëåêòèâíîñòü áàçû äàííûõ, êîòîðàÿ ïîçâî- ëÿåò óâåðåííî èäåíòèôèöèðîâàòü êîíêðåòíîå âåùåñòâî èëè îòëè÷èòü åãî îò äðóãèõ ìàòåðèà- ëîâ áàçû äàííûõ, óñòàíàâëèâàåòñÿ âî âðåìÿ âà- ëèäàöèè. Äëÿ óâåðåííîñòè â ïðèãîäíîñòè áàçû äàííûõ ýòà ñåëåêòèâíîñòü äîëæíà ðåãóëÿðíî ïðîâåðÿòüñÿ; â îñîáåííîñòè ýòî íåîáõîäèìî äå- ëàòü ïîñëå ëþáûõ çíà÷èòåëüíûõ èçìåíåíèé, ïðîèçîøåäøèõ ñ âåùåñòâîì (íàïðèìåð, èçìåíå- íèÿ ïîñòàâùèêà èëè ïðîèçâîäñòâåííîãî ïðî- öåññà), ëèáî ïðè íàñòðîéêå ïðèáîðà äëÿ ðàìà- íîâñêîé ñïåêòðîìåòðèè (íàïðèìåð, ïðè ïðîâåð- 34 Òàáëèöà 2.1.2.53.-1. — Ñäâèãè âîëíîâûõ ÷èñåë (è äîïóñòèìûå îòêëîíåíèÿ) äëÿ ïîëèñòèðîëà, ïàðàöåòàìîëà è öèêëîãåêñàíà Ñäâèãè âîëíîâûõ ÷èñåë, ñì–1 Äîïóñòèìûå îòêëîíåíèÿ Íàñòîëüíûé ïðèáîð, ñì–1 Ïîðòàòèâíûé ïðèáîð, ñì–1 Ïîëèñòèðîë1 620,9 ±1,5 ±2,5 1001,4 ±1,5 ±2,0 1031,8 ±1,5 ±2,0 1602,3 ±1,5 ±3,0 3054,3 ±3,0 Íå ïðèìåíèìî 4 Ïàðàöåòàìîë2 797,2 ±1,5 ±2,5 857,9 ±1,5 ±2,0 1168,5 ±1,5 ±2,0 1236,8 ±1,5 ±2,0 1323,9 ±1,5 ±2,5 1648,4 ±1,5 ±3,0 2931,1 ±2,0 Íå ïðèìåíèìî 4 Öèêëîãåêñàí3 801,3 ±1,5 ±2,5 1028,3 ±1,0 ±2,0 1266,4 ±1,0 ±2,0 1444,4 ±1,0 ±2,5 2852,9 ±2,0 ±3,0 1 Èñïîëüçóþò ïîëèñòèðîëüíóþ ïëåíêó (íàïðèìåð, òîëùèíîé 76 ìêì), ãðàíóëû èëè ñòåðæåíü. 2 ÑÎ ÔÅÀÝÑ ïàðàöåòàìîëà äëÿ êâàëèôèêàöèè îáîðóäîâàíèÿ, ïðåäñòàâëÿþùèé ñîáîé ìîíîêëèíàëüíóþ ôîðìó I. 3 Öèêëîãåêñàí Ð. 4 Íå ïðèìåíèìî â ñâÿçè ñ âûõîäîì çà ïðåäåëû äèàïàçîíà äåòåêòîðà. êå øêàëû âîëíîâûõ ÷èñåë èëè ïîâòîðÿåìîñòè îòêëèêà ñïåêòðîìåòðà) Ïîëó÷åííàÿ òàêèì îáðàçîì ñïåêòðàëüíàÿ áèáëèîòåêà ïðèãîäíà òîëüêî äëÿ äàííîãî ïðèáî- ðà ëèáî àíàëîãè÷íîãî ïðè óñëîâèè ïîäòâåðæäå- íèÿ äîñòîâåðíîñòè ðàáîòû áèáëèîòåêè ïîñëå ïåðåíîñà. Ìåòîäèêà. Ïîäãîòîâêó è èññëåäîâàíèå îá- ðàçöà ïðîâîäÿò òàêèì æå îáðàçîì, êàê è ïðè ñîç- äàíèè áàçû äàííûõ. Äëÿ îáëåã÷åíèÿ ñðàâíåíèÿ ñïåêòðîâ è êîëè÷åñòâåííûõ ðàñ÷åòîâ ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû ïîäõîäÿùèå ìàòåìàòè÷å- ñêèå ïðåîáðàçîâàíèÿ ðàìàíîâñêèõ ñïåêòðîâ. Ñðàâíåíèå èëè ïðåîáðàçîâàíèÿ ñïåêòðîâ, êîëè÷åñòâåííûé ïðîãíîç ñâîéñòâ âåùåñòâ, íà- õîäÿùèõñÿ â èñïûòóåìîì îáðàçöå, ìîãóò ïðîâî- äèòüñÿ ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîäõîäÿùèõ ìåòîäîâ õåìîìåòðèêè, ñòàòèñòè÷åñêîé êëàññèôèêàöèè è êàëèáðîâêè. 201020054-2022 2.1.2.54. Ìåòîäû âèñêîçèìåòðèè ñ ïàäàþùèì è êàòÿùèìñÿ øàðèêàìè Îïðåäåëåíèå äèíàìè÷åñêîé âÿçêîñòè íüþ- òîíîâñêèõ æèäêîñòåé ïðîâîäÿò, èñïîëüçóÿ âèñ- êîçèìåòð ñ ïàäàþùèì øàðèêîì èëè êàòÿùèìñÿ øàðèêîì, ïðè òåìïåðàòóðå (20,0 ± 0,1) °Ñ, ïðè îòñóòñòâèè â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå äðóãèõ óêàçàíèé òåìïåðàòóð. Èçìåðÿþò âðåìÿ ïàäåíèÿ èëè äâèæåíèÿ øàðèêà â èñïûòóåìîé æèäêîñòè îò îäíîé îòìåòêè èëè äàò÷èêà âèñêî- çèìåòðà äî äðóãîé.

ÂÈÑÊÎÇÈÌÅÒÐ Ñ ÏÀÄÀÞÙÈÌ ØÀÐÈÊÎÌ Îáîðóäîâàíèå. Âèñêîçèìåòð ñ ïàäàþùèì øàðèêîì ñîñòîèò èç ñòåêëÿííîé òðóáêè, çàêëþ- ÷åííîé â êîæóõ, êîòîðûé ïîçâîëÿåò êîíòðîëèðî- âàòü òåìïåðàòóðó; 6 øàðèêîâ ðàçëè÷íîé ïëîòíî- ñòè è äèàìåòðà, èçãîòîâëåííûõ èç ñòåêëà, æå- ëåçíî-íèêåëåâîãî ñïëàâà èëè ñòàëè. Òðóáêó ôèêñèðóþò òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû îòêëîíåíèå îò âåðòèêàëüíîé îñè ñîñòàâëÿëî (10 ± 1)°. Íà òðóáêå èìåþòñÿ äâå ìåòêè, îïðåäåëÿþùèå ðàñ- ñòîÿíèå ïàäåíèÿ øàðèêà. Ê ïðîìûøëåííûì âèñêîçèìåòðàì ïðèëàãàþòñÿ òàáëèöû ñî çíà÷å- íèÿìè ïîñòîÿííûõ, ïëîòíîñòè øàðèêîâ è äàí- íûå ïî ïðèãîäíîñòè ðàçëè÷íûõ øàðèêîâ äëÿ èñ- ïîëüçîâàíèÿ â ïðåäïîëàãàåìîì äèàïàçîíå âÿçêîñòè. Ìåòîäèêà. ×èñòóþ, ñóõóþ òðóáêó âèñêîçè- ìåòðà, ïðåäâàðèòåëüíî âûäåðæàííóþ ïðè òåì- ïåðàòóðå (20,0 ± 0,1) °Ñ, çàïîëíÿþò èñïûòóåìîé æèäêîñòüþ, èçáåãàÿ îáðàçîâàíèÿ ïóçûðüêîâ. Ïîäáèðàþò â òðóáêó øàðèê äëÿ ïîëó÷åíèÿ âðå- ìåíè ïàäåíèÿ íå ìåíåå 30 ñ ñ ó÷åòîì ïðåäïîëà- ãàåìîãî äèàïàçîíà âÿçêîñòè. Çàêðûâàþò òðóáêó è òåðìîñòàòèðóþò ðàñòâîð ïðè òåìïåðàòóðå (20,0 ± 0,1) °Ñ â òå÷åíèå íå ìåíåå 15 ìèí. Âíà- ÷àëå ïðîïóñêàþò øàðèê ìåæäó äâóìÿ ìåòêàìè áåç èçìåðåíèÿ âðåìåíè ïàäåíèÿ, âî âòîðîé ðàç èçìåðÿþò âðåìÿ ïàäåíèÿ øàðèêà ñ âåðõíåé äî íèæíåé ìåòêè ñåêóíäîìåðîì ñ òî÷íîñòüþ äî 1/5 ñåêóíäû. Èñïûòàíèå ïîâòîðÿþò íå ìåíåå 3 ðàç äëÿ ïîëó÷åíèÿ íå ìåíåå 4 çíà÷åíèé âðåìå- íè ïàäåíèÿ øàðèêà. Ðåçóëüòàò ñ÷èòàåòñÿ äîñòî- âåðíûì, åñëè âðåìÿ ïîñëåäîâàòåëüíûõ 2 ïàäå- íèé íå îòëè÷àþòñÿ áîëåå, ÷åì íà 1,5 %. Èñïîëüçóÿ ñðåäíåå çíà÷åíèå âðåìåíè ïàäå- íèÿ øàðèêà ðàññ÷èòûâàþò äèíàìè÷åñêóþ âÿç- êîñòü (h, ìÏà·ñ) ïî ôîðìóëå: h r r= - ×k t( )1 2 , ãäå: k — ïîñòîÿííàÿ âèñêîçèìåòðà, â ìì2/ñ2; r1 — ïëîòíîñòü èñïîëüçóåìîãî øàðèêà, ã/ñì3; r2 — ïëîòíîñòü èñïûòóåìîé æèäêîñòè, â ã/ñì3, ïîëó÷åííàÿ óìíîæåíèåì îò- íîñèòåëüíîé ïëîòíîñòè (d 20 20 ) íà 0,9982; t — ñðåäíåå âðåìÿ ïàäåíèÿ øàðèêà ìåæäó êðàéíèìè ìåòêàìè, ñ. ÀÂÒÎÌÀÒÈ×ÅÑÊÈÉ ÂÈÑÊÎÇÈÌÅÒÐ Ñ ÊÀÒßÙÈÌÑß ØÀÐÈÊÎÌ Îáîðóäîâàíèå. Àâòîìàòè÷åñêèé âèñêîçè- ìåòð ñ êàòÿùèìñÿ øàðèêîì ñîñòîèò èç íåñêîëü- êèõ êàïèëëÿðîâ èç ñòåêëà èëè äðóãèõ ïîäõîäÿ- ùèõ ìàòåðèàëîâ ñ ðàçíûìè äèàìåòðàìè, ïîìå- ùåííûõ â òåðìîñòàòè÷åñêè êîíòðîëèðóåìûé áëîê, ïîçâîëÿþùèé ïðîâîäèòü òî÷íûé êîíòðîëü òåìïåðàòóðû; øàðèêîâ èç íåðæàâåþùåé ñòàëè (íåîáÿçàòåëüíî èìåþùèõ ïîêðûòèå) èëè äðóãèõ ïîäõîäÿùèõ ìàòåðèàëîâ; ìîòîðà-ðåäóêòîðà, êî- òîðûé îïðåäåëÿåò ìåñòîïîëîæåíèå êàïèëëÿðà ïîä óãëîì íàêëîíà îò (10,0 ± 0,2)° äî (80,0 ± 0,2)° îò âåðòèêàëüíîé îñè. Ïðèáîð èìååò íå ìåíåå 2 äàò÷èêîâ äëÿ èçìåðåíèÿ âðåìåíè äâèæåíèÿ øàðèêà íà çàäàííîì ðàññòîÿíèè. 35 Ê ïðîìûøëåííûì âèñêîçèìåòðàì ïðèëàãàþòñÿ òàáëèöû ñî çíà÷åíèÿìè èõ ïîñòîÿííûõ, ïëîòíî- ñòè øàðèêîâ è äàííûå ïî ïðèãîäíîñòè ðàçëè÷- íûõ êàïèëëÿðîâ äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â ïðåäïîëà- ãàåìîì äèàïàçîíå âÿçêîñòè. Êîíòðîëü òåìïåðà- òóðû, êîíòðîëü óãëà íàêëîíà, îïðåäåëåíèå âðåìåíè äâèæåíèÿ, ïîâòîðû äâèæåíèé è ðàñ÷åò ñðåäíåãî çíà÷åíèÿ è îòíîñèòåëüíîãî ñòàíäàðò- íîãî îòêëîíåíèÿ âûïîëíÿþòñÿ ïðîãðàììíûì îáåñïå÷åíèåì ïðèáîðà. Ìåòîäèêà. Íàñòðàèâàþò ïðîãðàììíîå îáåñ- ïå÷åíèå òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû â ðåçóëüòàòå ïðî- âåäåíèÿ èçìåðåíèé ïîëó÷èòü 4 çíà÷åíèÿ âðåìå- íè äâèæåíèÿ (2 öèêëà âïåðåä/íàçàä) è îòíîñè- òåëüíîå ñòàíäàðòíîå îòêëîíåíèå íå áîëåå 0,5 %. Âûáèðàþò êàïèëëÿð, øàðèê è óãîë íàêëîíà, ïîäõîäÿùèå äëÿ ïðåäïîëàãàåìîãî äèàïàçîíà âÿçêîñòè èñïûòóåìîé æèäêîñòè, òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû âðåìÿ äâèæåíèÿ ñîñòàâëÿëî íå ìåíåå 20 ñåêóíä ïðè ïåðåìåùåíèè íà ðàññòîÿíèå 100 ìì èëè áûëî ïðîïîðöèîíàëüíî âðåìåíè ïå- ðåìåùåíèÿ íà äðóãèå ðàññòîÿíèÿ. Ïðè îòñóòñò- âèè ïîäêëþ÷åíèÿ âèñêîçèìåòðà ê öèôðîâîìó äåíñèòîìåòðó çíà÷åíèå ïëîòíîñòè èñïûòóåìîé æèäêîñòè äîëæíî áûòü óêàçàíî â ïðîãðàììíîì îáåñïå÷åíèè ïðèáîðà.

