Текст очень длинный, поэтому разбит на части. Часть 5 из 13.
Óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå îáúåì ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà ñâèíöà èîíîâ (10 ppm Pb2+) Ð äîâîäÿò óêàçàííûì ðàñòâîðèòåëåì èëè ñìåñüþ ðàñòâî- ðèòåëåé äî îáúåìà 20 ìë. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. 20 ìë óêàçàííîãî ðàñòâîðèòåëÿ èëè ñìåñè ðàñòâîðèòåëåé. Ê êàæäîìó ðàñòâîðó ïðèáàâëÿþò ïî 2 ìë áó- ôåðíîãî ðàñòâîðà ñ ðÍ 3,5 Ð è ïåðåìåøèâàþò. ( íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ ïðîèñõîäèò âûïàäåíèå îñàäêà, ïîýòîìó â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå îïèñûâàåòñÿ ïîâòîðíîå ðàñòâîðåíèå â óêàçàííîì îáúåìå äàííîãî ðàñòâîðèòåëÿ). Êà- æäûé ïîëó÷åííûé ðàñòâîð ïðèáàâëÿþò ê 1,2 ìë òèîàöåòàìèäà ðåàêòèâà Ð, òîò÷àñ ïåðåìåøè- âàþò è îñòàâëÿþò íà 2 ìèí. Ðàñòâîðû ôèëüòðó- þò ÷åðåç ïîäõîäÿùèé ìåìáðàííûé ôèëüòð ñ ðàçìåðîì ïîð 0,45 ìêì. Ñðàâíèâàþò ïÿòíà íà ôèëüòðàõ, ïîëó÷åííûå ïðè ôèëüòðîâàíèè ðàç- íûõ ðàñòâîðîâ. Ðåçóëüòàòû èñïûòàíèÿ ñ÷èòàþò äîñòîâåðíû- ìè, åñëè ïÿòíî, ïîëó÷åííîå â îïûòå ñ ðàñòâîðîì ñðàâíåíèÿ, èìååò êîðè÷íåâàòî-÷åðíóþ îêðàñêó â ñðàâíåíèè ñ ïÿòíîì, ïîëó÷åííûì â îïûòå ñ êîíòðîëüíûì ðàñòâîðîì. Èñïûòóåìûé îáðàçåö âûäåðæèâàåò èñïûòà- íèå, åñëè èíòåíñèâíîñòü êîðè÷íåâàòî-÷åðíîé îêðàñêè ïÿòíà, ïîëó÷åííîãî â îïûòå ñ èñïûòóå- ìûì ðàñòâîðîì, íå ïðåâûøàåò èíòåíñèâíîñòü îêðàñêè ïÿòíà, ïîëó÷åííîãî â îïûòå ñ ðàñòâî- ðîì ñðàâíåíèÿ. 201040009-2019 2.1.4.9. Æåëåçî Êîëè÷åñòâî èñïûòóåìîãî îáðàçöà, óêàçàí- íîå â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ðàñòâîðÿ- þò â âîäå Ð, äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âîäîé Ð äî 10 ìë èëè èñïîëüçóþò 10 ìë ðàñòâîðà, óêàçàí- íîãî â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Ïðèáàâ- ëÿþò 2 ìë ðàñòâîðà 200 ã/ë ëèìîííîé êèñëîòû Ð è 0,1 ìë òèîãëèêîëåâîé êèñëîòû Ð. Ïåðåìåøè- âàþò, ïîäùåëà÷èâàþò ðàñòâîðîì àììèàêà Ð è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âîäîé Ð äî 20 ìë. Òà- êèì æå îáðàçîì ãîòîâÿò ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ, èñ- ïîëüçóÿ 5 ìë ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà æåëåçà èîíîâ (2 ppm Fe3+) äîâåäåííîãî âîäîé Ð äî 10 ìë. ×åðåç 5 ìèí èíòåíñèâíîñòü ðîçîâîé îêðàñêè èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà íå äîëæíà ïðåâûøàòü èíòåíñèâíîñòü îêðàñêè ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ. 201040010-2019 2.1.4.10. Ñâèíåö â ñàõàðàõ Îïðåäåëåíèå ñâèíöà ïðîâîäÿò ìåòîäîì àòîì- íî-àáñîðáöèîííîé ñïåêòðîìåòðèè (2.1.2.22., ìåòîä II). Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. 20,0 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàñòâîðÿþò â ñìåñè ðàâíûõ îáúåìîâ óê- ñóñíîé êèñëîòû ðàçáàâëåííîé Ð è âîäû Ð, äîâî- äÿò îáúåì ðàñòâîðà òîé æå ñìåñüþ ðàñòâîðèòå- ëåé äî 100,0 ìë. Ïðèáàâëÿþò 2,0 ìë ïðîçðà÷íî- ãî ðàñòâîðà 10 ã/ë àììîíèÿ ïèððîëèäèíäèòèî- êàðáàìàòà Ð, 10,0 ìë ìåòèëèçîáóòèëêåòîíà Ð è âñòðÿõèâàþò â òå÷åíèå 30 ñ, çàùèùàÿ îò ÿðêî- ãî ñâåòà. Îñòàâëÿþò äî ðàçäåëåíèÿ ñëîåâ è èñ- ïîëüçóþò ñëîé ìåòèëèçîáóòèëêåòîíà. Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò òðè ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ òàêèì æå îáðàçîì, ÷òî è èñïûòóåìûé ðàñòâîð, íî ñ äîáàâëåíèåì ê 20,0 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ñîîòâåòñòâåííî 0,5 ìë, 1,0 ìë è 1,5 ìë ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà ñâèíöà èîíîâ (10 ppm Pb2+) Ð. Óñòàíàâëèâàþò íóëåâóþ òî÷êó íà ïðèáîðå, èñïîëüçóÿ ìåòèëèçîáóòèëêåòîí Ð, îáðàáîòàí- íûé àíàëîãè÷íî èñïûòóåìîìó ðàñòâîðó, íî áåç äîáàâëåíèÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Èçìåðÿþò îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü ïðè äëèíå âîëíû 283,3 íì, èñïîëüçóÿ â êà÷åñòâå èñòî÷íèêà èçëó÷åíèÿ ëàìïó ñ ïîëûì ñâèíöîâûì êàòîäîì è âîçäóø- íî-àöåòèëåíîâîå ïëàìÿ. Ñîäåðæàíèå ñâèíöà â èñïûòóåìîì îáðàçöå äîëæíî áûòü íå áîëåå 0,5 ppm ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. 201040011-2019 2.1.4.11. Ôîñôàòû Ê 100 ìë ïðèãîòîâëåííîãî è, ïðè íåîáõîäè- ìîñòè, íåéòðàëèçîâàííîãî â ñîîòâåòñòâèè ñ óêà- çàíèÿìè â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ðàñ- òâîðà ïðèáàâëÿþò 4 ìë ñóëüôîìîëèáäåíîâîãî ðåàêòèâà Ð3.
Âñòðÿõèâàþò è äîáàâëÿþò 0,1 ìë ðàñòâîðà îëîâà õëîðèäà Ð1.Òàêèì æå îáðàçîì ãîòîâÿò ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ, èñïîëüçóÿ âìåñòî 100 ìë ðàñòâîðà ñóáñòàíöèè ñìåñü 2 ìë ñòàí- äàðòíîãî ðàñòâîðà ôîñôàò-èîíîâ (5 ppm PO4 3- ) Ð è 98 ìë âîäû Ð. ×åðåç 10 ìèí ñðàâíèâàþò îêðàñêó 20 ìë êà- æäîãî ðàñòâîðà. 173 Èíòåíñèâíîñòü îêðàñêè èñïûòóåìîãî ðàñ- òâîðà íå äîëæíà ïðåâûøàòü èíòåíñèâíîñòü îê- ðàñêè ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ. 201040012-2019 2.1.4.12. Êàëèé Ê 10 ìë ðàñòâîðà, óêàçàííîãî â ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüå, ïðèáàâëÿþò 2 ìë ñâåæåïðè- ãîòîâëåííîãî ðàñòâîðà 10 ã/ë íàòðèÿ òåòðàôå- íèëáîðàòà Ð. Ïàðàëëåëüíî òàêèì æå îáðàçîì ãîòîâÿò ðàñ- òâîð ñðàâíåíèÿ, èñïîëüçóÿ ñìåñü 5 ìë ñòàí- äàðòíîãî ðàñòâîðà êàëèÿ èîíîâ (20 ppm Ê+) Ðè 5 ìë âîäû Ð. ×åðåç 5 ìèí èíòåíñèâíîñòü îïàëåñöåíöèè èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà íå äîëæíà ïðåâûøàòü èíòåíñèâíîñòü îïàëåñöåíöèè ðàñòâîðà ñðàâíå- íèÿ. 201040013-2019 2.1.4.13. Ñóëüôàòû Âñå ðàñòâîðû, ïðèìåíÿåìûå â äàííîì èñïû- òàíèè, äîëæíû áûòü ïðèãîòîâëåíû ñ èñïîëüçî- âàíèåì âîäû äèñòèëëèðîâàííîé Ð. Ê 4,5 ìë ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà ñóëü- ôàò-èîíîâ (10 ppm SO4 2- ) Ð ïðèáàâëÿþò 3 ìë ðàñòâîðà 250 ã/ë áàðèÿ õëîðèäà Ð. Âñòðÿõèâàþò è îñòàâëÿþò íà 1 ìèí. Ê 2,5 ìë ïîëó÷åííîé ñóñ- ïåíçèè ïðèáàâëÿþò 15 ìë ðàñòâîðà, óêàçàííîãî â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, è 0,5 ìë óêñóñ- íîé êèñëîòû Ð. Òàêèì æå îáðàçîì ãîòîâÿò ðàñòâîð ñðàâíå- íèÿ, èñïîëüçóÿ 15 ìë ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà ñóëüôàò-èîíîâ (10 ppm SO4 2- ) Ð âìåñòî óêàçàí- íîãî â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ðàñòâîðà. ×åðåç 5 ìèí èíòåíñèâíîñòü îïàëåñöåíöèè èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà íå äîëæíà ïðåâûøàòü èíòåíñèâíîñòü îïàëåñöåíöèè ðàñòâîðà ñðàâíå- íèÿ. 201040014-2019 2.1.4.14. Ñóëüôàòíàÿ çîëà Ïîäõîäÿùèé òèãåëü (íàïðèìåð, ôàðôîðî- âûé, êâàðöåâûé èëè ïëàòèíîâûé) ïðîêàëèâàþò ïðè òåìïåðàòóðå (600 ± 50) °Ñ â òå÷åíèå 30 ìèí, îõëàæäàþò â ýêñèêàòîðå íàä ñëîåì ñèëèêàãåëÿ èëè äðóãîãî ïîäõîäÿùåãî îñóøèòåëÿ è òî÷íî âçâåøèâàþò. Êîëè÷åñòâî èñïûòóåìîãî îáðàçöà, óêàçàííîå â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ïî- ìåùàþò â ïðåäâàðèòåëüíî ïðîêàëåííûé òèãåëü è òî÷íî âçâåøèâàþò. Èñïûòóåìûé îáðàçåö ñìà- ÷èâàþò 1 ìë ñåðíîé êèñëîòû Ð, îñòîðîæíî íà- ãðåâàþò ïðè òåìïåðàòóðå, ïî âîçìîæíîñòè íàè- áîëåå íèçêîé, äî ïîëíîãî îáóãëèâàíèÿ îáðàçöà. Ïîñëå îõëàæäåíèÿ îñòàòîê ñìà÷èâàþò 1 ìë ñåð- íîé êèñëîòû Ð, îñòîðîæíî íàãðåâàþò äî ïðå- êðàùåíèÿ âûäåëåíèÿ áåëûõ ïàðîâ è ïðîêàëèâà- þò â ìóôåëüíîé ïå÷è ïðè òåìïåðàòóðå (600 ± 50) °Ñ äî òåõ ïîð, ïîêà îñòàòîê ïîëíî- ñòüþ íå ïðåâðàòèòñÿ â çîëó. Íåîáõîäèìî îáåñïå- ÷èòü îòñóòñòâèå ïëàìåíè âî âðåìÿ ïðîâåäåíèÿ ïðîöåäóðû. Òèãåëü îõëàæäàþò â ýêñèêàòîðå íàä ñëîåì ñèëèêàãåëÿ èëè äðóãîãî ïîäõîäÿùåãî îñó- øèòåëÿ, ïîâòîðíîòî÷íî âçâåøèâàþò è ðàññ÷è- òûâàþò êîëè÷åñòâî îñòàòêà â ïðîöåíòàõ. Åñëè êîëè÷åñòâî ïîëó÷åííîãî îñòàòêà ïðå- âûøàåò ïðåäåë, óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüå, åãî ïîâòîðíî ñìà÷èâàþòñåðíîé êèñëîòîé Ð è ñæèãàþò, êàê îïèñàíî âûøå, â òå- ÷åíèå 30 ìèí. Ñæèãàíèå ïîâòîðÿþò äî òåõ ïîð, ïîêà äâà ïîñëåäîâàòåëüíî ïðîâåäåííûõ âçâåøè- âàíèÿ íå áóäóò îòëè÷àòüñÿ äðóã îò äðóãà íå áî- ëåå ÷åì íà 0,5 ìã èëè ñîäåðæàíèå îñòàòêà â ïðî- öåíòàõ íå áóäåò ñîîòâåòñòâîâàòü óêàçàííîìó ïðåäåëó. Êîëè÷åñòâî èñïûòóåìîãî îáðàçöà, èñïîëü- çóåìîå äëÿ èñïûòàíèÿ (îáû÷íî 1 – 2 ã) âûáèðà- þò òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû óêàçàííûé ïðåäåë ìàññû îñòàòêà (îáû÷íî îêîëî 1 ìã) ìîæíî áûëî èçìåðèòü ñ äîñòàòî÷íîé òî÷íîñòüþ. 201040015-2019 2.1.4.15. Íèêåëü â ïîëèîëàõ Îïðåäåëåíèå íèêåëÿ ïðîâîäÿò ìåòîäîì àòîì- íî-àáñîðáöèîííîé ñïåêòðîìåòðèè (2.1.2.22., ìåòîä II). Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. 20,0 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàñòâîðÿþò â ñìåñè ðàâíûõ îáúåìîâ óê- ñóñíîé êèñëîòû ðàçáàâëåííîé Ð è âîäû Ð, äîâî- äÿò îáúåì ðàñòâîðà òîé æå ñìåñüþ ðàñòâîðèòå- ëåé äî 100,0 ìë è ïåðåìåøèâàþò.
Ïðèáàâëÿþò 2,0 ìë íàñûùåííîãî ðàñòâîðà (îêîëî 10 ã/ë) àì- ìîíèÿ ïèððîëèäèíäèòèîêàðáàìàòà Ð è 10,0 ìë ìåòèëèçîáóòèëêåòîíà Ð, âñòðÿõèâàþò â òå÷å- íèå 30 ñ, çàùèùàÿ îò ÿðêîãî ñâåòà. Îñòàâëÿþò äî ðàçäåëåíèÿ ñëîåâ è èñïîëüçóþò ñëîé ìåòèëè- çîáóòèëêåòîíà. 174 Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò òðè ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ àíàëîãè÷íî èñïûòóåìîìó ðàñòâîðó, íî ñ äîáàâëåíèåì ê 20,0 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ñî- îòâåòñòâåííî 0,5 ìë, 1,0 ìë è 1,5 ìë ñòàíäàðò- íîãî ðàñòâîðà íèêåëÿ èîíîâ (10 ppm Ni2+) Ð. Óñòàíàâëèâàþò íóëåâóþ òî÷êó íà ïðèáîðå, èñïîëüçóÿ ìåòèëèçîáóòèëêåòîí Ð, îáðàáîòàí- íûé àíàëîãè÷íî èñïûòóåìîìó ðàñòâîðó, íî áåç äîáàâëåíèÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Èçìåðÿþò îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü ïðè äëèíå âîëíû 232,0 íì, èñïîëüçóÿ â êà÷åñòâå èñòî÷íèêà èçëó- ÷åíèÿ ëàìïó ñ ïîëûì íèêåëåâûì êàòîäîì è âîç- äóøíî-àöåòèëåíîâîå ïëàìÿ. Èñïûòóåìûé îáðàçåö äîëæåí ñîäåðæàòü íå áîëåå 1 ppm íèêåëÿ ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêà- çàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. 201040016-2019 2.1.4.16. Îáùàÿ çîëà Êâàðöåâûé èëè ïëàòèíîâûé òèãåëü íàãðåâà- þò äî êðàñíîãî êàëåíèÿ (600 ± 50) °Ñ â òå÷åíèå 30 ìèí, îõëàæäàþò â ýêñèêàòîðå è âçâåøèâàþò. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüå 1,00 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà èëè ðàñòèòåëüíîé ôàðìàöåâòè÷åñêîé ñóáñòàí- öèè ïîìåùàþò â òèãåëü è ðàâíîìåðíî ðàñïðåäå- ëÿþò ïî äíó òèãëÿ. Ñóøàò ïðè òåìïåðàòóðå îò 100 °Ñ äî 105 °Ñ â òå÷åíèå 1 ÷ è çàòåì ñæèãàþò äî ïîñòîÿííîé ìàññû â ìóôåëüíîé ïå÷è ïðè òåìïåðàòóðå (600 ± 5025) °Ñ. Òèãåëü ïîñëå êàæ- äîãî ñæèãàíèÿ îõëàæäàþò â ýêñèêàòîðå.  òå÷å- íèå âñåé ïðîöåäóðû â òèãëå íå äîëæíî ïîÿâ- ëÿòüñÿ ïëàìÿ. Åñëè ïîñëå äëèòåëüíîãî ñæèãà- íèÿ çîëà âñå åùå ñîäåðæèò òåìíûå ÷àñòèöû, ñîäåðæèìîå òèãëÿ êîëè÷åñòâåííî ïåðåíîñÿò ãî- ðÿ÷åé âîäîé íà áåççîëüíûé ôèëüòð è ñæèãàþò îñòàòêè è ôèëüòð. Ôèëüòðàò îáúåäèíÿþò ñ çî- ëîé, îñòîðîæíî óïàðèâàþò äîñóõà è ïðîêàëèâà- þò äî ïîñòîÿííîé ìàññû. 201040017-2019 2.1.4.17. Àëþìèíèé ÌÅÒÎÄ À Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ðàñòâîð èñïûòóåìî- ãî îáðàçöà, ïðèãîòîâëåííûé â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ïîìåùàþò â äåëèòåëüíóþ âîðîíêó, âñòðÿõèâàþò ñíà÷àëà ñ äâóìÿ ïîðöèÿìè ïî 20 ìë ðàñòâîðà 5 ã/ë ãèäðîêñèõèíîëèíà Ð â õëîðîôîðìå Ð, çàòåì ñ 10 ìë òîãî æå ðàñòâîðà. Õëîðîôîðìíûå ñëîè îòäåëÿþò, îáúåäèíÿþò è äîâîäÿò õëîðîôîðìîì Ð äî îáúåìà 50,0 ìë. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò òàêèì æå îáðà- çîì, èñïîëüçóÿ óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüå ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Ãîòîâÿò òàêèì æå îáðàçîì, èñïîëüçóÿ óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìà- êîïåéíîé ñòàòüå êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Èçìåðÿþò èíòåíñèâíîñòü ôëóîðåñöåíöèè (2.1.2.20) èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà (I1), ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (I2) è êîíòðîëüíîãî ðàñòâîðà (I3), èñ- ïîëüçóÿ âîçáóæäàþùåå èçëó÷åíèå ïðè äëèíå âîëíû 392 íì è âòîðè÷íûé ôèëüòð ñ ïîëîñîé ïðîïóñêàíèÿ, èìåþùåé ìàêñèìóì ïðè äëèíå âîëíû 518 íì, èëè ìîíîõðîìàòîð, óñòàíîâëåí- íûé íà ïðîïóñêàíèå äàííîé äëèíû âîëíû. Èíòåíñèâíîñòü ôëóîðåñöåíöèè (I1 – I3) èñ- ïûòóåìîãî ðàñòâîðà íå äîëæíà ïðåâûøàòü èí- òåíñèâíîñòü ôëóîðåñöåíöèè ðàñòâîðà ñðàâíå- íèÿ (I2 – I3). ÌÅÒÎÄ Á Äàííûé ìåòîä ïðèìåíÿþò äëÿ ñóáñòàíöèé, ïðåäíàçíà÷åííûõ äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â ãåìîäèà- ëèçå. Îïðåäåëåíèå ïðîâîäÿò ìåòîäîì àòîìíî-àá- ñîðáöèîííîé ñïåêòðîìåòðèè (2.1.2.22). Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ïðè îòñóòñòâèè äðó- ãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà, ñîäåðæàùóþ îò 1,2 ìêã äî 3,8 ìêã àëþìèíèé-èîíà, ïîìåùàþò â ïîëèìåðíóþ ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ìë, ïðèáàâëÿþò 50 ìë âîäû Ð è ðàñòâîðÿþò íà óëüòðàçâóêîâîé áàíå â òå÷åíèå 30 ìèí. Äî- áàâëÿþò 4 ìë àçîòíîé êèñëîòû Ð è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âîäîé Ð äî 100,0 ìë. Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ.
Àëþìèíèåâóþ ïðîâî- ëîêó îïóñêàþò íà íåñêîëüêî ìèíóò â 6 Ì õëîðî- âîäîðîäíóþ êèñëîòó P, íàãðåòóþ äî 80 °Ñ. Îêî- ëî 0,1 ã îáðàáîòàííîé ïðîâîëîêè ðàñòâîðÿþò â ñìåñè 10 ìë 25 % (îá/îá) õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòû è 2 ìë àçîòíîé êèñëîòû êîíöåíòðèðî- âàííîé ïðè òåìïåðàòóðå îêîëî 80 °Ñ è ïðîäîë- æàþò íàãðåâàíèå äî ïîëó÷åíèÿ îáúåìà ñìåñè îêîëî 4 ìë. Ñìåñü îõëàæäàþò äî êîìíàòíîé òåìïåðàòóðû è ïðèáàâëÿþò 4 ìë âîäû Ð, çàòåì óïàðèâàþò äî îáúåìà îêîëî 2 ìë, îõëàæäàþò, ïåðåíîñÿò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ìë, äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 100,0 ìë è ïåðåìåøèâàþò. 10 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà 175 äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 100,0 ìë è ïåðåìå- øèâàþò. 1,0 ìë äàííîãî ðàñòâîðà äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 100,0 ìë. Çàòåì 1,0 ìë, 2,0 ìë è 4,0 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà ïîìåùàþò â îò- äåëüíûå ìåðíûå êîëáû âìåñòèìîñòüþ 100 ìë è äîâîäÿò àçîòíîé êèñëîòîé ðàçáàâëåííîé Ð1äî îáúåìà 100,0 ìë (êîíöåíòðàöèÿ àëþìèíèé-èîíà 0,01 ìêã/ìë, 0,02 ìêã/ìë è 0,04 ìêã/ìë, ñîîòâåò- ñòâåííî). Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Àçîòíàÿ êèñëîòà ðàçáàâëåííàÿ Ð1. Èçìåðÿþò ïîãëîùåíèå èñïûòóåìîãî ðàñòâî- ðà è ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ ïðè äëèíå âîëíû 309,3 íì, èñïîëüçóÿ â êà÷åñòâå èñòî÷íèêà èçëó- ÷åíèÿ ëàìïó ñ ïîëûì àëþìèíèåâûì êàòîäîì è áåñïëàìåííóþ ýëåêòðè÷åñêóþ ïå÷ü. Êîíöåíòðàöèþ àëþìèíèÿ â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå îïðåäåëÿþò ïî êàëèáðîâî÷íîìó ãðà- ôèêó, ïîñòðîåííîìó ïî ðàñòâîðàì ñðàâíåíèÿ. Ðàññ÷èòûâàþò ñîäåðæàíèå àëþìèíèÿ â ñóá- ñòàíöèè. 201040018-2019 2.1.4.18. Ñâîáîäíûé ôîðìàëüäåãèä Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ïðèìåíÿþò ìåòîä À. Ìå- òîä Á ïðèìåíÿþò äëÿ âàêöèí, â êîòîðûõ äëÿ íåé- òðàëèçàöèè èçáûòî÷íîãî ôîðìàëüäåãèäà èñ- ïîëüçóþò íàòðèÿ ìåòàáèñóëüôèò. ÌÅÒÎÄ À Âàêöèíû, ïðèìåíÿåìûå â ìåäèöèíå, ðàçâî- äÿò â 10 ðàç. Áàêòåðèàëüíûå àíàòîêñèíû, ïðèìå- íÿåìûå â âåòåðèíàðèè, ðàçâîäÿò â 25 ðàç. Ê 1 ìë èñïûòóåìîé âàêöèíû, ðàçâåäåííîé êàê óêàçàíî âûøå, ïðèáàâëÿþò 4 ìë âîäû Ð è 5 ìë àöåòèëàöåòîíîâîãî ðåàêòèâà Ð1. Ïðî- áèðêó ïîìåùàþò íà âîäÿíóþ áàíþ è âûäåðæè- âàþò ïðè òåìïåðàòóðå 40 °Ñ â òå÷åíèå 40 ìèí. Îáðàçöû ïðîñìàòðèâàþò âäîëü âåðòèêàëüíîé îñè ïðîáèðîê. Èíòåíñèâíîñòü îêðàñêè ïîëó÷åí- íîãî ðàñòâîðà íå äîëæíà ïðåâûøàòü èíòåíñèâ- íîñòü îêðàñêè ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ, ïðèãîòîâ- ëåííîãî àíàëîãè÷íî èñïûòóåìîé âàêöèíå, ñ èñ- ïîëüçîâàíèåì âìåñòî ðàçâåäåííîé âàêöèíû 1 ìë ðàñòâîðà ôîðìàëüäåãèäà Ð, ñîäåðæàùåãî 20 ìêã ôîðìàëüäåãèäà (ÑÍ2Î) â îäíîì ìèëëè- ëèòðå. ÌÅÒÎÄ Á Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Èñïûòóåìóþ âàêöè- íó ðàçâîäÿò âîäîé Ð â ñîîòíîøåíèè 1:200. Åñëè èñïûòóåìàÿ âàêöèíà ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ýìóëü- ñèþ, ãîòîâÿò ýêâèâàëåíòíûå ðàçâåäåíèÿ, èñ- ïîëüçóÿ âîäíóþ ôàçó, îòäåëåííóþ ïîäõîäÿùèì ñïîñîáîì (ñì. íèæå). Åñëè äëÿ îòäåëåíèÿ âîä- íîé ôàçû ïðèìåíÿþò îäíó èç ìåòîäèê, îïèñàí- íûõ íèæå, èñïîëüçóþò ðàçâåäåíèå âîäíîé ôàçû â ñîîòíîøåíèè 1:20. Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò ðàñòâîðû, ñî- äåðæàùèå 0,25 ã/ë, 0,50 ã/ë, 1,00 ã/ë, 2,00 ã/ë ÑÍ2Î, ðàçâåäåíèåì ðàñòâîðà ôîðìàëüäåãèäà Ð âîäîé Ð. Çàòåì ãîòî- âÿò ðàçâåäåíèÿ êàæäîãî èç ïîëó÷åííûõ ðàñòâî- ðîâ âîäîé Ð â ñîîòíîøåíèè 1:200. Ê 0,5 ìë èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è êàæäîãî ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ ïðèáàâëÿþò ïî 5,0 ìë ñâå- æåïðèãîòîâëåííîãî ðàñòâîðà 0,5 ã/ë ìåòèëáåí- çîòèàçîëîíãèäðàçîíà ãèäðîõëîðèäà Ð, çàêðûâà- þò ïðîáèðêè, âñòðÿõèâàþò è îñòàâëÿþò íà 60 ìèí. Çàòåì äîáàâëÿþò ïî 1 ìë ðåàêòèâà æå- ëåçà(²²²)õëîðèäà è ñóëüôàìèíîâîé êèñëîòû Ð è îñòàâëÿþò íà 15 ìèí. Èçìåðÿþò îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü (2.1.2.24) ïîëó÷åííûõ ðàñòâîðîâ ïðè äëèíå âîëíû 628 íì. Ñîäåðæàíèå ôîðìàëüäåãèäà â èñïûòóåìîé âàê- öèíå îïðåäåëÿþò ïî êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé, ïî- ñòðîåííîé ñ ïîìîùüþ ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ.