×èñòûé, ñóõîé êàïèëëÿð âèñêîçèìåòðà çàïîëíÿþò èñïûòóåìîé æèäêî- ñòüþ, èçáåãàÿ îáðàçîâàíèÿ ïóçûðüêîâ. Íà÷èíà- þò èçìåðåíèå íåçàìåäëèòåëüíî ïîñëå çàïîëíå- íèÿ êàïèëëÿðà. Ïðèáîð àâòîìàòè÷åñêè ðàññ÷è- òûâàåò äèíàìè÷åñêóþ âÿçêîñòü (h, ìÏà/ñ) è êèíåìàòè÷åñêóþ âÿçêîñòü (v, ìì2/ñ). 201020055-2022 2.1.2.55. ÌÀÑÑ-ÑÏÅÊÒÐÎ- ÌÅÒÐÈß Ñ ÈÍÄÓÊÒÈÂÍÎ- ÑÂßÇÀÍÍÎÉ ÏËÀÇÌÎÉ Ìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ ñ èñïîëüçîâàíèåì èíäóê- òèâíî ñâÿçàííîé ïëàçìû (ÌÑ-ÈÑÏ, ICP-MS — inductively coupled plasma-mass spectrometry) ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ìåòîä, èñïîëüçóþùèé èí- äóêòèâíî ñâÿçàííóþ ïëàçìó (ÈÑÏ) â êà÷åñòâå èîíèçèðóþùåãî èñòî÷íèêà. Îñíîâíûå ïðèíöè- ïû ÈÑÏ îïèñàíû â îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòà- òüå 2.1.2.41. Àòîìíî-ýìèññèîííàÿ ñïåêòðîìåò- ðèÿ ñ èíäóêòèâíî-ñâÿçàííîé ïëàçìîé (ÀÝÑ- ÈÑÏ).  ÌÑ-ÈÑÏ èñïîëüçóåòñÿ ñïîñîáíîñòü ÈÑÏ ãåíåðèðîâàòü çàðÿæåííûå èîíû ýëåìåíòîâ, âõî- äÿùèõ â ñîñòàâ îáðàçöà. Ïîëó÷åííûå èîíû íà- ïðàâëÿþò â ìàññ-ñïåêòðîìåòð, êîòîðûé ðàçäåëÿ- åò èõ â ñîîòâåòñòâèè ñ îòíîøåíèåì ìàññà/çàðÿä (m/z). Áîëüøèíñòâî ìàññ-ñïåêòðîìåòðîâ èìåþò êâàäðóïîëüíûå èëè ìàãíèòíûå àíàëèçàòîðû. Èîíû ïåðåíîñÿòñÿ èç ïëàçìû â èîííóþ îïòèêó ÷åðåç äâà êîíóñà (êîíóñû ïðîáîîòáîðíèêà è ñå- ïàðàòîðà, îáðàçóþùèå îáëàñòü èíòåðôåéñà). Èîííàÿ îïòèêà ñîñòîèò èç ýëåêòðîñòàòè÷åñêèõ ëèíç, êîòîðûå ïåðåíîñÿò èîíû èç ïðîñòðàíñòâà ñ àòìîñôåðíûì äàâëåíèåì ê ìàññ-ôèëüòðó ñ äàâëåíèåì 10–8 Ïà èëè ìåíåå, ïîääåðæèâàå- ìûì ñ ïîìîùüþ òóðáîìîëåêóëÿðíîãî íàñîñà. Ïîñëå ôèëüòðàöèè èîíû ñ âûáðàííûì ñîîòíî- øåíèåì ìàññà/çàðÿä íàïðàâëÿþòñÿ íà äåòåêòîð (êàíàëüíûé ýëåêòðîóìíîæèòåëü, ÷àøêà Ôàðà- äåÿ, äèíîäû), ãäå ïîòîê èîíîâ êîíâåðòèðóåòñÿ â ýëåêòðè÷åñêèå ñèãíàëû. Êîëè÷åñòâåííî ýëå- ìåíòû îïðåäåëÿþò ïî ÷èñëó èîíîâ, ïîÿâëÿþ- ùèõñÿ è ãåíåðèðóþùèõ ýëåêòðè÷åñêèå èìïóëü- ñû â åäèíèöó âðåìåíè. Ñèñòåìà ââîäà îáðàçöà è ñïîñîáû îáðàáîòêè äàííûõ àíàëîãè÷íû èñïîëüçóåìûì â ÀÝÑ-ÈÑÏ. ÏÐÈÁÎÐ Ãëàâíûìè ñîñòàâëÿþùèìè ÷àñòÿìè ïðèáîðà ÿâëÿþòñÿ: – ñèñòåìà ââîäà îáðàçöà, ñîñòîÿùàÿ èç ïå- ðèñòàëüòè÷åñêîãî íàñîñà, ïîäàþùåãî ðàñòâîð ñ ïîñòîÿííîé ñêîðîñòüþ â ðàñïûëèòåëü; – ðàäèî÷àñòîòíûé (Ð×) ãåíåðàòîð; – ïëàçìåííàÿ ãîðåëêà; – îáëàñòü èíòåðôåéñà, âêëþ÷àþùàÿ â ñåáÿ êîíóñû äëÿ ïåðåíîñà èîíîâ â èîííóþ îïòèêó; – ìàññ-ñïåêòðîìåòð; – äåòåêòîð; – áëîê ñáîðà äàííûõ. ÈÍÒÅÐÔÅÐÅÍÖÈß Íàèáîëüøåé ïðîáëåìîé ÿâëÿåòñÿ ìàññîâàÿ èíòåðôåðåíöèÿ. Íàïðèìåð, èçîáàðè÷åñêèå ðàç- íîâèäíîñòè çíà÷èòåëüíî ïåðåêðûâàþò ìàññî- âûé ñèãíàë èñêîìûõ èîíîâ, îñîáåííî â öåí- òðàëüíîé ÷àñòè äèàïàçîíà ìàññ (íàïðèìåð, 40 – 80 à.å.ì.). Êîìáèíàöèÿ àòîìíûõ èîíîâ ïðè- âîäèò ê ïîëèàòîìíîé èëè ìîëåêóëÿðíîé èíòåð- ôåðåíöèÿì (òî åñòü 40Ar16O ñ 56Fe èëè 40Ar40Ar ñ 80Se). Ìàòðèöà, â ñëó÷àå ñ íåêîòîðûìè îïðåäå- ëÿåìûìè ýëåìåíòàìè, òàêæå ìîæåò âûçûâàòü èíòåðôåðåíöèþ. Íåêîòîðûå îáðàçöû îêàçûâàþò âëèÿíèå íà îáðàçîâàíèå êàïåëü èëè íà òåìïåðà- òóðó èîíèçàöèè â ïëàçìå. Ýòè ÿâëåíèÿ ìîãóò 36 ïðèâîäèòü ê ïîäàâëåíèþ àíàëèòè÷åñêîãî ñèãíà- ëà îïðåäåëÿåìîãî ýëåìåíòà, îêàçûâàÿ âëèÿíèå íà äîñòîâåðíîñòü ðåçóëüòàòà. Îáîéòè ôèçè÷å- ñêóþ èíòåðôåðåíöèþ ìîæíî, èñïîëüçóÿ ìåòîä âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà èëè ìåòîä ñòàíäàðòíûõ äîáàâîê. Âûáîð ýëåìåíòà, èñïîëüçóåìîãî â êà- ÷åñòâå âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà, çàâèñèò îò èññëå- äóåìîãî ýëåìåíòà: íàïðèìåð, â êà÷åñòâå âíóò- ðåííèõ ñòàíäàðòîâ ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû 59Co è 115In. Îñíîâíîé õàðàêòåðèñòèêîé ïðèáîðîâ ÌÑ-ÈÑÏ ÿâëÿåòñÿ ðàçðåøåíèå, òî åñòü ýôôåê- òèâíîñòü ðàçäåëåíèÿ äâóõ áëèçêèõ ìàññ. Ñ ýòîé òî÷êè çðåíèÿ ïðèáîðû ñ êâàäðóïîëüíûìè àíà- ëèçàòîðàìè óñòóïàþò ïðèáîðàì ñ ìàãíèòíûìè àíàëèçàòîðàìè. ÌÅÒÎÄ ÏÐÎÁÎÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ È ÂÂÎÄ ÎÁÐÀÇÖÀ Ïðîáîïîäãîòîâêà îáû÷íî âêëþ÷àåò â ñåáÿ ñòàäèþ ðàçëîæåíèÿ ìàòðèöû ñ ïîìîùüþ ïîäõî- äÿùåãî ìåòîäà, íàïðèìåð, â ìèêðîâîëíîâîé ïå÷è.

Êðîìå òîãî, íåîáõîäèìî îáåñïå÷èòü ïîïà- äàíèå êîíöåíòðàöèè îïðåäåëÿåìîãî ýëåìåíòà ðàçâåäåíèåì èëè êîíöåíòðèðîâàíèåì â ðàáî÷èé äèàïàçîí ïðèáîðà è ïîëó÷åíèå ðàñòâîðà èñïû- òóåìîãî îáðàçöà, ñïîñîáíîãî âîñïðîèçâîäèìî ðàñïûëÿòüñÿ. Íåêîòîðûå ðàñïûëèòåëüíûå ñèñòåìû óñòîé- ÷èâû ê äåéñòâèþ âûñîêèõ êîíöåíòðàöèé êè- ñëîò, íî èñïîëüçîâàíèå ñåðíîé è ôîñôîðíîé êè- ñëîò ìîæåò îêàçûâàòü âëèÿíèå íà áàçîâóþ ëè- íèþ ÈÑÏ-ñïåêòðîâ. Áîëåå ïðåäïî÷òèòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ èñïîëüçîâàíèå àçîòíîé è õëîðîâîäî- ðîäíîé êèñëîò. Ôòîðèñòîâîäîðîäíóþ êèñëîòó ìîæíî èñïîëüçîâàòü ïðè íàëè÷èè óñòîé÷èâûõ ê íåé (íàïðèìåð, èç ïåðôòîðàëêîêñèïîëèìåðà) ñèñòåì ââîäà îáðàçöà è ãîðåëîê. Ïðè âûáîðå ìå- òîäà ââîäà îáðàçöà ó÷èòûâàþò òðåáîâàíèÿ ïî ÷óâñòâèòåëüíîñòè, ñòàáèëüíîñòè, ñêîðîñòè, ðàç- ìåðó îáðàçöà, óñòîé÷èâîñòè ê êîððîçèè è óñòîé- ÷èâîñòè ê çàêóïîðêå.  áîëüøèíñòâå ñëó÷àåâ ïîäõîäèò èñïîëüçîâàíèå ðàñïûëèòåëÿ ñ ïîïå- ðå÷íûì ïîòîêîì âìåñòå ñ ðàñïûëèòåëüíîé êà- ìåðîé è ãîðåëêîé. Ïåðèñòàëüòè÷åñêèé íàñîñ ïî- äàåò èñïûòóåìûé ðàñòâîð è ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ ñî ñêîðîñòüþ 20 – 1000 ìêë/ìèí.  ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ îðãàíè÷åñêèõ ðàñ- òâîðèòåëåé íåîáõîäèìî îáåñïå÷èòü ðàçäåëåíèå êèñëîðîäà è îðãàíè÷åñêèõ ñëîåâ. ÂÛÁÎÐ ÓÑËÎÂÈÉ ÏÐÎÂÅÄÅÍÈß ÀÍÀËÈÇÀ Ïðè âûáîðå óñëîâèé ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà ñëåäóþò ðåêîìåíäàöèÿì ïðîèçâîäèòåëÿ ïðèáî- ðà. Àíàëèç âîäíûõ ðàñòâîðîâ è îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé îáû÷íî ïðîèñõîäèò ïðè ðàçëè÷- íûõ óñëîâèÿõ. Íàäëåæàùèì îáðàçîì äîëæíû áûòü âûáðàíû ñëåäóþùèå àíàëèòè÷åñêèå ïàðà- ìåòðû: – ïîäáîð êîíóñîâ (ìàòåðèàë ïðîáîîòáîðíè- êà è ñåïàðàòîðà); – ñêîðîñòè ïîòîêîâ ãàçà-íîñèòåëÿ (âíåø- íÿÿ, ïðîìåæóòî÷íàÿ è âíóòðåííÿÿ òðóáêè ãîðåë- êè); – ìîùíîñòü ðàäèî÷àñòîòíîãî èçëó÷åíèÿ; – ñêîðîñòü íàñîñà; – äîëæåí áûòü îñóùåñòâëåí âûáîð îäíîãî èëè áîëåå èçîòîïîâ èçìåðÿåìîãî ýëåìåíòà (ìàñ- ñà). ÂÛÁÎÐ ÈÇÎÒÎÏΠÂûáîð èçîòîïîâ îñóùåñòâëÿþò ïî íåñêîëü- êèì êðèòåðèÿì. Äëÿ ïîëó÷åíèÿ ìàêñèìàëüíîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè âûáèðàþò íàèáîëåå ðàñïðî- ñòðàíåííûé èçîòîï äàííîãî ýëåìåíòà. Êðîìå òîãî, ñëåäóåò âûáèðàòü èçîòîï ñ ìèíèìàëüíîé èíòåðôåðåíöèåé, âûçûâàåìîé äðóãèìè âèäàìè èçîòîïîâ, ïðèñóòñòâóþùèìè â ìàòðèöå è â ãà- çå-íîñèòåëå.  ïðîãðàììíîì îáåñïå÷åíèè ïðî- èçâîäèòåëåé ïðèáîðîâ ÌÑ-ÈÑÏ îáû÷íî ïðè- ñóòñòâóåò èíôîðìàöèÿ îá èçîáàðè÷åñêîé èíòåð- ôåðåíöèè è èíòåðôåðåíöèè, âûçûâàåìîé ïîëèàòîìíûìè èîíàìè, íàïðèìåð, ãèäðèäíûìè, îêñèäíûìè, õëîðèäíûìè è ò.ä. ÊÎÍÒÐÎËÜ ÐÀÁÎÒÎÑÏÎÑÎÁÍÎÑÒÈ ÏÐÈÁÎÐÀ Ïðèãîäíîñòü ñèñòåìû Íàñòðîéêà ïðèáîðà ïîçâîëÿåò ïðîâåðÿòü è ðåãóëèðîâàòü èçìåðåíèå ïåðåä ââåäåíèåì îá- ðàçöà. Òî÷íîñòü îïðåäåëåíèÿ ìàññ ïðèáîðîì ÌÑ-ÈÑÏ ïðîâåðÿþò ñ ïîìîùüþ ðàñòâîðà äëÿ íàñòðîéêè, ñîäåðæàùåãî íåñêîëüêî èçîòîïîâ, îõâàòûâàþùèõ âåñü äèàïàçîí, íàïðèìåð, 9Be, 59Co, 89Y, 115In, 140Ce è 209Bi. Çàïèñûâàþò ÷óâñòâèòåëüíîñòü è êðàòêîâðå- ìåííóþ è äîëãîâðåìåííóþ ñòàáèëüíîñòü. Ïàðà- ìåòðû ïðèáîðà (ñîñòîÿíèå ïëàçìû, ïàðàìåòðû èîííûõ ëèíç è êâàäðóïîëåé) íàñòðàèâàþò íà 37 ïîëó÷åíèå ìàêñèìàëüíî âîçìîæíîãî ÷èñëà îá- íàðóæåíèé èîíîâ. Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ íàáëþäåíèÿ ïðèåìëå- ìîãî îòêëèêà â øèðîêîì äèàïàçîíå ìàññ ðàçðå- øåíèå è îñü ìàññ íàñòðàèâàþò ñ èñïîëüçîâàíè- åì ðàñòâîðà, ñîäåðæàùåãî Li, Y è Tl. Äëÿ óìåíüøåíèÿ èíòåðôåðåíöèè íåîáõîäè- ìî îöåíèòü ýôôåêòèâíîñòü ðàçëîæåíèÿ ïëàçìîé íåêîòîðûõ îêñèäîâ. Õîðîøèìè èíäèêàòîðàìè ÿâëÿþòñÿ îòíîøåíèÿ Ce/CeO è (èëè) Ba/BaO, òðåáóåìûé óðîâåíü ïðè ýòîì äîëæåí ñîñòàâëÿòü ìåíåå 3 %. Ïîäàâëåíèå îáðàçîâàíèÿ äâóõçàðÿäíûõ èî- íîâ îñóùåñòâëÿþò ñ èñïîëüçîâàíèåì Ba è Ce. Îòíîøåíèå ñèãíàëà äâóõçàðÿäíûõ èîíîâ ê îï- ðåäåëÿåìîìó ýëåìåíòó äîëæíî áûòü ìåíåå 2 %.

Äîëãîâðåìåííóþ ñòàáèëüíîñòü ïðîâåðÿþò, èçìåðÿÿ ñòàíäàðò â íà÷àëå è â êîíöå èñïûòàíèÿ îáðàçöà, ïðè ýòîì ïðîâåðÿåòñÿ âëèÿíèå îòëîæå- íèÿ ñîëåé â êîíóñàõ íà óìåíüøåíèå ñèãíàëà âî âðåìÿ èñïûòàíèÿ. ÂÀËÈÄÀÖÈß ÌÅÒÎÄÈÊÈ Ìåòîäèêó, ïðèâåäåííóþ â ÷àñòíîé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüå èëè íîðìàòèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó, âåðèôèöèðóþò ÷åðåç îïðåäåëåííîå âðåìÿ äëÿ ïîëó÷åíèÿ óäîâëåòâîðèòåëüíûõ ðå- çóëüòàòîâ. ËÈÍÅÉÍÎÑÒÜ Ãîòîâÿò è àíàëèçèðóþò íå ìåíåå ÷åòûðåõ ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ, êîíöåíòðàöèÿ êîòîðûõ íà- õîäèòñÿ â ïðåäåëàõ äèàïàçîíà êàëèáðîâêè, è êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Ïðîâîäÿò íå ìåíåå ïÿòè èçìåðåíèé. Èñïîëüçóÿ âñå ïîëó÷åííûå äàííûå, ðàññ÷è- òûâàþò ëèíåéíîå óðàâíåíèå ãðàôèêà ìåòîäîì íàèìåíüøèõ êâàäðàòîâ. Ñòðîÿò êðèâóþ ðåãðåñ- ñèè, îòìå÷àÿ ñðåäíèå çíà÷åíèÿ, èçìåðåííûå çíà- ÷åíèÿ è äîâåðèòåëüíûé èíòåðâàë êàëèáðîâî÷- íîãî ãðàôèêà. Ìåòîäèêà ÿâëÿåòñÿ ïðèãîäíîé ïðè óñëîâèè ñîáëþäåíèÿ ñëåäóþùèõ òðåáîâà- íèé: – êîýôôèöèåíò êîððåëÿöèè äîëæåí áûòü íå ìåíåå 0,99; – íà êàëèáðîâî÷íîì ãðàôèêå ïîãðåøíîñòè êàæäîãî êàëèáðîâî÷íîãî óðîâíÿ äîëæíû áûòü ðàñïðåäåëåíû ñëó÷àéíûì îáðàçîì. Ðàññ÷èòûâàþò ñðåäíåå çíà÷åíèå è îòíîñè- òåëüíîå ñòàíäàðòíîå îòêëîíåíèå äëÿ íàèìåíü- øåãî è íàèáîëüøåãî êàëèáðîâî÷íîãî óðîâíÿ.  ñëó÷àå åñëè îòíîøåíèå ðàññ÷èòàííîãî ñòàíäàðòíîãî îòêëîíåíèÿ íàèìåíüøåãî è íàè- áîëüøåãî êàëèáðîâî÷íîãî óðîâíÿ ìåíåå 0,5 èëè áîëåå 2,0, òî áîëåå òî÷íàÿ îöåíêà êàëèáðîâî÷- íîãî ãðàôèêà ìîæåò áûòü ïîëó÷åíà ñ èñïîëüçî- âàíèåì âçâåøåííîé ëèíåéíîé ðåãðåññèè. Ëè- íåéíàÿ è êâàäðàòè÷íàÿ âåñîâàÿ ôóíêöèè ïðèìå- íÿþòñÿ ê ïîëó÷åííûì äàííûì äëÿ íàõîæäåíèÿ íàèáîëåå ïîäõîäÿùåé äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ âåñî- âîé ôóíêöèè. Åñëè ñðåäíèå çíà÷åíèÿ ïðè ñðàâ- íåíèè ñ êàëèáðîâî÷íûì ãðàôèêîì ïðîÿâëÿþò îòêëîíåíèå îò ëèíåéíîñòè, èñïîëüçóþò äâóõ- ìåðíóþ ëèíåéíóþ ðåãðåññèþ. ÏÐÀÂÈËÜÍÎÑÒÜ Ïðåäïî÷òèòåëüíî âåðèôèöèðîâàòü ïðàâèëü- íîñòü ñ èñïîëüçîâàíèåì ñåðòèôèöèðîâàííûõ ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ. Åñëè ýòî íåâîçìîæíî, ïðîâåðÿþò îòêðûâàåìîñòü. Îòêðûâàåìîñòü.  ñëó÷àå ìåòîäèê êîëè÷å- ñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ îòêðûâàåìîñòü äîëæíà áûòü îò 90 % äî 110 %. Äëÿ äðóãèõ îïðåäåëå- íèé, íàïðèìåð äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñëåäîâûõ êîëè- ÷åñòâ ýëåìåíòà, îòêðûâàåìîñòü äîëæíà áûòü îò 80 % äî 120 % îò òåîðåòè÷åñêîãî çíà÷åíèÿ. Îò- êðûâàåìîñòü ìîæåò áûòü îïðåäåëåíà ñ èñïîëü- çîâàíèåì ïîäõîäÿùåãî ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (ìàòðè÷íîãî ðàñòâîðà), ñîäåðæàùåãî èçâåñòíîå êîëè÷åñòâî îïðåäåëÿåìîãî ýëåìåíòà (ñðåäíÿÿ êîíöåíòðàöèÿ êàëèáðîâî÷íîãî ãðàôèêà). ÏÎÂÒÎÐßÅÌÎÑÒÜ Ïîâòîðÿåìîñòü äîëæíà áûòü íå áîëåå 3 % äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ è íå áîëåå 5 % äëÿ èñïûòàíèÿ íà ñîäåðæàíèå ïðèìåñåé. ÏÐÅÄÅË ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÃÎ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß Óäîñòîâåðÿþòñÿ, ÷òî ïðåäåë êîëè÷åñòâåííî- ãî îïðåäåëåíèÿ (íàïðèìåð, îïðåäåëåííûé ñ èñ- ïîëüçîâàíèåì ïðèáëèæåíèÿ 10ó) íèæå èçìåðÿå- ìîãî çíà÷åíèÿ. 201020056-2022 2.1.2.56. Àíàëèç ãëèêàíîâ â ãëèêîïðîòåèíàõ 1. ÂÂÅÄÅÍÈÅ Àíàëèç ãëèêàíîâ — êîìïëåêñ èñïûòàíèé äëÿ èññëåäîâàíèÿ îëèãîñàõàðèäíûõ öåïåé (ãëè- êàíîâ) ãëèêîïðîòåèíîâ. Îí ìîæåò âêëþ÷àòü â ñåáÿ: – àíàëèç öåëüíîãî ãëèêîïðîòåèíà; 38 – ðàçäåëåíèå è îáíàðóæåíèå ãëèêîôîðì áåëêà; – àíàëèç ãëèêîïåïòèäîâ, ïîëó÷åííûõ ïîñëå ôåðìåíòàòèâíîé îáðàáîòêè ãëèêîïðîòåèíà; – àíàëèç îòùåïëåííûõ ãëèêàíîâ, ïîëó÷åí- íûõ ïîñëå õèìè÷åñêîé èëè ôåðìåíòàòèâíîé îá- ðàáîòêè ãëèêîïðîòåèíà. Àíàëèç ìîíîñàõàðèäîâ ìîæåò ñëóæèòü äî- ïîëíåíèåì ê èíôîðìàöèè, ïîëó÷åííîé ïðè àíà- ëèçå ãëèêàíîâ. Ãëèêîçèëèðîâàíèå ìîæåò èãðàòü âàæíóþ ðîëü â ïðîÿâëåíèè ëåêàðñòâåííûì ñðåäñòâîì áèîëîãè÷åñêîãî ïðîèñõîæäåíèÿ åãî ôóíêöèî- íàëüíûõ, ôàðìàêîêèíåòè÷åñêèõ, ôàðìàêîäèíà- ìè÷åñêèõ è èììóíîãåííûõ ñâîéñòâ, à òàêæå åãî óñòîé÷èâîñòè.