Ðå- çóëüòàòû àíàëèçà ñ÷èòàþòñÿ äîñòîâåðíûìè, åñëè êîýôôèöèåíò êîððåëÿöèè (r) êàëèáðîâî÷- íîé êðèâîé ñîñòàâëÿåò íå ìåíåå 0,97. Ýìóëüñèè. Åñëè èñïûòóåìàÿ âàêöèíà ïðåä- ñòàâëÿåò ñîáîé ýìóëüñèþ, âîäíóþ ôàçó îòäåëÿ- þò, èñïîëüçóÿ ïîõîäÿùóþ ìåòîäèêó, è ïðèìåíÿ- þò äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà. Èñïîëüçóþò ñëåäóþùèå ìåòîäèêè. (à) Ê 1,0 ìë èñïûòóåìîé âàêöèíû ïðèáàâëÿ- þò 1,0 ìë èçîïðîïèëìèðèñòàòà Ð è ïåðåìåøè- âàþò. Äîáàâëÿþò 1,3 ìë 1 Ì õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòû, 2,0 ìë õëîðîôîðìà Ð è 2,7 ìë ðàñ- òâîðà 9 ã/ë íàòðèÿ õëîðèäà Ð, òùàòåëüíî ïåðå- ìåøèâàþò. Öåíòðèôóãèðóþò ñ óñêîðåíèåì 15 000g â òå÷åíèå 60 ìèí. Âîäíóþ ôàçó ïåðåíî- ñÿò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 10 ìë è äîâî- äÿò îáúåì ðàñòâîðà âîäîé Ð äî 10,0 ìë. Åñëè îïèñàííàÿ ïðîöåäóðà íå ïîçâîëÿåò îòäåëèòü âîäíóþ ôàçó, ê ðàñòâîðó íàòðèÿ õëîðèäà ïðè- áàâëÿþò ðàñòâîð 100 ã/ë ïîëèñîðáàòà 20 Ð è ïî- âòîðÿþò ïðîöåäóðó, íî öåíòðèôóãèðóþò ñ óñêî- ðåíèåì 22 500g. 176 (á) Ê 1,0 ìë èñïûòóåìîé âàêöèíû ïðèáàâ- ëÿþò 1,0 ìë ðàñòâîðà 100 ã/ë íàòðèÿ õëîðèäà Ð è ïåðåìåøèâàþò. Öåíòðèôóãèðóþò ñ óñêîðåíè- åì 1000 g â òå÷åíèå 15 ìèí. Âîäíóþ ôàçó ïåðå- íîñÿò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 10 ìë è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âîäîé Ð äî 10,0 ìë. (â) Ê 1,0 ìë èñïûòóåìîé âàêöèíû ïðèáàâëÿ- þò 2,0 ìë ðàñòâîðà 100 ã/ë íàòðèÿ õëîðèäà Ð è 3,0 ìë õëîðîôîðìà Ð, ïåðåìåøèâàþò. Öåíòðè- ôóãèðóþò ñ óñêîðåíèåì 1000 g â òå÷åíèå 5 ìèí. Ïåðåíîñÿò âîäíóþ ôàçó â ìåðíóþ êîëáó âìåñòè- ìîñòüþ 10 ìë è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âîäîé Ð äî 10,0 ìë. 201040019-2019 2.1.4.19. Èäåíòèôèêàöèÿ è êîíòðîëü îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé Ìåòîäèêè èñïûòàíèé, îïèñàííûå â äàííîì îáùåì ìåòîäå, ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû: 1) äëÿ èäåíòèôèêàöèè áîëüøèíñòâà îñòà- òî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé êëàññîâ 1 è 2 â àêòèâíîé ñóáñòàíöèè, âñïîìîãàòåëüíîì âåùåñòâå èëè ëå- êàðñòâåííîì ïðåïàðàòå, åñëè îñòàòî÷íûå ðàñ- òâîðèòåëè íåèçâåñòíû; 2) äëÿ îïðåäåëåíèÿ ïðåäåëüíîãî ñîäåðæà- íèÿ îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé êëàññîâ 1 è 2, åñëè îíè ïðèñóòñòâóþò â àêòèâíîé ñóáñòàíöèè, âñïîìîãàòåëüíîì âåùåñòâå èëè ëåêàðñòâåííîì ïðåïàðàòå; 3) äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ðàñ- òâîðèòåëåé êëàññà 2, åñëè èõ ïðåäåëüíûå íîðìû ñîäåðæàíèÿ ïðåâûøàþò 1000 ppm (0.1 %) èëè äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ðàñòâîðèòå- ëåé êëàññà 3, ïðè íåîáõîäèìîñòè. Îñòàòî÷íûå ðàñòâîðèòåëè êëàññà 1, êëàññà 2 è êëàññà 3 ïåðå÷èñëåíû â îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå 2.3.2.0. Îñòàòî÷íûå ðàñòâîðèòåëè. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà íèæå îïèñàíû òðè ðàñòâîðèòåëÿ è ñòàòè÷åñêèå óñëîâèÿ ââîäà ïàðîâîé ôàçû îáðàçöà â õðîìàòî- ãðàôè÷åñêóþ ñèñòåìó. Èç äâóõ îïèñàííûõ õðî- ìàòîãðàôè÷åñêèõ ñèñòåì ïðåäïî÷òèòåëüíîé ÿâ- ëÿåòñÿ ñèñòåìà À. Ñèñòåìó  îáû÷íî èñïîëüçó- þò äëÿ èäåíòèôèêàöèè. Âûáîð ìåòîäèêè ïðèãîòîâëåíèÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà çàâèñèò îò ðàñòâîðèìîñòè ñóáñòàíöèè è â íåêîòîðûõ ñëó- ÷àÿõ îò îïðåäåëÿåìûõ îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòå- ëåé. Òàêèå îñòàòî÷íûå ðàñòâîðèòåëè êàê ôîðìà- ìèä, 2-ýòîêñèýòàíîë, 2-ìåòîêñèýòàíîë, ýòèëåíã- ëèêîëü, N-ìåòèëïèððîëèäîí è ñóëüôîëàí ñ òðó- äîì îáíàðóæèâàþòñÿ â óñëîâèÿõ ïàðîôàçíîãî àíàëèçà. Äëÿ êîíòðîëÿ óêàçàííûõ îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé ñëåäóåò ïðèìåíÿòü äðóãèå ïîä- õîäÿùèå ìåòîäèêè. Åñëè ìåòîäèêó èñïûòàíèÿ ïðèìåíÿþò äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ îñòàòî÷íûõ ðàñ- òâîðèòåëåé â ñóáñòàíöèè, îíà äîëæíà áûòü âà- ëèäèðîâàíà. ÌÅÒÎÄÈÊÀ Îïðåäåëåíèå ïðîâîäÿò ìåòîäîì ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè ñî ñòàòè÷åñêèì ââîäîì ïàðîâîé ôàçû (2.1.2.27). Ïðîáîïîäãîòîâêà 1. Èñïûòóåìûé îáðàçåö ïðåäíàçíà÷åí äëÿ êîíòðîëÿ îñòàòî÷íûõ ðàñòâî- ðèòåëåé â âîäîðàñòâîðèìûõ ñóáñòàíöèÿõ. Ðàñòâîð îáðàçöà (1). 0,200 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàñòâîðÿþò â âîäå Ð è äîâîäÿò òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî îáúåìà 20,0 ìë. Ïðîáîïîäãîòîâêà 2.
Îáðàçåö ïðåäíàçíà÷åí äëÿ êîíòðîëÿ îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé â íå- ðàñòâîðèìûõ â âîäå ñóáñòàíöèÿõ. Ðàñòâîð îáðàçöà (2). 0,200 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàñòâîðÿþò â äèìåòèëôîðìàìèäå Ð (ÄÌÔ) è äîâîäÿò òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî îáú- åìà 20,0 ìë. Ïðîáîïîäãîòîâêà 3. Èñïûòóåìûé îáðàçåö ïðåäíàçíà÷åí äëÿ êîíòðîëÿ N,N-äèìåòèëàöåòà- ìèäà è/èëè N,N-äèìåòèëôîðìàìèäà, åñëè èç- âåñòíî èëè äîïóñêàåòñÿ, ÷òî îäèí èëè îáà ðàñ- òâîðèòåëÿ ïðèñóòñòâóþò â ñóáñòàíöèè. Ðàñòâîð îáðàçöà (3). 0,200 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàñòâîðÿþò â 1,3-äèìåòèë-2-èìèäàçî- ëèäèíîíå Ð (ÄÌÈ) è äîâîäÿò òåì æå ðàñòâîðèòå- ëåì äî îáúåìà 20,0 ìë.  íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ, êîãäà íè îäíà èç âû- øåïðèâåäåííûõ ìåòîäèê ïðèãîòîâëåíèÿ îáðàç- öà íå ïîäõîäèò, âîçìîæíî èñïîëüçîâàíèå äðóãî- ãî ðàñòâîðèòåëÿ è äðóãèõ ïîäõîäÿùèõ óñëîâèé ñòàòè÷åñêîãî ââîäà ïàðîâîé ôàçû, ïðèãîäíîñòü êîòîðûõ äîëæíà áûòü äîêàçàíà. Ðàñòâîð ðàñòâîðèòåëÿ (à). Ê 1,0 ìë ÑÎ ðàñ- òâîðèòåëÿ êëàññà 1 ïðèáàâëÿþò 9 ìë äèìåòèë- ñóëüôîêñèäà Ð è äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 100,0 ìë. 1,0 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 100 ìë. 1,0 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 10,0 ìë. Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ äîëæíû ñîîòâåòñòâî- âàòü ñëåäóþùèì äîïóñòèìûì íîðìàì ñîäåðæà- íèÿ îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé: – áåíçîë: 2 ppm; – óãëåðîäà òåòðàõëîðèä: 4 ppm; – 1,2-äèõëîðýòàí: 5 ppm; 177 – 1,1-äèõëîðýòåí: 8 ppm; – 1,1,1-òðèõëîðýòàí: 10 ppm. Ðàñòâîð ðàñòâîðèòåëÿ (b). Ñîîòâåòñòâóþ- ùèå êîëè÷åñòâà ðàñòâîðèòåëåé êëàññà 2 ðàñòâî- ðÿþò â äèìåòèëñóëüôîêñèäå Ð è äîâîäÿò òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî îáúåìà 100,0 ìë. Ïîëó÷åííûé ðàñòâîð ðàçâîäÿò âîäîé Ðäî êîíöåíòðàöèè 1/20 îò çíà÷åíèé ïðåäåëüíîé êîíöåíòðàöèè, ïðèâå- äåííîé â òàáëèöå 2 îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòà- òüè 2.3.2.0. Îñòàòî÷íûå ðàñòâîðèòåëè. Ðàñòâîð ðàñòâîðèòåëÿ (ñ). 1,00 ã ðàñòâîðè- òåëÿ èëè ðàñòâîðèòåëåé, ñîäåðæàùèõñÿ â ñóá- ñòàíöèè, ðàñòâîðÿþò â äèìåòèëñóëüôîêñèäå Ð èëè âîäå Ð, â ñëó÷àå ïðèìåíèìîñòè, è äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 100,0 ìë. Ïîëó÷åííûé ðàñ- òâîð ðàçâîäÿò äî êîíöåíòðàöèè 1/20 îò çíà÷åíèé ïðåäåëüíîé êîíöåíòðàöèè, óêàçàííîé â òàáëèöå 1 èëè 2 îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüè 2.3.2.0. Îñòàòî÷íûå ðàñòâîðèòåëè. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Ãîòîâÿò â óñëîâèÿõ, îïèñàííûõ äëÿ ðàñòâîðà ðàñòâîðèòåëÿ (ñ), íî áåç äîáàâëåíèÿ ðàñòâîðèòåëÿ(åé) (èñïîëüçóþò äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ îòñóòñòâèÿ ìåøàþùèõ ïè- êîâ). Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. 5,0 ìë ðàñòâîðà èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà è 1,0 ìë êîíòðîëüíîãî ðàñ- òâîðà ïîìåùàþò âî ôëàêîí äëÿ ââîäà ïàðîâîé ôàçû. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ (à) (êëàññ 1). 1,0 ìë ðàñ- òâîðà ðàñòâîðèòåëÿ (à) è 5,0 ìë ñîîòâåòñòâóþ- ùåãî ðàñòâîðèòåëÿ ïîìåùàþò âî ôëàêîí äëÿ ââîäà ïàðîâîé ôàçû. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ (à1) (êëàññ 1). 5,0 ìë ðàñ- òâîðà èñïûòóåìîãî îáðàçöà è 1,0 ìë ðàñòâîðà ðàñòâîðèòåëÿ (à) ïîìåùàþò âî ôëàêîí äëÿ ââîäà ïàðîâîé ôàçû. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ (b) (êëàññ 2). 1,0 ìë ðàñ- òâîðà ðàñòâîðèòåëÿ (b) è 5,0 ìë ñîîòâåòñòâóþ- ùåãî ðàñòâîðèòåëÿ ïîìåùàþò âî ôëàêîí äëÿ ââîäà ïàðîâîé ôàçû. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ (ñ). 5,0 ìë ðàñòâîðà èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà è 1,0 ìë ðàñòâîðà ðàñòâîðè- òåëÿ (ñ) ïîìåùàþò âî ôëàêîí äëÿ ââîäà ïàðîâîé ôàçû. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ (d). 1,0 ìë êîíòðîëüíîãî ðàñòâîðà è 5,0 ìë ñîîòâåòñòâóþùåãî ðàñòâîðè- òåëÿ ïîìåùàþò âî ôëàêîí äëÿ ââîäà ïàðîâîé ôàçû. Ôëàêîíû ïëîòíî óêóïîðèâàþò ðåçèíîâîé ìåìáðàííîé êðûøêîé, ïîêðûòîé ïîëèòåòðàôòî- ðýòèëåíîì è îáâàëüöîâûâàþò àëþìèíèåâûì êîëïà÷êîì. Âñòðÿõèâàþò ñîäåðæèìîå ôëàêîíà äî ïîëó÷åíèÿ ãîìîãåííîãî ðàñòâîðà. Äëÿ ñòàòè÷åñêîãî ïàðîôàçíîãî àíàëèçà ìî- ãóò áûòü èñïîëüçîâàíû óñëîâèÿ, ïðèâåäåííûå â òàáëèöå 2.1.4.19.-1.
Äëÿ ïðîâåäåíèÿ õðîìàòîãðàôè÷åñêîãî àíà- ëèçà ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû ñëåäóþùèå ñèñ- òåìû: ÑÈÑÒÅÌÀ À – êîëîíêà êâàðöåâàÿ êàïèëëÿðíàÿ ðàçìåðîì 30 ì ´ 0,32 ìì èëè 30 ì ´ 0,53 ìì, ïîêðûòàÿ ïëåíêîé ïîïåðå÷íî-ñøèòîãî ïîëèìåðà ñ6 % ïî- ëèöèàíîïðîïèë-ôåíèëñèëîêñàíà è 94 % ïîëè- äèìåòèëñèëîêñàíà òîëùèíîé 1,8 ìêì èëè 3 ìêì; – ãàç-íîñèòåëü àçîò äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð èëè ãåëèé äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð; – äåëåíèå ïîòîêà 1:5; – ëèíåéíàÿ ñêîðîñòü ãàçà-íîñèòåëÿ îêîëî 35 ñì/ñ; – äåòåêòîð ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûé (äëÿ õëîðèðîâàííûõ îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé êëàññà 1 ìîæåò áûòü òàêæå èñïîëüçîâàí ìàññ-ñïåêòðîìåòð èëè äåòåêòîð ýëåêòðîííîãî çàõâàòà); – òåìïåðàòóðà êîëîíêè 40 °Ñ â òå÷åíèå 20 ìèí, çàòåì ïîâûøåíèå òåìïåðàòóðû ñî ñêî- ðîñòüþ 10 °Ñ/ìèí äî 240 °Ñ è âûäåðæèâàíèå ïðè 240 °Ñ â òå÷åíèå 20 ìèí; 178 Òàáëèöà 2.1.4.19.-1. — Óñëîâèÿ ñòàòè÷åñêîãî ïàðîôàçíîãî àíàëèçà Ðàáî÷èå ïàðàìåòðû Ìåòîäèêà ïðîáîïîäãîòîâêè 1 2 3 Òåìïåðàòóðà óðàâíîâåøèâàíèÿ (°Ñ) 80 105 80 Âðåìÿ óðàâíîâåøèâàíèÿ (ìèí) 60 45 45 Òåìïåðàòóðà ëèíèè ïîäà÷è ãàçîâîé ïðîáû (°Ñ) 85 110 105 Ãàç-íîñèòåëü: àçîò äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð èëè ãåëèé äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð ïðè ñîîòâåòñòâóþùåì äàâëåíèè Âðåìÿ ïðåáûâàíèÿ ïîä äàâëåíèåì (ñ) 30 30 30 Îáúåì ââîäèìîé ïðîáû (ìë) 1 1 1 – òåìïåðàòóðà áëîêà ââîäà ïðîá 140 °Ñ; – òåìïåðàòóðà äåòåêòîðà 250 °Ñ.  òåõ ñëó÷àå, êîãäà ìàòðèöà ìåøàåò îïðåäå- ëåíèþ, èñïîëüçóþò ñèñòåìó Â. ÑÈÑÒÅÌÀ  – êîëîíêà êâàðöåâàÿ êàïèëëÿðíàÿ ðàçìåðîì 30 ì ´ 0,32 ìì èëè 30 ì ´ 0,53 ìì, ïîêðûòàÿ ïëåíêîé ìàêðîãîëà 20 000 Ð òîëùèíîé 0,25 ìêì; – ãàç-íîñèòåëü: àçîò äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð èëè ãåëèé äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð; – äåëåíèå ïîòîêà 1:5; – ëèíåéíàÿ ñêîðîñòü ãàçà-íîñèòåëÿ îêîëî 35 ñì/ñ; – äåòåêòîð ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûé (äëÿ õëîðèðîâàííûõ îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé êëàññà 1 ìîæåò áûòü òàêæå èñïîëüçîâàí ìàññ- ñïåêòðîìåòð èëè äåòåêòîð ýëåêòðîííîãî çàõâà- òà); – òåìïåðàòóðà êîëîíêè: 50 °Ñ â òå÷åíèå 20 ìèí, çàòåì ïîâûøåíèå òåìïåðàòóðû ñî ñêî- ðîñòüþ 6 °Ñ/ìèí äî 165 °Ñ è âûäåðæèâàíèå ïðè òåìïåðàòóðå 165 °Ñ â òå÷åíèå 20 ìèí; – òåìïåðàòóðà áëîêà ââîäà ïðîá 140 °Ñ; – òåìïåðàòóðà äåòåêòîðà 250 °Ñ.  êîëîíêó, îïèñàííóþ äëÿ ñèñòåìû À, ââî- äÿò 1 ìë ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (à)è çàïèñûâàþò õðîìàòîãðàììó â óñ- ëîâèÿõ, ïîçâîëÿþùèõ îïðåäåëèòü îòíîøåíèå ñèãíàë/øóì äëÿ ïèêà 1,1,1-òðèõëîðýòàíà. Îòíî- øåíèå ñèãíàë/øóì äîëæíî áûòü íå ìåíåå 5. Òè- ïè÷íàÿ õðîìàòîãðàììà ïðåäñòàâëåíà íà ðèñóíêå 2.1.4.19.-1. 1 ìë ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (à1) ââîäÿò â êîëîíêó, îïèñàííóþ äëÿ ñèñòåìû À. Íà õðîìàòîãðàììå äîëæíû îáíàðó- æèâàòüñÿ ïèêè îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé êëàñ- ñà 1. 1 ìë ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (b) ââîäÿò â êîëîíêó, îïèñàííóþ äëÿ ñèñòåìû À, è çàïèñûâàþò õðîìàòîãðàììó â óñ- ëîâèÿõ, ïîçâîëÿþùèõ îïðåäåëèòü ðàçðåøåíèå ìåæäó ïèêàìèàöåòîíèòðèëà è ìåòèëåíõëîðèäà. Õðîìàòîãðàôè÷åñêàÿ ñèñòåìà ñ÷èòàåòñÿ ïðèãîä- íîé, åñëè ïîëó÷åííàÿ õðîìàòîãðàììà èìååò ñõîäñòâî ñ õðîìàòîãðàììîé, ïðåäñòàâëåííîé íà ðèñóíêå 2.1.4.19.-2, à ðàçðåøåíèå ìåæäó ïèêà- ìèàöåòîíèòðèëà è ìåòèëåíõëîðèäà ñîñòàâëÿåò íå ìåíåå 1,0. 1 ìë ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû èñïûòóåìî- ãî ðàñòâîðàââîäÿò â êîëîíêó, îïèñàííóþ äëÿ ñèñòåìûÀ. Åñëè íà õðîìàòîãðàììå èñïûòóåìî- ãî ðàñòâîðà îòñóòñòâóþò ïèêè, ñîîòâåòñòâóþ- ùèå ïèêàì îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé íà õðîìà- òîãðàììàõ ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ (à) èëè (b), èñ- ïûòóåìûé îáðàçåö âûäåðæèâàåò èñïûòàíèå. Åñëè íà õðîìàòîãðàììå èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà îáíàðóæèâàåòñÿ ïèê, ñîîòâåòñòâóþùèé ïèêó ëþáîãî îñòàòî÷íîãî ðàñòâîðèòåëÿ íà õðîìàòî- 179 Ðèñóíîê 2.1.4.19.-1. — Òèïè÷íàÿ õðîìàòîãðàììà ðàñòâîðèòåëåé êëàññà 1 ïðè èñïîëüçîâàíèè óñëîâèé, îïèñàí- íûõ äëÿ ñèñòåìû À è ìåòîäèêè 1.
Ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûé äåòåêòîð 1) 1,1- äèõëîðýòåí 2) 1,1,1-òðèõëîðýòàí 3) óãëåðîäà òåòðàõëîðèä 4) áåíçîë 5) 1,2-äèõëîðýòàí ãðàììàõ ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ (à) èëè (b), ñëåäó- åò èñïîëüçîâàòü ñèñòåìó Â.  êîëîíêó, îïèñàííóþ äëÿ ñèñòåìû Â, ââî- äÿò 1 ìë ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (à) è çàïèñûâàþò õðîìàòîãðàììó â óñëîâèÿõ, ïîçâîëÿþùèõ îïðåäåëèòü îòíîøå- íèå ñèãíàë/øóì äëÿ ïèêà áåíçîëà. Îòíîøåíèå ñèãíàë/øóì äîëæíî áûòü íå ìåíåå 5. Òèïè÷íàÿ õðîìàòîãðàììà ïðåäñòàâëåíà íà ðèñóíêå 2.1.4.19.-3. 1 ìë ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (à1) ââîäÿò â êîëîíêó, îïèñàííóþ äëÿ ñèñòåìû Â. Íà õðîìàòîãðàììå äîëæíû îáíàðó- æèâàòüñÿ ïèêè îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé êëàñ- ñà 1. 1 ìë ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (b) ââîäÿò â êîëîíêó, îïèñàííóþ äëÿ ñèñòåìû Â, è çàïèñûâàþò õðîìàòîãðàììó â óñ- ëîâèÿõ, ïîçâîëÿþùèõ îïðåäåëèòü ðàçðåøåíèå ìåæäó ïèêàìè àöåòîíèòðèëà è òðèõëîðýòåíà. Õðîìàòîãðàôè÷åñêàÿ ñèñòåìà ñ÷èòàåòñÿ ïðèãîä- íîé, åñëè ïîëó÷åííàÿ õðîìàòîãðàììà èìååò ñõîäñòâî ñ õðîìàòîãðàììîé, ïðåäñòàâëåííîé íà ðèñóíêå 2.1.4.19.-4, à ðàçðåøåíèå ìåæäó ïèêà- ìèàöåòîíèòðèëà è òðèõëîðýòåíà ñîñòàâëÿåò íå ìåíåå 1,0.  êîëîíêó, îïèñàííóþ äëÿ ñèñòåìû Â, ââî- äÿò 1 ìë ïàðîâîé ôàçû èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà. Åñëè íà õðîìàòîãðàììå èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà îòñóòñòâóþò ïèêè, ñîîòâåòñòâóþùèå ïèêàì îñ- òàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé íà õðîìàòîãðàììàõ ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ (à) è (b), èñïûòóåìûé îáðàçåö âûäåðæèâàåò èñïûòàíèå. Åñëè íà õðî- ìàòîãðàììå èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà îáíàðóæèâà- åòñÿ ïèê, ñîîòâåòñòâóþùèé ïèêó ëþáîãî îñòà- òî÷íîãî ðàñòâîðèòåëÿ íà õðîìàòîãðàììàõ ðàñ- òâîðîâ ñðàâíåíèÿ (à) è (b), îáíàðóæèâàåìûé òàêæå ïðè èñïîëüçîâàíèè ñèñòåìû À, ïîñòóïà- þò ñëåäóþùèì îáðàçîì. Ââîäÿò 1 ìë ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû ðàñ- òâîðà ñðàâíåíèÿ (ñ) â êîëîíêó, îïèñàííóþ äëÿ ñèñòåìû À èëè Â. Ïðè íåîáõîäèìîñòè ÷óâñòâè- òåëüíîñòü ñèñòåìû ðåãóëèðóþò òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû âûñîòà ïèêà îïðåäåëÿåìîãî îñòàòî÷íîãî ðàñòâîðèòåëÿ(åé) íà ïîëó÷åííîé õðîìàòîãðàì- 180 Ðèñóíîê 2.1.4.19.-2. — Õðîìàòîãðàììà ðàñòâîðèòåëåé êëàññà 2 (ðàñòâîð ðàñòâîðèòåëÿ (b))ïðè èñïîëüçîâà- íèè óñëîâèé, îïèñàííûõ äëÿ ñèñòåìû À è ìåòîäèêè 1. Ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûé äåòåêòîð 1) ìåòàíîë 2) àöåòîíèòðèë 3) äèõëîðìåòàí 4) ãåêñàí 5) 1,2-äèõëîðýòåí 6) íèòðîìåòàí 7) òåòðàãèäðîôóðàí 8) õëîðîôîðì 9) öèêëîãåêñàí 10) 1,2-äèìåòîêñèýòàí 11) 1,1,2-òðèõëîðýòåí 12) Ìåòèëöèêëîãåêñàí 13) 1,4-äèîêñàí 14) ïèðèäèí (tr = 18,7 ìèí) 15) òîëóîë 16) ìåòèëáóòèëêåòîí 17) õëîðáåíçîë 18) îðòî-, ìåòà- è ïàðà-êñèëîë 19) Êóìîë 20) òåòðàëèí 181 Ðèñóíîê 2.1.4.19.-3. — Õðîìàòîãðàììà îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé êëàññà 1 ïðè èñïîëüçîâàíèè óñëîâèé, îïè- ñàííûõ äëÿ ñèñòåìû  è ìåòîäèêè 1. Ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûé äåòåêòîð 1) 1,1-äèõëîðýòåí 2) 1,1,1-òðèõëîðýòàí 3) óãëåðîäà òåòðàõëîðèä 4) áåíçîë 5) 1,2-äèõëîðýòàí Ðèñóíîê 2.1.4.19.-4. — Òèïè÷íàÿ õðîìàòîãðàììà îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé êëàññà 2 (ðàñòâîð ðàñòâîðèòå- ëÿ (b)) ïðè èñïîëüçîâàíèè óñëîâèé, îïèñàííûõ äëÿ ñèñòåìû  è ìåòîäèêè 1. Ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûé äåòåêòîð 1) ìåòàíîë 2) àöåòîíèòðèë 3) äèõëîðìåòàí 4) ãåêñàí 5) 1,2-äèõëîðýòåí 6) íèòðîìåòàí 7) òåòðàãèäðîôóðàí 8) õëîðîôîðì 9) öèêëîãåêñàí 10) 1,2-äèìåòîêñèýòàí 11) 1,1,2-òðèõëîðýòåí 12) Ìåòèëöèêëîãåêñàí 13) 1,4-äèîêñàí 14) ïèðèäèí 15) òîëóîë 16) ìåòèëáóòèëêåòîí 17) õëîðáåíçîë 18) îðòî-, ìåòà- è ïàðà-êñèëîë 19) Êóìîë 20) òåòðàëèí (tr = 28 ìèí) ìå ñîñòàâëÿëà íå ìåíåå 50 % îò ïîëíîé øêàëû ðåãèñòðèðóþùåãî óñòðîéñòâà. Ââîäÿò 1 ìë ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû ðàñ- òâîðà ñðàâíåíèÿ (d). Íå äîëæíû íàáëþäàòüñÿ ìåøàþùèå ïèêè. Õðîìàòîãðàôèðóþò ïî 1 ìë ïàðîâîé ôàçû èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (ñ). Ïîâòîðíîå õðîìàòîãðàôèðîâàíèå ïðîâîäÿò íå ìåíåå òðåõ ðàç.