Ãëèêîçèëèðîâàíèå, â îòëè÷èå îò òðàíñêðèïöèè, ÿâëÿåòñÿ ïðîöåññîì ôåðìåíòà- òèâíîé ìîäèôèêàöèè, íå èìåþùèì ìàòðè÷íîãî óïðàâëåíèÿ, ðåçóëüòàòîì ÷åãî ÿâëÿåòñÿ ãåòåðî- ãåííîñòü ãëèêàíîâ. Íà ãåòåðîãåííîñòü òàêæå âëèÿåò ïðîöåññ ïîëó÷åíèÿ. Ïîýòîìó àíàëèç ãëè- êàíîâ ãëèêîïðîòåèíîâ ÿâëÿåòñÿ âàæíûì èñïû- òàíèåì äëÿ èäåíòèôèêàöèè èçìåíåíèé â ñõåìå ãëèêîçèëèðîâàíèÿ ãëèêîïðîòåèíîâ è (èëè) äëÿ íàáëþäåíèÿ çà ñòàáèëüíîñòüþ ñõåìû ãëèêîçè- ëèðîâàíèÿ ïðè ïðîèçâîäñòâå. Àíàëèç ãëèêàíîâ ìîæåò áûòü ñðàâíèòåëü- íûì ìåòîäîì, ïîòîìó ÷òî ïîëó÷åííàÿ èíôîðìà- öèÿ, ïðè ñðàâíåíèè ñ àíàëîãè÷íî àíàëèçèðóå- ìûì ñòàíäàðòíûì îáðàçöîì, ïîäòâåðæäàåò ñî- îòâåòñòâèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà.  äàííîé îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ïðåäñòàâëåíû ïîäõîäû, èñïîëüçóåìûå äëÿ àíà- ëèçà ãëèêàíîâ, âõîäÿùèõ â ñîñòàâ ãëèêîïðîòåè- íîâ è òðåáîâàíèÿ ê èñïîëüçîâàíèþ è âàëèäàöèè ìåòîäîâ. Àíàëèç ãëèêàíîâ íå ÿâëÿåòñÿ åäèíûì îáùèì ìåòîäîì, à âêëþ÷àåò â ñåáÿ ïðèìåíåíèå îïðåäå- ëåííûõ ïðîöåäóð è ïîëó÷åíèå ñïåöèôè÷åñêèõ ïðîôèëåé ãëèêàíîâ äëÿ êàæäîãî ãëèêîïðîòåèíà. Îñîáûå ïðîöåäóðû óêàçûâàþòñÿ â ñîîòâåòñò- âóþùèõ ÷àñòíûõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòüÿõ èëè íîðìàòèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó. 1.1. ÃËÈÊÎÇÈËÈÐÎÂÀÍÈÅ ÁÅËÊΠÑóùåñòâóåò 3 âèäà ôåðìåíòàòèâíîãî ãëèêî- çèëèðîâàíèÿ áåëêîâ: – N-ãëèêîçèëèðîâàíèå: ïðèñîåäèíåíèå îëè- ãîñàõàðèäîâ ÷åðåç àòîì àçîòà òåðìèíàëüíîé àìèäíîé ãðóïïû àñïàðàãèíà; – O-ãëèêîçèëèðîâàíèå: ïðèñîåäèíåíèå îëè- ãîñàõàðèäîâ ÷åðåç ãèäðîêñèëüíûå ãðóïïû ñåðè- íà, òðåîíèíà è (èëè) ãèäðîêñèïðîëèíà; – C-ãëèêîçèëèðîâàíèå: ïðèñîåäèíåíèå a-ìàí- íîïèðàíîçû ê Ñ2-óãëåðîäó èíäîëüíîãî öèêëà òðèïòîôàíà. Ïðèñîåäèíåíèå áåç ó÷àñòèÿ ôåðìåíòîâ, òàê- æå èçâåñòíîå êàê ãëèêèðîâàíèå, ìîæåò ïðîèñõî- äèòü ïðè èíêóáèðîâàíèè áåëêîâ ñ âîññòàíàâëè- âàþùèìè ñàõàðàìè. 1.2. ÃÅÒÅÐÎÃÅÍÍÎÑÒÜ ÃËÈÊÎÇÈËÈÐÎÂÀÍÈß ÁÅËÊΠÏðè ïðîèçâîäñòâå ãëèêîïðîòåèíîâ ìîæåò ïðîÿâëÿòüñÿ ðàçëè÷íàÿ ñòåïåíü ãåòåðîãåííîñòè ãëèêàíîâ. Íåîäíîðîäíîñòü ìîæåò ïîÿâèòüñÿ â ðåçóëüòàòå èçìåí÷èâîñòè: – ïî ñòåïåíè çàíÿòîñòè (ïîëíàÿ, ÷àñòè÷íàÿ, ñâîáîäíàÿ); – ïî òèïó (N- èëè O-îïîñðåäîâàííîå); – ïî ñòðóêòóðå îëèãîñàõàðèäà (ïðîòÿæåí- íîñòü, ðàçâåòâëåííîñòü, òèï ñîåäèíåíèÿ). Íåîäíîðîäíîñòü ãëèêîçèëèðîâàíèÿ ïðèâî- äèò ê íàëè÷èþ íàáîðà ãëèêîôîðì ó êàæäîãî îò- äåëüíîãî ãëèêîïðîòåèíà. Ýòè ðàçíîâèäíîñòè âîçíèêàþò èç-çà òîãî, ÷òî ïðîöåññ ãëèêîçèëèðî- âàíèÿ, â îòëè÷èå îò òðàíñêðèïöèîííûõ èëè òðàíñëÿöèîííûõ ïðîöåññîâ áèîñèíòåçà, íå èìå- åò ìàòðè÷íîãî óïðàâëåíèÿ è ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ïðîöåññ ïîñòòðàíñëÿöèîííîãî èçìåíåíèÿ ìîëå- êóëû. Ñòðóêòóðà ãëèêîçèëèðîâàíèÿ â âûáðàííîé ÷àñòè çàâèñèò îò ìíîãèõ ôàêòîðîâ, âêëþ÷àÿ ïðèñóòñòâèå ôåðìåíòîâ ãëèêîçèëòðàíñôåðàç è ýêçîãëèêîçèäàç (çàâèñÿùåå îò ñïåöèàëèçàöèè êëåòêè è (èëè) îò ñòåïåíè åå ðàçâèòèÿ), îáíàðó- æèâàåìûõ â àïïàðàòå Ãîëüäæè è â ýíäîïëàçìà- òè÷åñêîé ðåòèêóëÿðíîé ñåòè êëåòêè. Ïðîöåññ ãëèêîçèëèðîâàíèÿ çàâèñèò òàêæå îò ñòðóêòóðû áåëêà, ïðîöåññà ïîëó÷åíèÿ, ýêñïðåñ- ñèè ñèñòåìû «õîçÿèí-âåêòîðíàÿ ÄÍÊ» è îò ðå- æèìà êóëüòèâèðîâàíèÿ êëåòîê. 2. ÌÅÒÎÄÛ ÀÍÀËÈÇÀ ÃËÈÊÀÍΠÃåòåðîãåííîñòü â ãëèêîçèëèðîâàíèè ìîæåò áûòü îöåíåíà ÷åòûðüìÿ îòäåëüíûìè è âçàèìî- äîïîëíÿþùèìè ìåòîäàìè: – àíàëèç èíòàêòíîãî ãëèêîïðîòåèíà; – àíàëèç ãëèêîïåïòèäîâ; – àíàëèç îòùåïëåííûõ ãëèêàíîâ; – àíàëèç ìîíîñàõàðèäîâ. 39 40 Ðèñóíîê 2.1.2.56.-1. — Îáùàÿ ñõåìà ìåòîäèê àíàëèçà ãëèêàíîâ.

Óñëîâíûå îáîçíà÷åíèÿ: ÊÝ — êàïèëëÿðíûé ýëåêòðîôîðåç; ÀÎÕ — àíèîíîîáìåííàÿ õðîìàòîãðàôèÿ ïðè âûñîêèõ çíà÷åíèÿõ pH ñ èìïóëüñíûì àìïåðîìåò- ðè÷åñêèì äåòåêòèðîâàíèåì; ÈÝÔ — èçîýëåêòðè÷åñêîå ôîêóñèðîâàíèå; ÆÕ — æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ; ÌÑ — ìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ; ÏÃÕ — õðîìàòîãðàôèÿ ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîðèñòîãî ãðàôèòèðîâàííîãî óãëåðî- äà; ÄÑÍ-ÏÀÀà ýëåêòðîôîðåç — ýëåêòðîôîðåç ñ íàòðèÿ äîäåöèëñóëüôàòîì â ïîëèàêðèëàìèäíîì ãåëå.  íàñòîÿùåé ñòàòüå ïðåäñòàâëåíû ìåòîäû è îáùèå òðåáîâàíèÿ, ïðèìåíÿåìûå äëÿ àíàëèçà ãëèêàíîâ â ãëèêîïðîòåèíàõ, ñîäåðæàùèõ N- è O-ñâÿçàííûå ãëèêàíû. Àíàëèç ãëèêàíîâ îáû÷íî ïðåäñòàâëÿåò ñî- áîé ìíîãîñòóïåí÷àòûé ïðîöåññ. Ñóùåñòâóåò áîëüøîå êîëè÷åñòâî ìåòîäèê àíàëèçà ãëèêàíîâ, îáóñëîâëåííîå ðàçíîîáðàçèåì è ñëîæíîñòüþ ãëèêàíîâûõ ñòðóêòóð, ÷èñëîì äîñòóïíûõ ìåòî- äèê è ñèñòåì äåòåêòèðîâàíèÿ, à òàêæå øèðîêèì âûáîðîì ïîäõîäîâ, â çàâèñèìîñòè îò óðîâíÿ íå- îáõîäèìîé èíôîðìàöèè. Íà ðèñóíêå 2.1.2.56.-1 ïðåäñòàâëåíà ñõåìà àíàëèòè÷åñêèõ ìåòîäèê àíàëèçà ãëèêàíîâ, êîòî- ðàÿ ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàíà äëÿ âûáðàííîãî ïîäõîäà (ïîäõîäîâ). Âñëåäñòâèå ðàçíîîáðàçèÿ è ñëîæíîñòè ñòðóêòóðû è ïðîèñõîæäåíèÿ ãëèêà- íîâ, äîñòóïíû ðàçëè÷íûå âàðèàöèè îäíèõ è òåõ æå ìåòîäèê è óñëîâèé. Âûäåëåíèå è î÷èñòêà. Âûäåëåíèå è î÷èñò- êà ìîãóò áûòü íåîáõîäèìû äëÿ àíàëèçà ôàðìà- öåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé èëè äëÿ àíàëèçà ëåêàð- ñòâåííûõ ôîðì, ñîäåðæàùèõ ìåøàþùèå âñïî- ìîãàòåëüíûå âåùåñòâà, è îïèñûâàþòñÿ â ÷àñòíûõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòüÿõ èëè íîðìà- òèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó. 2.1. ÀÍÀËÈÇ ÈÍÒÀÊÒÍÛÕ ÃËÈÊÎÏÐÎÒÅÈÍΠÀíàëèç èíòàêòíîãî ãëèêîïðîòåèíà ïðåäîñ- òàâëÿåò èíôîðìàöèþ î ãëèêîçèëèðîâàíèè ãëè- êîïðîòåèíà â öåëîì.  òîì ñëó÷àå, åñëè ìîëåêóëà êðóïíàÿ è èìå- åò ìíîãî÷èñëåííûå ïîëîæåíèÿ ãëèêîçèëèðîâà- íèÿ, ýòîò ïîäõîä äàåò îãðàíè÷åííîå êîëè÷åñòâî èíôîðìàöèè. Ìîãóò èñïîëüçîâàòüñÿ òàêèå ìåòîäû, êàê êà- ïèëëÿðíûé ýëåêòðîôîðåç (2.1.2.37) è ìàññ-ñïåê- òðîìåòðèÿ (2.1.2.51). Ìåòîäû, ñ îñíîâó êîòîðûõ ïîëîæåíû ñâîéñòâà, ñâÿçàííûå ñ ðàçìåðîì ìî- ëåêóëû, òàêèå êàê ýêñêëþçèîííàÿ õðîìàòîãðà- ôèÿ (2.1.2.29) è ýëåêòðîôîðåç ñ íàòðèÿ äîäåöèë- ñóëüôàòîì â ïîëèàêðèëàìèäíîì ãåëå (2.1.2.30), ìîãóò ïðåäîñòàâëÿòü èíôîðìàöèþ î ñîñòîÿíèè ãëèêîçèëèðîâàíèÿ áåëêà. Åñëè ñòåïåíü ñèàëèðî- âàíèÿ çíà÷èòåëüíî âëèÿåò íà áèîëîãè÷åñêóþ àê- òèâíîñòü ãëèêîïðîòåèíà, òî äëÿ åå ìîíèòîðèíãà ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû èîíîîáìåííàÿ õðîìà- òîãðàôèÿ (2.1.2.36), èçîýëåêòðè÷åñêîå ôîêóñè- ðîâàíèå (2.1.2.38) èëè êàïèëëÿðíûé ýëåêòðîôî- ðåç (2.1.2.37). Äîëæíà áûòü âûáðàíà ìåòîäèêà, îáåñïå÷èâàþùàÿ äîñòîâåðíóþ êîððåëÿöèþ ìå- æäó ñòåïåíüþ ñèàëèðîâàíèÿ è áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ ïðîäóêòà. 2.2. ÀÍÀËÈÇ ÃËÈÊÎÏÅÏÒÈÄΠÀíàëèç ãëèêîïåïòèäîâ îáåñïå÷èâàåò ïîëó- ÷åíèå èíôîðìàöèè î ñâîéñòâàõ ãëèêîçèëèðîâà- íèÿ, õàðàêòåðíûõ äëÿ äàííîãî ó÷àñòêà ìîëåêó- ëû, ñòåïåíè çàíÿòîñòè è î ñòðóêòóðå îëèãîñàõà- ðèäîâ. Îí âêëþ÷àåò ïðîòåîëèòè÷åñêîå ðàñùåï- ëåíèå ãëèêîïðîòåèíîâ. Ïîäõîäû ê ðàñùåïëå- íèþ áåëêîâîãî îñòîâà â çàâèñèìîñòè îò ìåñòî- ïîëîæåíèÿ ïðåäñòàâëåíû â îáùåé ôàðìàêîïåé- íîé ñòàòüå 2.1.2.39. Ïåïòèäíîå êàðòèðîâàíèå. Ïîñëå ïðîòåîëèçà ãëèêîïðîòåèíà ìîãóò áûòü âûáðàíû ñëåäóþùèå ïîäõîäû. Ïðÿìîé àíàëèç ìåòîäîì ìàññ-ñïåêòðîìåò- ðèè (2.1.2.51). Íåîáõîäèìî òùàòåëüíî ñëåäèòü, ÷òîáû ñèãíàë ãëèêîïåïòèäà íå ïîäàâëÿëñÿ ïðè- ñóòñòâèåì äðóãèõ ïåïòèäîâ, òàê êàê ãëèêîïåïòè- äû ñîñòàâëÿþò ìàëóþ äîëþ â îáùåé ñìåñè ïåï- òèäîâ è èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà ó íèõ ìåíüøå, ÷åì ó íåãëèêîçèëèðîâàííûõ ïåïòèäîâ. Ðàçäåëåíèå, ïðåäøåñòâóþùåå àíàëèçó ìå- òîäîì ìàññ-ñïåêòðîìåòðèè. Ýòà äîïîëíèòåëü- íàÿ ñòàäèÿ ïîìîãàåò ïðåîäîëåòü ïðîáëåìû, óïî- ìÿíóòûå âûøå. Ìåòîäû îáîãàùåíèÿ è ôðàêöèî- íèðîâàíèÿ ìîãóò ñî÷åòàòüñÿ ñ ïðÿìûì àíàëèçîì êàê ïàðàëëåëüíî, òàê è ïîñëåäîâàòåëüíî.