Ñðåäíÿÿ ïëîùàäü ïèêà îñòàòî÷íîãî ðàñòâî- ðèòåëÿ(åé), âû÷èñëåííàÿ èç õðîìàòîãðàìì èñ- ïûòóåìîãî ðàñòâîðà, íå äîëæíà ïðåâûøàòü ïî- ëîâèíó ñðåäíåé ïëîùàäè ïèêà îñòàòî÷íîãî ðàñ- òâîðèòåëÿ (åé), âû÷èñëåííîé èç õðîìàòîãðàìì ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (ñ). Ðåçóëüòàòû àíàëèçà ñ÷è- òàþòñÿ äîñòîâåðíûìè, åñëè îòíîñèòåëüíîå ñòàíäàðòíîå îòêëîíåíèå, ðàññ÷èòàííîå äëÿ ðàç- íèöû ïëîùàäåé ïèêîâ ðàñòâîðèòåëåé íà òðåõ õðîìàòîãðàììàõ ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ (ñ) è èñïû- òóåìîãî ðàñòâîðà, ñîñòàâëÿåò íå áîëåå 15 %. Äèàãðàììà ìåòîäèêè àíàëèçà ïðåäñòàâëåíà íà ðèñóíêå 2.1.4.19.-5. Åñëè ñîäåðæàíèå îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé (êëàññîâ 2 èëè 3) ñîñòàâëÿåò 0,1 % è áîëåå, òî äëÿ èõ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí ìåòîä ñòàíäàðòíûõ äîáàâîê. 182 Ðèñóíîê 2.1.4.19.-5. — Äèàãðàììà èäåíòèôèêàöèè è îïðåäåëåíèÿ äîïóñòèìûõ íîðì ñîäåðæàíèÿ îñòàòî÷íûõ ðàñòâîðèòåëåé 201040020-2019 2.1.4.20. N,N-äèìåòèëàíèëèí ÌÅÒÎÄ À Èñïûòàíèå ïðîâîäÿò ìåòîäîì ãàçîâîé õðî- ìàòîãðàôèè (2.1.2.27), èñïîëüçóÿ â êà÷åñòâå âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà N,N-äèýòèëàíèëèí Ð. Ðàñòâîð âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà. 50 ìã N,N-äèýòèëàíèëèíà Ð ðàñòâîðÿþò â 4 ìë 0,1 Ì õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòû è äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 50 ìë. 1 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà äîâî- äÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 100 ìë. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. 0,50 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïîìåùàþò â ïðîáèðêó ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿííîé ïðîáêîé, ðàñòâîðÿþò â 30,0 ìë âîäû Ð, çàòåì ïðèáàâëÿþò 1,0 ìë ðàñòâîðà âíóòðåííå- ãî ñòàíäàðòà è íàãðåâàþò ïîëó÷åííûé ðàñòâîð äî òåìïåðàòóðû 26 – 28 °Ñ. Äîáàâëÿþò 1,0 ìë ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèäðîêñèäà êîíöåíòðèðîâàí- íîãî Ð è ïåðåìåøèâàþò äî ïîëíîãî ðàñòâîðå- íèÿ. Ïðèáàâëÿþò 2,0 ìë òðèìåòèëïåíòàíà Ð, âñòðÿõèâàþò â òå÷åíèå 2 ìèí è îñòàâëÿþò äî ðàññëîåíèÿ. Èñïîëüçóþò âåðõíèé ñëîé. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ. 50,0 ìã N,N-äèìåòèëà- íèëèíàÐ ðàñòâîðÿþò â 4,0 ìë 0,1 Ì õëîðîâîäî- ðîäíîé êèñëîòû è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âî- äîé Ð äî 50,0 ìë. 1,0 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 100,0 ìë. 1,0 ìë äàí- íîãî ðàñòâîðà äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 30,0 ìë. Ïðèáàâëÿþò 1,0 ìë ðàñòâîðà âíóòðåí- íåãî ñòàíäàðòà è 1,0 ìë ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèäðî- êñèäà êîíöåíòðèðîâàííîãî Ð, äîáàâëÿþò 2,0 ìë òðèìåòèëïåíòàíà Ð, âñòðÿõèâàþò â òå÷åíèå 2 ìèí è îñòàâëÿþò äî ðàññëîåíèÿ. Èñïîëüçóþò âåðõíèé ñëîé. Îïðåäåëåíèå ìîæåò áûòü ïðîâåäåíî íà ãàçî- âîì õðîìàòîãðàôå ñ ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûì äåòåêòîðîì â ñëåäóþùèõ óñëîâèÿõ: – êâàðöåâàÿ êîëîíêà êàïèëëÿðíàÿ ðàçìåðîì 25 ì ´ 0,32 ìì, ïîêðûòàÿ ïëåíêîé ïîïåðå÷- íî-ñøèòîãî ïîëèìåòèëôåíèëñèëîêñàíà Ð òîë- ùèíîé 0,52 ìêì; – ãàç-íîñèòåëü ãåëèé äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð; – äåëåíèå ïîòîêà 1:20; – äàâëåíèå íà âõîäå â êîëîíêó 50 êÏà; – îáúåìíàÿ ñêîðîñòü ñáðàñûâàåìîãî ãàçà- íîñèòåëÿ 20 ìë/ìèí; – êâàðöåâàÿ âñòàâêà â èñïàðèòåëü äëèíîé îêîëî 1 ñì, çàïîëíåííàÿ ñëîåì äèàòîìèòà äëÿ ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè Ð, ïðîïèòàííûì ïîëè- äèìåòèëñèëîêñàíîì Ð â êîëè÷åñòâå 10 % (ì/ì); – òåìïåðàòóðà êîëîíêè 150 °Ñ â òå÷åíèå 5 ìèí, çàòåì ïîâûøåíèå òåìïåðàòóðû ñî ñêîðî- ñòüþ 20 °Ñ/ìèí äî 275 °Ñ è óäåðæèâàíèå òåìïå- ðàòóðû â òå÷åíèå 3 ìèí; – òåìïåðàòóðà áëîêà ââîäà ïðîá 220 °Ñ; – òåìïåðàòóðà äåòåêòîðà 300 °Ñ. Âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ ïèêà N,N-äèìåòèëàíè- ëèíà ñîñòàâëÿåò îêîëî 3,6 ìèí, N,N-äèýòèëàíè- ëèíà — îêîëî 5,0 ìèí. Õðîìàòîãðàôèðóþò ïî 1 ìêë èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ. ÌÅÒÎÄ B Èñïûòàíèå ïðîâîäÿò ìåòîäîì ãàçîâîé õðî- ìàòîãðàôèè (2.1.2.27), èñïîëüçóÿ â êà÷åñòâå âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà íàôòàëèí Ð. Ðàñòâîð âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà. 50 ìã íàôòàëèíà Ð ðàñòâîðÿþò â öèêëîãåêñàíå Ð è äî- âîäÿò îáúåì ðàñòâîðà òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî 50 ìë. 5 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà äîâîäÿò öèê- ëîãåêñàíîì Ð äî îáúåìà 100 ìë. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð.
1,0 ã ñóáñòàíöèè ïî- ìåùàþò â ïðîáèðêó ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿííîé ïðîáêîé, ïðèáàâëÿþò 5 ìë 1 Ì ðàñòâîðà íà- òðèÿ ãèäðîêñèäà è 1,0 ìë ðàñòâîðà âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà. Ïðîáèðêó çàêðûâàþò è ýíåðãè÷íî âñòðÿõèâàþò â òå÷åíèå 1 ìèí. Ïðè íåîáõîäèìî- ñòè öåíòðèôóãèðóþò è èñïîëüçóþò âåðõíèé ñëîé. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ. Ê 50,0 ìã N,N-äèìåòè- ëàíèëèíà Ð ïðèáàâëÿþò 2 ìë õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòû Ð è 20 ìë âîäû Ð, âñòðÿõèâàþò äî ïîë- íîãî ðàñòâîðåíèÿ è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âî- äîé Ð äî 50,0 ìë. 5,0 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 250,0 ìë. Ê 1,0 ìë äàííîãî ðàñòâîðà, ïîìåùåííîãî â ïðîáèðêó ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿííîé ïðîáêîé, ïðèáàâëÿþò 5 ìë 1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèäðîêñèäà è1,0 ìë ðàñòâîðà âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà. Ïðîáèðêó çà- êðûâàþò ïðîáêîé è ýíåðãè÷íî âñòðÿõèâàþò â òå÷åíèå 1 ìèí. Ïðè íåîáõîäèìîñòè öåíòðèôó- ãèðóþò è èñïîëüçóþò âåðõíèé ñëîé. Õðîìàòîãðàôèðîâàíèå ìîæåò áûòü ïðîâåäå- íî íà ãàçîâîì õðîìàòîãðàôå ñ ïëàìåííî-èîíèçà- öèîííûì äåòåêòîðîì â ñëåäóþùèõ óñëîâèÿõ: – êîëîíêà ñòåêëÿííàÿ ðàçìåðîì 2 ì ´ 2 ìì, çàïîëíåííàÿ äèàòîìèòîì ñèëàíèçèðîâàííûì äëÿ ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè Ð, ïðîïèòàííûì ïî- ëèìåòèëôåíèëñèëîêñàíîì Ð â êîëè÷åñòâå 3 % (ì/ì); – ãàç-íîñèòåëü àçîò äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð; 183 – ñêîðîñòü ãàçà-íîñèòåëÿ 30 ìë/ìèí; – òåìïåðàòóðà êîëîíêè 120 ºÑ; – òåìïåðàòóðà áëîêà ââîäà ïðîá 150 ºÑ; – òåìïåðàòóðà äåòåêòîðà 150 ºÑ. Õðîìàòîãðàôèðóþò ïî 1 ìêë èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ. 201040021-2019 2.1.4.21. Òÿæåëûå ìåòàëëû è ìûøüÿê â ëåêàðñòâåííîì ðàñòèòåëüíîì ñûðüå è ëåêàðñòâåííûõ ðàñòèòåëüíûõ ïðåïàðàòàõ ÏÐÅÄÎÑÒÅÐÅÆÅÍÈÅ. Ïðè èñïîëüçîâàíèè çàêðûòûõ ðåàêöèîííûõ ñîñóäîâ âûñîêîãî äàâ- ëåíèÿ è ìèêðîâîëíîâîãî ëàáîðàòîðíîãî îáîðó- äîâàíèÿ íåîáõîäèìî ñîáëþäàòü òðåáîâàíèÿ èí- ñòðóêöèè ïî òåõíèêå áåçîïàñíîñòè è ýêñïëóà- òàöèè ïðîèçâîäèòåëÿ. ÏÐÈÁÎÐ Ïðèáîð îáû÷íî ñîñòîèò èç ñëåäóþùèõ ÷àñ- òåé: – ïîëèòåòðàôòîðýòèëåíîâûõ, ïåðôòîðàë- êîêñèïîëèìåðíûõ, êâàðöåâûõ èëè ñòåêëÿííûõ ñîñóäîâ â êà÷åñòâå ðåàêöèîííûõ, âìåñòèìîñòüþ îò 20 ìë äî 150 ìë ñ âîçäóõîíåïðîíèöàåìîé êðûøêîé, êëàïàíà äëÿ ðåãóëèðîâàíèÿ äàâëåíèÿ âíóòðè êîíòåéíåðà è ïîëèòåòðàôòîðýòèëåíîâîé òðóáêè äëÿ âûáðîñà ãàçà; – ñèñòåìû, îáåñïå÷èâàþùåé èçîëÿöèþ ñî- ñóäîâ îò äîñòóïà âîçäóõà è èñïîëüçóþùåé îäè- íàêîâóþ òîðñèîííóþ ñèëó äëÿ êàæäîãî èç íèõ; – ïðîãðàììèðóåìîé ìèêðîâîëíîâîé ïå÷è (íàïðèìåð, ñ ìàãíèòíîé ÷àñòîòîé 2450 ÌÃö è èç- áèðàòåëüíîé ìîùíîñòüþ îò 0 äî (1500 ± 70) Âò íà 1 % ïîâûøåíèÿ), ïðîãðàììèðóþùåãî öèôðî- âîãî êîìïüþòåðà, ìèêðîâîëíîâîãî ðåçîíàòîðà, ïîêðûòîãî ïîëèòåòðàôòîðýòèëåíîì, ñ âåíòèëÿ- òîðîì ñ èçìåíÿþùåéñÿ ñêîðîñòüþ âûáðîñà, âðà- ùàþùåãîñÿ äèñêà ïðèâîäíîé ñèñòåìû è îòâîä- íîé òðóáêè äëÿ ïàðà; – àòîìíî-àáñîðáöèîííîãî ñïåêòðîìåòðà (2.1.2.21), àòîìíî-ýìèññèîííîãî ñïåêòðîìåòðà ñ èíäóêòèâíî-ñâÿçàííîé ïëàçìîé (2.1.2.41) èëè ìàññ-ñïåêòðîìåòðà ñ èíäóêòèâíî-ñâÿçàííîé ïëàçìîé. ÌÅÒÎÄÈÊÀ Èñïûòàíèÿ ïðîâîäÿò ìåòîäàìè àòîìíî-àá- ñîðáöèîííîé ñïåêòðîìåòðèè (ÀÀÑ) (2.1.2.22), àòîìíî-ýìèññèîííîé ñïåêòðîìåòðèè ñ èíäóê- òèâíî-ñâÿçàííîé ïëàçìîé (AÝÑ-ÈCÏ) (2.1.2.41) èëè ìàññ-ñïåêòðîìåòðèè ñ èíäóêòèâíî-ñâÿçàí- íîé ïëàçìîé (ÌÑ-ÈCÏ).Îòêëîíåíèÿ îò ýêñïå- ðèìåíòàëüíûõ ïàðàìåòðîâ ïðîöåäóðû ïðîáî- ïîäãîòîâêè è ìåòîäèêà, îïèñàííàÿ íèæå, ïðèåì- ëåìû ïðè óñëîâèè ñîáëþäåíèÿ âàëèäàöèîííûõ òðåáîâàíèé è âûïîëíåíèÿ èñïûòàíèÿ ïðèãîäíî- ñòè ñèñòåìû â äåíü àíàëèçà. Ïðîáîïîäãîòîâêà 1 Ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì âñþ ñòåêëÿííóþ ïî- ñóäó è ëàáîðàòîðíîå îáîðóäîâàíèå î÷èùàþò ðàñòâîðîì 10 ã/ë àçîòíîé êèñëîòû Ð. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð.
 ðåàêöèîííûé ñî- ñóä ïîìåùàþò óêàçàííîå êîëè÷åñòâî èñïûòóå- ìîãî îáðàçöà (îêîëî 0,50 ã èçìåëü÷åííîéëåêàð- ñòâåííîãî ðàñòèòåëüíîãî ñûðüÿ), ïðèáàâëÿþò 4 ìë õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòû, ñâîáîäíîé îò òÿæåëûõ ìåòàëëîâ, Ð è 6 ìë àçîòíîé êèñëîòû, ñâîáîäíîé îò òÿæåëûõ ìåòàëëîâ, Ð è ïåðåìå- øèâàþò. Ñîñóä äîëæåí áûòü âîçäóõîíåïðîíè- öàåìûì. Ðåàêöèîííûé ñîñóä ïîìåùàþò â ìèêðîâîë- íîâóþ ïå÷ü è ïðîãðàììèðóþò íàãðåâàíèå â òðè ýòàïà â ñîîòâåòñòâèè ñî ñëåäóþùåé ïðîãðàì- ìîé: 80 % ìîùíîñòè â òå÷åíèå 15 ìèí, 100 % ìîùíîñòè â òå÷åíèå 5 ìèí, 80 % ìîùíîñòè â òå- ÷åíèå 20 ìèí. Äëÿ èñïûòàíèÿ èñïîëüçóþò ñåìü ñîñóäîâ ñ èñïûòóåìûì ðàñòâîðîì. Ïî îêîí÷àíèè öèêëà ñîñóäû îõëàæäàþò íà âîçäóõå èëè â âîäå. Ïîñëå îõëàæäåíèÿ êàæäûé ðåàêöèîííûé ñîñóä îòêðûâàþò è ïåðåíîñÿò ïî- ëó÷åííûé ïðîçðà÷íûé áåñöâåòíûé ðàñòâîð â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 50 ìë. Êàæäûé ðå- àêöèîííûé ñîñóä äâàæäû îïîëàñêèâàþò àçîò- íîé êèñëîòîé ðàçáàâëåííîé, ñâîáîäíîé îò òÿ- æåëûõ ìåòàëëîâ, Ð ïîðöèÿìè ïî 15 ìë. Ñìûâû ïåðåíîñÿò â òó æå ìåðíóþ êîëáó è äîâîäÿò îáú- åì ðàñòâîðà âîäîé Ð äî 50,0 ìë. Ïðè íåîáõîäè- ìîñòè äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå ìîäèôèêàòî- ðîâ (íàïðèìåð, ïðè îïðåäåëåíèè ìåòîäîì àòîì- íî-àáñîðáöèîííîé ñïåêòðîìåòðèè (ÀÀÑ) ñ ýëåêòðîòåðìè÷åñêîé àòîìèçàöèåé 1,0 ìë ðàñòâî- ðà 10 ã/ë ìàãíèÿ íèòðàòà Ð è 1,0 ìë ðàñòâîðà 100 ã/ë àììîíèÿ äèãèäðîôîñôàòà Ð) è ñòàáèëè- çèðóþùèõ àãåíòîâ. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. 4 ìë õëîðîâîäîðîä- íîé êèñëîòû, ñâîáîäíîé îò òÿæåëûõ ìåòàë- ëîâ, Ð è 6 ìë àçîòíîé êèñëîòû, ñâîáîäíîé îò òÿæåëûõ ìåòàëëîâ, Ð ñìåøèâàþò â ðåàêöèîí- íîì ñîñóäå è âûäåðæèâàþò â ìèêðîâîëíîâîé 184 ïå÷è ïî òîé æå ïðîãðàììå, ÷òî è èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ïðîáîïîäãîòîâêà 2 Ìèíåðàëèçàöèþ ïðîâîäÿò â ñèñòåìå ìèêðî- âîëíîâîãî ðàçëîæåíèÿ. Ðàçëîæåíèå â ìèêðîâîë- íîâîé ñèñòåìå âîçìîæíî â ðàçëè÷íîì àïïàðà- òóðíîì èñïîëíåíèè ïðè èñïîëüçîâàíèè ðàçëè÷- íûõ êèñëîò è ðåàãåíòîâ. Ïðè èñïîëüçîâàíèè òàêèõ ñèñòåì íóæíî ïðèäåðæèâàòüñÿ ðåêîìåí- äàöèé ôèðìû-èçãîòîâèòåëÿ. Íåîáõîäèìî âàëè- äèðîâàòü ìåòîäèêó ðàçëîæåíèÿ ëåêàðñòâåííîãî ðàñòèòåëüíîãî ñûðüÿ è ëåêàðñòâåííûõ ðàñòè- òåëüíûõ ïðåïàðàòîâ. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Îêîëî 0,5 ã (òî÷íàÿ íàâåñêà) èçìåëü÷åííîãî ëåêàðñòâåííîãî ðàñòè- òåëüíîãî ñûðüÿ/ëåêàðñòâåííîãî ðàñòèòåëüíîãî ïðåïàðàòà ïîìåùàþò â ñîñóä äëÿ ìèêðîâîëíî- âîãî ðàçëîæåíèÿ, ïðèáàâëÿþò 4 ìë âîäû Ð è 6 ìë àçîòíîé êèñëîòû Ð, îñòîðîæíî ïåðåìåøè- âàþò äî ïîëíîãî ñìà÷èâàíèÿ è âûäåðæèâàþò â òå÷åíèè 10 – 15 ìèí. Ñîñóä ãåðìåòè÷íî çàêðû- âàþò, ïîìåùàþò åãî â çàùèòíûé êîæóõ è çàòåì â ðîòîð ìèêðîâîëíîâîé ñèñòåìû. Äàëåå ïðîâîäÿò îáðàáîòêó ïî ïðîãðàììå, ïðèâåäåííîé â òàáëè- öå 2.1.4.21.-1.  êîíöå öèêëà ñîñóä îõëàæäàþò íà âîçäóõå, îñòîðîæíî îòêðûâàþò è ïîëó÷åííûé ïðîçðà÷- íûé èëè ñ íåáîëüøèì îñàäêîì ðàñòâîð êîëè÷å- ñòâåííî ïåðåíîñÿò â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìî- ñòüþ 50 ìë, ôèëüòðóÿ ÷åðåç áåççîëüíûé ôèëüòð, ïðîìûòûé 0,1 Ì õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòîé, äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âîäîé Ð äî 25,0 ìë è ïå- ðåìåøèâàþò. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. 4 ìë âîäû Ð è 6 ìë àçîòíîé êèñëîòû Ð ñìåøèâàþò â ðåàêöèîííîì ñîñóäå è âûäåðæèâàþò â ðîòîðå ìèêðîâîëíîâîé ñèñòåìû ïî òîé æå ïðîãðàììå, ÷òî è èñïûòóå- ìûé ðàñòâîð. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÌÛØÜßÊÀ, ÊÀÄÌÈß, ÌÅÄÈ, ÍÈÊÅËß È ÑÂÈÍÖÀ ÌÅÒÎÄÎÌ ÀÀÑ (2.1.2.22) Ñ ÝËÅÊÒÐÎÒÅÐÌÈ- ×ÅÑÊÈÌ ÑÏÎÑÎÁÎÌ ÀÒÎÌÈÇÀÖÈÈ ÌÅÒÎÄ À Ñîäåðæàíèå ìûøüÿêà, êàäìèÿ, ìåäè, íèêåëÿ è ñâèíöà îïðåäåëÿþò ìåòîäîì êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé (2.1.2.22, ìåòîä I) èëè ìåòîäîì ñòàí- äàðòíûõ äîáàâîê (2.1.2.22, ìåòîä II), èñïîëüçóÿ ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ êàæäîãî òÿæåëîãî ìåòàëëà è õàðàêòåðèñòèêè ïðèáîðà, ïðèâåäåííûå â òàá- ëèöå 2.1.4.21.-1.
Çíà÷åíèå îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè êîíòðîëü- íîãî ðàñòâîðà àâòîìàòè÷åñêè âû÷èòàåòñÿ èç ïî- ëó÷åííîãî çíà÷åíèÿ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èñ- ïûòóåìîãî ðàñòâîðà, ïðèãîòîâëåííîãî â ñîîò- âåòñòâèè ñ ïðîáîïîäãîòîâêîé 1. ÌÅÒÎÄ Á Ñîäåðæàíèå ìûøüÿêà, êàäìèÿ è ñâèíöà îï- ðåäåëÿþò ìåòîäîì êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé (2.1.2.22, ìåòîä I) â óñëîâèÿõ, ïðèâåäåííûõ â òàáëèöå 2.1.4.21.-3. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð è êîíòðîëüíûé ðàñ- òâîð ãîòîâÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ ïðîáîïîäãîòîâêîé ìåòîäèêîé 2. Ñîäåðæàíèå ýëåìåíòîâ â èñïûòóåìûõ ðàñ- òâîðàõ îïðåäåëÿþò ïî êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé. Ðàñòâîðû äëÿ ïîñòðîåíèÿ ãðàôèêîâ ãîòîâÿò èç ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ ñîîòâåòñòâóþùèõ èî- íîâ. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ ñâèíöà ãðà- ôèê ñòðîÿò, èñïîëüçóÿ ðàñòâîðû ñ êîíöåíòðàöè- åé èîíîâ ñâèíöà 0,005 ìêã/ìë; 0,01 ìêã/ìë; 0,02 ìêã/ìë; 0,04 ìêã/ìë, äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñî- 185 Òàáëèöà 2.1.4.21.-1. — Ïðîãðàììà îáðàáîòêè îáðàç- öîâ ëåêàðñòâåííîãî ðàñòèòåëüíîãî ñûðüÿ/ïðåïàðà- òå â ñèñòåìå ìèêðîâîëíîâîãî ðàçëîæåíèÿ Ýòàï Âðåìÿ (ìèí) Òåìïåðàòóðà (°Ñ) Ìîùíîñòü èçëó÷åíèÿ (Âò) 1 9 80 äî 550 2 7 160 äî 1500 3 10 200 äî 1800 4 14 200 äî 1500 Òàáëèöà 2.1.4.21.-2. — Õàðàêòåðèñòèêè ïðèáîðà äëÿ ìåòîäà ÀÀÑ ñ ýëåêòðîòåðìè÷åñêèì ñïîñîáîì àòîìèçàöèè Õàðàêòåðèñòèêè ïðèáîðà As Cd Ñu Ni Ðb Äëèíà âîëíû íì 193,7 228,8 324,8 232 283,5 Øèðèíà ùåëè íì 0,5 0,5 0,5 0,2 0,5 Ñèëà òîêà ëàìïû ìÀ 10 6 7 10 5 Òåìïåðàòóðà îçîëåíèÿ °Ñ 1400 800 800 800 800 Òåìïåðàòóðà àòîìèçàöèè °Ñ 2600 1800 2300 2500 2200 Ñêîðîñòü ïîòîêà ãàçà ë/ìèí 3 3 3 3 3 äåðæàíèÿ êàäìèÿ — ðàñòâîðû ñ êîíöåíòðàöèåé èîíîâ êàäìèÿ 0,0005 ìêã/ìë, 0,001 ìêã/ìë, 0,002 ìêã/ìë, 0,003 ìêã/ìë, äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñî- äåðæàíèÿ ìûøüÿêà – ðàñòâîðû ñ êîíöåíòðàöèåé èîíîâ ìûøüÿêà 0,002 ìêã/ìë; 0,004 ìêã/ìë; 0,006 ìêã/ìë; 0,008 ìêã/ìë. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÌÛØÜßÊÀ È ÐÒÓÒÈ ÌÅÒÎÄÎÌ ÀÀÑ (2.1.2.22) Ñ ÀÒÎÌÈÇÀ- ÖÈÅÉ ÑÏÎÑÎÁÎÌ ÕÎËÎÄÍÎÃÎ ÏÀÐÀ ÈËÈ ÃÈÄÐÈÄÍÛÌ ÑÏÎÑÎÁÎÌ ÌÅÒÎÄ À Ñîäåðæàíèå ìûøüÿêà è ðòóòè îïðåäåëÿþò ìåòîäîì êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé (2.1.2.22, ìå- òîä I) èëè ìåòîäîì ñòàíäàðòíûõ äîáàâîê 2.1.2.22, ìåòîä II), èñïîëüçóÿ ðàñòâîðû ñðàâíå- íèÿ ìûøüÿêà è ðòóòè è àâòîìàòèçèðîâàííóþ ñèñòåìó ãåíåðèðîâàíèÿ áåñïðåðâíîãî ïîòîêà ïàðîâ ãèäðèäîâ îïðåäåëÿåìîãî ýëåìåíòà. Çíà÷åíèå îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè êîíòðîëü- íîãî ðàñòâîðà àâòîìàòè÷åñêè âû÷èòàåòñÿ èç ïî- ëó÷åííîãî çíà÷åíèÿ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èñ- ïûòóåìîãî ðàñòâîðà. Ìûøüÿê Ðàñòâîð îáðàçöà. Ê 19,0 ìë èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà èëè êîíòðîëüíîãî ðàñòâîðà, ïðèãîòîâ- ëåíèå êîòîðûõ îïèñàíî âûøå, ïðèáàâëÿþò 1 ìë ðàñòâîðà 200 ã/ë êàëèÿ éîäèäà Ð. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð âûäåðæèâàþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðà- òóðå îêîëî 50 ìèí èëè ïðè òåìïåðàòóðå 70 °Ñ îêîëî 4 ìèí. Êèñëîòíûé ðåàêòèâ. Õëîðîâîäîðîäíàÿ êè- ñëîòà, ñâîáîäíàÿ îò òÿæåëûõ ìåòàëëîâ, Ð. Âîññòàíàâëèâàþùèé ðåàêòèâ. Ðàñòâîð 6 ã/ë íàòðèÿ òåòðàãèäðîáîðàòà Ð â ðàñòâîðå 5 ã/ë íàòðèÿ ãèäðîêñèäà Ð. Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå õàðàêòåðèñòèê ïðèáîðà, ïðèâåäåííûõ â òàáëèöå 2.1.4.21.-2. Ðòóòü Ðàñòâîð îáðàçöà. Èñïûòóåìûé è êîíòðîëü- íûé ðàñòâîðû ãîòîâÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ ðàíåå ïðèâåäåííûì îïèñàíèåì. Êèñëîòíûé ðåàêòèâ. Ðàñòâîð 515 ã/ë õëîðî- âîäîðîäíîé êèñëîòû, ñâîáîäíîé îò òÿæåëûõ ìåòàëëîâ, Ð. Âîññòàíàâëèâàþùèé ðåàêòèâ. Ðàñòâîð 10 ã/ë îëîâà õëîðèäà Ð â õëîðîâîäîðîäíîé êè- ñëîòå ðàçáàâëåííîé, ñâîáîäíîé îò òÿæåëûõ ìåòàëëîâ, Ð. Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå õàðàêòåðèñòèê ïðèáîðà, ïðèâåäåííûõ â òàáëèöå 2.1.4.21.-4. ÌÅÒÎÄ Á Ñîäåðæàíèå ðòóòè îïðåäåëÿþò ìåòîäîì êà- ëèáðîâî÷íîé êðèâîé (2.1.2.22, ìåòîä I) â óñëî- âèÿõ, ïðèâåäåííûõ â òàáëèöå 2.1.4.21.-5. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð è êîíòðîëüíûé ðàñ- òâîð ãîòîâÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ ïðîáîïîäãîòîâ- êîé 2.
ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÌÛØÜßÊÀ, ÊÀÄÌÈß, ÌÅÄÈ, ÐÒÓÒÈ, ÍÈÊÅËß È ÑÂÈÍÖÀ ÌÅÒÎÄÎÌ AÝÑ- ÈCÏ (2.1.2.41) Ñîäåðæàíèå ìûøüÿêà, êàäìèÿ, ìåäè, ðòóòè, íèêåëÿ è ñâèíöà îïðåäåëÿþò ìåòîäîì êàëèáðî- âî÷íîé êðèâîé (2.1.2.22, ìåòîä I), èñïîëüçóÿ ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ êàæäîãî ýëåìåíòà èëè ñìå- ñè âñåõ îïðåäåëÿåìûõ ýëåìåíòîâ, à òàêæå õàðàê- òåðèñòèêè ïðèáîðà, ïðèâåäåííûå â òàáëèöå 2.1.4.21.-6. Çíà÷åíèå èíòåíñèâíîñòè ýìèññèè êîíòðîëü- íîãî ðàñòâîðà àâòîìàòè÷åñêè âû÷èòàåòñÿ èç ïî- 186 Òàáëèöà 2.1.4.21.-3. — Õàðàêòåðèñòèêè ïðèáîðà äëÿ ìåòîäà ÀÀÑ ñ ýëåêòðîòåðìè÷åñêèì ñïîñîáîì àòîìèçà- öèè è óñëîâèÿ ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà Ïàðàìåòð Pb Cd As Õàðàêòåðèñòèêà ïðèáîðà Äëèíà âîëíû íì 283,3 228,8 193,7 Øèðèíà ùåëè íì 0,5 0,5 0,5R Ñèëà òîêà ëàìïû ìÀ 10 4 11 Òåìïåðàòóðà îçîëåíèÿ °Ñ 800 600 1400 Òåìïåðàòóðà àòîìèçàöèè °Ñ 2000 1700 2600 Òèï èíòåãðèðîâàíèÿ ïî ïëîùàäè ïèêà ïî ïëîùàäè ïèêà ïî ïëîùàäè ïèêà Ñèñòåìà êîððåêöèè ôîíà (íà ýôôåêòå Çååìàíà) âêë. âêë. âêë. Îáúåì ïðîáû èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà, ìë 20 10 30 (çà 2 ðàçà) Îáúåì äîçèðîâàíèÿ ìîäèôèêàòîðà, ìêë 10 10 10 (çà 2 ðàçà) ëó÷åííîãî çíà÷åíèÿ èíòåíñèâíîñòè ýìèññèè èñ- ïûòóåìîãî ðàñòâîðà. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÌÛØÜßÊÀ, ÊÀÄÌÈß, ÌÅÄÈ, ÐÒÓÒÈ, ÍÈÊÅËß È ÑÂÈÍÖÀ ÌÅÒÎÄÎÌ ÌÑ-ÈCÏ Ñîäåðæàíèå ìûøüÿêà, êàäìèÿ, ìåäè, ðòóòè, íèêåëÿ è ñâèíöà îïðåäåëÿþò ìåòîäîì êàëèáðî- âî÷íîé êðèâîé (2.1.2.22, ìåòîä I), èñïîëüçóÿ ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ êàæäîãî ýëåìåíòà, àíàëè- òè÷åñêèå èçîòîïû è äîïîëíèòåëüíûå ìàññû, ïðèâåäåííûå â òàáëèöå 2.1.4.21.-7. Èíòåíñèâíîñòü ñèãíàëà êîíòðîëüíîãî ðàñ- òâîðà àâòîìàòè÷åñêè âû÷èòàåòñÿ èç ïîëó÷åííî- ãî çíà÷åíèÿ èíòåíñèâíîñòè ñèãíàëà èñïûòóåìî- ãî ðàñòâîðà. Ïðåäåëüíî äîïóñòèìîå ñîäåðæàíèå òÿæå- ëûõ ìåòàëëîâ è ìûøüÿêà â ëåêàðñòâåííîì ðàñ- òèòåëüíîì ñûðüå è ëåêàðñòâåííûõ ðàñòèòåëü- íûõ ïðåïàðàòàõ íå äîëæíî ïðåâûøàòü çíà÷å- íèé, ïðèâåäåííûõ â òàáëèö 2.1.4.21.-8. ÏÐÈÃÎÄÍÎÑÒÜ ÑÈÑÒÅÌÛ Èñïûòàíèå íà ïðèãîäíîñòü ñèñòåìû äîëæíî îñóùåñòâëÿòüñÿ â äåíü àíàëèçà äëÿ îáåñïå÷åíèÿ ïðèåìëåìîñòè ïðîáîïîäãîòîâêè è ñèñòåìû èç- ìåðåíèÿ. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè äëÿ ïðèãîòîâëå- íèÿ ðàñòâîðà îáðàçöà: ïðîçðà÷íûé ðàñòâîð. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè äëÿ ñèñòåìû èçìå- ðåíèÿ: èçìåðåííàÿ êîíöåíòðàöèÿ ñòàíäàðòíîãî ðàñòâîðà ýëåìåíòà, íàõîäÿùàÿñÿ â ïðåäåëàõ äèàïàçîíà êîíöåíòðàöèé èñïîëüçóåìîé êàëèá- ðîâî÷íîé êðèâîé, íå äîëæíà îòëè÷àòüñÿ îò ôàê- òè÷åñêîé êîíöåíòðàöèè áîëåå ÷åì íà 20 %. ÂÀËÈÄÀÖÈÎÍÍÛÅ ÒÐÅÁÎÂÀÍÈß Àíàëèòè÷åñêèå ìåòîäèêè äîëæíû áûòü ïîä- òâåðæäåíû â ñîîòâåòñòâèè ñ òðåáîâàíèÿìè îá- ùèõ ìåòîäîâ ÀÀÑ (2.1.2.22), AÝÑ-ÈCÏ (2.1.2.41) è ÌÑ-ÈCÏ. Êðîìå òîãî, äîëæíû âû- ïîëíÿòüñÿ ñëåäóþùèå êðèòåðèè.ÑÏÅÖÈÔÈ×- ÍÎÑÒÜÑïåöèôè÷íîñòü ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ñïîñîáíîñòü àíàëèòè÷åñêèõ ìåòîäèê ïðîáîïîä- ãîòîâêè è èçìåðåíèÿ îáåñïå÷èâàòü äîñòîâåðíîå îïðåäåëåíèå ýëåìåíòà(îâ) â ïðèñóòñòâèè ïðåä- 187 Òàáëèöà 2.1.4.21.-4. — Õàðàêòåðèñòèêè ïðèáîðà äëÿ ìåòîäà ÀÀÑ ñ àòîìèçàöèåé ñïîñîáîì õîëîäíîãî ïàðà èëè ãèäðèäíûì ñïîñîáîì Õàðàêòåðèñòèêè ïðèáîðà As Hg Äëèíà âîëíû íì 193,7 253,7 Øèðèíà ùåëè íì 0,2 0,5 Ñèëà òîêà ëàìïû ìÀ 10 4 Ñêîðîñòü ïîòîêà êèñëîòíîãî ðåàêòèâà ìë/ìèí 1,0 1,0 Ñêîðîñòü ïîòîêà âîññòàíàâëèâàþùåãî ðåàêòèâà ìë/ìèí 1,0 1,0 Ñêîðîñòü ïîòîêà ðàñòâîðà îáðàçöà ìë/ìèí 7,0 7,0 Àäñîðáöèîííàÿ êþâåòà êâàðöåâàÿ (íàãðåâàåìàÿ) êâàðöåâàÿ (íåíàãðåâàåìàÿ) Ñêîðîñòü ïîòîêà àçîòà ë/ìèí 0,1 0,1 Òàáëèöà 2.1.4.21.-5. — Õàðàêòåðèñòèêà ïðèáîðà äëÿ ìåòîäà ÀÀÑ ñ àòîìèçàöèåéãèäðèäíûì ñïîñîáîì Õàðàêòåðèñòèêà ïðèáîðà Hg Äëèíà âîëíû íì 253,7 Øèðèíà ùåëè, íì íì 0,5R Ñèëà òîêà ëàìïû ìÀ 3 Òàáëèöà 2.1.4.21.-6.
— Õàðàêòåðèñòèêè ïðèáîðà äëÿ ìåòîäà AÝÑ-ÈCÏ Õàðàêòåðèñòèêè ïðèáîðà As Cd Ñu Hg Ni ÐÜ Äëèíà âîëíû íì 193,696/ 197,197/ 189,042 214,438/ 226,502/ 228,802 324,754/ 327,396/ 224,700 189,950/ 253,652/ 435,835 231.604/ 231,997/ 352,454 220,351/ 283,306/ 168,215 Àðãîí, ëèíèÿ ìîíèòîðà íì 430,010 430,010 430,010 430,010 430,010 430,010 Ýíåðãèÿ ïëàçìû Âò 1200 1200 1200 1200 1200 1200 Ïèê àëãîðèòìà ñ êîððåêöèåé ôîíà äà äà äà äà äà äà ïîëàãàåìûõ êîìïîíåíòîâ (íàïðèìåð, ãàçà-íîñè- òåëÿ, ïðèìåñåé, ìàòðèöû).Êðèòåðèè ïðèåìëå- ìîñòè: ìåòîäèêà äîëæíà áûòü ñïîñîáíà îäíî- çíà÷íî îöåíèâàòü êàæäûé îïðåäåëÿåìûé ýëåìåíò â ïðèñóòñòâèè ïðåäïîëàãàåìûõ êîìïî- íåíòîâ, â òîì ÷èñëå äðóãèõ òÿæåëûõ ìåòàëëîâ, êîìïîíåíòîâ ìàòðèöû è äðóãèõ èñòî÷íèêîâ ïî- ìåõ; ñïåöèôè÷íîñòü ïîäòâåðæäàåòñÿ ñîîòâåòñò- âèåì òðåáîâàíèþ äëÿ ïðàâèëüíîñòè îïðåäåëå- íèÿ ýëåìåíòà(îâ). ÄÈÀÏÀÇÎÍ ÏÐÈÌÅÍÅÍÈß Äèàïàçîí êàëèáðîâêè äëÿ êàæäîãî ìåòàëëà äîëæåí áûòü â ïðåäåëàõ ëèíåéíîãî äèàïàçîíà ìåòîäèêè; èñïûòóåìûå ðàñòâîðû, ñîäåðæàùèå îñòàòî÷íûå êîëè÷åñòâà ìåòàëëà â êîíöåíòðàöèè çà ïðåäåëàìè äèàïàçîíà îïðåäåëåíèÿ, ìîãóò áûòü ðàçâåäåíû äî êîíöåíòðàöèè â äèàïàçîíå êàëèáðîâêè. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè: äèàïàçîí ïîä- òâåðæäàåòñÿ ñîîòâåòñòâèåì òðåáîâàíèþ äëÿ îò- êðûâàåìîñòè. ÏÐÀÂÈËÜÍÎÑÒÜ Ïðàâèëüíîñòü ïîäòâåðæäàþò ñ ïîìîùüþ ñåðòèôèöèðîâàííîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà èëè ïóòåì âûïîëíåíèÿ òðåáîâàíèÿ íà îòêðûâàå- ìîñòü. Îòêðûâàåìîñòü. Îòêðûâàåìîñòü ìîæåò îï- ðåäåëÿòüñÿ íà èñïûòóåìîì îáðàçöå ñóáñòàíöèè, â êîòîðûé âíåñåíî èçâåñòíîå êîëè÷åñòâî ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà ýëåìåíòà (òðè çíà÷åíèÿ êîí- öåíòðàöèè â äèàïàçîíå îò 50 % äî 150 % îò óñ- òàíîâëåííîãî ñïåöèôèêàöèåé ïðåäåëüíîãî çíà- ÷åíèÿ, äàæå åñëè èñòèííàÿ êîíöåíòðàöèÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà ñîîòâåòñòâóåò óêàçàííî- ìóçíà÷åíèþ) â òðåõ ïàðàëëåëüíûõ îïûòàõ. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè: îòêðûâàåìîñòü äîëæíà ñîñòàâëÿòü îò 70 % äî 150 % äëÿ ñðåä- íåãî çíà÷åíèÿ èç òðåõ îïðåäåëåíèé êàæäîé êîí- öåíòðàöèè. ÏÎÂÒÎÐßÅÌÎÑÒÜ Èñïûòóåìûå îáðàçöû. Ãîòîâÿò øåñòü îò- äåëüíûõ èñïûòóåìûõ îáðàçöîâ ñ äîáàâëåíèåì ïîäõîäÿùåãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà ñ êîíöåí- òðàöèåé, ñîîòâåòñòâóþùåé ðåãëàìåíòèðóåìîìó óðîâíþ, èëè ãîòîâÿò îáðàçöû â òðåõ êîíöåíòðà- öèÿõ äëÿ òðåõ ïàðàëëåëüíûõ îïûòîâ. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè: îòíîñèòåëüíîå ñòàíäàðòíîå îòêëîíåíèå â îáîèõ ñëó÷àÿõ íå- äîëæíî ïðåâûøàòü çíà÷åíèÿ, óêàçàííûå â òàá- ëèöå 2.4.27.-9. ÂÍÓÒÐÈËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÀß ÏÐÅÖÈÇÈÎÍÍÎÑÒÜ Äîëæíî áûòü óñòàíîâëåíî âëèÿíèå ñëó÷àé- íûõ ôàêòîðîâ (âíóòðèëàáîðàòîðíûå èçìåíåíèÿ) íà àíàëèòè÷åñêóþ ïðåöèçèîííîñòü ìåòîäèêè. Ïðèåìëåìûìè èñïûòàíèÿìè äëÿ óñòàíîâëåíèÿ âíóòðèëàáîðàòîðíîé ïðåöèçèîííîñòè ÿâëÿåòñÿ ïðîâåäåíèå ïîâòîðíîãî àíàëèçà â ðàçíûå äíè, èëè íà ðàçíûõ ïðèáîðàõ, èëè ðàçíûìè àíàëèòè- êàìè. Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ âíóòðèëàáîðàòîðíîé ïðåöèçèîííîñòè òðåáóåòñÿ òîëüêî îäíî èç òðåõ èñïûòàíèé. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè: îòíîñèòåëüíîå ñòàíäàðòíîå îòêëîíåíèå íå äîëæíî ïðåâûøàòü çíà÷åíèÿ, óêàçàííûå â òàáëèöå 2.1.4.21.-9. ÏÐÅÄÅË ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÃÎ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß Îïðåäåëÿþò íàèìåíüøóþ êîíöåíòðàöèþ, ñîîòâåòñòâóþùóþ êðèòåðèÿì ïðèåìëåìîñòè. Ïðè ýòîì èñïîëüçóþò ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ ïðàâèëüíîñòè. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè: ïðåäåë êîëè÷åñò- âåííîãî îïðåäåëåíèÿ äîëæåí áûòü íèæå ïðå- äåëüíîãî çíà÷åíèÿ ñïåöèôèêàöèè. 188 Òàáëèöà 2.1.4.21.-7. — Ðåêîìåíäóåìûå àíàëèòè÷å- ñêèå èçîòîïû è äîïîëíèòåëüíûå ìàññû äëÿ ìåòîäà ÌÑ-ÈCÏ Èçîòîï Îïðåäåëÿåìûé ýëåìåíò 75 Ìûøüÿê 106, 108, 111, 114 Êàäìèé 63, 65 Ìåäü 202 Ðòóòü 60, 62 Íèêåëü 206, 207, 208 Ñâèíåö Òàáëèöà 2.1.4.21.-8.
— Ïðåäåëüíî äîïóñòèìîå ñîäåð- æàíèå òÿæåëûõ ìåòàëëîâ è ìûøüÿêà â ëåêàðñòâåí- íîì ðàñòèòåëüíîì ñûðüå è ëåêàðñòâåííûõ ðàñòè- òåëüíûõ ïðåïàðàòàõ Ýëåìåíò Ïðåäåëüíî äîïóñòèìîå ñîäåðæàíèå, ppm Ñâèíåö 6,0 Êàäìèé 1,0 Ðòóòü 0,1 Ìûøüÿê 0,5 ÏÐÅÄÅË ÎÁÍÀÐÓÆÅÍÈß (ÏÐÈÌÅÍÈÌ ÒÎËÜÊÎ ÄËß ÈÑÏÛÒÀÍÈÉ ÍÀ ÏÐÅÄÅËÜÍÎÅ ÑÎÄÅÐÆÀÍÈÅ ÏÐÈÌÅÑÅÉ) Îïðåäåëÿþò íàèìåíüøóþ êîíöåíòðàöèþ, ñèãíàë êîòîðîé ÷åòêî îòëè÷àåòñÿ îò ñèãíàëà êîíòðîëüíîãî ðàñòâîðà. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè: ïðåäåë îáíàðóæå- íèÿ íå äîëæåí ïðåâûøàòü áîëåå ÷åì â 0,1 ðàçà êîíöåíòðàöèþ, ñîîòâåòñòâóþùóþ ïðåäåëüíîìó çíà÷åíèþ ñïåöèôèêàöèè. 201040022-2019 2.1.4.22. 2-ýòèëãåêñàíîâàÿ êèñëîòà Îïðåäåëåíèå ïðîâîäÿò ìåòîäîì ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè (2.1.2.27), èñïîëüçóÿ â êà÷åñòâå âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà 3-öèêëîãåêñèëïðîïàíî- âóþ êèñëîòó Ð. Ðàñòâîð âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà. 100 ìã 3-öèêëîãåêñèëïðîïàíîâîé êèñëîòû Ð ðàñòâîðÿ- þò â öèêëîãåêñàíå Ð è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî 100 ìë. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ê 0,300 ã èñïûòóå- ìîãî îáðàçöà ïðèáàâëÿþò 4,0 ìë 33 % (îá/îá) õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòû Ð. Ýíåðãè÷íî âñòðÿ- õèâàþò â òå÷åíèå 1 ìèí ñ 1,0 ìë ðàñòâîðà âíóò- ðåííåãî ñòàíäàðòà. Îñòàâëÿþò äî ðàññëîåíèÿ, ïðè íåîáõîäèìîñòè öåíòðèôóãèðóþò. Äëÿ èñïû- òàíèÿ èñïîëüçóþò âåðõíèé ñëîé. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ. 75,0 ìã 2-ýòèëãåêñàíî- âîé êèñëîòû Ð ðàñòâîðÿþò â ðàñòâîðå âíóòðåí- íåãî ñòàíäàðòà è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî 50,0 ìë. Ê 1,0 ìë ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà ïðèáàâëÿþò 4,0 ìë 33 % (îá/îá) õëîðî- âîäîðîäíîé êèñëîòû Ð è ýíåðãè÷íî âñòðÿõèâà- þò â òå÷åíèå 1 ìèí. Îñòàâëÿþò äî ðàññëîåíèÿ (ïðè íåîáõîäèìîñòè öåíòðèôóãèðóþò äëÿ ëó÷- øåãî ðàçäåëåíèÿ ñëîåâ). Äëÿ èñïûòàíèÿ èñïîëü- çóþò âåðõíèé ñëîé. Õðîìàòîãðàôèðîâàíèå ïðîâîäÿò íà ãàçîâîì õðîìàòîãðàôå ñ ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûì äå- òåêòîðîì â ñëåäóþùèõ óñëîâèÿõ: – êâàðöåâàÿ êîëîíêà êàïèëëÿðíàÿ ñ øèðî- êèì îòâåðñòèåì ðàçìåðîì 10 ì × 0,53 ìì, ïî- êðûòàÿ ïëåíêîé ìàêðîãîëà 20 000 2-íèòðîòå- ðåôòàëàòà Ð òîëùèíîé 1,0 ìêì; – ãàç-íîñèòåëü ãåëèé äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð; – ñêîðîñòü ãàçà-íîñèòåëÿ 10 ìë/ìèí; – ðåæèì ïðîãðàììèðîâàíèÿ òåìïåðàòóðû: Âðåìÿ (ìèí) Òåìïåðà- òóðà (°Ñ) Ñêîðîñòü ïîäúåìà òåìïåðà- òóðû (°Ñ/ìèí) Ïðèìå÷àíèÿ Êîëîíêà 0 – 2 40 — Èçîòåðìè- ÷åñêèé ðå- æèì 2 – 7,3 40 ® 200 30 Ëèíåéíûé ãðàäèåíò òåìïåðàòó- ðû 7,3 – 10,3 200 — Èçîòåðìè- ÷åñêèé ðå- æèì Áëîê ââîäà ïðîá 200 Äåòåêòîð 300 Õðîìàòîãðàôèðóþò ïî 1 ìêë èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ. Õðîìàòîãðàôè÷åñêàÿ ñèñòåìà ñ÷èòàåòñÿ ïðèãîäíîé, åñëè ðàçðåøåíèå ìåæäó ïèêàìè 2-ýòèëãåêñàíîâîé êèñëîòû (ïåðâûé ïèê) è âíóò- ðåííåãî ñòàíäàðòà ñîñòàâëÿåò íå ìåíåå 2,0. Ñîäåðæàíèå 2-ýòèëãåêñàíîâîé êèñëîòû â ïðîöåíòàõ ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå: S I m S I m T S S S T T ´ ´ ´ ´ ´ 2, ãäå: ST — ïëîùàäü ïèêà 2-ýòèëãåêñàíîâîé êè- ñëîòû íà õðîìàòîãðàììå èñïûòóåìî- ãî ðàñòâîðà; SS — ïëîùàäü ïèêà 2-ýòèëãåêñàíîâîé êè- ñëîòû íà õðîìàòîãðàììå ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ; IT — ïëîùàäü ïèêà âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà íà õðîìàòîãðàììå èñïûòóåìîãî ðàñ- òâîðà; IS — ïëîùàäü ïèêà âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà íà õðîìàòîãðàììå ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ; mT — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàì- ìàõ; mS — íàâåñêà 2-ýòèëãåêñàíîâîé êèñëîòû â ãðàììàõ. 189 Òàáëèöà 2.1.4.21.-9. — Ïîâòîðÿåìîñòü è âíóòðèëà- áîðàòîðíàÿïðåöèçèîííîñòü â çàâèñèìîñòè îò äèà- ïàçîíà êîíöåíòðàöèè ìåòàëëà Äèàïàçîí êîíöåíòðàöèè ìåòàëëà (ìã/êã) Ïîâòîðÿåìîñòü (RSD) (%) Âíóòðèëàáîðàòîðíàÿ ïðåöèçèîííîñòü (RSD) (%) 0,01 – 1 20 32 >1 10 16 2.1.5. ÌÅÒÎÄÛ ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÎÃÎ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß 201050001-2019 2.1.5.1. Êèñëîòíîå ÷èñëî Êèñëîòíûì ÷èñëîì IÀ íàçûâàþò êîëè÷åñòâî êàëèÿ ãèäðîêñèäà â ìèëëèãðàììàõ, íåîáõîäè- ìîå äëÿ íåéòðàëèçàöèè ñâîáîäíûõ êèñëîò, ñî- äåðæàùèõñÿ â 1 ã ñóáñòàíöèè.
10,00 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà èëè íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà, óêàçàííóþ â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ðàñòâîðÿþò â 50 ìë ñìå- ñè ðàâíûõ îáúåìîâ 96 % ýòàíîëà Ð è ïåòðîëåé- íîãî ýôèðà Ð3, ïðåäâàðèòåëüíî íåéòðàëèçîâàí- íîé 0,1 Ì ðàñòâîðîì êàëèÿ ãèäðîêñèäà èëè 0,1 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ ãèäðîêñèäà, ïðè îò- ñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüå, èñïîëüçóÿ â êà÷åñòâå èíäèêàòîðà 0,5 ìë ðàñòâîðà ôåíîëôòàëåèíà Ð1. Äëÿ óëó÷- øåíèÿðàñòâîðåíèÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïîëó- ÷åííóþ ñìåñü, ïðè íåîáõîäèìîñòè, íàãðåâàþò ïðèìåðíî äî 90 °Ñ è ïîääåðæèâàþò ýòó òåìïå- ðàòóðó â ïðîöåññå òèòðîâàíèÿ. Ïîñëå ðàñòâîðå- íèÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïîëó÷åííûé ðàñòâîð òèòðóþò 0,1 Ì ðàñòâîðîì êàëèÿ ãèäðîêñèäà èëè0,1 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ ãèäðîêñèäà äî ïî- ÿâëåíèÿ ðîçîâîãî îêðàøèâàíèÿ, íå èñ÷åçàþùåãî â òå÷åíèå 15 ñ. Êèñëîòíîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå: I V m A = ×5 61, , ãäå: V — îáúåì 0,1 Ì ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðî- êñèäà (èëè0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèäðîêñèäà), èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðîâàíèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà, â ìèëëèëèòðàõ; m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàììàõ; 5,610 — êîëè÷åñòâî êàëèÿ ãèäðîêñèäà, ñî- îòâåòñòâóþùåå 1 ìë 0,1 Ì ðàñòâî- ðà êàëèÿ ãèäðîêñèäà (èëè 0,1 Ì ðàñ- òâîðà íàòðèÿ ãèäðîêñèäà), â ìèë- ëèëèòðàõ. 201050002-2019 2.1.5.2. Ýôèðíîå ÷èñëî Ýôèðíûì ÷èñëîì IÅ íàçûâàþò êîëè÷åñòâî êàëèÿ ãèäðîêñèäà â ìèëëèãðàììàõ, íåîáõîäè- ìîå äëÿ îìûëåíèÿ ýôèðîâ, ñîäåðæàùèõñÿ â 1 ã ñóáñòàíöèè. Ýôèðíîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå: IÅ = IS – IA, ãäå: IS — ÷èñëî îìûëåíèÿ; IA — êèñëîòíîå ÷èñëî. 201050003-2019 2.1.5.3. Ãèäðîêñèëüíîå ÷èñëî Ãèäðîêñèëüíûì ÷èñëîì IOH íàçûâàþò êîëè- ÷åñòâî êàëèÿ ãèäðîêñèäà â ìèëëèãðàììàõ, íåîá- õîäèìîå äëÿ íåéòðàëèçàöèè êèñëîòû, ñâÿçû- âàþùåéñÿ ïðè àöèëèðîâàíèè 1 ã ñóáñòàíöèè. ÌÅÒÎÄ À Íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà, âçÿòóþ â ñî- îòâåòñòâèè ñ òàáëèöåé 2.1.5.3.-1, ïîìåùàþò â êîëáó äëÿ àöèëèðîâàíèÿ âìåñòèìîñòüþ 150 ìë, ñíàáæåííóþ âîçäóøíûì õîëîäèëüíè- êîì, ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Ïðèáàâëÿþò ðàñòâîð óêñóñíîãî àíãèäðèäà Ð1 â êîëè÷åñòâå, óêàçàí- 190 Òàáëèöà 2.1.5.3.-1. — Ïðåäïîëàãàåìûå çíà÷åíèÿ ãèä- ðîêñèëüíîãî ÷èñëà â çàâèñèìîñòè îò íàâåñêè èñïû- òóåìîãî îáðàçöà è îáúåìà àöèëèðóþùåãî ðåàãåíòà Ïðåäïîëàãàåìîå çíà÷åíèå IÎH Íàâåñêà èñïûòóå- ìîãî îáðàçöà (ã) Îáúåì àöèëèðóþ- ùåãî ðåàãåíòà (ìë) 10 – 100 2,0 5,0 100 – 150 1,5 5,0 150 – 200 1,0 5,0 200 – 250 0,75 5,0 250 – 300 0,60 èëè 1,20 5,0 èëè 10,0 300 – 350 1,0 10,0 350 – 700 0,75 15,0 700 – 950 0,5 15,0 íîì â òàáëèöå 2.1.5.3.-1 è ïðèñîåäèíÿþò âîç- äóøíûé õîëîäèëüíèê. Êîëáó íàãðåâàþò íà êèïÿùåé âîäÿíîé áàíå â òå÷åíèå 1 ÷, ïîääåðæèâàÿ óðîâåíü âîäû â áàíå ïðèìåðíî íà 2,5 ñì âûøå óðîâíÿ æèäêîñòè â êîëáå. Âûíèìàþò êîëáó èç áàíè è îõëàæäàþò. Çàòåì ÷åðåç âåðõíèé êîíåö õîëîäèëüíèêà ïðè- áàâëÿþò 5 ìë âîäû Ð. Åñëè ðàñòâîð ìóòíååò, ê íåìó äîáàâëÿþò äîñòàòî÷íîå êîëè÷åñòâî ïè- ðèäèíà Ð äî èñ÷åçíîâåíèÿ ìóòè, îòìå÷àÿ èçðàñ- õîäîâàííûé îáúåì. Êîëáó âñòðÿõèâàþò è ïî- âòîðíî íàãðåâàþò íà êèïÿùåé âîäÿíîé áàíå â òå÷åíèå 10 ìèí, çàòåì êîëáó âûíèìàþò è îõëà- æäàþò. Õîëîäèëüíèê è ñòåíêè êîëáû ïðîìûâà- þò 5 ìë ýòàíîëà Ð, ïðåäâàðèòåëüíî íåéòðàëèçî- âàííîãî ðàñòâîðîì ôåíîëôòàëåèíà Ð1. Ïîëó- ÷åííûé ðàñòâîð òèòðóþò 0,5 Ì ðàñòâîðîì êàëèÿ ãèäðîêñèäà ñïèðòîâûì, èñïîëüçóÿ â êà÷å- ñòâå èíäèêàòîðà 0,2 ìë ðàñòâîðà ôåíîëôòàëåè- íà Ð1. Ïðîâîäÿò êîíòðîëüíûé îïûò â òàêèõ æå óñëîâèÿõ.
Ãèäðîêñèëüíîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîð- ìóëå: I V V m I AOH = × - + 28 05 2 1, ( ) , ãäå: V1 — îáúåì 0,5 Ì ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðî- êñèäà ñïèðòîâîãî, èçðàñõîäîâàí- íûé íà òèòðîâàíèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà, â ìèëëèëèòðàõ; V2 — îáúåì 0,5 Ì ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðî- êñèäà ñïèðòîâîãî, èçðàñõîäîâàí- íûé íà òèòðîâàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, â ìèëëèëèòðàõ; m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàììàõ; 28,05 — êîëè÷åñòâî êàëèÿ ãèäðîêñèäà, ñî- îòâåòñòâóþùåå 1 ìë 0,5 Ì ðàñòâî- ðà êàëèÿ ãèäðîêñèäàñïèðòîâîãî, â ìèëëèãðàììàõ; IA — êèñëîòíîå ÷èñëî. ÌÅÒÎÄ Á Íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà, óêàçàííóþ â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ïîìåùàþò â ñóõóþ êîíè÷åñêóþ êîëáó ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿí- íîé èëè ïîäõîäÿùåé ïîëèìåðíîé ïðîáêîé âìå- ñòèìîñòüþ 5 ìë è ïðèáàâëÿþò 2,0 ìë ðåàêòèâà ïðîïèîíîâîãî àíãèäðèäà Ð. Êîëáó çàêðûâàþò, îñòîðîæíî âñòðÿõèâàþò äî ðàñòâîðåíèÿ èñïû- òóåìîãî îáðàçöà è îñòàâëÿþò íà 2 ÷ ïðè îòñóòñò- âèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Îòêðûâàþò ïðîáêó, ñîäåðæèìîå êîëáû ïåðåíîñÿò â êîíè÷åñêóþ êîëáó ñ øèðîêèì ãîð- ëîì âìåñòèìîñòüþ 500 ìë, ñîäåðæàùóþ 25,0 ìë ðàñòâîðà 9 ã/ë àíèëèíà Ð â öèêëîãåêñàíå Ð è 30 ìë óêñóñíîé êèñëîòû ëåäÿíîé Ð. Ñîäåðæè- ìîå êîëáû ïåðåìåøèâàþò êðóãîâûìè äâèæå- íèÿìè, îñòàâëÿþò íà 5 ìèí, ïðèáàâëÿþò 0,05 ìë ðàñòâîðà êðèñòàëëè÷åñêîãî ôèîëåòîâîãî Ð è òèòðóþò 0,1 Ì ðàñòâîðîì õëîðíîé êèñëîòû äî ïîÿâëåíèÿ èçóìðóäíî-çåëåíîãî îêðàøèâà- íèÿ. Ïðîâîäÿò êîíòðîëüíûé îïûò â òàêèõ æå óñ- ëîâèÿõ. Ãèäðîêñèëüíîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîð- ìóëå: I V V m OH = × -5 610 1 2, ( ), ãäå: V1 — îáúåì 0,1 Ì ðàñòâîðà õëîðíîé êè- ñëîòû, èçðàñõîäîâàííûéíà òèòðî- âàíèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà, â ìèë- ëèëèòðàõ V2 — îáúåì 0,1 Ì ðàñòâîðà õëîðíîé êè- ñëîòû, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðî- âàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, â ìèë- ëèëèòðàõ m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàììàõ 5,610 — êîëè÷åñòâî êàëèÿ ãèäðîêñèäà, ñîîò- âåòñòâóþùåå 1 ìë 0,1 Ì ðàñòâîðà õëîðíîé êèñëîòû, â ìèëëèãðàììàõ. Ñîäåðæàíèå âîäû â ñóáñòàíöèè îïðåäåëÿþò ïîëóìèêðîìåòîäîì (2.1.5.12). Ïåðåñ÷åò ãèäðîêñèëüíîãî ÷èñëà ïðîâîäÿò ïî ôîðìóëå: IOH = (íàéäåííîå çíà÷åíèå ãèäðîêñèëüíîãî ÷èñëà) – 31,1· ó, ãäå: y — ñîäåðæàíèå âîäû â ñóáñòàíöèè â ïðî- öåíòàõ. ÌÅÒÎÄ Â Íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà, óêàçàííóþ â òàáëèöå 2.1.5.3.-2, ïîìåùàþò â ñóõóþ êîíè÷å- ñêóþ êîëáó ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿííîé ïðîáêîé âìåñòèìîñòüþ 250 ìë è ïðèáàâëÿþò 5 ìë ñìåñè ñâåæåïåðåãíàííûé ïèðèäèí Ð — ñâåæåïåðå- ãíàííûé óêñóñíûé àíãèäðèä Ð (3:1 îá/îá), íàãðå- âàþò ñ îáðàòíûì õîëîäèëüíèêîì íà êèïÿùåé âîäÿíîé áàíå â òå÷åíèå 1 ÷. Çàòåì ÷åðåç âåðõíèé êîíåö õîëîäèëüíèêà ïðèáàâëÿþò 10 ìë âîäû Ð è íàãðåâàþò â òå÷åíèå 10 ìèí è îõëàæäàþò. Ïðè- áàâëÿþò 25 ìë áóòàíîëà Ð, ïðåäâàðèòåëüíî íåé- òðàëèçîâàííîãî 0,5 Ì ðàñòâîðîì êàëèÿ ãèäðî- 191 êñèäà ñïèðòîâûì ïî ôåíîëôòàëåèíó: ñíà÷àëà ÷åðåç âåðõíèé êîíåö õîëîäèëüíèêà ïðèáàâëÿþò 15 ìë áóòàíîëà Ð, çàòåì îòñîåäèíÿþò õîëîäèëü- íèê è ïðîìûâàþò ñòåíêè êîëáû 10 ìë áóòàíîëà Ð. Äîáàâëÿþò 1 ìë ðàñòâîðà ôåíîëôòàëåèíà Ð1è òèòðóþò 0,5 Ì ðàñòâîðîì êàëèÿ ãèäðîêñèäà ñïèðòîâûì. Ïðîâîäÿò êîíòðîëüíûé îïûò â òà- êèõ æå óñëîâèÿõ. Îïðåäåëåíèå ñâîáîäíûõ êèñëîò. Îêîëî 10,0 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïîìåùàþò â êîíè- ÷åñêóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 125 ìë, ïðèáàâëÿ- þò 10 ìë ñâåæåïåðåãíàííîãî ïèðèäèíà Ð, ïðåä- âàðèòåëüíî íåéòðàëèçîâàííîãî ïî ôåíîëôòà- ëåèíó, 1 ìë ðàñòâîðà ôåíîëôòàëåèíà Ð1 è òèòðóþò 0,5 Ì ðàñòâîðîì êàëèÿ ãèäðîêñèäàñ- ïèðòîâûì.
Ãèäðîêñèëüíîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîð- ìóëå: I m V m V m VOH = × + × - é ëê ù ûú 28 05 1 1 1 2 2 , , ãäå: V — îáúåì 0,5 Ì ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðî- êñèäà ñïèðòîâîãî, èçðàñõîäîâàí- íûé íà òèòðîâàíèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà, â ìèëëèëèòðàõ; V1 — îáúåì 0,5 Ì ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðî- êñèäà ñïèðòîâîãî, èçðàñõîäîâàí- íûé íà òèòðîâàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, â ìèëëèëèòðàõ; V2 — îáúåì 0,5 Ì ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðî- êñèäà ñïèðòîâîãî, èçðàñõîäîâàí- íûé íà òèòðîâàíèå ñâîáîäíûõ êè- ñëîò, â ìèëëèëèòðàõ; m1 — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàììàõ; m2 — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñâîáîäíûõ êèñëîò â ãðàììàõ; 28,05 — êîëè÷åñòâî êàëèÿ ãèäðîêñèäà, ñî- îòâåòñòâóþùåå 1 ìë 0,5 Ì ðàñòâî- ðà êàëèÿ ãèäðîêñèäà ñïèðòîâîãî, â ìèëëèãðàììàõ. Ïðè àíàëèçå îêðàøåííûõ ìàñåë êîíå÷íóþ òî÷êó òèòðîâàíèÿ óñòàíàâëèâàþò ïîòåíöèîìåò- ðè÷åñêè (2.1.2.19). 201050004-2019 2.1.5.4. Éîäíîå ÷èñëî Éîäíûì ÷èñëîì II íàçûâàþò êîëè÷åñòâî ãà- ëîãåíà â ïåðåñ÷åòå íà éîä â ãðàììàõ, íåîáõîäè- ìîå äëÿ ñâÿçûâàíèÿ 100 ã ñóáñòàíöèè â îïèñàí- íûõ óñëîâèÿõ. Ïðè îòñóòñòâèè óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüå èñïîëüçóþò ìåòîä À. Çàìå- íà ìåòîäà À íà ìåòîä  òðåáóåò ïðîâåäåíèÿ âàëèäàöèè. ÌÅÒÎÄ À Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå äëÿ îïðåäåëåíèÿ èñïîëü- çóþò êîëè÷åñòâà èñïûòóåìîãî îáðàçöà, ïðèâå- äåííûå â òàáëèöå 2.1.5.4.-1. Íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïîìåùàþò â êîëáó ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿííîé ïðîáêîé âìå- ñòèìîñòüþ 250 ìë, ïðåäâàðèòåëüíî âûñóøåí- íóþ èëè ïðîìûòóþ óêñóñíîé êèñëîòîé ëåäÿíîé Ð, ðàñòâîðÿþò â 15 ìë õëîðîôîðìà Ð, ïðè îòñóò- ñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåé- íîé ñòàòüå. Ê ïîëó÷åííîìó ðàñòâîðó î÷åíü ìåäëåííî ïðèáàâëÿþò 25,0 ìë ðàñòâîðà éîäà áðîìèäà Ð. Êîëáó çàêðûâàþò ïðîáêîé è âûäåð- æèâàþò â òåìíîì ìåñòå ïðè ÷àñòîì ïåðåìåøè- 192 Òàáëèöà 2.1.5.3.-2. — Ïðåäïîëàãàåìûå çíà÷åíèÿ ãèä- ðîêñèëüíîãî ÷èñëà â çàâèñèìîñòè îò íàâåñêè èñïû- òóåìîãî îáðàçöà Ïðåäïîëàãàåìîå çíà÷åíèå IOH Íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà (ã) ìåíåå 20 10 20 – 50 5 50 – 100 3 100 – 150 2 150 – 200 1,5 200 – 250 1,25 250 – 300 1,0 300 – 350 0,75 Òàáëèöà 2.1.5.4.-1. — Ïðåäïîëàãàåìûå çíà÷åíèÿ éîä- íîãî ÷èñëà â çàâèñèìîñòè îò íàâåñêè èñïûòóåìîãî îáðàçöà Ïðåäïîëàãàåìîå çíà÷åíèå II Íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà (ã) ìåíåå 20 1,0 20 – 60 0,5 – 0,25 60 – 100 0,25 – 0,15 áîëåå 100 0,15 – 0,10 âàíèè â òå÷åíèå 30 ìèí, ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Äî- áàâëÿþò 10 ìë ðàñòâîðà 100 ã/ë êàëèÿ éîäèäà Ð, 100 ìë âîäû Ð è òèòðóþò 0.1 Ì ðàñòâîðîì íà- òðèÿ òèîñóëüôàòà ïðè èíòåíñèâíîì ïåðåìå- øèâàíèè äî îáåñöâå÷èâàíèÿ æåëòîé îêðàñêè. Çàòåì ïðèáàâëÿþò 5 ìë ðàñòâîðà êðàõìàëà Ð è ïðîäîëæàþò òèòðîâàíèå 0,1 Ì ðàñòâîðîì íà- òðèÿ òèîñóëüôàòà ïî êàïëÿì äî îáåñöâå÷èâà- íèÿ. Ïðîâîäÿò êîíòðîëüíûé îïûò â òàêèõ æå óñ- ëîâèÿõ. Éîäíîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå: I V V m I = × -1269 2 1, ( ) , ãäå: V1 — îáúåì 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ òèî- ñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííîãî íà òèò- ðîâàíèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà, â ìèë- ëèëèòðàõ; V2 — îáúåì 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ òèî- ñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííîãî íà òèò- ðîâàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, â ìèë- ëèëèòðàõ; m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàì- ìàõ. ÌÅÒÎÄ Â Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, äëÿ îïðåäåëåíèÿ èñ- ïîëüçóþò êîëè÷åñòâà èñïûòóåìîãî îáðàçöà, ïðèâåäåííûå â òàáëèöå 2.1.5.4.-2. Íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà äîëæíà áûòü òàêàÿ, ÷òîáû èçáûòîê ðàñòâîðà éîäà õëîðèäà Ð ñîñòàâëÿë 50 – 60 % îò îáùåãî êîëè÷åñòâà, ò.å. 100 – 150 % îò ñâÿçàííîãî êîëè÷åñòâà.
Íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà, óêàçàííóþ â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ïîìåùàþò â êîëáó ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿííîé ïðîáêîé âìå- ñòèìîñòüþ 250 ìë, ïðåäâàðèòåëüíî âûñóøåí- íóþ èëè ïðîìûòóþ óêñóñíîé êèñëîòîé ëåäÿíîé Ð, è ðàñòâîðÿþò â ñìåñè ðàâíûõ îáúåìîâ öèêëî- ãåêñàíà Ð è óêñóñíîé êèñëîòû ëåäÿíîé Ð, ïðè îò- ñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüå. Ïðè íåîáõîäèìîñòè ïåðåä ðàñòâîðåíèåì íà- âåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàñïëàâëÿþò (òåì- ïåðàòóðà ïëàâëåíèÿ âûøå 50 °C). Ê ïîëó÷åííî- ìó ðàñòâîðó î÷åíü ìåäëåííî ïðèáàâëÿþò îáúåì ðàñòâîðà éîäà õëîðèäà Ð, óêàçàííûé â òàáëèöå 2.1.5.4.-2. Êîëáó çàêðûâàþò è âûäåðæèâàþò â òåìíîì ìåñòå ïðè ÷àñòîì ïåðåìåøèâàíèè â òå- ÷åíèå 30 ìèí, ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Ïðèáàâëÿþò 10 ìë ðàñòâîðà 100 ã/ë êàëèÿ éîäèäà Ð, 100 ìë âîäû Ð è òèòðóþò 0,1 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ òèîñóëüôàòà ïðè èíòåíñèâíîì ïåðåìåøèâà- íèè ïî÷òè äî ïîëíîãî îáåñöâå÷èâàíèÿ æåëòîé îêðàñêè. Çàòåì äîáàâëÿþò 5 ìë ðàñòâîðà êðàõ- ìàëà Ð è ïðîäîëæàþò òèòðîâàíèå, ïðèáàâëÿÿ ïî êàïëÿì 0,1 Ì ðàñòâîð íàòðèÿ òèîñóëüôàòà äî îáåñöâå÷èâàíèÿ. Ïðîâîäÿò êîíòðîëüíûé îïûò â òàêèõ æå óñëîâèÿõ. Éîäíîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå: I V V m I = × -1269 2 1, ( ) ãäå: V1 — îáúåì 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ òèî- ñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííîãî íà òèò- ðîâàíèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà, â ìèë- ëèëèòðàõ V2 — îáúåì 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ òèî- ñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííîãî íà òèò- ðîâàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, â ìèë- ëèëèòðàõ m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàì- ìàõ. 193 Òàáëèöà 2.1.5.4.-2. — Ïðåäïîëàãàåìûå çíà÷åíèÿ éîä- íîãî ÷èñëà â çàâèñèìîñòè îò íàâåñêè èñïûòóåìîãî îáðàçöà è îáúåìà ðàñòâîðà éîäà õëîðèäà ICl (éîäà õëîðèä) Ïðåäïî- ëàãàåìîå çíà÷åíèå II Íàâåñêà (ã) èñïû- òóåìîãî îáðàçöà (ñîîòâåòñòâóåò èçáûòêó 150 % ICl) Íàâåñêà(ã) èñïû- òóåìîãî îáðàçöà (ñîîòâåòñòâóåò èçáûòêó 100 % ICl) Îáúåì ðàñòâîðà ICl (ìë) <3 10 10 25 3 8,4613 10,5760 25 5 5,0770 6,3460 25 10 2,5384 3,1730 20 20 0,8461 1,5865 20 40 0,6346 0,7935 20 60 0,4321 0,5288 20 80 0,3173 0,3966 20 100 0,2538 0,3173 20 120 0,2115 0,2644 20 140 0,1813 0,2266 20 160 0,1587 0,1983 20 180 0,1410 0,1762 20 200 0,1269 0,1586 20 201050005-2019 2.1.5.5. Ïåðîêñèäíîå ÷èñëî Ïåðîêñèäíûì ÷èñëîì Ip íàçûâàþò êîëè÷åñò- âî ïåðîêñèäîâ, âûðàæåííîå â ìèëëèýêâèâàëåí- òàõ àêòèâíîãî êèñëîðîäà, ñîäåðæàùååñÿ â 1000 ã ñóáñòàíöèè. Ïåðîêñèäíîå ÷èñëî îïðåäåëÿþò íèæåîïè- ñàííûìè ìåòîäàìè. Ïðè îòñóòñòâèè óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüå èñïîëüçóþò ìåòîä À. Çàìå- íà ìåòîäà À íà ìåòîä  òðåáóåò ïîäòâåðæ- äåíèÿ. ÌÅÒÎÄ À 5,00 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïîìåùàþò â êî- íè÷åñêóþ êîëáó ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿííîé ïðîá- êîé âìåñòèìîñòüþ 250 ìë, ïðèáàâëÿþò 30 ìë ñìåñè õëîðîôîðì Ð — óêñóñíàÿ êèñëîòà ëåäÿ- íàÿ Ð (2:3 îá/îá). Êîëáó âñòðÿõèâàþò äî ðàñòâî- ðåíèÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà, äîáàâëÿþò 0,5 ìë íàñûùåííîãî ðàñòâîðà êàëèÿ éîäèäà Ð, ïåðåìå- øèâàþò òî÷íî 1 ìèí è ïðèáàâëÿþò 30 ìë âîäû Ð. Ïîëó÷åííûé ðàñòâîð òèòðóþò 0,01 Ì ðàñòâî- ðîì íàòðèÿ òèîñóëüôàòà, ìåäëåííî äîáàâëÿÿ òèòðàíò ïðè íåïðåðûâíîì èíòåíñèâíîì ïåðåìå- øèâàíèè ïî÷òè äî ïîëíîãî îáåñöâå÷èâàíèÿ æåëòîé îêðàñêè. Çàòåì ïðèáàâëÿþò 5 ìë ðàñ- òâîðà êðàõìàëà Ð è ïðîäîëæàþò òèòðîâàíèå, èíòåíñèâíî ïåðåìåøèâàÿ äî îáåñöâå÷èâàíèÿ ðàñòâîðà. Ïðîâîäÿò êîíòðîëüíûé îïûò ïðè òåõ æå óñëîâèÿõ. Îáúåì0,01 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ òèîñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðîâàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, íå äîëæåí ïðåâûøàòü 0,1 ìë.
Ïåðîêñèäíîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîð- ìóëå: I V V m P = × -10 1 2( ) ãäå: V1 — îáúåì 0,01 Ì íàòðèÿ òèîñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðîâàíèå èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà, â ìèëëèëèòðàõ; V2 — îáúåì 0,01 Ì íàòðèÿ òèîñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðîâàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, â ìèëëèëèòðàõ; m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàì- ìàõ. ÌÅÒÎÄ Â Èñïûòàíèÿ ïðîâîäÿò â çàùèùåííîì îò ñâå- òà ìåñòå. 50 ìë ñìåñè òðèìåòèëïåíòàí Ð(óêñóñíàÿ êèñëîòà ëåäÿíàÿ Ð (2:3 îá/îá) ïîìåùàþò â êî- íè÷åñêóþ êîëáó è çàêðûâàþò ïðîáêîé.  êîëáó âíîñÿò íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà (òàáëè- öà 2.1.5.5.-1) è ïåðåìåøèâàþò êðóãîâûìè äâè- æåíèÿìè äî ïîëíîãî åãî ðàñòâîðåíèÿ. Ê ïîëó- ÷åííîìó ðàñòâîðó ïèïåòêîé ïîäõîäÿùåãî îáúå- ìà ïðèáàâëÿþò 0,5 ìë íàñûùåííîãî ðàñòâîðà êàëèÿ éîäèäà Ð è ñíîâà çàêðûâàþò êîëáó ïðîá- êîé. Ðàñòâîð âûäåðæèâàþò â òå÷åíèå60 ±1 ñ, íå- ïðåðûâíî åãî âñòðÿõèâàÿ, à çàòåì äîáàâëÿþò 30 ìë âîäû Ð. Òèòðóþò 0,01 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ òèî- ñóëüôàòà, ïîñòåïåííî äîáàâëÿÿ òèòðàíò ïðè ïîñòîÿííîì è èíòåíñèâíîì ïåðåìåøèâàíèè ïî÷òè äî ïîëíîãî èñ÷åçíîâåíèÿ æåëòîé îêðàñêè éîäà. Çàòåì ïðèáàâëÿþò îêîëî 0,5 ìë ðàñòâîðà êðàõìàëà Ð1 è ïðîäîëæàþò òèòðîâàíèå ïðè ïî- ñòîÿííîì èíòåíñèâíîì ïåðåìåøèâàíèè, îñî- áåííî âáëèçè òî÷êè ýêâèâàëåíòíîñòè, ñ öåëüþ ïîëíîãî âûñâîáîæäåíèÿ éîäà èç ñëîÿ îðãàíè÷å- ñêîãî ðàñòâîðèòåëÿ. Ðàñòâîð íàòðèÿ òèîñóëüôà- òà ïðèáàâëÿþò ïî êàïëÿì äî èñ÷åçíîâåíèÿ ñè- íåé îêðàñêè.  çàâèñèìîñòè îò îáúåìà 0,01 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ òèîñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííîãî íà òèòðîâàíèå, ïðè íåîáõîäèìîñòè, äîïóñêàåòñÿ òèòðîâàíèå 0,1 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ òèîñóëü- ôàòà. ÏÐÈÌÅ×ÀÍÈÅ. Äëÿ ïåðîêñèäíîãî ÷èñëà îêîëî 70 è áîëåå íàáëþäàåòñÿ çàäåðæêà îáåñ- öâå÷èâàíèÿ êðàõìàëà îò 15 ñ äî 30 ñ, ÷òî îáó- ñëîâëåíî ñïîñîáíîñòüþ òðèìåòèëïåíòàíà âñïëû- âàòü íà ïîâåðõíîñòü âîäíîé ôàçû. Ïîýòîìó ïðè ñìåøèâàíèè ðàñòâîðèòåëÿ ñ âîäíûì òèòðàíòîì íåîáõîäèìî âûäåðæèâàòü âðåìÿ, äîñòàòî÷íîå äëÿ ïîëíîãî âûñâîáîæäåíèÿ éîäà. Äëÿ ïåðîê- ñèäíûõ ÷èñåë, çíà÷åíèå êîòîðûõ ïðåâûøàåò 150, ðåêîìåíäóþò èñïîëüçîâàòü 0,1 Ì ðàñòâîð 194 Òàáëèöà 2.1.5.5.-1. — Ïðåäïîëàãàåìûå çíà÷åíèÿ ïå- ðîêñèäíîãî ÷èñëà â çàâèñèìîñòè îò íàâåñêè èñïû- òóåìîãî îáðàçöà Ïðåäïîëàãàåìîå çíà÷åíèå IP Íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà(ã) îò 0 äî 12 îò 5,00 äî 2,00 îò 12 äî 20 îò 2,00 äî 1,20 îò 20 äî 30 Îò 1,20 äî 0,80 îò 30 äî 50 îò 0,800 äî 0,500 îò 50 äî 90 îò 0,500 äî 0,300 íàòðèÿ òèîñóëüôàòà. Ñ öåëüþ ïðåäîòâðàùå- íèÿ ðàññëîåíèÿ ôàç è óìåíüøåíèÿ âðåìåíè âû- ñâîáîæäåíèÿ éîäà äîïóñêàåòñÿ ïðèáàâëåíèå ê ñìåñè íåáîëüøîãî êîëè÷åñòâà (îò 0,5 % äî 1,0 %, ì/ì) ýìóëüãàòîðà ñ âûñîêèì ãèäðîôèëü- íî-ëèïîôèëüíûì áàëàíñîì (íàïðèìåð, ïîëè- ñîðáàò 60). Ïðîâîäÿò êîíòðîëüíûé îïûò. Åñëè îáúåì òèòðàíòà, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðîâàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, ïðåâûøàåò 0,1 ìë, ïîâòî- ðÿþò èñïûòàíèå ñî ñâåæåïðèãîòîâëåííûìè ðå- àêòèâàìè. Ïåðîêñèäíîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîð- ìóëå: I V V c m P = × - ×1000 1 0( ) , ãäå: V1 — îáúåì 0,01 Ì íàòðèÿ òèîñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðîâàíèå èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà, â ìèëëèëèòðàõ; V0 — îáúåì 0,01 Ì íàòðèÿ òèîñóëüôàòà, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðîâàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, â ìèëëèëèò- ðàõ; m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàì- ìàõ; ñ — êîíöåíòðàöèÿ ðàñòâîðà íàòðèÿ òèî- ñóëüôàòà â ìîëü íà ëèòð. 201050006-2019 2.1.5.6. ×èñëî îìûëåíèÿ ×èñëîì îìûëåíèÿ IS íàçûâàþò êîëè÷åñòâî êàëèÿ ãèäðîêñèäà â ìèëëèãðàììàõ, íåîáõîäè- ìîå äëÿ íåéòðàëèçàöèè ñâîáîäíûõ êèñëîò è îìûëåíèÿ ñëîæíûõ ýôèðîâ, ñîäåðæàùèõñÿ â 1 ã ñóáñòàíöèè. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå äëÿ îïðåäåëåíèÿ èñïîëü- çóþò êîëè÷åñòâà èñïûòóåìîãî îáðàçöà, ïðèâå- äåííûå â òàáëèöå 2.1.5.6.-1.
Íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïîìåùàþò â êîëáó èç áîðîñèëèêàòíîãî ñòåêëà âìåñòèìî- ñòüþ 250 ìë ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿííîé ïðîáêîé, ñíàáæåííóþ îáðàòíûì õîëîäèëüíèêîì. Ïðè- áàâëÿþò 25,0 ìë 0,5 Ì ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðî- êñèäà ñïèðòîâîãî Ð è íåñêîëüêî ñòåêëÿííûõ øàðèêîâ. Ïðèñîåäèíÿþò õîëîäèëüíèê è íàãðå- âàþò â òå÷åíèå 30 ìèí, ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Äî- áàâëÿþò 1 ìë ðàñòâîðà ôåíîëôòàëåèíà Ð1, ãî- ðÿ÷èé ðàñòâîð òîò÷àñ òèòðóþò 0,5 Ì õëîðîâîäî- ðîäíîé êèñëîòîé. Ïðîâîäÿò êîíòðîëüíûé îïûò â òàêèõ æå óñëîâèÿõ. ×èñëî îìûëåíèÿ ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå: ( )I V V m S = × -28 05, 2 1 ãäå: V1 — îáúåì 0,5 Ì õëîðîâîäîðîäíîé êè- ñëîòû, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðî- âàíèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà, â ìèë- ëèëèòðàõ; V2 — îáúåì 0,5 Ì õëîðîâîäîðîäíîé êè- ñëîòû, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðî- âàíèå â êîíòðîëüíîì îïûòå, â ìèë- ëèëèòðàõ; m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàììàõ; 28,05 — êîëè÷åñòâî êàëèÿ ãèäðîêñèäà, ñî- îòâåòñòâóþùåå 1 ìë 0,5 Ì õëîðîâî- äîðîäíîé êèñëîòû, â ìèëëèãðàì- ìàõ. 201050007-2019 2.1.5.7. Íåîìûëÿåìûå âåùåñòâà Òåðìèí «íåîìûëÿåìûå âåùåñòâà» ïðèìåíÿ- åòñÿ ê âåùåñòâàì, íåëåòó÷èì ïðè òåìïåðàòóðå îò 100 °Ñ äî 105 °Ñ è ïîëó÷àåìûì ïóòåì ýêñ- òðàêöèè îðãàíè÷åñêèì ðàñòâîðèòåëåì èç ñóá- ñòàíöèè ïîñëå åå îìûëåíèÿ. Ñîäåðæàíèå íå- îìûëÿåìûõ âåùåñòâ âû÷èñëÿþò â ïðîöåíòàõ (ì/ì). Íåîáõîäèìî èñïîëüçîâàòü ñòåêëÿííóþ ïî- ñóäó ñî øëèôàìè áåç ñìàçêè. Íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà, óêàçàííóþ â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ïîìåùàþò 195 Òàáëèöà 2.1.5.6.-1. — Ïðåäïîëàãàåìûå çíà÷åíèÿ ÷èñ- ëà îìûëåíèÿ â çàâèñèìîñòè îò íàâåñêè èñïûòóåìîãî îáðàçöà Ïðåäïîëàãàåìûå çíà÷åíèÿ Is Íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà(ã) <3 20 îò 3 äî 10 îò 12 äî 15 îò 10 äî 40 îò 8 äî 12 îò 40 äî 60 îò 5 äî 8 îò 60 äî 100 îò 3 äî 5 îò 100 äî 200 îò 2,5 äî 3 îò 200 äî 300 îò 1 äî 2 îò 300 äî 400 îò 0,5 äî 1 â êîëáó âìåñòèìîñòüþ 250 ìë, ñíàáæåííóþ îá- ðàòíûì õîëîäèëüíèêîì. Ïðèáàâëÿþò 50 ìë 2 Ì ðàñòâîðà êàëèÿ ãèäðîêñèäà ñïèðòîâîãî Ð è íà- ãðåâàþò íà âîäÿíîé áàíå â òå÷åíèå 1 ÷, ïåðèîäè- ÷åñêè ïåðåìåøèâàÿ êðóãîâûìè äâèæåíèÿìè, çà- òåì îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû íèæå 25 °Ñ. Ñî- äåðæèìîå êîëáû ñ ïîìîùüþ 100 ìë âîäû Ð ïåðåíîñÿò â äåëèòåëüíóþ âîðîíêó. Ïîëó÷åííûé ðàñòâîð îñòîðîæíî âñòðÿõèâàþò ñ ýôèðîì, ñâî- áîäíûì îò ïåðîêñèäîâ, Ð òðåõêðàòíî ïîðöèÿìè ïî 100 ìë. Âñå ýôèðíûå èçâëå÷åíèÿ ñîáèðàþò â äðóãóþ äåëèòåëüíóþ âîðîíêó, ñîäåðæàùóþ 40 ìë âîäû Ð, îñòîðîæíî âñòðÿõèâàþò â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ ìèíóò (íå áîëåå 5 ìèí) è îñòàâëÿþò äî ïîëíîãî ðàçäåëåíèÿ ñëîåâ, ïîñëå ÷åãî îòáðà- ñûâàþò âîäíûé ñëîé. Ýôèðíûé ñëîé ïðîìûâà- þò äâàæäû âîäîé Ð ïîðöèÿìè ïî 40 ìë, çàòåì 40 ìë ðàñòâîðà 30 ã/ë êàëèÿ ãèäðîêñèäà Ð è 40 ìë âîäû Ð; äàííóþ îïåðàöèþ ïîâòîðÿþò òðè ðàçà. Ýôèðíûé ñëîé ïðîìûâàþò íåñêîëüêî ðàç âîäîé Ð ïîðöèÿìè ïî 40 ìë äî îòðèöàòåëüíîé ùåëî÷íîé ðåàêöèè â âîäíîì ñëîå ïî ôåíîëôòà- ëåèíó. Ýôèðíûé ñëîé êîëè÷åñòâåííî ïåðåíîñÿò â äîâåäåííóþ äî ïîñòîÿííîé ìàññû êîëáó, ïðî- ìûâàÿ äåëèòåëüíóþ âîðîíêó ýôèðîì, ñâîáîä- íûì îò ïåðîêñèäîâ, Ð. Ýôèð îòãîíÿþò ñ ñîîòâåòñòâóþùèìè ïðå- äîñòîðîæíîñòÿìè, ê îñòàòêó ïðèáàâëÿþò 6 ìë àöåòîíà Ð. Ðàñòâîðèòåëü îñòîðîæíî óäàëÿþò â ïîòîêå âîçäóõà. Îñòàòîê â êîëáå ñóøàò ïðè òåìïåðàòóðå îò 100 °Ñ äî 105 °Ñ äî ïîñòîÿííîé ìàññû, îõëàæäàþò â ýêñèêàòîðå è âçâåøèâàþò. Ñîäåðæàíèå íåîìûëÿåìûõ âåùåñòâ ðàññ÷è- òûâàþò ïî ôîðìóëå: Íåîìûëÿåìûå âåùåñòâà = 100 × a m , ãäå: à — ìàññà îñòàòêà â ãðàììàõ; m — íàâåñêè èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàì- ìàõ. Îñòàòîê ðàñòâîðÿþò â 20 ìë ýòàíîëà Ð, ïðåäâàðèòåëüíî íåéòðàëèçîâàííîãî ïî ðàñòâî- ðó ôåíîëôòàëåèíà Ð, è òèòðóþò 0,1 Ì ðàñòâî- ðîì íàòðèÿ ãèäðîêñèäà ñïèðòîâûì.
Åñëè èçðàñ- õîäîâàííûé îáúåì 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèä- ðîêñèäà ñïèðòîâîãî ïðåâûøàåò 0,2 ìë, ðàçäåëåíèå ñëîåâ áûëî íåïîëíûì; ïðè ýòîì âçâåøåííûé îñòàòîê íå ìîæåò ðàññìàòðèâàòüñÿ êàê íåîìûëÿåìûå âåùåñòâà.  ýòîì ñëó÷àå èñ- ïûòàíèå ïîâòîðÿþò. 201050008-2019 2.1.5.8. Îïðåäåëåíèå àìèííîãî àçîòà â ïåðâè÷íûõ àðîìàòè÷åñêèõ àìèíàõ Íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà, óêàçàííóþ â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ðàñòâîðÿþò â 50 ìë õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòû ðàçáàâëåííîé Ð èëè â äðóãîì óêàçàííîì ðàñòâîðèòåëå è ïðè- áàâëÿþò 3 ã êàëèÿ áðîìèäà Ð. Îõëàæäàþò â ëå- äÿíîé âîäå è ìåäëåííî òèòðóþò ïðè ïîñòîÿí- íîì ïåðåìåøèâàíèè 0,1 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ íèòðèòà. Êîíå÷íóþ òî÷êó òèòðîâàíèÿ óñòàíàâëèâàþò ýëåêòðîìåòðè÷åñêè èëè ñ ïîìîùüþ èíäèêàòîðà, óêàçàííîãî â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. 201050009-2019 2.1.5.9. Îïðåäåëåíèå àçîòà ïîñëå ìèíåðàëèçàöèè ñåðíîé êèñëîòîé ÏÎËÓÌÈÊÐÎÌÅÒÎÄ Íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà, ñîäåðæàùóþ îêîëî 2 ìã àçîòà, ïîìåùàþò â êîëáó äëÿ ñæèãà- íèÿ, ïðèáàâëÿþò 4 ã èçìåëü÷åííîé â ïîðîøîê ñìåñè, ñîñòîÿùåé èç 100 ã êàëèÿ ñóëüôàòà Ð, 5 ã ìåäè ñóëüôàòà Ð è 2,5 ã ñåëåíà Ð, à òàêæå òðè ñòåêëÿííûõ øàðèêà. Ïðèáàâëÿþò 5 ìë ñåðíîé êèñëîòû Ð òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû îíà ñìûâàëà ëþáûå îñòàòêè ÷àñòèö, ïðèëèïøèå ê ãîðëó êîë- áû, è ñòåêàëà ïî ñòåíêàì êîëáû. Ñîäåðæèìîå êîëáû ïåðåìåøèâàþò êðóãîâûìè äâèæåíèÿìè. Âî èçáåæàíèå áîëüøèõ ïîòåðü ñåðíîé êèñëîòû ãîðëî êîëáû çàêðûâàþò íåïëîòíî, íàïðèìåð, ñòåêëÿííîé ãðóøåâèäíîé ïðîáêîé ñ êîðîòêèì çàïàÿííûì îòðîñòêîì. Êîëáó íàãðåâàþò, ïîñòå- ïåííî ïîâûøàÿ òåìïåðàòóðó äî èíòåíñèâíîãî êèïåíèÿ è êîíäåíñàöèè ïàðîâ ñåðíîé êèñëîòûâ ãîðëå êîëáû; ïðè ýòîì íåîáõîäèìî ñëåäèòü çà òåì, ÷òîáû âåðõíÿÿ ÷àñòü êîëáû íå ïåðåãðåâà- ëàñü. Íàãðåâàíèå ïðîäîëæàþò â òå÷åíèå 30 ìèí ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüå. Îõëàæäàþò, òâåðäûé îñòà- òîê ðàñòâîðÿþò, îñòîðîæíî ïðèáàâëÿÿ ê ñìåñè 25 ìë âîäû Ð, ñíîâà îõëàæäàþò è ïðèñîåäèíÿþò ê ïðèáîðó äëÿ ïåðåãîíêè ñ âîäÿíûì ïàðîì. Ïðè- áàâëÿþò 30 ìë ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèäðîêñèäà êîíöåíòðèðîâàííîãî Ð è òîò÷àñ ïåðåãîíÿþò, ïðîïóñêàÿ ïàð ÷åðåç ñìåñü. Îêîëî 40 ìë äèñòèë- 196 ëÿòà ñîáèðàþò â ïðèåìíèê, ñîäåðæàùèé 20,0 ìë 0,01 Ì õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòû è äîñòàòî÷- íîå êîëè÷åñòâî âîäû Ðäëÿ òîãî, ÷òîáû êîíåö õî- ëîäèëüíèêà áûë ïîãðóæåí.  êîíöå ïåðåãîíêè ïðèåìíèê îïóñêàþò òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû êî- íåö õîëîäèëüíèêà íàõîäèëñÿ íàä ïîâåðõíîñòüþ êèñëîòû. Íåîáõîäèìî èñêëþ÷èòü ïîïàäàíèå æèäêîñòè èç ïðèåìíèêàíà âíåøíþþ ïîâåðõ- íîñòü õîëîäèëüíèêà. Äèñòèëëÿò òèòðóþò 0,01 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ ãèäðîêñèäà, èñïîëüçóÿ â êà- ÷åñòâå èíäèêàòîðà ñìåøàííûé ðàñòâîð ìåòè- ëîâîãî êðàñíîãî Ð. Èñïûòàíèå ïîâòîðÿþò, èñïîëüçóÿ âìåñòî èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà 50 ìã ãëþêîçû Ð. Ñîäåðæàíèå àçîòà â ïðîöåíòàõ ðàññ÷èòûâà- þò ïî ôîðìóëå: Ñîäåðæàíèå àçîòà = 0 01401 2 1, ( )× -V V m , ãäå: V1 — îáúåì 0,01 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèä- ðîêñèäà, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðî- âàíèå ðàñòâîðà, ïîëó÷åííîãî ïîñëå ñæèãàíèÿ íàâåñêè èñïûòóåìîãî îá- ðàçöà, â ìèëëèëèòðàõ; V2 — îáúåì 0,01 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèä- ðîêñèäà, èçðàñõîäîâàííûé íà òèòðî- âàíèå ðàñòâîðà, ïîëó÷åííîãî ïîñëå ñæèãàíèÿ ãëþêîçû, â ìèëëèëèòðàõ; m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ãðàì- ìàõ. 201050010-2019 2.1.5.10. Ìåòîä ñæèãàíèÿ â êîëáå ñ êèñëîðîäîì Ìåòîä îñíîâàí íà ðàçðóøåíèè îðãàíè÷å- ñêèõ âåùåñòâ ïóòåì ñæèãàíèÿ â êèñëîðîäå, ðàñ- òâîðåíèè îáðàçóþùèõñÿ ïðîäóêòîâ ñãîðàíèÿ â ïîãëîùàþùåé æèäêîñòè äëÿ ïîñëåäóþùåãî îïðåäåëåíèÿ ýëåìåíòîâ, íàõîäÿùèõñÿ â ðàñòâî- ðå â âèäå èîíîâ. Ìåòîä ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäå- ëåíèÿ ãàëîãåíîâ (ôòîðà, õëîðà, áðîìà è éîäà), ñåðû è ôîñôîðà.
Êîëáà äëÿ ñæèãàíèÿ ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé êî- íè÷åñêóþ êîëáó èç áîðîñèëèêàòíîãî ñòåêëà âìåñòèìîñòüþ íå ìåíåå 500 ìë ñ ïðèòåðòîé ñòåêëÿííîé ïðîáêîé, â êîòîðóþ âïàÿíà ïëàòèíî- âàÿ, íèõðîìîâàÿ èëè ïëàòèíî-èðèäèåâàÿ ïðîâî- ëîêà äèàìåòðîì îò 0,7 ìì äî 0,8 ìì, çàêàí÷è- âàþùàÿñÿ äåðæàòåëåì îáðàçöà â âèäå êîðçèíêè èëè ñïèðàëè, èçãîòîâëåííûõ èç òîãî æå ìàòå- ðèàëà, íà ðàññòîÿíèè îò 1,5 ñì äî 2,0 ñì îò äíà êîëáû (ðèñóíîê 2.1.5.10.-1). Òùàòåëüíî èçìåëü÷àþò èñïûòóåìóþ ñóá- ñòàíöèþ è ïîìåùàþò óêàçàííîå â ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüå êîëè÷åñòâî â öåíòð êóñî÷êà ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãè ðàçìåðîì îò 40 ìì äî 45 ìì è çàâîðà÷èâàþò â âèäå ïàêåòèêà, îñòàâëÿÿ âûñòóïàþùóþ ïîëîñêó øèðèíîé îêîëî 10 ìì è äëèíîé 30 – 35 ìì, â ñîîòâåòñòâèè ñî ñõåìîé íà ðèñ. 2.5.10.-2. Åñëè â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå óêàçà- íî, ÷òî áóìàãà äîëæíà áûòü ïðîïèòàíà ëèòèÿ êàðáîíàòîì, òî ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì öåíòð áó- ìàãè óâëàæíÿþò íàñûùåííûì ðàñòâîðîì ëèòèÿ êàðáîíàòà Ð è ñóøàò â ñóøèëüíîì øêàôó ïðè òåìïåðàòóðå 100 – 105 °Ñ. Ïðè èñïûòàíèè æèäêîñòè íàâåñêó ïîìåùà- þò â êàïèëëÿð, çàïëàâëåííûé ïàðàôèíîì, èëè â êàïñóëó, èçãîòîâëåííóþ èç ïîëèýòèëåíà, íèò- ðîïëåíêè èëè ìåòèëöåëëþëîçû. Äëÿ òðóäíîëå- òó÷èõ æèäêîñòåé äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíåíèå äâîéíîãî áóìàæíîãî ïàêåòèêà. Äëÿ àíàëèçà ìà- çåîáðàçíûõ ñóáñòàíöèé ïðèìåíÿþò êàïñóëó èç íèòðîïëåíêè èëè ïàêåò èç âîùåíîé áóìàãè. Êàïñóëû è êàïèëëÿðû çàâîðà÷èâàþò â ïàêåòèê èç ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãè ïî ïðèâåäåííîé íèæå ñõåìå.  ñëó÷àå òâåðäûõ è ìàçåîáðàçíûõ ñóáñòàíöèé, ñãîðàþùèõ ñî âñïûøêîé, ê íàâåñêå ïðèáàâëÿþò îò 3 ìã äî 5 ìã ïàðàôèíà. Ïîäãîòîâëåííûé ïàêåòèê ñ îáðàçöîì ïîìå- ùàþò â äåðæàòåëü.  êîëáó âíîñÿò âîäó Ð èëè óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ðàñ- òâîð, ïðåäíàçíà÷åííûé äëÿ ïîãëîùåíèÿ ïðîäóê- òîâ ãîðåíèÿ. Ñ ïîìîùüþ òðóáêè, êîíåö êîòîðîé íàõîäèòñÿ âûøå óðîâíÿ æèäêîñòè, âûòåñíÿþò âîçäóõ èç êîëáû, ïðîïóñêàÿ òîê êèñëîðîäà. Çà- 197 Ðèñóíîê 2.1.5.10.-1. — Êîëáà äëÿ ñæèãàíèÿ â êèñëî- ðîäå òåì îñòîðîæíî ïîäæèãàþò óçêèé êîíåö ñâîáîä- íîé ïîëîñêè ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãè è òîò÷àñ ïëîòíî çàêðûâàþò êîëáó ïðîáêîé, ñìî÷åííîé âîäîé Ð. Êîëáó îñòàâëÿþò ïëîòíî çàêðûòîé â òå- ÷åíèå âñåãî ïðîöåññà ñæèãàíèÿ. Ýíåðãè÷íî âñòðÿõèâàþò êîëáó äëÿ ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ ïðîäóêòîâ ãîðåíèÿ, îõëàæäàþò è ïðèìåðíî ÷å- ðåç 5 ìèí, ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷à- ñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, îñòîðîæíî îòêðû- âàþò. Ïðîìûâàþò äíî è ñòåíêè êîëáû, à òàêæå äåðæàòåëü îáðàçöà âîäîé Ð. Ïðîìûâíûå âîäû ïðèñîåäèíÿþò ê îñíîâíîìó ðàñòâîðó è ïðîâî- äÿò îïðåäåëåíèå ýëåìåíòà ìåòîäîì, óêàçàííûì â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Ïàðàëëåëüíî ïðîâîäÿò êîíòðîëüíûé îïûò. ÏÐÈÌÅ×ÀÍÈÅ. Ïðè ïðîâåäåíèè èñïûòà- íèÿ íåîáõîäèìî ñîáëþäàòü ìåðû ïðåäîñòîðîæ- íîñòè (èñïîëüçîâàòü çàùèòíûå î÷êè, êîëáó ïî- ìåñòèòü â ïðåäîõðàíèòåëüíûé ÷åõîë, óñòàíî- âèòü çàùèòíûé ýêðàí). Êîëáà äëÿ ñæèãàíèÿ äîëæíà áûòü òùàòåëüíî âûìûòà è íå ñîäåðæàòü ñëåäîâ îðãàíè÷åñêèõ âåùåñòâ è ðàñòâîðèòåëåé. 201050011-2019 2.1.5.11. Êîìïëåêñîìåòðè÷åñêîå òèòðîâàíèå ÀËÞÌÈÍÈÉ 20,0 ìë ðàñòâîðà, óêàçàííîãî â ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüå, ïîìåùàþò â êîíè÷åñêóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 500 ìë, ïðèáàâëÿþò 25,0 ìë 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ýäåòàòà è 10 ìë ñìåñè ðàâíûõ îáúåìîâ ðàñòâîðà 155 ã/ë àììîíèÿ àöåòàòà Ð è óêñóñíîé êèñëîòû ðàç- áàâëåííîé Ð, êèïÿòÿò â òå÷åíèå 2 ìèí è îõëàæ- äàþò. Ïðèáàâëÿþò 50 ìë ýòàíîëà Ð è 3 ìë ñâå- æåïðèãîòîâëåííîãî ðàñòâîðà 0,25 ã/ë äèòèçîíà Ð â ýòàíîëå Ð. Èçáûòîê íàòðèÿ ýäåòàòà òèòðóþò 0,1 Ì ðàñòâîðîì öèíêà ñóëüôàòà äî ïåðåõîäà çåëåíîâàòî-ñèíåé îêðàñêè ðàñòâîðà â êðàñíîâà- òî-ôèîëåòîâóþ. 1 ìë 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ýäåòàòà ñîîò- âåòñòâóåò 2,698 ìã Al.
ÂÈÑÌÓÒ Ðàñòâîð, óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåé- íîé ñòàòüå, ïîìåùàþò â êîíè÷åñêóþ êîëáó âìå- ñòèìîñòüþ 500 ìë. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêà- çàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ðàñòâîð ðàçâîäÿò âîäîé Ð äî 250 ìë, ïðèáàâëÿþò ïî êàï- ëÿì ïðè ïåðåìåøèâàíèè ðàñòâîð àììèàêà êîí- öåíòðèðîâàííûé Ð äî ïîìóòíåíèÿ ñìåñè. Äî- áàâëÿþò 0,5 ìë àçîòíîé êèñëîòû Ð, íàãðåâàþò ïðè òåìïåðàòóðå îêîëî 70 °Ñ äî ïîëíîãî èñ÷åç- íîâåíèÿ ïîìóòíåíèÿ, ïðèáàâëÿþò îêîëî 50 ìã èíäèêàòîðíîé ñìåñè êñèëåíîëîâîãî îðàíæåâîãî Ð è òèòðóþò 0,1 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ ýäåòàòà äî ïåðåõîäà ðîçîâàòî-ôèîëåòîâîé îêðàñêè ðàñ- òâîðà â æåëòóþ. 1 ìë 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ýäåòàòà ñîîò- âåòñòâóåò 20,90 ìã Bi. ÊÀËÜÖÈÉ Ðàñòâîð, óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåé- íîé ñòàòüå, ïîìåùàþò â êîíè÷åñêóþ êîëáó âìå- ñòèìîñòüþ 500 ìë. Îáúåì ðàñòâîðà äîâîäÿò âî- äîé Ð äî 300 ìë, ïðèáàâëÿþò 6,0 ìë ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèäðîêñèäà êîíöåíòðèðîâàííîãî Ð, îêî- ëî 200 ìã èíäèêàòîðíîé ñìåñè êèñëîòû êàëü- êîíêàðáîíîâîéÐ è òèòðóþò 0,1 Ì ðàñòâîðîì íà- òðèÿ ýäåòàòàäî ïåðåõîäà ôèîëåòîâîé îêðàñêè ðàñòâîðà â íàñûùåííî-ñèíþþ. 1 ìë 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ýäåòàòà ñîîò- âåòñòâóåò 4,008 ìã Ñà. ÌÀÃÍÈÉ Ðàñòâîð, óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåé- íîé ñòàòüå, ïîìåùàþò â êîíè÷åñêóþ êîëáó âìå- ñòèìîñòüþ 500 ìë. Îáúåì ðàñòâîðà äîâîäÿò âî- äîé Ð äî 300 ìë, ïðèáàâëÿþò 10 ìë àììèà÷íîãî áóôåðíîãî ðàñòâîðà ñ ðÍ 10,0 Ð è îêîëî 50 ìã èíäèêàòîðíîé ñìåñè ïðîòðàâíîãî ÷åðíîãî 11 Ð. Ðàñòâîð íàãðåâàþò äî òåìïåðàòóðû îêîëî 40 °Ñ 198 Ðèñóíîê 2.1.5.10.-2. — Ôèëüòðîâàëüíàÿ áóìàãà äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ïàêåòèêà è òèòðóþò ïðè ýòîé òåìïåðàòóðå 0,1 Ì ðàñòâî- ðîì íàòðèÿ ýäåòàòà äî ïåðåõîäà ôèîëåòîâîé îêðàñêè ðàñòâîðà â íàñûùåííî-ñèíþþ. 1 ìë 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ýäåòàòà ñîîò- âåòñòâóåò 2,431 ìã Mg. ÑÂÈÍÅÖ Ðàñòâîð, óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåé- íîé ñòàòüå, ïîìåùàþò â êîíè÷åñêóþ êîëáó âìå- ñòèìîñòüþ 500 ìë. Îáúåì ðàñòâîðà äîâîäÿò âî- äîé Ð äî 200 ìë, ïðèáàâëÿþò îêîëî 50 ìã èíäè- êàòîðíîé ñìåñè êñèëåíîëîâîãî îðàíæåâîãî Ð, çàòåì ãåêñàìåòèëåíòåòðàìèí Ð äî ïîÿâëåíèÿ ôèîëåòîâî-ðîçîâîé îêðàñêè ðàñòâîðà. Òèòðóþò 0,1 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ ýäåòàòà äî ïåðåõîäà ôèîëåòîâî-ðîçîâîé îêðàñêè ðàñòâîðà â æåëòóþ. 1 ìë 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ýäåòàòà ñîîò- âåòñòâóåò 20,72 ìã Pb. ÖÈÍÊ Ðàñòâîð, óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåé- íîé ñòàòüå, ïîìåùàþò â êîíè÷åñêóþ êîëáó âìå- ñòèìîñòüþ 500 ìë. Îáúåì ðàñòâîðà äîâîäÿò âî- äîé Ð äî 200 ìë, ïðèáàâëÿþò îêîëî 50 ìã èíäè- êàòîðíîé ñìåñè êñèëåíîëîâîãî îðàíæåâîãî Ð, çàòåì ãåêñàìåòèëåíòåòðàìèí Ð äî ïîÿâëåíèÿ ôèîëåòîâî-ðîçîâîé îêðàñêè ðàñòâîðà. Ïðèáàâ- ëÿþò 2 ã ãåêñàìåòèëåíòåòðàìèíàÐ â èçáûòêå è òèòðóþò 0,1 Ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ ýäåòàòà äî ïåðåõîäà ôèîëåòîâî-ðîçîâîé îêðàñêè ðàñòâîðà â æåëòóþ. 1 ìë 0,1 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ýäåòàòà ñîîò- âåòñòâóåò 6,54 ìã Zn. 201050012-2019 2.1.5.12. Âîäà: îïðåäåëåíèå ïîëóìèêðîìåòîäîì Îïðåäåëåíèå âîäû ïîëóìèêðîìåòîäîì (ìå- òîä Ê. Ôèøåðà) îñíîâàíî íà êîëè÷åñòâåííîé ðå- àêöèè âîäû ñ ñåðû äèîêñèäîì è éîäîì â ïîäõî- äÿùåé áåçâîäíîé ñðåäå â ïðèñóòñòâèè îñíîâà- íèÿ ñ äîñòàòî÷íîé áóôåðíîé åìêîñòüþ. Ðåàêöèÿ ïðîòåêàåò â äâå ñòàäèè ñòåõèîìåò- ðè÷åñêè ïî óðàâíåíèÿì: R1OH + SO2 + R2N = [R2NH]SO3R1, I2 + H2O + [R2NH]SO3R1 + 2R2N = = [R2NH]SO4R1 + 2[R2NH]I, ãäå: R1OH — àëèôàòè÷åñêèé ñïèðò; R2N — îñíîâàíèå (ïèðèäèí èëè èìèäà- çîë). Ðåàêòèâ Ê. Ôèøåðà. Ðàñòâîð ñåðû äèîêñèäà, éîäà è ïèðèäèíà (èëè èìèäàçîëà) â ìåòàíîëå. Ïðè îïðåäåëåíèè âîäû â òâåðäûõ ñóáñòàí- öèÿõ, íåðàñòâîðèìûõ â ìåòàíîëå, òîíêîèçìåëü- ÷åííóþ íàâåñêó âñòðÿõèâàþò ñ ìåòàíîëîì Ð, à çàòåì òèòðóåò ðåàêòèâîì Ê. Ôèøåðà.
Íåêîòî- ðûå ñóáñòàíöèè èëè ñìåñè ñóáñòàíöèé ìîæíî ðàñòâîðÿòü â óêñóñíîé êèñëîòå áåçâîäíîé Ð, õëî- ðîôîðìå Ð, ïèðèäèíå Ð èëè äðóãèõ ðàñòâîðèòå- ëÿõ â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè â ÷àñòíûõ ôàð- ìàêîïåéíûõ ñòàòüÿõ. Ñ ïîìîùüþ ðåàêòèâà Ê. Ôèøåðà ìîæåò áûòü îïðåäåëåíà ãèãðîñêîïè÷å- ñêàÿ è êðèñòàëëèçàöèîííàÿ âîäà. Ðåàêòèâ Ê. Ôèøåðà íå ïðèìåíèì äëÿ àíàëè- çà ñóáñòàíöèé, ðåàãèðóþùèõ ñ îäíèì èëè íå- ñêîëüêèìè êîìïîíåíòàìè ðåàêòèâà. ÏÐÈÁÎÐ Ïðèáîð ñîñòîèò èç ñîñóäà äëÿ òèòðîâàíèÿ, ñíàáæåííûé: – äâóìÿ îäèíàêîâûìè ïëàòèíîâûìè ýëåê- òðîäàìè; – íåïðîíèöàåìûìè âõîäíûìè îòâåðñòèÿìè äëÿ ïîäâîäà ðàñòâîðèòåëÿ è òèòðàíòà; – âõîäíûì îòâåðñòèåì äëÿ ïîäà÷è âîçäóõà ÷åðåç îñóøèòåëü; – âõîäíûì îòâåðñòèåì äëÿ îáðàçöà ñ ïðîá- êîé èëè ïðîêëàäêîé äëÿ æèäêîñòåé. Ñèñòåìû âõîäíûõ îòâåðñòèé ïîäõîäÿò òàêæå äëÿ ïîäâîäà ñóõîãî àçîòà èëè äëÿ ðàñïûëåíèÿ ðàñòâîðèòåëåé. Òèòðîâàíèå âûïîëíÿþò â ñîîòâåòñòâèè ñ èí- ñòðóêöèÿìè, ïðèëàãàåìûìè ê ïðèáîðó.  ïðî- öåññå èñïûòàíèÿ ñëåäóåò îáåñïå÷èòü çàùèòó ðå- àêòèâîâ è ðàñòâîðèòåëåé îò àòìîñôåðíîé âëàãè. Êîíå÷íóþ òî÷êó òèòðîâàíèÿ îïðåäåëÿþò, èñ- ïîëüçóÿ äâà îäèíàêîâûõ èíäèêàòîðíûõ ýëåêòðî- äà, ïîäêëþ÷åííûõ ê èñòî÷íèêó ýëåêòðè÷åñêîãî òîêà òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû ìåæäó ýëåêòðîäàìè ïðîõîäèë ëèáî ïîñòîÿííûé òîê (Âîëüòàìïåðî- ìåòðè÷åñêîå òèòðîâàíèå), ëèáî ïîääåðæèâà- ëîñü ïîñòîÿííîå íàïðÿæåíèå (2.1.2.18. Àìïåðî- ìåòðè÷åñêîå òèòðîâàíèå). Ïðè ïðÿìîì òèòðî- âàíèè (ìåòîä À) äîáàâëåíèå òèòðàíòà âûçûâàåò ëèáî óìåíüøåíèå íàïðÿæåíèÿ ïðè ïîñòîÿííîì òîêå, ëèáî óâåëè÷åíèå ñèëû òîêà ïðè ïîñòîÿí- íîì íàïðÿæåíèè äî òåõ ïîð, ïîêà íå íàñòóïèò êîíå÷íàÿ òî÷êà òèòðîâàíèÿ. Îáû÷íî èñïîëüçó- þò ïðèáîð ñ àâòîìàòè÷åñêèì îïðåäåëåíèåì êî- íå÷íîé òî÷êè òèòðîâàíèÿ. Êâàëèôèêàöèÿ ïðè- áîðà ïðîâîäèòñÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ ïðîöåäóðàìè, óñòàíîâëåííûìè â ðàìêàõ ñèñòåìû êà÷åñòâà, 199 íàïðèìåð, ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîäõîäÿùåãî ñåð- òèôèöèðîâàííîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. Óñòàíîâêà òèòðà.  ñîñóä äëÿ òèòðîâàíèÿ ïðèáàâëÿþò ìåòàíîë Ð, ïðè íåîáõîäèìîñòè âû- ñóøåííûé, èëè ðàñòâîðèòåëü, ðåêîìåíäîâàííûé ïðîèçâîäèòåëåì òèòðàíòà.  ñëó÷àå ïðèìåíè- ìîñòè äëÿ ïðèáîðà èñïîëüçóþò ïðèñïîñîáëå- íèå, ïðåäíàçíà÷åííîå äëÿ óäàëåíèÿ îñòàòî÷íîé âîäû èç èçìåðèòåëüíîé ÿ÷åéêè, èëè âûïîëíÿþò ïðåäâàðèòåëüíîå òèòðîâàíèå. Ïîìåùàþò ñîîò- âåòñòâóþùåå êîëè÷åñòâî âîäû (âîäà Ð èëè ñåð- òèôèöèðîâàííûé ñòàíäàðò âîäû) è òèòðóþò, ïå- ðåìåøèâàÿ â òå÷åíèå íåîáõîäèìîãî âðåìåíè. Òèòð èñïîëüçóåìîãî òèòðàíòà äîëæåí áûòü íå ìåíåå 80 % îò óêàçàííîãî ïðîèçâîäèòåëåì. Òèòð óñòàíàâëèâàþò ïåðåä ïåðâûì èñïîëüçîâàíèåì è çàòåì ÷åðåç ñîîòâåòñòâóþùèå èíòåðâàëû âðå- ìåíè. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé èñïîëüçó- þò ìåòîä À. Ìåòîä À.  ñîñóä äëÿ òèòðîâàíèÿ ïîìåùàþò ìåòàíîë Ð èëè ðàñòâîðèòåëü, óêàçàííûé â ÷àñò- íîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, èëè ðåêîìåíäîâàí- íûé ïðîèçâîäèòåëåì òèòðàíòà.  ñëó÷àå ïðèìå- íèìîñòè äëÿ ïðèáîðà èñïîëüçóþò ïðèñïîñîáëå- íèå, ïðåäíàçíà÷åííîå äëÿ óäàëåíèÿ îñòàòî÷íîé âîäû èç èçìåðèòåëüíîé ÿ÷åéêè, èëè âûïîëíÿþò ïðåäâàðèòåëüíîå òèòðîâàíèå. Áûñòðî ïîìåùà- þò èñïûòóåìûé îáðàçåö è òèòðóþò, ïåðåìåøè- âàÿ â òå÷åíèå âðåìåíè, íåîáõîäèìîãî äëÿ ýêñ- òðàêöèè. Ìåòîä Á.  ñîñóä äëÿ òèòðîâàíèÿ ïîìåùàþò ìåòàíîë Ð èëè ðàñòâîðèòåëü, óêàçàííûé â ÷àñò- íîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, èëè ðåêîìåíäîâàí- íûé ïðîèçâîäèòåëåì òèòðàíòà.  ñëó÷àå ïðèìå- íèìîñòè äëÿ ïðèáîðà èñïîëüçóþò ïðèñïîñîáëå- íèå, ïðåäíàçíà÷åííîå äëÿ óäàëåíèÿ îñòàòî÷íîé âîäû èç èçìåðèòåëüíîé ÿ÷åéêè, èëè âûïîëíÿþò ïðåäâàðèòåëüíîå òèòðîâàíèå. Èñïûòóåìûé îá- ðàçåö, èçìåëü÷åííûé äî íåîáõîäèìîé ñòåïåíè, áûñòðî ïîìåùàþò â ñîñóä äëÿ òèòðîâàíèÿ. Ïðè- áàâëÿþò òî÷íî èçìåðåííûé îáúåì òèòðàíòà, âçÿòûé â èçáûòêå ïðèáëèçèòåëüíî íà 1 ìë èëè îáúåì, óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå.