Òàêèå ìåòîäû ðàçäåëåíèÿ êàê æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðà- ôèÿ (2.1.2.28) è êàïèëëÿðíûé ýëåêòðîôîðåç (2.1.2.37) òàêæå ïðèãîäíû. Ýòè ìåòîäû ìîãóò áûòü ñîâìåùåíû ñ ìåòîäîì ìàññ-ñïåêòðîìåò- ðèè, ïîçâîëÿÿ ïîëó÷àòü ðåçóëüòàòû â ðåæèìå ðå- àëüíîãî âðåìåíè (on-line). Äåãëèêîçèëèðîâàíèå ãëèêîïåïòèäîâ. Ñðàâ- íåíèå ïåïòèäíûõ êàðò, ïîëó÷åííûõ ïîñëå ïðî- òåîëèòè÷åñêîãî ðàñùåïëåíèÿ èíòàêòíîãî ãëèêî- ïðîòåèíà è äåãëèêîçèëèðîâàííîãî äî èëè ïîñëå ïðîòåîëèòè÷åñêîãî ðàñùåïëåíèÿ, äàåò âîçìîæ- íîñòü èäåíòèôèöèðîâàòü ðàçëè÷íûå ìîëåêóëû. Ïåïòèäíàÿ ìàññà ïðåäîñòàâëÿåò èíôîðìàöèþ î ãëèêîçèëèðîâàííûõ ó÷àñòêàõ è ñ ïîìîùüþ ïîä- ñ÷åòà ðàçíèöû ìàññ ìåæäó èíòàêòíûì è äåãëè- êîçèëèðîâàííûì ãëèêîïåïòèäîì ìîæíî ïîëó- ÷èòü èíôîðìàöèþ î ñîñòàâå è ãåòåðîãåííîñòè ïðèñîåäèíåííûõ ãëèêàíîâ. Ñïîñîáû äåãëèêîçè- ëèðîâàíèÿ áåëêîâîãî îñòîâà ïðåäñòàâëåíû â ðàçäåëå 2.3.1 äàííîé îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüè. Ñòàäèÿ ðàçäåëåíèÿ ìîæåò áûòü ïðîâåäå- íà äî èëè ïîñëå äåãëèêîçèëèðîâàíèÿ. 2.3. ÀÍÀËÈÇ ÎÒÙÅÏËÅÍÍÛÕ ÃËÈÊÀÍΠÏðîâåäåíèå àíàëèçà îòùåïëåííûõ ãëèêàíîâ ïîçâîëÿåò ïîëó÷àòü èíôîðìàöèþ î ìíîãîîáðàç- 41 íûõ ñåìåéñòâàõ ãëèêàíîâ, ñâÿçàííûõ ñ áåëêîì (ïðîôèëèðîâàíèå ïî õàðàêòåðó âåòâëåíèÿ: äâîéíîå, òðîéíîå èëè áîëåå âûñîêîãî ïîðÿäêà). Íà ýòîé ñòàäèè îïðåäåëÿþò òàêæå ñòåïåíü ñèà- ëèðîâàíèÿ.  çàâèñèìîñòè îò âûáðàííîãî ìåòî- äà, äëÿ äåòåêòèðîâàíèÿ ãëèêàíîâ ìîæåò áûòü íåîáõîäèìà ïðåäâàðèòåëüíàÿ äåðèâàòèçàöèÿ/ ìå÷åíèå. Àíàëèç îòùåïëåííûõ ãëèêàíîâ îáû÷íî âêëþ÷àåò â ñåáÿ îòùåïëåíèå è âûäåëåíèå ãëèêà- íîâ èç ðåàêöèîííîé ñìåñè, ñîïðîâîæäàþùèåñÿ ñ ïîñëåäóþùèì ìàðêèðîâàíèåì è (èëè) äåðèâà- òèçàöèåé ãëèêàíîâ (ãäå ýòî íåîáõîäèìî), ïîñëå ÷åãî ãëèêàíû ïðîôèëèðóþò â ñîîòâåòñòâèè ñî ñïåöèôè÷åñêèìè ñâîéñòâàìè (ôðàêöèîíèðîâà- íèå èëè ðàçäåëåíèå). 2.3.1. Îòùåïëåíèå ãëèêàíîâ Âûáîð ìåòîäà îòùåïëåíèÿ ãëèêàíîâ çàâèñèò îò ïðèðîäû ãëèêîïðîòåèíà. Âûáîð ðåàêòèâà, ïðèìåíÿåìîãî äëÿ îòùåïëåíèÿ, çàâèñèò îò âû- áîðà òèïà îòùåïëåíèÿ è îò îáúåìà òîé èíôîð- ìàöèè, êîòîðàÿ äîëæíà áûòü ïîëó÷åíà â ðåçóëü- òàòå èñïûòàíèÿ: ìîæåò ïðèìåíÿòüñÿ ôåðìåíòà- òèâíîå èëè õèìè÷åñêîå îòùåïëåíèå.  òàáëèöå 2.1.2.56.-1 ïðåäñòàâëåí íåïîëíûé ïåðå÷åíü ðå- àêòèâîâ ôåðìåíòàòèâíîãî îòùåïëåíèÿ è èõ ñóá- ñòðàòíàÿ ñïåöèôè÷íîñòü. Îáû÷íî ýôôåêòèâíîñòü ðàñùåïëåíèÿ çàâè- ñèò îò äîñòóïíîñòè ãëèêàíîâ â ãëèêîïðîòåèíå. Ñëåäîâàòåëüíî, äëÿ óâåëè÷åíèÿ äîñòóïíîñòè ìåñò ãëèêîçèëèðîâàíèÿ áåëîê ìîæåò áûòü äåíà- òóðèðîâàí, çà èñêëþ÷åíèåì ñëó÷àåâ, êîãäà íåîá- õîäèìî ïðîôèëèðîâàòü ãëèêàíû ïî èõ ïîëîæå- íèþ â ñòðóêòóðå ìîëåêóëû (íà ïîâåðõíîñòè èëè ïîãðóæåíû â ñòðóêòóðó ìîëåêóëû ïðîòåèíà). Äëÿ îòùåïëåíèÿ ãëèêàíîâ ìîãóò áûòü èñ- ïîëüçîâàíû õèìè÷åñêèå ðåàêòèâû, íàïðèìåð, äëÿ îòùåïëåíèÿ ïî òèïó â-ýëèìèíèðîâàíèÿ èñ- ïîëüçóþò ãèäðàçèí èëè áîðîãèäðèäû ùåëî÷íûõ ìåòàëëîâ. 2.3.2. Àíàëèç ãëèêàíîâ Àíàëèç îòùåïëåííûõ ãëèêàíîâ èëè èõ ïðî- ôèëèðîâàíèå ìîãóò áûòü îñóùåñòâëåíû ñ ïîìî- ùüþ ìåòîäîâ õðîìàòîãðàôèè, ýëåêòðîôîðåçà, 42 Òàáëèöà 2.1.2.56.-1.

— Ïåðå÷åíü ðåàêòèâîâ ôåðìåíòàòèâíîãî îòùåïëåíèÿ è èõ ñóáñòðàòíàÿ ñïåöèôè÷íîñòü Ðåàêòèâû Ñïåöèôè÷íîñòü Îòùåïëåíèå N-ñâÿçàííûõ ãëèêàíîâ Ïåïòèä-N4-(N-àöåòèë-b-ãëþêîçàìèíèë)àñïàðà- ãèíàìèäàçà (ÊÔ* 3.5.1.52) Ãèäðîëèç N4-(àöåòèë-b-D-ãëþêîçàìèíèë)àñïàðàãè- íîâûõ îñòàòêîâ, â êîòîðûõ îñòàòîê ãëþêîçàìèíà ìîæåò áûòü äàëåå ãëèêîçèëèðîâàí, ñ ïîëó÷åíèåì (çàìåùåííîãî) N-àöåòèë-b-D-ãëþêîçàìèíèëàìèíà è ïåïòèäà, ñîäåðæàùåãî îñòàòîê àñïàðòàòà – Ïåïòèä-N-ãëèêîçèäàçà F (PNGase F) Îòùåïëÿåò öåïü ó N-ñâÿçàííîãî ãëèêàíà, íî íå îòùåïëÿåò öåïü N- ñâÿçàííîãî ãëèêàíà, â êîòîðîé ïðèñóòñòâóåò ÿäðî ôóêîçû, ñâÿçàííîå ïî ïîëîæåíèþ (a1-3) – Ïåïòèä-N-ãëèêîçèäàçà A (PNGase A) Îòùåïëÿåò öåïü ó N- ñâÿçàííîãî ãëèêàíà, â êîòîðîé ïðèñóòñòâóåò ÿäðî ôóêîçû, ñâÿçàííîå ïî ïîëîæåíèþ (a1-3) Ìàííîçèë-ãëèêîïðîòåèíýíäî-b-N-àöåòèëãëþ- êîçàìèíèäàçà (ÊÔ* 3.2.1.96) Ýíäîãèäðîëèçóåò áëîê N,N¢-äèàöåòèëõèòîáèîçèë â ãëèêîïåïòèäàõ è (èëè) ãëèêîïðîòåèíàõ ñ âûñîêèì ñîäåðæàíèåì ìàííîçû, ñîäåðæàùèõ [Man(GlcNAc)2]Asn – Ýíäî-b-N-àöåòèëãëþêîçàìèíèäàçà F (ýíäî F) Îòùåïëåíèå ãèáðèäíûõ è êîìïëåêñíûõ îëèãîñàõàðè- äîâ ñ âûñîêèì ñîäåðæàíèåì ìàííîçû – Ýíäî-b-N-àöåòèëãëþêîçàìèíèäàçà H (ýíäî H) Îòùåïëåíèå ãèáðèäíûõ îëèãîñàõàðèäîâ ñ âûñîêèì ñîäåðæàíèåì ìàííîçû Îòùåïëåíèå Î-ñâÿçàííûõ ãëèêàíîâ Ãëèêîïåïòèä a-N-àöåòèëãàëàêòîçàìèíèäàçà (ÊÔ* 3.2.1.97)** Ãèäðîëèçóåò òåðìèíàëüíûå ó÷àñòêè D-ãàëàêòîçèë-N-àöåòèë-a-D-ãàëàêòîçàìèíà * Êîä ôåðìåíòà â ñîîòâåòñòâèè ñ êëàññèôèêàöèåé Ìåæäóíàðîäíîãî ñîþçà ïî áèîõèìèè è ìîëåêóëÿðíîé áèî- ëîãèè (IUBMB). ** Äàííûé ôåðìåíò èñïîëüçóåòñÿ ðåäêî èç-çà ñâîåé âûñîêîé ñïåöèôè÷íîñòè ê ñóáñòðàòó. ìàññ-ñïåêòðîìåòðèè èëè êîìáèíèðîâàíèÿ ýòèõ ìåòîäîâ. Âûáîð ìåòîäà ïðîèçâîäÿò â çàâèñèìî- ñòè îò ïðèðîäû ãëèêàíîâ è îáúåìà íåîáõîäèìîé èíôîðìàöèè. Àíàëèç ãëèêàíîâ ïðåäîñòàâëÿåò èíôîðìà- öèþ î ðàçëè÷íûõ âèäàõ ãëèêàíîâ, ïðèñóòñòâóþ- ùèõ â áåëêå (ñ âûñîêèì ñîäåðæàíèåì ìàííîçû, êîìïëåêñíûõ, ãèáðèäíûõ). Èíôîðìàöèÿ îá îò- íîñèòåëüíûõ êîëè÷åñòâàõ ðàçâåòâëåííûõ ñòðóê- òóð ìîæåò áûòü ïîëó÷åíà ñ ïîìîùüþ àíàëèçà äåñèàëèðîâàííûõ ãëèêàíîâ. Åñëè íåîáõîäèìî ðàçäåëåíèå â êà÷åñòâå îáÿ- çàòåëüíîé ñòàäèè, òî â êà÷åñòâå ïðîìåæóòî÷íûõ ìåòîäîâ èñïîëüçóþò ìåòîäû æèäêîñòíîé õðîìà- òîãðàôèè (2.1.2.28) è êàïèëëÿðíîãî ýëåêòðîôî- ðåçà (2.1.2.37). Æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ (2.1.2.28) ìîæåò ïðèìåíÿòüñÿ êàê ïðåïàðàòèâ- íàÿ, ñî ñáîðîì îòäåëüíûõ ôðàêöèé (îáû÷íî òðå- áóåòñÿ ìå÷åíèå), èëè ìîæåò áûòü ñîâìåùåíà íå- ïîñðåäñòâåííî ñ ìàññ-ñïåêòðîìåòðèåé (2.1.2.51). 2.3.2.1. Àíàëèç íåìå÷åíûõ ãëèêàíîâ Àíàëèç íàòèâíûõ íåìå÷åíûõ ãëèêàíîâ ìî- æåò îñóùåñòâëÿòüñÿ ìåòîäàìè àíèîíîîáìåííîé õðîìàòîãðàôèè ïðè âûñîêèõ çíà÷åíèÿõ pH ñ èì- ïóëüñíûì àìïåðîìåòðè÷åñêèì äåòåêòèðîâàíè- åì, õðîìàòîãðàôèè ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîðèñòîãî ãðàôèòèðîâàííîãî óãëåðîäà, èëè ìàññ-ñïåêòðî- ìåòðèè (2.1.2.51). Ìåòîä àíèîíîîáìåííîé õðîìàòîãðàôèè ïðè âûñîêèõ çíà÷åíèÿõ pH ñ èìïóëüñíûì àìïåðî- ìåòðè÷åñêèì äåòåêòèðîâàíèåì èìååò âûñîêóþ ÷óâñòâèòåëüíîñòü, à òàêæå ïîçâîëÿåò ðàçäåëÿòü èçîìåðû, îòëè÷àþùèåñÿ ïî ìåñòó ñâÿçûâàíèÿ. Ôàêòîðû îòêëèêà ðàçëè÷íûõ ñèãíàëîâ ó îëèãî- ñàõàðèäîâ ðàçëè÷íîé ñòðóêòóðû íåîäèíàêîâû. Àáñîëþòíîå êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå ãëè- êàíà çàòðóäíèòåëüíî, êðîìå ñëó÷àåâ, êîãäà äîñ- òóïíà èíôîðìàöèÿ î áèáëèîòåêå ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ îëèãîñàõàðèäîâ. Êîëè÷åñòâåííîå îï- ðåäåëåíèå âîçìîæíî â ñðàâíåíèè ñ õîðîøî èñ- ñëåäîâàííûì ñòàíäàðòíûì îáðàçöîì èñïûòóåìîãî âåùåñòâà èëè ïóòåì ñîîòíåñåíèÿ ïëîùàäè ïèêà êàæäîãî ãëèêàíà ñ îáùåé ïëîùà- äüþ ïèêîâ âñåõ ãëèêàíîâ íà ïðîôèëå.