Âûäåðæèâàþò â çàùèùåííîì îò ñâåòà ìåñòå â òå÷åíèå 1 ìèí èëè â òå÷åíèå âðåìåíè, óêàçàííîãî â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ïðè ïåðåìåøèâàíèè ñîäåðæèìîãî ñîñóäà. Èç- áûòîê ðåàêòèâà òèòðóþò, èñïîëüçóÿ ìåòàíîë Ð èëè óêàçàííûé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ðàñòâîðèòåëü, ñîäåðæàùèé òî÷íî èçâåñòíîå êî- ëè÷åñòâî âîäû. Ïðèãîäíîñòü ñèñòåìû. Ïðèãîäíîñòü îïðå- äåëåíèÿ ñ âûáðàííûì òèòðàíòîì äîëæíà áûòü ïîäòâåðæäåíà äëÿ êàæäîé êîìáèíàöèè ñóáñòàí- öèè, òèòðàíòà è ðàñòâîðèòåëÿ. Ìåòîäèêà, ïðèâå- äåííàÿ íèæå â êà÷åñòâå ïðèìåðà, ïðèãîäíà äëÿ îáðàçöîâ, ñîäåðæàùèõ îò 2,5 ìã äî 25 ìã âîäû. Ñîäåðæàíèå âîäû â ñóáñòàíöèè îïðåäåëÿþò, èñïîëüçóÿ âûáðàííóþ ñèñòåìó «ðåàêòèâ/ðàñòâî- ðèòåëü». Ïîñëå ýòîãî â òîò æå ñîñóä äëÿ òèòðî- âàíèÿ ïîñëåäîâàòåëüíî ïðèáàâëÿþò â ïîäõîäÿ- ùåé ôîðìå èçâåñòíûå êîëè÷åñòâà âîäû Ð, ñîîò- âåòñòâóþùèå ïðèìåðíî 50 – 100 % îò íàéäåí- íîãî êîëè÷åñòâà â ñóáñòàíöèè (ïî êðàéíåé ìåðå, 5 äîáàâëåíèé), è îïðåäåëÿþò ñîäåðæàíèå âîäû ïîñëå êàæäîãî äîáàâëåíèÿ. Ðàññ÷èòûâàþò âåëè- ÷èíó îòêðûâàåìîñòè (r) â ïðîöåíòàõ ïîñëå êàæ- äîãî äîáàâëåíèÿ âîäû ïî ôîðìóëå: r W W = ×100 2 1 , ãäå: W1 — äîáàâëåííîå êîëè÷åñòâî âîäû â ìèë- ëèãðàììàõ; W2 — íàéäåííîå êîëè÷åñòâî âîäû â ìèë- ëèãðàììàõ. Ðàññ÷èòûâàþò ñðåäíåå çíà÷åíèå îòêðûâàå- ìîñòè (r) â ïðîöåíòàõ. Ñèñòåìà «ðåàêòèâ/ðàñ- òâîðèòåëü» ñ÷èòàåòñÿ ïðèãîäíîé, åñëè r ñîñòàâ- ëÿåò îò 97,5 % äî 102,5 %. Ðàññ÷èòûâàþò óðàâíåíèå ëèíåéíîé çàâèñè- ìîñòè. Ïî îñè x îòêëàäûâàþò îáùåå êîëè÷åñòâî äîáàâëåííîé âîäû, à ïî îñè y — ñóììó ïåðâîíà- ÷àëüíîãî ñîäåðæàíèÿ âîäû, îïðåäåëåííîãî äëÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà (M), è îáùåãî êîëè÷åñòâà âîäû, îïðåäåëåííîãî ïîñëå êàæäîãî äîáàâëåíèÿ âîäû. Ðàññ÷èòûâàþò òàíãåíñ óãëà íàêëîíà (b), îòðåçêà, îòñåêàåìîãî íà îñè y(a), è îòðåçêà, îò- ñåêàåìîãî íà îñè x (d) ïðè ýêñòðàïîëÿöèè êàëèá- ðîâî÷íîé êðèâîé. Ðàññ÷èòûâàþò ïîãðåøíîñòü â ïðîöåíòàõ (e1 è e2) ïî ôîðìóëàì: e a M M 1 = - 100 , | |e d M M 2 = - 100 , ãäå: a — âåëè÷èíà îòðåçêà, îòñåêàåìîãî íà îñè ó, ðàâíîãî ñîäåðæàíèþ âîäû â ìèëëè- ãðàììàõ; d — âåëè÷èíà îòðåçêà, îòñåêàåìîãî íà îñè õ, ðàâíîãî ñîäåðæàíèþ âîäû â ìèëëè- ãðàììàõ; 200 M — ñîäåðæàíèå âîäû â èñïûòóåìîì îáðàç- öå â ìèëëèãðàììàõ. Ñèñòåìà «ðåàêòèâ/ðàñòâîðèòåëü» ñ÷èòàåòñÿ ïðèãîäíîé, åñëè: – çíà÷åíèÿ | |e1 è | |e2 ñîñòàâëÿþò íå áîëåå 2,5 %; – çíà÷åíèå b íàõîäèòñÿ â èíòåðâàëå îò 0,975 äî 1,025. 201050013-2019 2.1.5.13. Âîäà: ìèêðîîïðåäåëåíèå ÏÐÈÍÖÈÏ Êóëîíîìåòðè÷åñêîå òèòðîâàíèå âîäû îñíî- âàíî íà êîëè÷åñòâåííîé ðåàêöèè âîäû ñ ñåðû äèîêñèäîì è éîäîì â áåçâîäíîé ñðåäå â ïðèñóò- ñòâèè îñíîâàíèÿ ñ äîñòàòî÷íîé áóôåðíîé åìêî- ñòüþ.  îòëè÷èå îò îáúåìíîãî ìåòîäà, îïèñàí- íîãî â îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå 2.1.5.12. Âîäà: îïðåäåëåíèå ïîëóìèêðîìåòîäîì, éîä ïî- ëó÷àåòñÿ ýëåêòðîõèìè÷åñêèì ïóòåì â ðåàêöèîí- íîé ÿ÷åéêå ïðè îêèñëåíèè éîäèäà. Éîä, ïîëó- ÷àåìûé íà àíîäå, ñðàçó âçàèìîäåéñòâóåò ñ âîäîé è ñåðû äèîêñèäîì, ñîäåðæàùèìèñÿ â ðåàêöèîí- íîé ÿ÷åéêå. Êîëè÷åñòâî âîäû â èñïûòóåìîì îá- ðàçöå ïðÿìî ïðîïîðöèîíàëüíî êîëè÷åñòâó ýëåê- òðè÷åñòâà (â êóëîíàõ), âûðàæåííîìó êàê ñèëà- ýëåêòðè÷åñêîãî òîêà (â àìïåðàõ), óìíîæåííàÿ íà âðåìÿ (â ñåêóíäàõ) è èñïîëüçóåìîìó äëÿ ïî- ëó÷åíèÿ éîäà äîíàñòóïëåíèÿ êîíå÷íîé òî÷êè òèòðîâàíèÿ. Êîãäà âñÿ âîäà â ðåàêöèîííîé ÿ÷åé- êå ïðîðåàãèðóåò, äîñòèãàåòñÿ êîíå÷íàÿ òî÷êà òèòðîâàíèÿ, îïðåäåëÿåìàÿ ïî ïîÿâëåíèþ èçáûò- êà éîäà. Îäèí ìîëü éîäà ñîîòâåòñòâóåò îäíîìó ìîëü âîäû, à êîëè÷åñòâî ýëåêòðè÷åñòâà 10,71 Êë ñîîòâåòñòâóåò 1 ìã âîäû. Âëàãó èç ðåàêöèîííîé ÿ÷åéêè óäàëÿþò ïðåä- âàðèòåëüíûì òèòðîâàíèåì, ò.å. ýëåêòðîëèòè÷å- ñêèé ðåàêòèâ òèòðóþò äîñóõà ïåðåä àíàëèçîì èñïûòóåìîãî îáðàçöà.
Èíäèâèäóàëüíûå îïðåäåëåíèÿ ìîãóò áûòü âûïîëíåíû ïîñëåäîâàòåëüíî â òîì æå ðàñòâîðå ðåàêòèâà ïðè ñëåäóþùèõ óñëîâèÿõ: – êàæäûé êîìïîíåíò èñïûòóåìîé ñìåñè ñî- âìåñòèì ñ äðóãèìè êîìïîíåíòàìè; – äðóãèõ ðåàêöèé íå ïðîèñõîäèò; – îáúåì è åìêîñòü âîäû ýëåêòðîëèòè÷åñêî- ãî ðåàêòèâà äîñòàòî÷íû. Êóëîíîìåòðè÷åñêîå òèòðîâàíèå ïðåäíàçíà- ÷åíî äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ìàëûõ- êîëè÷åñòâ âîäû (îò 10 ìêã), îäíàêî ðåêîìåíäóå- ìûé èíòåðâàë, ñ ó÷åòîì âîñïðîèçâîäèìîñòè, îò 100 ìêã äî 10 ìã âîäû. Ïðàâèëüíîñòü è ïðåöèçèîííîñòü ìåòîäà îáóñëîâëåíû â îñíîâíîì ñïîñîáîì ïðèãîòîâëå- íèÿ èñïûòóåìîãî îáðàçöà è ñòåïåíüþ âëèÿíèÿ àòìîñôåðíîé âëàãè íà ñèñòåìó. Êîíòðîëü çà ñèñòåìîé îñóùåñòâëÿþò ïóòåì èçìåðåíèÿ äðåé- ôà áàçîâîé ëèíèè. ÏÐÈÁÎÐ Ïðèáîð ñîñòîèò èç ðåàêöèîííîé ÿ÷åéêè, ýëåêòðîäîâ è ìàãíèòíîé ìåøàëêè. Ðåàêöèîííàÿ ÿ÷åéêà ñîñòîèò èç áîëüøîãî àíîäíîãî îòäåëà è ìåíüøåãî êàòîäíîãî îòäåëà.  çàâèñèìîñòè îò êîíñòðóêöèè ýëåêòðîäà îáà îòäåëåíèÿ ìîãóò áûòü ðàçäåëåíû äèàôðàãìîé. Êàæäîå îòäåëåíèå ñîäåðæèò ïëàòèíîâûé ýëåêòðîä. Æèäêîñòü èëè ðàñòâîðåííûå îáðàçöû ââîäÿòñÿ ÷åðåç ïåðåãî- ðîäêó ñ ïîìîùüþ øïðèöà.  êà÷åñòâå àëüòåðíà- òèâû ìîæåò èñïîëüçîâàòüñÿ òåõíèêà âûïàðèâà- íèÿ, ïðè êîòîðîé èñïûòóåìûé îáðàçåö íàãðåâà- þò â ïå÷è, âîäà èñïàðÿåòñÿ è ïåðåíîñèòñÿ â ÿ÷åéêó ïîòîêîì ñóõîãî èíåðòíîãî ãàçà. Ñëåäó- åò èçáåãàòü ïîïàäàíèÿ â ÿ÷åéêó òâåðäûõ îáðàç- öîâ. Îäíàêî åñëè íåîáõîäèìî ïðîâåñòè èñïûòà- íèå íà òâåðäûõ îáðàçöàõ, èñïîëüçóþò ãåðìåòè÷- íî çàêðûâàåìûé ââîä; ïðè ýòîì äîëæíû áûòü ïðåäïðèíÿòû ìåðû äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ ïîïà- äàíèÿ àòìîñôåðíîé âëàãè â ïðèáîð, íàïðèìåð, ðàáîòà â ïåð÷àòî÷íîì áîêñå â àòìîñôåðå ñóõîãî èíåðòíîãî ãàçà. Ìåòîäèêè àíàëèçà äîëæíû êîí- òðîëèðîâàòüñÿ ñ ïîìîùüþ ñîîòâåòñòâóþùåãî ýëåêòðîííîãî óñòðîéñòâà, ñíàáæåííîãî äèñ- ïëååì. Êâàëèôèêàöèÿ ïðèáîðà ïðîâîäèòñÿ â ñîîò- âåòñòâèè ñ óñòàíîâëåííûìè ïðîöåäóðàìè ñèñ- òåìû êà÷åñòâà, íàïðèìåð, ñ èñïîëüçîâàíèåì ïîäõîäÿùèõ ñåðòèôèöèðîâàííûõ ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ. Äëÿ ïðèáîðà ñ ïå÷üþ ìîæåò áûòü ïðè- ìåíåí Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö àìîêñèöèëëèíà òðèãèäðàòà äëÿ ïðîâåðêè ýêñïëóàòàöèîííûõ õàðàêòåðèñòèê ïðèáîðà. ÌÅÒÎÄÈÊÀ Îòäåëåíèÿ ðåàêöèîííîé ÿ÷åéêè çàïîëíÿþò ýëåêòðîëèòè÷åñêèì ðåàêòèâîì äëÿ îïðåäåëå- íèÿ âîäû ìèêðîìåòîäîì Ð â ñîîòâåòñòâèè ñ èí- ñòðóêöèÿìè ïðîèçâîäèòåëÿ è âûïîëíÿþò êóëî- íîìåòðè÷åñêîå ïðåäâàðèòåëüíîå òèòðîâàíèå äî ñòàáèëüíîé êîíå÷íîé òî÷êè òèòðîâàíèÿ. Çàòåì 201 óêàçàííîå êîëè÷åñòâî èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïî- ìåùàþò â ðåàêöèîííóþ ÿ÷åéêó, ïåðåìåøèâàþò â òå÷åíèå 30 ñ, ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, è ñíîâà òèòðó- þò äî ñòàáèëüíîé êîíå÷íîé òî÷êè òèòðîâàíèÿ.  ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ ïå÷è óêàçàííîå êîëè÷å- ñòâî èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïîìåùàþò â ïå÷ü è íàãðåâàþò. Ïîñëå âûïàðèâàíèÿ âîäû èç îáðàç- öà â ðåàêöèîííîé ÿ÷åéêå ïðîâîäÿò òèòðîâàíèå. Àëüòåðíàòèâíî, äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ ïîòåðü âîäû, óæå ñîáðàííîé â ðåàêöèîííîì ðàñòâîðå â ïðîöåññå äëèòåëüíîãî íàãðåâàíèÿ, âûïàðåí- íóþ âîäó òèòðóþò íåìåäëåííî, îäíîâðåìåííî ñ íàãðåâàíèåì èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ïå÷è. Çà- ïèñûâàþò ïîêàçàíèÿ ïðèáîðà è, ïðè íåîáõîäè- ìîñòè, ðàññ÷èòûâàþò ïðîöåíò èëè êîëè÷åñòâî âîäû, ïðèñóòñòâóþùåå â îáðàçöå. Ïðè íåîáõî- äèìîñòè, êîãäà ýòîãî òðåáóåò òèï îáðàçöà èëè åãî ïðîáîïîäãîòîâêà, âûïîëíÿþò êîíòðîëüíûé îïûò. ÏÎÄÒÂÅÐÆÄÅÍÈÅ ÏÐÀÂÈËÜÍÎÑÒÈ ×åðåç îïðåäåëåííûå ïðîìåæóòêè âðåìåíè, êàê ìèíèìóì, â íà÷àëå è êîíöå òèòðîâàíèÿ ñå- ðèè îáðàçöîâ, ïîìåùàþò òî÷íóþ íàâåñêó âîäû òàêîãî æå ïîðÿäêà, ÷òî è êîëè÷åñòâî âîäû â îá- ðàçöå, èñïîëüçóÿ ïîäõîäÿùèé ñòàíäàðòíûé îá- ðàçåö, è âûïîëíÿþò êóëîíîìåòðè÷åñêîå òèòðî- âàíèå. Îòêðûâàåìîñòü äîëæíà áûòü â äèàïàçîíå îò 97,5% äî 102,5% äëÿ íàâåñêè 1000 ìêã H2O è â äèàïàçîíå îò 90,0 % äî 110,0 % äëÿ íàâåñêè 100 ìêã H2O.
201050014-2019 2.1.5.14. Îáùèé áåëîê Ìíîãèå èç ìåòîäîâ êîëè÷åñòâåííîãî îïðå- äåëåíèÿ, îïèñàííûå â äàííîì ðàçäåëå, ìîãóò áûòü âûïîëíåíû ñ èñïîëüçîâàíèåì èìåþùèõñÿ â ïðîäàæå íàáîðîâ. ÌÅÒÎÄ 1 Áåëîê â ðàñòâîðå ïîãëîùàåò óëüòðàôèîëåòî- âûé ñâåò ïðè äëèíå âîëíû 280 íì áëàãîäàðÿ ïðèñóòñòâèþ â åãî ñòðóêòóðå àðîìàòè÷åñêèõ àìèíîêèñëîò, ãëàâíûì îáðàçîì, òèðîçèíà è òðèïòîôàíà. Ýòî ñâîéñòâî áåëêîâ ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàíî äëÿ èõ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäå- ëåíèÿ. Åñëè áóôåðíûé ðàñòâîð, èñïîëüçóåìûé äëÿ ðàñòâîðåíèÿ áåëêà, èìååò áîëüøåå çíà÷åíèå îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ïî îòíîøåíèþ ê âîäå, â íåì ïðèñóòñòâóþò ìåøàþùèå âåùåñòâà. Âëèÿíèå ìåøàþùèõ âåùåñòâ ìîæåò áûòü óñòðà- íåíî èñïîëüçîâàíèåì áóôåðíîãî ðàñòâîðà â êà- ÷åñòâå êîìïåíñàöèîííîãî ðàñòâîðà. Íî, åñëè ìåøàþùèå âåùåñòâà èìåþò âûñîêóþ îïòè÷å- ñêóþ ïëîòíîñòü, ðåçóëüòàòû ìîãóò áûòü ïîä- âåðãíóòû ñîìíåíèþ. Ïðè íèçêèõ êîíöåíòðàöè- ÿõ áåëîê ìîæåò àäñîðáèðîâàòüñÿ íà ñòåíêàõ êþâåòû, ÷òî ïðèâîäèò ê ñóùåñòâåííîìó çàíè- æåííîìó ðåçóëüòàòó åãî ñîäåðæàíèÿ â ðàñòâîðå. Âî èçáåæàíèå ýòîãî ãîòîâÿò îáðàçöû ñ âûñîêîé êîíöåíòðàöèåé áåëêà èëè èñïîëüçóþò ïðè ïðè- ãîòîâëåíèè íåèîííûå äåòåðãåíòû. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ãîòîâÿò ðàñòâîð èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà â áóôåðíîì ðàñòâîðå, óêà- çàííîì â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ñ êîí- öåíòðàöèåé áåëêà îò 0,2 ìã/ìë äî 2 ìã/ìë. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ñîîò- âåòñòâóþùåãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà äëÿ îïðå- äåëÿåìîãî áåëêà â òîì æå áóôåðíîì ðàñòâîðå è ñ òàêîé æå êîíöåíòðàöèåé áåëêà, ÷òî è â èñïû- òóåìîì ðàñòâîðå. Ìåòîäèêà. Ïðè ïðîâåäåíèè èñïûòàíèÿ èñ- ïûòóåìûé ðàñòâîð, ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ è êîì- ïåíñàöèîííûé ðàñòâîð âûäåðæèâàþò ïðè îäè- íàêîâîé òåìïåðàòóðå. Îïðåäåëÿþò îïòè÷åñêèå ïëîòíîñòè (2.1.2.24) èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ â êâàðöåâûõ êþâåòàõ ïðè äëèíå âîëíû 280 íì, èñïîëüçóÿ óêàçàííûé áó- ôåðíûé ðàñòâîð â êà÷åñòâå êîìïåíñàöèîííîãî ðàñòâîðà. Äëÿ ïîëó÷åíèÿ òî÷íûõ ðåçóëüòàòîâ çíà÷åíèÿ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè äîëæíû ñîîò- âåòñòâîâàòü òðåáîâàíèÿì ëèíåéíîñòè â èíòåð- âàëå îïðåäåëÿåìûõ êîíöåíòðàöèé áåëêà. Ñâåòîðàññåÿíèå. Òî÷íîñòü îïðåäåëåíèÿ áåëêà ìîæåò áûòü ñíèæåíà çà ñ÷åò ñâåòîðàññåÿ- íèÿ ðàñòâîðîì èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Åñëè áå- ëîê â ðàñòâîðå ïðèñóòñòâóåò â âèäå ÷àñòèö, ñî- ïîñòàâèìûõ ïî ðàçìåðàì ñ äëèíîé âîëíû èçìå- ðÿåìîãî ñâåòà (îò 250 íì äî 300 íì), ðàññåÿíèå ñâåòîâîãî ïîòîêà ïðèâîäèò ê çíà÷èòåëüíîìó óâåëè÷åíèþ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èñïûòóåìî- ãî îáðàçöà. ×òîáû ðàññ÷èòàòü îïòè÷åñêóþ ïëîò- íîñòü ïðè äëèíå âîëíû 280 íì ñ ó÷åòîì ñâåòî- ðàññåÿíèÿ, îïðåäåëÿþò îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà ïðè äëèíàõ âîëí 320 íì, 325 íì, 330 íì, 335 íì, 340 íì, 345 íì è 350 íì. Ñòðîÿò ãðàôèê çàâèñèìîñòè ëîãàðèôìà ïîëó- ÷åííîé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè îò ëîãàðèôìà äëèíû âîëíû è, èñïîëüçóÿ ëèíåéíóþ ðåãðåñ- 202 ñèþ, ïðîâîäÿò êàëèáðîâî÷íóþ êðèâóþ, íàèëó÷- øèì îáðàçîì ñîâïàäàþùóþ ñ íàíåñåííûìè òî÷êàìè. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ëîãàðèôìà îïòè÷å- ñêîé ïëîòíîñòè ïðè äëèíå âîëíû 280 íì ýêñòðà- ïîëèðóþò ïîëó÷åííóþ êðèâóþ. Àíòèëîãàðèôì äàííîãî çíà÷åíèÿ ÿâëÿåòñÿ îïòè÷åñêîé ïëîòíî- ñòüþ, îòíîñÿùåéñÿ ê ñâåòîðàññåÿíèþ. Äëÿ îïðå- äåëåíèÿ çíà÷åíèÿ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè áåëêà â ðàñòâîðå êîððåêòèðóþò ïîëó÷åííûå çíà÷åíèÿ, âû÷èòàÿ îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü, îòíîñÿùóþñÿ ê ñâåòîðàññåÿíèþ, èç îáùåé îïòè÷åñêîé ïëîò- íîñòè, èçìåðåííîé ïðè äëèíå âîëíû 280 íì. Äëÿ óìåíüøåíèÿ âëèÿíèÿ ñâåòîðàññåÿíèÿ, îñî- áåííî ïðè çàìåòíîé ìóòíîñòè ðàñòâîðà, åãî ìîæíî ïðîôèëüòðîâàòü ÷åðåç ôèëüòð, íå àäñîð- áèðóþùèé áåëîê, ñ ðàçìåðîì ïîð 0,2 ìêì èëè îñâåòëèòü ïóòåì öåíòðèôóãèðîâàíèÿ. Ðàñ÷åòû. Äëÿ ðàñ÷åòîâ èñïîëüçóþò îòêîð- ðåêòèðîâàííûå çíà÷åíèÿ îïòè÷åñêîé ïëîòíî- ñòè.
Ðàññ÷èòûâàþò êîíöåíòðàöèþ áåëêà â èñïû- òóåìîì ðàñòâîðå (CU) ïî óðàâíåíèþ: C C A AU S U S= ( / ), ãäå: ÑS — êîíöåíòðàöèÿ áåëêà â ðàñòâîðå ñðàâ- íåíèÿ â ìèëëèãðàììàõ íà ìèëëèëèòð; AU — îòêîððåêòèðîâàííîå çíà÷åíèå îïòè- ÷åñêîé ïëîòíîñòè èñïûòóåìîãî ðàñ- òâîðà; AS — îòêîððåêòèðîâàííîå çíà÷åíèå îïòè- ÷åñêîé ïëîòíîñòè ðàñòâîðà ñðàâíå- íèÿ. ÌÅÒÎÄ 2 Äàííûé ìåòîä (îáû÷íî íàçûâàåìûé ìåòî- äîì êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ áåëêà Ëîóðè) îñíîâàí íà âîññòàíîâëåíèè áåëêîì ôîñôîðíî- ìîëèáäåíîâî-âîëüôðàìîâîãî ñìåøàííîãî êè- ñëîãî õðîìîãåíà â ôîñôîðíîìîëèáäåíîâî- âîëüôðàìîâîì ðåàêòèâå, ÷òî ïðèâîäèò ê ïîÿâëå- íèþ ìàêñèìóìà ïîãëîùåíèÿ ïðè äëèíå âîëíû 750 íì. Ôîñôîðíîìîëèáäåíîâî-âîëüôðàìîâûé ðåàêòèâ âçàèìîäåéñòâóåò ïðåèìóùåñòâåííî ñ îñòàòêàìè òèðîçèíà. Îêðàøèâàíèå äîñòèãàåò ìàêñèìóìà ÷åðåç 20 – 30 ìèí ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå, ïîñëå ÷åãî ïðîèñõîäèò ïîñòåïåí- íîå îáåñöâå÷èâàíèå. Ïîñêîëüêó äàííûé ìåòîä ÿâëÿåòñÿ ÷óâñòâèòåëüíûì ê ìåøàþùèì âåùåñò- âàì, ìîæíî èñïîëüçîâàòü ìåòîäèêó îñàæäåíèÿ áåëêà èç èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Áîëüøèíñòâî ìåøàþùèõ âåùåñòâ âûçûâàþò îñëàáëåíèå îê- ðàøèâàíèÿ, íî ïðèìåíåíèå íåêîòîðûõ äåòåð- ãåíòîâ ìîæåò âûçûâàòü óñèëåíèå îêðàñêè. Âû- ñîêàÿ êîíöåíòðàöèÿ ñîëè ìîæåò ïðèâåñòè ê îá- ðàçîâàíèþ îñàäêà. Ïîñêîëüêó ðàçíûå âèäû áåë- êîâ ìîãóò äàâàòü ðàçëè÷íûå ïî èíòåíñèâíîñòè îêðàñêè, ñòàíäàðòíûé îáðàçåö è èñïûòóåìûé áåëîê äîëæíû áûòü îäèíàêîâûìè. Ïåðåä ïðèãî- òîâëåíèåì èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà, ïðè íåîáõî- äèìîñòè, îòäåëÿþò ìåøàþùèå âåùåñòâà îò áåë- êà â èñïûòóåìîì îáðàçöå ïî îïèñàííîé íèæå ìåòîäèêå. Âëèÿíèå ìåøàþùèõ âåùåñòâ ìîæåò áûòü ìèíèìèçèðîâàíî ïóòåì ðàçâåäåíèÿ, îáåñ- ïå÷èâàþùåãî êîíöåíòðàöèþ èñïûòóåìîãî áåë- êà íà óðîâíå, äîñòàòî÷íîì äëÿ ïðîâåäåíèÿ òî÷- íûõ èçìåðåíèé. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ âñåõ áóôåðíûõ ðàñòâî- ðîâ è ðåàêòèâîâ, ïðèìåíÿåìûõ â äàííîì ìåòîäå, èñïîëüçóþò âîäó äèñòèëëèðîâàííóþ Ð. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ãîòîâÿò ðàñòâîð èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà â áóôåðíîì ðàñòâîðå, óêà- çàííîì â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ñ êîí- öåíòðàöèåé áåëêîâ â ïðåäåëàõ èíòåðâàëà êîí- öåíòðàöèé êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé. Ñîîòâåòñò- âóþùèé áóôåðíûé ðàñòâîð îáåñïå÷èâàåò çíà÷å- íèå ðÍ èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà îò 10,0 äî 10,5. Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ñîîò- âåòñòâóþùåãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà áåëêà â áó- ôåðíîì ðàñòâîðå, óêàçàííîì â ÷àñòíîé ôàðìà- êîïåéíîé ñòàòüå. Ïîðöèè ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà ðàçâîäÿò òåì æå áóôåðíûì ðàñòâîðîì äëÿ ïîëó- ÷åíèÿ íå ìåíåå ïÿòè ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ ñ êîí- öåíòðàöèÿìè áåëêà, ðàâíîìåðíî ðàñïðåäåëåí- íûìè â èíòåðâàëå îò 5 ìêã/ìë äî 100 ìêã/ìë. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Áóôåðíûé ðàñòâîð, èñïîëüçóåìûé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ. Ìåäè ñóëüôàòà ðåàêòèâ. 100 ìã ìåäè(II) ñóëüôàòà Ð è 0,2 ã íàòðèÿ òàðòðàòà Ð ðàñòâî- ðÿþò â âîäå äèñòèëëèðîâàííîé Ð è äîâîäÿò äî îáúåìà ðàñòâîðà òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî 50 ìë. 10 ã íàòðèÿ êàðáîíàòà áåçâîäíîãî Ð ðàñ- òâîðÿþò â âîäå äèñòèëëèðîâàííîé Ð è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî 50 ìë.  ðàñòâîð ìåäè ñóëüôàòà ìåäëåííî ïðè ïåðåìå- øèâàíèè âëèâàþò ðàñòâîð íàòðèÿ êàðáîíàòà. Ðàñòâîð èñïîëüçóþò â òå÷åíèå 24 ÷. Ìåäè ðåàêòèâ ùåëî÷íîé. Ñìåñü ìåäè ñóëü- ôàòà ðåàêòèâ – ðàñòâîð 50 ã/ë íàòðèÿ äîäåöèë- ñóëüôàòà Ð — ðàñòâîð 32 ã/ë íàòðèÿ ãèäðîêñè- äà Ð (1:2:1 îá/îá). Õðàíÿò ïðè êîìíàòíîé òåìïå- ðàòóðå è èñïîëüçóþò â òå÷åíèå äâóõ íåäåëü. Ôîñôîðíîìîëèáäåíîâî-âîëüôðàìîâûé ðåàê- òèâ ðàçáàâëåííûé. Ñìåøèâàþò 5 ìë ôîñôîðíî- ìîëèáäåíîâî-âîëüôðàìîâîãî ðåàêòèâà Ð è 203 55 ìë âîäû äèñòèëëèðîâàííîé Ð. Õðàíÿò â êîí- òåéíåðå èç òåìíîãî ñòåêëà ïðè êîìíàòíîé òåì- ïåðàòóðå. Ìåòîäèêà.