Õðîìàòîãðàôèÿ ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîðèñòî- ãî ãðàôèòèðîâàííîãî óãëåðîäà ìîæåò ïðèìå- íÿòüñÿ äëÿ ðàçäåëåíèÿ ãëèêàíîâ â åñòåñòâåííîì ñîñòîÿíèè, ïîñêîëüêó èñïîëüçóåìûå ïðè ýòîì êîëîíêè ïî ñâîåé âûñîêîé ñåëåêòèâíîñòè ñðàâ- íèìû ñ îáû÷íî èñïîëüçóåìûìè îáðàùåííî- ôàçíûìè êîëîíêàìè (íåïîëÿðíûìè). Ñî÷åòàí- íîå ïðèìåíåíèå ìåòîäîâ õðîìàòîãðàôèè ñ èñ- ïîëüçîâàíèåì ïîðèñòîãî ãðàôèòèðîâàííîãî óã- ëåðîäà è ìàññ-ñïåêòðîìåòðèè ñ èîíèçàöèåé ýëåêòðîðàñïûëåíèåì ìîæåò èñïîëüçîâàòüñÿ äëÿ ïðÿìîãî àíàëèçà ãëèêàíà. 2.3.2.2. Àíàëèç ìàðêèðîâàííûõ ãëèêàíîâ Ìàðêèðîâàíèå ãëèêàíîâ Òèï ïðîèçâîäèìîãî õèìè÷åñêîãî èçìåíåíèÿ (äåðèâàòèçàöèè) çàâèñèò îò ìåòîäà, èñïîëüçóå- ìîãî äëÿ äåòåêòèðîâàíèÿ ãëèêàíîâ: ÓÔ èëè ôëóîðåñöåíòíûé. Äåðèâàòèçàöèÿ ñ ôëóîðåñöåíòíûìè ìåòêà- ìè — íàèáîëåå èñïîëüçóåìûé ìåòîä äëÿ ìàðêè- ðîâàíèÿ ãëèêàíîâ ïî âîññòàíàâëèâàþùåìó êîí- öó ìîëåêóëû ïóòåì âîññòàíîâèòåëüíîãî àìèíè- ðîâàíèÿ. Îäíà ìåòêà ìîæåò áûòü ïðèñîåäèíåíà ê êàæäîìó îäèíàðíîìó ìîíî- è îëèãîñàõàðèäó, ïîçâîëÿÿ îïðåäåëèòü ìîëÿðíîå êîëè÷åñòâî.  òàáëèöå 2.1.2.56.-2 ïðèâåäåí íåïîëíûé ñïè- ñîê îáû÷íî èñïîëüçóåìûõ ôëóîðåñöåíòíûõ ìàðêåðîâ è ïîäõîäÿùèõ àíàëèòè÷åñêèõ ìåòî- äîâ. Äëÿ äåòåêòèðîâàíèÿ ñ èñïîëüçîâàíèåì òîëü- êî ìàññ-ñïåêòðîìåòðèè (2.1.2.51) òàêæå ìîæåò èñïîëüçîâàòüñÿ ïðåäåëüíîå ìåòèëèðîâàíèå ãëè- 43 Òàáëèöà 2.1.2.56.-2. — Ïðèìåðû ôëóîðåñöåíòíûõ ìåòîê è ïîäõîäÿùèõ àíàëèòè÷åñêèõ ìåòîäîâ Íàçâàíèå Àááðåâèàòóðà Àíàëèòè÷åñêèå ìåòîäû 2-Àìèíîáåíçîéíàÿ êèñëîòà 2-AA Æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ (2.1.2.28), ìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ (2.1.2.51) 2-Àìèíîáåíçàìèä 2-AB Æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ (2.1.2.28), ìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ (2.1.2.51) 2-Àìèíîïèðèäèí 2-AP Æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ (2.1.2.28), ìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ (2.1.2.51) 2-Àìèíî-9(10H)-àêðèäèíîí AMAC Ãåëü-ýëåêòðîôîðåç (2.1.2.30) Òðèíàòðèÿ 8-àìèíîïèðèí- 1,3,6-òðèñóëüôîíàò APTS Êàïèëëÿðíûé ýëåêòðîôîðåç (2.1.2.37) êàíîâ. Îíî îñíîâàíî íà ìåòèëèðîâàíèè îëèãî- ñàõàðèäîâ. Àíàëèç ìàðêèðîâàííûõ ãëèêàíîâ Ìàðêèðîâàííûå ãëèêàíû ìîãóò áûòü ïðî- àíàëèçèðîâàíû ñ ïîìîùüþ òàêèõ àíàëèòè÷å- ñêèõ ìåòîäîâ, êàê æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ (2.1.2.28), êàïèëëÿðíûé ýëåêòðîôîðåç (2.1.2.37) è ìàññ-ñïåêòðîìåòðèÿ (2.1.2.51).  ñîîòâåòñòâèè ñî ñâîéñòâàìè ðàçäåëÿþ- ùèõñÿ ãëèêàíîâ, îíè ìîãóò áûòü ïðîôèëèðîâà- íû è îïðåäåëåíû êîëè÷åñòâåííî ñ èñïîëüçîâà- íèåì ïîäõîäÿùåãî ìàðêåðà ñ ïîìîùüþ íåñêîëü- êèõ ñèñòåì æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèè (2.1.2.28): îáðàùåííî-ôàçíàÿ (ðàçäåëåíèå ïî ãèäðîôîáíîñòè), íîðìàëüíî-ôàçíàÿ (ðàçäåëå- íèå ïî ðàçìåðó), è àíèîíîîáìåííàÿ (ðàçäåëåíèå ïî çàðÿäó) æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ. 2.4. ÀÍÀËÈÇ ÌÎÍÎÑÀÕÀÐÈÄΠÀíàëèç ìîíîñàõàðèäîâ äàåò èíôîðìàöèþ î ìîíîñàõàðèäíîé ñòðóêòóðå ãëèêîïðîòåèíà. Àíàëèç ìîæåò áûòü âûïîëíåí êàê êîëîðèìåòðè- ÷åñêèìè, òàê è ðàçäåëèòåëüíûìè ìåòîäàìè. 2.4.1. Êîëîðèìåòðè÷åñêèå ìåòîäû Êîëîðèìåòðè÷åñêèå ìåòîäû, îñíîâàííûå íà õèìè÷åñêîì îêðàøèâàíèè, äàþò èíôîðìàöèþ î êîëè÷åñòâå ñïåöèôè÷åñêèõ êëàññîâ ñàõàðîâ, òà- êèõ êàê ñèàëîâûå êèñëîòû, íåéòðàëüíûå ñàõàðà è ãåêñîçàìèíû. 2.4.2. Ìåòîäû ðàçäåëåíèÿ Ìåòîäû ðàçäåëåíèÿ ïîçâîëÿþò ïîëó÷àòü êî- ëè÷åñòâåííûå äàííûå îá îáùåì ñîñòàâå ìîíî- ñàõàðèäîâ. Ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì ìåòîäîâ òðå- áóåòñÿ ïðåäâàðèòåëüíûé êèñëîòíûé ãèäðîëèç îëèãîñàõàðèäíûõ öåïåé èíòàêòíûõ ãëèêîïðî- òåèíîâ èëè îòùåïëåííûõ ãëèêàíîâ. Äëÿ îòùåï- ëåíèÿ ñèàëîâûõ êèñëîò ïðèìåíÿåòñÿ óìåðåí- íûé êèñëîòíûé ãèäðîëèç èëè ôåðìåíòàòèâíàÿ îáðàáîòêà. Ñòàäèÿ ãèäðîëèçà — ýòî çíà÷èìûé èñòî÷íèê âàðèàáåëüíîñòè, è îíà òðåáóåò ïðî- äóêò-ñïåöèôè÷íîé âàëèäàöèè.

Ìåòîäû ðàçäåëåíèÿ è êîëè÷åñòâåííîãî îï- ðåäåëåíèÿ ìîíîñàõàðèäîâ âêëþ÷àþò: – èñïîëüçîâàíèå àíèîíîîáìåííîé õðîìàòî- ãðàôèè ïðè âûñîêèõ çíà÷åíèÿõ pH ñ èìïóëüñ- íûì àìïåðîìåòðè÷åñêèì äåòåêòèðîâàíèåì è õðîìàòîãðàôèè ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîðèñòîãî ãðàôèòèðîâàííîãî óãëåðîäà ñ ìàññ-ñïåêòðîìåò- ðè÷åñêèì äåòåêòèðîâàíèåì, ÷òî ïîçâîëÿåò îï- ðåäåëÿòü ìîëüíûå êîëè÷åñòâà ìîíîñàõàðèäîâ â åñòåñòâåííîì ñîñòîÿíèè (ñèàëîâûå êèñëîòû, íåéòðàëüíûå ñàõàðà è àëüäèòû); – ôëóîðîôîðíîå ìå÷åíèå ìîíîñàõàðèäîâ ñ ïîñëåäóþùèì èñïîëüçîâàíèåì ìåòîäîâ ðàçäå- ëåíèÿ, òàêèõ êàê îáðàùåííî-ôàçíàÿ èëè èîíî- îáìåííàÿ õðîìàòîãðàôèÿ èëè êàïèëëÿðíûé ýëåêòðîôîðåç. 3. ÎÖÅÍÊÀ È ÀÍÀËÈÇ ÐÅÇÓËÜÒÀÒΠÈññëåäîâàíèå è îöåíêà ðåçóëüòàòîâ, ïîëó- ÷åííûõ â õîäå àíàëèçà ãëèêàíîâ, ïðîèçâîäèòñÿ ñ 3 ðàçëè÷íûìè öåëÿìè: – ïîäòâåðæäåíèå ïîäëèííîñòè èíäèâèäó- àëüíûõ ñòðóêòóð èëè ãðóïï ñòðóêòóð; – ïîäòâåðæäåíèå ñîîòâåòñòâèÿ èñïûòóåìî- ãî îáðàçöà ïðè êà÷åñòâåííîì àíàëèçå; – ïîäòâåðæäåíèå ñîîòâåòñòâèÿ èñïûòóåìî- ãî îáðàçöà ïðè êîëè÷åñòâåííîì àíàëèçå. Îñîáûå ñîîáðàæåíèÿ êàñàòåëüíî ñòàíäàðò- íûõ îáðàçöîâ è ìåòîäîâ ïðîâåäåíèÿ êàæäîé ñòàäèè àíàëèçà ïðèâåäåíû â ðàçäåëàõ 4 è 5 ñîîò- âåòñòâåííî. 3.1. ÏÎÄÒÂÅÐÆÄÅÍÈÅ ÏÎÄËÈÍÍÎÑÒÈ ÈÍÄÈÂÈÄÓÀËÜÍÛÕ ÑÒÐÓÊÒÓÐ ÈËÈ ÃÐÓÏÏ ÑÒÐÓÊÒÓÐ Àíàëèòè÷åñêîé ìèøåíüþ ìåòîäà àíàëèçà ãëèêàíîâ ìîæåò áûòü îòäåëüíûé ìîíîñàõàðèä (íàïðèìåð, ñèàëîâàÿ êèñëîòà, ôóêîçà), îïðåäå- ëåííàÿ îëèãîñàõàðèäíàÿ ñòðóêòóðà (íàïðèìåð, òåòðà-ñèàëèëîâûé, òåòðà-àíòåííàëüíûé ãëèêàí) èëè ãðóïïà ñòðóêòóð, èìåþùàÿ îáùóþ àíàëèòè- ÷åñêóþ îñîáåííîñòü (íàïðèìåð, òåòðà-ñèàëèëî- âûå ãëèêàíû, òðè-àíòåííàëüíûå ãëèêàíû, ãëèêî- ïðîòåèíîâûå èçîôîðìû ñ îäèíàêîâûì çàðÿäîì). Ïîäòâåðæäåíèå ïîäëèííîñòè àíàëèòè÷åñêîé ìèøåíè — ýòî âàæíåéøèé øàã ïðè àíàëèçå è îöåíêå ðåçóëüòàòîâ, êîòîðûé ìîæåò áûòü äîñ- òèãíóò àáñîëþòíî ïóòåì ïîäòâåðæäåíèÿ ìîëå- êóëÿðíîé ñòðóêòóðû, èëè ñðàâíèòåëüíî — ïó- òåì ñðàâíåíèÿ ñ ñîîòâåòñòâóþùèì ñòàíäàðò- íûì îáðàçöîì. 3.1.1. Àáñîëþòíîå ïîäòâåðæäåíèå ïîäëèííîñòè Àáñîëþòíîå ïîäòâåðæäåíèå ïîäëèííîñòè ãëèêàíîâûõ ñòðóêòóð âûïîëíÿåòñÿ îáû÷íî âî âðåìÿ ðàçðàáîòêè ëåêàðñòâåííîãî ñðåäñòâà, è îíî íå îáÿçàòåëüíî ÿâëÿåòñÿ öåëüþ ðóòèííîãî àíàëèçà. Ïîäëèííîñòü àíàëèòè÷åñêîé ìèøåíè óñòàíàâëèâàþò ñ ïîìîùüþ èçâåñòíîãî ìîëåêó- 44 ëÿðíîãî ñâîéñòâà ìîëåêóëû. Òàêàÿ àáñîëþòíàÿ èäåíòèôèêàöèÿ èíäèâèäóàëüíûõ ñòðóêòóð òðå- áóåò ìíîãîñòóïåí÷àòûõ ïîäõîäîâ, âêëþ÷àþùèõ â ñåáÿ ôåðìåíòàòèâíûå è õèìè÷åñêèå ðåàêöèè, ðàçäåëèòåëüíûå ìåòîäèêè è on-line èëè off-line ìåòîäû äåòåêòèðîâàíèÿ, è îáû÷íî èñïîëüçóåò â êà÷åñòâå îñíîâîïîëàãàþùåãî ïðèíöèïà äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ñòðóêòóðû îòíîøåíèå çàðÿäà ê ìàññå ìîëåêóëÿðíîãî èîíà, êîòîðîå îïðåäåëÿ- åòñÿ ïîäõîäÿùèì ìàññ-ñïåêòðîìåòðè÷åñêèì ìå- òîäîì. 3.1.2. Ñðàâíèòåëüíîå îïðåäåëåíèå ïîäëèííîñòè Ïðè ðóòèííîì ïðèìåíåíèè àíàëèòè÷åñêîãî ìåòîäà ïîäëèííîñòü àíàëèòè÷åñêîé ìèøåíè ìî- æåò áûòü ïîäòâåðæäåíà ïóòåì ñðàâíåíèÿ ñî ñòàíäàðòíûìè îáðàçöàìè ïðîöåññà èëè ïðèãîä- íîñòè ñèñòåìû. Îíè ìîãóò áûòü ïîëó÷åíû èç èçâåñòíûõ õîðîøî èçó÷åííûõ ãëèêîïðîòåèíîâ, êîòîðûå ìîãóò ïðèíàäëåæàòü òîìó æå êëàññó, ÷òî è èñïûòóåìûé îáðàçåö (íàïðèìåð, ôåòóèí äëÿ N-ñâÿçàííûõ ãëèêîïðîòåèíîâ), èëè ìîãóò áûòü ïðîèçâåäåíû èç õîðîøî èçó÷åííîé ñåðèè èñïûòóåìîãî ïðîäóêòà, êîòîðàÿ áûëà îïðåäåëå- íà êàê ñòàíäàðòíûé îáðàçåö.

Ñëåäóþùèå óòâåð- æäåíèÿ ïðèìåíÿþòñÿ ê ñðàâíèòåëüíîìó îïðåäå- ëåíèþ ñòðóêòóðíîé ïîäëèííîñòè: – â ñëó÷àå ïîäòâåðæäåííîé âûñîêîé âîñ- ïðîèçâîäèìîñòè âðåìåíè óäåðæèâàíèÿ, äëÿ êîð- ðåêòíîé èíòåðïðåòàöèè ìîæåò áûòü èñïîëüçî- âàíî àáñîëþòíîå âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ; – â êà÷åñòâå àëüòåðíàòèâû, â íà÷àëå è â êîí- öå èñïûòàíèÿ ìîæåò áûòü ââåäåí ãëèêàíîâûé ìàðêåð äëÿ ïðîâåðêè ëþáûõ îòêëîíåíèé âðåìå- íè óäåðæèâàíèÿ; íà îñíîâå ýòèõ ýòàëîííûõ õðî- ìàòîãðàìì ìîãóò áûòü èíòåðïðåòèðîâàíû ãëè- êàíû èñïûòóåìûõ îáðàçöîâ; – â ñëó÷àÿõ, êîãäà ñòàíäàðòíûé îáðàçåö äëÿ îïðåäåëåíèÿ âñåõ ïèêîâ ãëèêàíîâ â èñïûòóåìîì îáðàçöå îòñóòñòâóåò, äëÿ êîíòðîëèðîâàíèÿ è ìå- ÷åíèÿ íåèçâåñòíûõ ïèêîâ ãëèêàíîâ ìîæåò èñ- ïîëüçîâàòüñÿ àáñîëþòíîå èëè íîðìàëèçîâàííîå âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ. 3.2. ÏÎÄÒÂÅÐÆÄÅÍÈÅ ÑÎÎÒÂÅÒÑÒÂÈß ÈÑÏÛÒÓÅÌÎÃÎ ÎÁÐÀÇÖÀ ÒÐÅÁÎÂÀÍÈßÌ ÊÀ×ÅÑÒÂÀ Íà ýòîì ýòàïå îïðåäåëåíèÿ, àíàëèòè÷åñêèå ðåçóëüòàòû, ïîëó÷åííûå äëÿ èñïûòóåìîãî îá- ðàçöà, îöåíèâàþòñÿ íà ïðåäìåò ñîîòâåòñòâèÿ ñïåöèôèêàöèè. Îáû÷íî ýòî äîñòèãàåòñÿ ïóòåì ñðàâíåíèÿ ñ äàííûìè, ïîëó÷åííûìè ïðè ïàðàë- ëåëüíîì èñïûòàíèè ñîîòâåòñòâóþùåãî ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà. Ïðè îöåíêå äàííûõ íåîáõîäèìî: – äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè ñèñòåìû óñòà- íîâèòü, ÷òî àíàëèòè÷åñêèé ðåçóëüòàò, ïîëó÷åí- íûé ïðè èñïîëüçîâàíèè ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, ñîèçìåðèì ñ îæèäàåìûì ðåçóëüòàòîì; íàïðè- ìåð, ïðè ïðîôèëèðîâàíèè ãëèêàíîâ ýòî áóäåò äîñòèãíóòî ïóòåì ñðàâíåíèÿ ïðîôèëÿ ñòàíäàðò- íîãî îáðàçöà ñ ïðåäñòàâëåííûì ïðîôèëåì îá- ðàçöà, ïîëó÷åííûì ïðè ñîçäàíèè ýòîãî ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà è ñ ïîìîùüþ ïîäòâåðæäåíèÿ âñåõ êðèòåðèåâ ïðèãîäíîñòè ñèñòåìû; – äîêàçàòü ñõîäñòâî ïðîôèëåé ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà, èñïîëüçóÿ ëþ- áûå ñïåöèôè÷åñêèå êðèòåðèè ïðèãîäíîñòè, óêà- çàííûå â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå èëè íîðìàòèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó. 3.3. ÏÎÄÒÂÅÐÆÄÅÍÈÅ ÑÎÎÒÂÅÒÑÒÂÈß ÈÑÏÛÒÓÅÌÎÃÎ ÎÁÐÀÇÖÀ ÒÐÅÁÎÂÀÍÈßÌ ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÃÎ ÀÍÀËÈÇÀ 3.3.1. Êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå ñîäåðæàíèÿ àíàëèçèðóåìîãî âåùåñòâà è ïðåäñòàâëåíèå ðåçóëüòàòîâ  íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ, íàïðèìåð, ïðè îïðå- äåëåíèè ñèàëîâîé êèñëîòû èëè äðóãèõ ìîíîñà- õàðèäîâ, äàííûå ïðåäîñòàâëÿþò â âèäå ìîëÿð- íîãî ñîîòíîøåíèÿ ñèàëîâîé êèñëîòû ê ãëèêî- ïðîòåèíó. Äàííûå ðàññ÷èòûâàþò ñ ó÷åòîì ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà ñèàëîâîé êèñëîòû è âàëè- äèðîâàííîãî ìåòîäà îïðåäåëåíèÿ áåëêà. Ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí êàê ìåòîä âíóòðåííåãî ñòàí- äàðòà, òàê è ìåòîä âíåøíåãî ñòàíäàðòà (2.1.2.36). 3.3.2. Ñïîñîáû êîëè÷åñòâåííîãî âûðàæåíèÿ ïðîôèëÿ ðàçäåëåíèÿ Ïðîôèëè èëè ñõåìû ðàñïðåäåëåíèÿ ìîãóò áûòü ïðåäñòàâëåíû â ÷èñëåííîé ôîðìå ìíîãè- ìè ñïîñîáàìè, âêëþ÷àÿ ìåòîäèêó íîðìàëèçà- öèè; ïðîöåíò ñîäåðæàíèÿ êàæäîé àíàëèòè÷å- ñêîé ìèøåíè, íàïðèìåð, ÷àñòè ãëèêàíà, ðàññ÷è- òûâàþò ïóòåì îïðåäåëåíèÿ îòêëèêà ÷àñòè ãëèêàíà êàê ïðîöåíòíóþ ñîñòàâëÿþùóþ îáùåãî îòêëèêà âñåõ ÷àñòåé, íå ó÷èòûâàÿ îòêëèêè ðàñ- òâîðèòåëåé, äðóãèõ äîáàâëåííûõ ðåàêòèâîâ è ñèãíàëîâ íèæå íåó÷èòûâàåìîãî ïðåäåëà. Êðî- ìå òîãî, ìîãóò èñïîëüçîâàòüñÿ òàêèå ÷èñëåííûå âûðàæåíèÿ, êàê Z ÷èñëî, êîòîðûå ñïåöèôè÷íû 45 ìåòîäó è ïðîäóêòó, è îïèñàíû â ÷àñòíûõ ôàðìà- êîïåéíûõ ñòàòüÿõ. 4. ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÅ ÎÁÐÀÇÖÛ Ñòàíäàðòíûå îáðàçöû äëÿ àíàëèçà ãëèêàíîâ èñïîëüçóþò â äâóõ öåëÿõ: ïðîâåðêà ïðèãîäíîñòè ñèñòåìû è ïîäòâåðæäåíèå ñîîòâåòñòâèÿ èñïû- òóåìîãî îáðàçöà ñïåöèôèöèðîâàííûì òðåáîâà- íèÿì.

Ñòàíäàðòíûìè îáðàçöàìè, èñïîëüçóþùèìè- ñÿ äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè ñèñòåìû, ìîãóò áûòü: – ñòàíäàðòíûé îáðàçåö èñïûòóåìîãî âåùå- ñòâà; – îëèãîñàõàðèäíàÿ öåïü, îòùåïëåííàÿ îò ïîëíîñòüþ èçó÷åííîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà èñïûòóåìîãî âåùåñòâà; – õîðîøî èçó÷åííûå îëèãîñàõàðèäíûå öåïè, îòùåïëåííûå îò ãëèêîïðîòåèíîâ (íàïðè- ìåð, ôåòóèí, IgG); – ïðîèçâîäíûå ãëèêàíîâ (ìå÷åíûå ãëèêà- íû), äëÿ êîòîðûõ ïîäòâåðæäåíà ïîäëèííîñòü è ÷èñòîòà (êîëè÷åñòâåííîå ñîäåðæàíèå). Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, èñïîëüçóåìûé äëÿ ïîëó÷åíèÿ çàêëþ÷åíèÿ î ñîîòâåòñòâèè èñïûòóå- ìîãî ãëèêîïðîòåèíà, ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ïðåïà- ðàò èç èñïûòóåìûõ âåùåñòâ. Ìåòîäèêè àíàëèçà ãëèêàíîâ, îïèñàííûå â ÷àñòíûõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòüÿõ, ïðåäïèñûâàþò èñïîëüçîâàíèå ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà äëÿ èñïûòóåìîãî âåùåñòâà, äëÿ êîòîðîãî âàëèäèðîâàíà ìåòîäèêà àíàëèçà. 5. ÝÒÀÏÛ ÐÀÇÐÀÁÎÒÊÈ ÌÅÒÎÄÈÊ È ÈÕ ÂÀËÈÄÀÖÈß Â äàííîì ðàçäåëå ïðåäñòàâëåíû ñïîñîáû îöåíêè èñïîëíåíèÿ ìåòîäà â öåëîì, ïðè åãî ðàç- ðàáîòêå. Ñòåïåíü ðàçðàáîòêè ìåòîäà è àíàëèòè- ÷åñêàÿ âàëèäàöèÿ âûáèðàåòñÿ íà îñíîâå èõ ïðè- ãîäíîñòè äëÿ îïðåäåëåííîãî ïðîäóêòà.  çàâè- ñèìîñòè îò âûáðàííîãî ìåòîäà, äëÿ àíàëèçà ãëèêàíîâ íåîáõîäèìû îïðåäåëåííûå äåéñòâèÿ, íàïðèìåð êàê: – âûäåëåíèå è î÷èñòêà (èëè äåìèíåðàëèçà- öèÿ) ãëèêîïðîòåèíà; – ôåðìåíòàòèâíàÿ (èëè õèìè÷åñêàÿ) îáðà- áîòêà ãëèêîïðîòåèíà ñ öåëüþ èçáèðàòåëüíîãî îòùåïëåíèÿ îò «îïîðíîãî» áåëêà òîëüêî N- èëè òîëüêî Î-ñâÿçàííûõ ãëèêàíîâ; – âûäåëåíèå è î÷èñòêà îòùåïëåííûõ ãëèêà- íîâ; – êîíòðîëü îòùåïëåííîé ñèàëîâîé êèñëîòû è ìîíîñàõàðèäíûõ îñòàòêîâ; – õðîìîôîðíîå ìå÷åíèå îòùåïëåííûõ ãëè- êàíîâ; – ðàçäåëåíèå ãëèêàíîâ, íàòèâíûõ èëè ôëóî- ðåñöåíòíî-ìå÷åííûõ; – èäåíòèôèêàöèÿ è êîëè÷åñòâåííîå îïðåäå- ëåíèå ãëèêàíîâ (íàïðèìåð, âû÷èñëåíèå Z ÷èñ- ëà); – îïðåäåëåíèå ïîëîæåíèé ñâÿçûâàíèÿ íà îñíîâàíèè îòíîñèòåëüíûõ êîëè÷åñòâ ãëèêîçè- ëèðîâàííûõ è íåãëèêîçèëèðîâàííûõ ïåïòèäîâ. Âûäåëåíèå è î÷èñòêà áåëêîâ. Äëÿ óäàëå- íèÿ ìåøàþùèõ âåùåñòâ (íàïðèìåð, âñïîìîãà- òåëüíûå âåùåñòâà, ñîëè) ìîãóò ïîíàäîáèòüñÿ âûäåëåíèå è î÷èñòêà ãëèêîïðîòåèíîâ èç ìàòðè- öû, ÷òî ïðè íåîáõîäèìîñòè, îïèñûâàþò â ÷àñò- íîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Ìåòîäèêè î÷èñòêè äîëæíû áûòü âàëèäèðîâàíû íà ïðåäìåò âîñïðî- èçâîäèìîñòè, ÷òîáû ãàðàíòèðîâàòü ïîñòîÿíñòâî êîëè÷åñòâåííîé îòêðûâàåìîñòè áåëêà. Îòùåïëåíèå è âûäåëåíèå îëèãîñàõàðèäîâ. Ïîäõîä, âûáðàííûé äëÿ îòùåïëåíèÿ ãëèêàíîâ, çàâèñèò îò àíàëèçèðóåìûõ áåëêîâ è îñíîâàí íà òèïå ãëèêîçèëèðîâàíèÿ, ò.å. N- èëè O-ñâÿçàííîå ãëèêîçèëèðîâàíèå. Ïðèìåíåíèå íå óêàçàííûõ â ôàðìàêîïåå ìåòîäîâ îòùåïëåíèÿ ãëèêàíîâ âîçìîæíî òîëüêî ïîñëå îïòèìèçàöèè ýòèõ ìåòî- äîâ ñ öåëüþ ïîäòâåðæäåíèÿ êîëè÷åñòâåííîãî ïðîôèëèðîâàíèÿ âñåõ ãëèêàíîâûõ ÷àñòåé ìîëå- êóëû. Îïòèìèçèðîâàíû äîëæíû áûòü âñå ôàêòî- ðû, êîòîðûå îáëàäàþò ñóùåñòâåííûì âëèÿíèåì íà ýôôåêòèâíîñòü îòùåïëåíèÿ, íàïðèìåð: îòíî- ñèòåëüíàÿ êîíöåíòðàöèÿ ôåðìåíò/áåëîê, òåìïå- ðàòóðà, òå÷åíèå ðåàêöèè âî âðåìåíè, äåíàòóðè- ðîâàíèå áåëêà äî íà÷àëà îòùåïëåíèÿ. Ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî ôåðìåíòàòèâíàÿ/õè- ìè÷åñêàÿ ðåàêöèÿ íå äîëæíà èçìåíÿòü ñòðîåíèå ãëèêàíà, íàïðèìåð, íå äîëæíà ðàçðóøàòü îñòàò- êè ñèàëîâîé êèñëîòû. Òàì, ãäå ïðèñóòñòâóåò áî- ëåå îäíîãî ïîëîæåíèÿ ãëèêîçèëèðîâàíèÿ, ïðè ôåðìåíòàòèâíîé îáðàáîòêå äîëæíû ïðîïîðöèî- íàëüíî îòùåïëÿòüñÿ âñå ôðàãìåíòû îëèãîñàõà- ðèäîâ, ïðèñîåäèíåííûå ê áåëêó, íåçàâèñèìî îò èõ ñòðóêòóðû è ñâîåãî êîíêðåòíîãî ìåñòà â áåë- êå. Äîëæíà áûòü ïîäòâåðæäåíà îòêðûâàåìîñòü âñåõ ãëèêàíîâûõ ñîñòàâëÿþùèõ èç ðåàêöèîííîé ñìåñè. Äåðèâàòèçàöèÿ îòùåïëåííûõ ãëèêàíîâ. Äå- ðèâàòèçàöèþ îáû÷íî âûïîëíÿþò â ñîîòâåòñò- âèè ñ ìåòîäèêàìè, íåîïèñàííûìè â ôàðìàêîïåå.

Ïî ýòîé ïðè÷èíå ïîâòîðíàÿ äåðèâàòèçàöèÿ âñåõ 46 ãëèêàíîâûõ ãðóïï äîëæíà âåðèôèöèðîâàòüñÿ, ÷òî ìîæåò áûòü äîñòèãíóòü ïðè îïòèìèçàöèè óñëîâèé ðåàêöèé, òàêèõ êàê êîëè÷åñòâî ðåàêòè- âîâ äåðèâàòèçàöèè, òåìïåðàòóðà è âðåìÿ ðåàê- öèè. Ðåàêöèÿ äåðèâàòèçàöèè íå äîëæíà èçìå- íÿòü ñòðîåíèå ãëèêàíà, íàïðèìåð íå äîëæíà ðàç- ðóøàòü îñòàòîê ñèàëîâîé êèñëîòû. Ðàçäåëåíèå, èäåíòèôèêàöèÿ è ïðîâåðêà ïðè- ãîäíîñòè ñèñòåìû. Ìåòîäû, ïðèìåíÿåìûå äëÿ àíàëèçà ãëèêàíîâ, äîëæíû áûòü ñïîñîáíû äå- òåêòèðîâàòü è ðàçäåëÿòü ðàçëè÷íûå ãëèêàíîâûå ÷àñòè ìîëåêóëû, îáåñïå÷èâàÿ íàäåæíóþ èäåí- òèôèêàöèþ è êîëè÷åñòâåííûé àíàëèç ãëèêàíîâ. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè äëÿ ïðîâåðêè ïðè- ãîäíîñòè ñèñòåìû, à òàêæå ðàñùåïëåíèÿ, îòêðû- âàåìîñòè è àíàëèçà ãëèêàíîâ, çàâèñÿò îò êðèòè- ÷åñêèõ ïàðàìåòðîâ èñïûòàíèÿ, êîòîðûå âëèÿþò íà êîíå÷íûé ðåçóëüòàò. Ñðàâíåíèå ãëèêàíîâûõ ïðîôèëåé èñïûòóå- ìîãî îáðàçöà è ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, ïîëó÷åí- íûõ â îäèíàêîâûõ óñëîâèÿõ, ÿâëÿåòñÿ ïàðàìåò- ðîì äëÿ îöåíêè ïðàâèëüíîñòè âûïîëíåíèÿ àíàëèòè÷åñêîé ìåòîäèêè. Äëÿ äàëüíåéøåãî ïîä- òâåðæäåíèÿ ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ, àíàëèçû ìîãóò áûòü ïîâòîðíî ïðîâåäåíû ñ ïîìîùüþ íå- çàâèñèìîãî ìåòîäà. Èñïîëüçîâàíèå ñòàíäàðòíî- ãî îáðàçöà (íàïðèìåð, ñòàíäàðòíûé îáðàçåö èñïûòóåìîãî âåùåñòâà, ìàðêåð ãëèêàíà äëÿ ïðî- âåðêè ïðèãîäíîñòè ñèñòåìû) ÿâëÿåòñÿ íåîáõî- äèìûì äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ïàðàìåòðîâ ïðèãîäíî- ñòè ñèñòåìû è âàëèäàöèè àíàëèòè÷åñêîé ìåòî- äèêè. Âîñïðîèçâîäèìîñòü ðåçóëüòàòîâ êîëè÷åñò- âåííîãî îïðåäåëåíèÿ (íàïðèìåð, ðàñ÷åò Z ÷èñ- ëà) ãëèêàíà äîëæíà áûòü ïîäòâåðæäåíà. Îïðåäåëåíèå ïîëîæåíèé ñâÿçûâàíèÿ, íà îñ- íîâàíèè îòíîñèòåëüíûõ êîëè÷åñòâ ãëèêîçèëè- ðîâàííûõ è íåãëèêîçèëèðîâàííûõ ïåïòèäîâ.  òîì ñëó÷àå, åñëè ñòåïåíü ãëèêîçèëèðîâàíèÿ îöåíèâàåòñÿ ïóòåì ñðàâíåíèÿ ñîäåðæàíèÿ ãëè- êîçèëèðîâàííûõ è íåãëèêîçèëèðîâàííûõ ïåïòè- äîâ ïîñëå ôåðìåíòàòèâíîãî ðàñùåïëåíèÿ, äîëæíà áûòü äîêàçàíà âîñïðîèçâîäèìîñòü îò- ùåïëåíèÿ äëÿ îáåèõ ôîðì ïåïòèäà. 47 Ðèñóíîê 2.1.2.56.-2. — Ñõåìà âûáîðà ìåòîäèêè äëÿ ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà ãëèêàíîâ 6. ÑÕÅÌÀ ÏÐÈÍßÒÈß ÐÅØÅÍÈÉ ÏÐÈ ÀÍÀËÈÇÅ ÃËÈÊÀÍΠÝòà ñèñòåìà ïðèíÿòèÿ ðåøåíèé ïðèâîäèòñÿ äëÿ èíôîðìàöèè è íå ÿâëÿåòñÿ îáÿçàòåëüíîé ÷à- ñòüþ ôàðìàêîïåè. Âûáîð ìåòîäèê, èñïîëüçóåìûõ äëÿ àíàëèçà ãëèêàíîâ, ïðîèçâîäèòñÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ òåì îáúåìîì äàííûõ, êîòîðûé íåîáõîäèì äëÿ ïîä- òâåðæäåíèÿ êà÷åñòâà ãëèêîïðîòåèíà è ïðîèñõî- äèò íà ñòàäèè ðàçðàáîòêè ïðîäóêòà. Ñõåìà âûáîðà ìåòîäèêè äëÿ ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà ãëèêàíîâ ïðåäñòàâëåíà íà ðèñóíêå 2.1.2.56.-2. 201020057-2022 2.1.2.57. Âîëüòàìåòðè÷åñêîå òèòðîâàíèå Êîíå÷íàÿ òî÷êà òèòðîâàíèÿ ïðè âîëüòàìåò- ðè÷åñêîì òèòðîâàíèè ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé âåëè- ÷èíó èçìåíåíèÿ íàïðÿæåíèÿ, èçìåðåííîãî ìåæ- äó äâóìÿ ýëåêòðîäàìè (îäíèì èíäèêàòîðíûì ýëåêòðîäîì è îäíèì ýëåêòðîäîì ñðàâíåíèÿ, èëè äâóìÿ èíäèêàòîðíûìè ýëåêòðîäàìè), ïîãðóæåí- íûìè â èñïûòóåìûé ðàñòâîð ïðè ïîääåðæàíèè ïîñòîÿííîãî òîêà, êàê ôóíêöèþ êîëè÷åñòâà ïðè- áàâëåííîãî òèòðàíòà. Ïðèáîð. Ïðèáîð ñîñòîèò èç ðåãóëèðóåìîãî èñòî÷íèêà òîêà è âîëüòìåòðà; ñèñòåìà äåòåêòè- ðîâàíèÿ îáû÷íî âêëþ÷àåò èíäèêàòîðíûé ýëåê- òðîä (íàïðèìåð, ïëàòèíîâûé ýëåêòðîä, ýëåêòðîä ñ âðàùàþùèìèñÿ äèñêàìè èëè óãîëüíûé ýëåê- òðîä) è âòîðîé ýëåêòðîä (íàïðèìåð, ïëàòèíîâûé ýëåêòðîä, ýëåêòðîä ñ âðàùàþùèìèñÿ äèñêàìè èëè óãîëüíûé ýëåêòðîä). Ìåòîäèêà. Íàñòðàèâàþò òîê íà èíäèêàòîð- íîì ýëåêòðîäå, êàê óêàçàíî â ÷àñòíîé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüå èëè íîðìàòèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó, è ñòðîÿò ãðàôèê çàâèñèìîñòè íà÷àëü- íîãî íàïðÿæåíèÿ è çíà÷åíèé, ïîëó÷åííûõ ïðè òèòðîâàíèè, îò êîëè÷åñòâà ïðèáàâëåííîãî òèò- ðàíòà.