Ê 1,0 ìë êàæäîãî ðàñòâîðà ñðàâ- íåíèÿ, èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è êîíòðîëüíîãî ðàñòâîðà ïðèáàâëÿþò ïî 1,0 ìë ìåäè ðåàêòèâà ùåëî÷íîãî è ïåðåìåøèâàþò. Âûäåðæèâàþò â òå÷åíèå 10 ìèí. Ïðèáàâëÿþò 0,5 ìë ôîñôîð- íîìîëèáäåíîâî-âîëüôðàìîâîãî ðåàêòèâà ðàç- áàâëåííîãî, ïåðåìåøèâàþò è âûäåðæèâàþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå â òå÷åíèå 30 ìèí. Èçìå- ðÿþò îïòè÷åñêèå ïëîòíîñòè (2.1.2.24) ðàñòâî- ðîâ ïðè äëèíå âîëíû 750 íì, èñïîëüçóÿ êîí- òðîëüíûé ðàñòâîð â êà÷åñòâå êîìïåíñàöèîííîãî ðàñòâîðà. Ðàñ÷åòû. Çàâèñèìîñòü îïòè÷åñêîé ïëîòíî- ñòè îò êîíöåíòðàöèè áåëêà íå ÿâëÿåòñÿ ëèíåé- íîé; îäíàêî, åñëè èíòåðâàë êîíöåíòðàöèé, èñ- ïîëüçóåìûõ äëÿ ïîñòðîåíèÿ êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé, íåáîëüøîé, îíà ïðèáëèæàåòñÿ ê ëèíåé- íîé. Ñòðîÿò ãðàôèê çàâèñèìîñòè îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ îò êîíöåíòðà- öèé áåëêà è, èñïîëüçóÿ ëèíåéíóþ ðåãðåññèþ, ñòðîÿò êàëèáðîâî÷íóþ êðèâóþ. Íà îñíîâàíèè êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé è îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà îïðåäåëÿþò êîíöåíòðà- öèþ áåëêà â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå. Ìåøàþùèå âåùåñòâà.  ïðåäñòàâëåííîé ìåòîäèêå äî ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ ìåøàþùèå âåùåñòâà óäàëÿþò ïóòåì îñàæäåíèÿ áåëêîâ ïðè äîáàâëåíèè ê ðàñòâîðó èñïûòóåìîãî îáðàçöà äå- çîêñèõîëàòòðèõëîðóêñóñíîé êèñëîòû. Äàííàÿ ìåòîäèêà òàêæå ìîæåò áûòü ïðèìåíåíà äëÿ êîí- öåíòðèðîâàíèÿ áåëêîâ èç ðàçáàâëåííîãî ðàñ- òâîðà. 0,1 ìë ðàñòâîðà 1,5 ã/ë íàòðèÿ äåçîêñèõîëà- òà Ð ïðèáàâëÿþò ê 1 ìë ðàñòâîðà èñïûòóåìîãî îáðàçöà, ïåðåìåøèâàþò íà âèõðåâîì âñòðÿõèâà- òåëå è âûäåðæèâàþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòó- ðå â òå÷åíèå 10 ìèí. Ïðèáàâëÿþò 0,1 ìë ðàñòâî- ðà 720 ã/ë òðèõëîðóêñóñíîé êèñëîòû Ð è ïåðå- ìåøèâàþò íà âèõðåâîì âñòðÿõèâàòåëå. Öåíòðè- ôóãèðóþò ïðè óñêîðåíèè 3000 g â òå÷åíèå 30 ìèí, äåêàíòèðóþò è óäàëÿþò îñòàâøóþñÿ æèäêîñòü ïèïåòêîé. Ïîëó÷åííûé îñàäîê áåëêà ðàñòâîðÿþò â 1 ìë ìåäè ðåàêòèâà ùåëî÷íîãî. ÌÅÒÎÄ 3 Äàííûé ìåòîä (îáû÷íî íàçûâàåìûé ìåòî- äîì êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ Áðåäôîðäà) îñíîâàí íà ñäâèãå ìàêñèìóìà ïîãëîùåíèÿ, îáó- ñëîâëåííîãî ñâÿçûâàíèåì áåëêà ñ êðàñèòåëåì êèñëîòíûì ñèíèì 90, îò äëèíû âîëíû 470 íì äî 595 íì. Êðàñèòåëü êèñëîòíûé ñèíèé 90 íàèáî- ëåå àêòèâíî ñâÿçûâàåò â áåëêå îñòàòêè àðãèíèíà è ëèçèíà, ÷òî ìîæåò ïðèâîäèòü ê ïîãðåøíîñòè ïðè êîëè÷åñòâåííîì îïðåäåëåíèè ðàçëè÷íûõ áåëêîâ. Áåëîê, èñïîëüçóåìûé â êà÷åñòâå ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà, äîëæåí áûòü òàêèì æå, êàê è èñïûòóåìûé áåëîê. Ìåøàþùèõ âåùåñòâ îò- íîñèòåëüíî íåìíîãî, îäíàêî íåîáõîäèìî èçáå- ãàòü ïðèñóòñòâèÿ â èñïûòóåìîì îáðàçöå äåòåð- ãåíòîâ è àìôîëèòîâ. Ñèëüíîùåëî÷íûå îáðàçöû ìîãóò âçàèìîäåéñòâîâàòü ñ êèñëîòíûì ðåàêòè- âîì. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ âñåõ áóôåðíûõ ðàñòâî- ðîâ è ðåàêòèâîâ, ïðèìåíÿåìûõ â äàííîì ìåòîäå, èñïîëüçóþò âîäó äèñòèëëèðîâàííóþ Ð. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ãîòîâÿò ðàñòâîð èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà â áóôåðíîì ðàñòâîðå, óêà- çàííîì â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ñ êîí- öåíòðàöèåé áåëêà â ïðåäåëàõ èíòåðâàëà êîíöåí- òðàöèé êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé. Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ñîîò- âåòñòâóþùåãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà áåëêà â áó- ôåðíîì ðàñòâîðå, óêàçàííîì â ÷àñòíîé ôàðìà- êîïåéíîé ñòàòüå. Ïîðöèè ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà ðàçâîäÿò òåì æå áóôåðíûì ðàñòâîðîì äëÿ ïîëó- ÷åíèÿ íå ìåíåå ïÿòè ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ ñ êîí- öåíòðàöèÿìè áåëêà, ðàâíîìåðíî ðàñïðåäåëåí- íûìè â èíòåðâàëå îò 0,1 ìêã/ìë äî 1 ìêã/ìë. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Áóôåðíûé ðàñòâîð, ïðèìåíÿåìûé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ. Êèñëîòíîãî ñèíåãî 90 ðåàêòèâ. 0,10 ã êè- ñëîòíîãî ñèíåãî 90 Ð ðàñòâîðÿþò â 50 ìë 96 % ýòàíîëà Ð. Ïðèáàâëÿþò 100 ìë ôîñôîðíîé êè- ñëîòû Ð, äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà äèñòèëëèðî- âàííîé âîäîé Ð äî 1000 ìë è ïåðåìåøèâàþò. Ôèëüòðóþò ðàñòâîð è õðàíÿò â êîíòåéíåðå èç òåìíîãî ñòåêëà ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå.
Ïðè õðàíåíèè âûïàäàåò îñàäîê êðàñèòåëÿ, ïî- ýòîìó ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì ðåàêòèâ íåîáõîäè- ìî ôèëüòðîâàòü. Ìåòîäèêà. Ê 0,100 ìë êàæäîãî ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ, èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è êîíòðîëü- íîãî ðàñòâîðà ïðèáàâëÿþò ïî 5 ìë êèñëîòíîãî ñèíåãî 90 ðåàêòèâà, ïåðåìåøèâàþò ïåðåâîðà÷è- âàÿ. Èçáåãàþò îáðàçîâàíèÿ ïåíû, ïðèâîäÿùåé ê óõóäøåíèþ âîñïðîèçâîäèìîñòè. Èçìåðÿþò îïòè÷åñêèå ïëîòíîñòè (2.1.2.24) ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ è èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà ïðè äëèíå âîëíû 595 íì, èñïîëüçóÿ êîíòðîëüíûé ðàñòâîð â êà÷åñòâå êîìïåíñàöèîííîãî ðàñòâîðà. Íå äî- 204 ïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå êâàðöåâûõ (êðåìíèå- âûõ) ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêèõ êþâåò, âñëåäñò- âèå ñâÿçûâàíèÿ êðàñèòåëÿ ñ ýòèìè ìàòåðèàëàìè. Ðàñ÷åòû. Çàâèñèìîñòü îïòè÷åñêîé ïëîòíî- ñòè îò êîíöåíòðàöèè áåëêà íå ÿâëÿåòñÿ ëèíåé- íîé, îäíàêî, åñëè èíòåðâàë êîíöåíòðàöèé, èñ- ïîëüçóåìûõ äëÿ ïîñòðîåíèÿ êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé, íåáîëüøîé, îíà ïðèáëèæàåòñÿ ê ëèíåé- íîé. Ñòðîÿò ãðàôèê çàâèñèìîñòè îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ îò êîíöåíòðà- öèé áåëêà è, èñïîëüçóÿ ëèíåéíóþ ðåãðåññèþ, ñòðîÿò êàëèáðîâî÷íóþ êðèâóþ. Íà îñíîâàíèè êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé è îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà îïðåäåëÿþò êîíöåíòðà- öèþ áåëêà â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå. ÌÅÒÎÄ 4 Äàííûé ìåòîä (îáû÷íî íàçûâàåìûé ìåòî- äîì êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ñ áèöèíõî- íèíîâîé êèñëîòîé èëè ÁÖÊ ìåòîäîì) îñíîâàí íà âîññòàíîâëåíèè áåëêîì èîíà äâóõâàëåíòíîé ìåäè (Cu2+) äî èîíà îäíîâàëåíòíîé ìåäè (Cu+). Ðåàêòèâ áèöèíõîíèíîâîé êèñëîòû ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ èîíà îäíîâàëåíòíîé ìåäè. Ïðîòåêàíèþ ðåàêöèè ìåøàþò íåêîòîðûå âåùå- ñòâà, âëèÿíèå êîòîðûõ ìîæåò áûòü ìèíèìèçèðî- âàíî ïóòåì ðàçâåäåíèÿ, îáåñïå÷èâàþùåãî êîí- öåíòðàöèþ áåëêà íà óðîâíå, äîñòàòî÷íîì äëÿ ïðîâåäåíèÿ òî÷íûõ èçìåðåíèé. Äëÿ óäàëåíèÿ ìåøàþùèõ âåùåñòâ òàêæå ìîæåò áûòü èñïîëü- çîâàíà ìåòîäèêà îñàæäåíèÿ áåëêà, îïèñàííàÿ â ðàçäåëå Ìåòîä 2. Ïîñêîëüêó ðàçíûå âèäû áåë- êîâ ìîãóò äàâàòü ðàçëè÷íûå ïî èíòåíñèâíîñòè îêðàñêè, ñòàíäàðòíûé îáðàçåö è èñïûòóåìûé áåëîê äîëæíû áûòü îäèíàêîâûìè. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ âñåõ áóôåðíûõ ðàñòâî- ðîâ è ðåàêòèâîâ, ïðèìåíÿåìûõ â äàííîì ìåòîäå, èñïîëüçóþò âîäó äèñòèëëèðîâàííóþ Ð. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ãîòîâÿò ðàñòâîð èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà â áóôåðíîì ðàñòâîðå, óêà- çàííîì â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, ñ êîí- öåíòðàöèåé áåëêà â ïðåäåëàõ èíòåðâàëà êîíöåí- òðàöèé êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé. Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ñîîò- âåòñòâóþùåãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà áåëêà â áó- ôåðíîì ðàñòâîðå, óêàçàííîì â ÷àñòíîé ôàðìà- êîïåéíîé ñòàòüå. Ïîðöèè ïîëó÷åííîãî ðàñòâîðà ðàçâîäÿò òåì æå áóôåðíûì ðàñòâîðîì äëÿ ïîëó- ÷åíèÿ íå ìåíåå ïÿòè ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ ñ êîí- öåíòðàöèÿìè áåëêà, ðàâíîìåðíî ðàñïðåäåëåí- íûìè â èíòåðâàëå îò 10 ìêã/ìë äî 1200 ìêã/ìë. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Áóôåðíûé ðàñòâîð, ïðèìåíÿåìûé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ. ÁÖÊ ðåàêòèâ. 10 ã äèíàòðèÿ áèöèíõîíèíà- òà Ð, 20 ã íàòðèÿ êàðáîíàòà ìîíîãèäðàòà Ð, 1,6 ã íàòðèÿ òàðòðàòà Ð, 4 ã íàòðèÿ ãèäðîêñè- äà Ð è 9,5 ã íàòðèÿ ãèäðîêàðáîíàòà Ð ðàñòâîðÿ- þò â âîäå äèñòèëëèðîâàííîé Ð. Ïðè íåîáõîäè- ìîñòè pH ðàñòâîðà êîððåêòèðóþò ðàñòâîðîì íà- òðèÿ ãèäðîêñèäà Ð èëè ðàñòâîðîì íàòðèÿ ãèäðîêàðáîíàòà Ð äî çíà÷åíèÿ 11,25 è äîâîäÿò âîäîé äèñòèëëèðîâàííîé Ð äî îáúåìà 1000 ìë, ïåðåìåøèâàþò. Ìåäíî-ÁÖÊ ðåàêòèâ. Ñìåøèâàþò 1 ìë ðàñ- òâîðà 40 ã/ë ìåäè ñóëüôàòà ïåíòàãèäðàòà Ð è 50 ìë ÁÖÊ ðåàêòèâà. Ìåòîäèêà. 0,1 ìë êàæäîãî ðàñòâîðà ñðàâíå- íèÿ, èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà è êîíòðîëüíîãî ðàñ- òâîðà ñìåøèâàþò ñ 2 ìë ìåäíî-ÁÖÊ ðåàêòèâà è ïåðåìåøèâàþò. Ïîëó÷åííûå ðàñòâîðû èíêó- áèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °C â òå÷åíèå 30 ìèí, îòìå÷àþò âðåìÿ è îõëàæäàþò äî êîì- íàòíîé òåìïåðàòóðû.
×åðåç 60 ìèí ïîñëå îêîí- ÷àíèÿ èíêóáàöèè â êâàðöåâûõ êþâåòàõ èçìåðÿ- þò îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü (2.1.2.24) ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ è èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà ïðè äëèíå âîëíû 562 íì, èñïîëüçóÿ êîíòðîëüíûé ðàñòâîð â êà÷åñòâå êîìïåíñàöèîííîãî ðàñòâîðà. Íåîáõî- äèìî ó÷èòûâàòü, ÷òî ïîñëå îõëàæäåíèÿ ðàñòâî- ðîâ äî êîìíàòíîé òåìïåðàòóðû, èíòåíñèâíîñòü èõ îêðàñêè ïîñòåïåííî óâåëè÷èâàåòñÿ. Ðàñ÷åòû. Çàâèñèìîñòü îïòè÷åñêîé ïëîòíî- ñòè îò êîíöåíòðàöèè áåëêà íå ÿâëÿåòñÿ ëèíåé- íîé, îäíàêî, åñëè èíòåðâàë êîíöåíòðàöèé, èñ- ïîëüçóåìûõ äëÿ ïîñòðîåíèÿ êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé, íåáîëüøîé, îíà ïðèáëèæàåòñÿ ê ëèíåé- íîé. Ñòðîÿò ãðàôèê çàâèñèìîñòè îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ îò êîíöåíòðà- öèé áåëêà è, èñïîëüçóÿ ëèíåéíóþ ðåãðåññèþ, ñòðîÿò êàëèáðîâî÷íóþ êðèâóþ. Íà îñíîâàíèè êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé è îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà îïðåäåëÿþò êîíöåíòðà- öèþ áåëêà â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå. ÌÅÒÎÄ 5 Äàííûé ìåòîä (îáû÷íî íàçûâàåìûé áèóðå- òîâûì ìåòîäîì êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ) îñíîâàí íà âçàèìîäåéñòâèè äâóõâàëåíòíîãî èîíà ìåäè (Cu2+) ñ áåëêîì â ùåëî÷íîé ñðåäå, ÷òî ïðèâîäèò ê ïîÿâëåíèþ ìàêñèìóìà ïîãëîùåíèÿ ïðè äëèíå âîëíû 545 íì. Ìåòîä îáíàðóæèâàåò ìèíèìàëüíîå ðàçëè÷èå ìåæäó ðàâíûìè êîëè÷å- 205 ñòâàìè èììóíîãëîáóëèíîâûõ è àëüáóìèíîâûõ îáðàçöîâ. Ïðèáàâëåíèå íàòðèÿ ãèäðîêñèäà è áèóðåòîâîãî ðåàêòèâà â âèäå êîìáèíèðîâàí- íîãî ðåàêòèâà, íåäîñòàòî÷íîå ïåðåìåøèâàíèå ïîñëå ïðèáàâëåíèÿ íàòðèÿ ãèäðîêñèäà èëè ïðî- äîëæèòåëüíûé ïåðèîä âðåìåíè ìåæäó ïðèáàâ- ëåíèåì íàòðèÿ ãèäðîêñèäà è áèóðåòîâîãî ðåàê- òèâà çàâûøàþò çíà÷åíèÿ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èììóíîãëîáóëèíîâûõ îáðàçöîâ ïî ñðàâíåíèþ ñ àëüáóìèíîâûìè îáðàçöàìè. Ìåòîä ñ òðèõëî- ðóêñóñíîé êèñëîòîé, èñïîëüçóåìûé äëÿ ìèíè- ìèçàöèè âëèÿíèÿ ìåøàþùèõ âåùåñòâ, òàêæå ìîæåò áûòü ïðèìåíåí äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñîäåð- æàíèÿ áåëêà â èñïûòóåìûõ îáðàçöàõ ïðè êîí- öåíòðàöèÿõ íèæå 500 ìêã/ìë. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ âñåõ áóôåðíûõ ðàñòâî- ðîâ è ðåàêòèâîâ, ïðèìåíÿåìûõ â äàííîì ìåòîäå, èñïîëüçóþò âîäó äèñòèëëèðîâàííóþ Ð. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ãîòîâÿò ðàñòâîð èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà â ðàñòâîðå 9 ã/ë íàòðèÿ õëî- ðèäà Ð ñ êîíöåíòðàöèåé áåëêà â ïðåäåëàõ èíòåð- âàëà êîíöåíòðàöèé êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé. Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ñîîò- âåòñòâóþùåãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà áåëêà â ðàñòâîðå 9 ã/ë íàòðèÿ õëîðèäà Ð. Ïîðöèè ïî- ëó÷åííîãî ðàñòâîðà ðàçâîäÿò ðàñòâîðîì 9 ã/ë íàòðèÿ õëîðèäà Ð äëÿ ïîëó÷åíèÿ íå ìåíåå òðåõ ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ ñ êîíöåíòðàöèÿìè áåëêà, ðàâíîìåðíî ðàñïðåäåëåííûìè â èíòåðâàëå îò 0,5 ìã/ìë äî 10 ìã/ìë. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Ðàñòâîð 9 ã/ë íà- òðèÿ õëîðèäà Ð. Áèóðåòîâûé ðåàêòèâ. 3,46 ã ìåäè(II) ñóëü- ôàòà Ððàñòâîðÿþò â 10 ìë ãîðÿ÷åé âîäû äèñ- òèëëèðîâàííîéÐ è îõëàæäàþò (ðàñòâîð A). 34,6 ã íàòðèÿ öèòðàòà Ð è 20,0 ã íàòðèÿ êàð- áîíàòà áåçâîäíîãî Ð ðàñòâîðÿþò â 80 ìë ãîðÿ- ÷åé âîäûäèñòèëëèðîâàííîé Ð è îõëàæäàþò (Á). Ñìåøèâàþò ðàñòâîðû À è Á è äîâîäÿò âîäîé äèñòèëëèðîâàííîé Ð äî îáúåìà 200 ìë. Èñïîëü- çóþò ïîëó÷åííûé ðàñòâîð â òå÷åíèå øåñòè ìå- ñÿöåâ. Ðåàêòèâ íåëüçÿ èñïîëüçîâàòü, åñëè îí ñòàíîâèòñÿ ìóòíûì èëè îáðàçóåòñÿ îñàäîê. Ìåòîäèêà. Ê 1 îáúåìó èñïûòóåìîãî ðàñòâî- ðà ïðèáàâëÿþò ðàâíûé îáúåì ðàñòâîðà 60 ã/ë íàòðèÿ ãèäðîêñèäà Ðè ïåðåìåøèâàþò. Òîò÷àñ äîáàâëÿþò áèóðåòîâûé ðåàêòèâ â êîëè÷åñòâå, ðàâíîì 0,4 îáúåìà èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà, è áû- ñòðî ïåðåìåøèâàþò. Âûäåðæèâàþò ïðè òåìïå- ðàòóðå îò 15 °Ñ äî 25 °Ñ íå ìåíåå 15 ìèí.  òå- ÷åíèå 90 ìèí ïîñëå ïðèáàâëåíèÿ áèóðåòîâîãî ðåàêòèâà èçìåðÿþò îïòè÷åñêèå ïëîòíîñòè (2.1.2.24) ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ è èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà ïðè äëèíå âîëíû 545 íì, èñïîëüçóÿ êîíòðîëüíûé ðàñòâîð â êà÷åñòâå êîìïåíñàöèîí- íîãî ðàñòâîðà. Ìóòíûå ðàñòâîðû èëè ðàñòâîðû ñ îñàäêîì íåïðèãîäíû äëÿ îïðåäåëåíèÿ êîíöåí- òðàöèè áåëêà. Ðàñ÷åòû.
Çàâèñèìîñòü îïòè÷åñêîé ïëîòíî- ñòè îò êîíöåíòðàöèè áåëêà èìååò ïî÷òè ëèíåé- íûé õàðàêòåð â ðàìêàõ óêàçàííîãî èíòåðâàëà êîíöåíòðàöèè áåëêà äëÿ ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ. Ñòðîÿò ãðàôèê çàâèñèìîñòè îïòè÷åñêèõ ïëîò- íîñòåé ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ îò êîíöåíòðàöèé áåëêà è, èñïîëüçóÿ ëèíåéíóþ ðåãðåññèþ, ñòðîÿò êàëèáðîâî÷íóþ êðèâóþ. Ðàññ÷èòûâàþò êîýôôè- öèåíò êîððåëÿöèè äëÿ êàëèáðîâî÷íîé êðèâîé. Ñèñòåìà ñ÷èòàåòñÿ ïðèãîäíîé, åñëè ëèíåéíàÿ çàâèñèìîñòü èìååò êîýôôèöèåíò êîððåëÿöèè íå ìåíåå 0,99. Íà îñíîâàíèè êàëèáðîâî÷íîé êðè- âîé è îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èñïûòóåìîãî ðàñ- òâîðà îïðåäåëÿþò êîíöåíòðàöèþ áåëêà â èñïû- òóåìîì ðàñòâîðå. Ìåøàþùèå âåùåñòâà. Äëÿ ìèíèìèçàöèè âëèÿíèÿ ìåøàþùèõ âåùåñòâ áåëîê ìîæåò áûòü îñàæäåí èç èñïûòóåìîãî îáðàçöà ñëåäóþùèì îáðàçîì: ê 1 îáúåìó ðàñòâîðà èñïûòóåìîãî îá- ðàçöà ïðèáàâëÿþò 0,1 îáúåìà ðàñòâîðà 500 ã/ë òðèõëîðóêñóñíîé êèñëîòû Ð, óäàëÿþò íàäîñà- äî÷íóþ æèäêîñòü è ðàñòâîðÿþò îñàäîê â íå- áîëüøîì îáúåìå 0,5 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèäðî- êñèäà. Ïîëó÷åííûé ðàñòâîð èñïîëüçóþò äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà. ÌÅÒÎÄ 6 Äàííûé ôëóîðèìåòðè÷åñêèé ìåòîä îñíîâàí íà äåðèâàòèçàöèè áåëêà o-ôòàëåâûì àëüäåãè- äîì, êîòîðûé âçàèìîäåéñòâóåò ñ ïåðâè÷íûìè àìèíîãðóïïàìè áåëêà (N-êîíöåâàÿ àìèíîêèñëî- òà è å-àìèíîãðóïïà îñòàòêîâ ëèçèíà). ×óâñòâè- òåëüíîñòü êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ìîæåò áûòü ïîâûøåíà ãèäðîëèçîì áåëêà ïåðåä ïðè- áàâëåíèåì o-ôòàëåâîãî àëüäåãèäà. Ãèäðîëèç äå- ëàåò á-àìèíîãðóïïû àìèíîêèñëîò, âõîäÿùèõ â ñòðóêòóðó áåëêà, äîñòóïíûìè äëÿ ðåàêöèè ñ ðåàêòèâîì ôòàëåâîãî àëüäåãèäà. Äëÿ äàííîãî ìåòîäà òðåáóåòñÿ î÷åíü íåáîëüøîå êîëè÷åñòâî áåëêà. Ïåðâè÷íûå àìèíû, íàïðèìåð, òðèñ(ãèä- ðîêñèìåòèë)-àìèíîìåòàí è àìèíîêèñëîòíûå áó- ôåðíûå ðàñòâîðû âçàèìîäåéñòâóþò ñ ôòàëåâûì àëüäåãèäîì, ïîýòîìó èõ íåîáõîäèìî èçáåãàòü èëè óäàëÿòü. Àììèàê ïðè âûñîêèõ êîíöåíòðà- öèÿõ âçàèìîäåéñòâóåò ñ ôòàëåâûì àëüäåãèäîì. Ôëóîðåñöåíöèÿ, ïîëó÷åííàÿ ïðè âçàèìîäåéñò- 206 âèè àìèíà ñ ôòàëåâûì àëüäåãèäîì, ìîæåò áûòü íåñòàáèëüíîé. Èñïîëüçîâàíèå àâòîìàòèçèðî- âàííûõ ïðîöåäóð äëÿ ñòàíäàðòèçàöèè äàííîãî ìåòîäà ìîæåò ïîâûñèòü ïðàâèëüíîñòü è ïðåöè- çèîííîñòü. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ âñåõ áóôåðíûõ ðàñòâî- ðîâ è ðåàêòèâîâ, ïðèìåíÿåìûõ â äàííîì ìåòîäå, èñïîëüçóþò âîäó äèñòèëëèðîâàííóþ Ð. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð. Ãîòîâÿò ðàñòâîð èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà â ðàñòâîðå 9 ã/ë íàòðèÿ õëî- ðèäà Ð ñ êîíöåíòðàöèåé áåëêà â ïðåäåëàõ êîí- öåíòðàöèé ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ. Ïåðåä ïðèáàâ- ëåíèåì ðåàêòèâà ôòàëåâîãî àëüäåãèäà pH ðàñòâîðà äîâîäÿò äî çíà÷åíèÿ îò 8 äî 10,5. Ðàñòâîðû ñðàâíåíèÿ. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ñîîò- âåòñòâóþùåãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà áåëêà â ðàñòâîðå 9 ã/ë íàòðèÿ õëîðèäà Ð. Ïîðöèè ïî- ëó÷åííîãî ðàñòâîðà ðàçâîäÿò ðàñòâîðîì 9 ã/ë íàòðèÿ õëîðèäà Ð äëÿ ïîëó÷åíèÿ íå ìåíåå ïÿòè ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ ñ êîíöåíòðàöèÿìè áåëêà, ðàâíîìåðíî ðàñïðåäåëåííûìè â èíòåðâàëå îò 10 ìêã/ìë äî 200 ìêã/ìë. Ïåðåä ïðèáàâëåíèåì ðåàêòèâà ôòàëåâîãî àëüäåãèäà pH ðàñòâîðà äî- âîäÿò äî çíà÷åíèÿ îò 8 äî 10,5. Êîíòðîëüíûé ðàñòâîð. Ðàñòâîð 9 ã/ë íà- òðèÿ õëîðèäà Ð. Áîðàòíûé áóôåðíûé ðàñòâîð. 61,83 ã áîð- íîé êèñëîòû Ð ðàñòâîðÿþò â âîäå äèñòèëëèðî- âàííîé Ð, pH ðàñòâîðà êîððåêòèðóþò ðàñòâîðîì êàëèÿ ãèäðîêñèäà Ð äî çíà÷åíèÿ 10,4 è äîâîäÿò âîäîé äèñòèëëèðîâàííîé Ð äî îáúåìà 1000 ìë, ïåðåìåøèâàþò. Ôòàëåâîãî àëüäåãèäà îñíîâíîé ðàñòâîð. 1,20 ã ôòàëåâîãî àëüäåãèäà Ð ðàñòâîðÿþò â 1,5 ìë ìåòàíîëà Ð, ïðèáàâëÿþò 100 ìë áîðàò- íîãî áóôåðíîãî ðàñòâîðà è ïåðåìåøèâàþò. Äî- áàâëÿþò 0,6 ìë ðàñòâîðà 300 ã/ëìàêðîãîëà 23 ëàóðèëîâîãî ýôèðà Ð è ïåðåìåøèâàþò. Õðàíÿò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå è èñïîëüçóþò â òå- ÷åíèå òðåõ íåäåëü. Ôòàëåâîãî àëüäåãèäà ðåàêòèâ. Ê 5 ìë îñ- íîâíîãî ðàñòâîðà ôòàëåâîãî àëüäåãèäà ïðèáàâ- ëÿþò 15 ìêë 2-ìåðêàïòîýòàíîëà Ð.
Ðàñòâîð ãî- òîâÿò íå ìåíåå ÷åì çà 30 ìèí ïåðåä èñïîëüçîâà- íèåì. Èñïîëüçóþò â òå÷åíèå 24 ÷. Ìåòîäèêà. Ñìåøèâàþò ïî 10 ìêë èñïûòóå- ìîãî ðàñòâîðà è êàæäîãî ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ ñ 0,1 ìë ðåàêòèâà ôòàëåâîãî àëüäåãèäà, ïåðåìå- øèâàþò è âûäåðæèâàþò ïðè êîìíàòíîé òåìïå- ðàòóðå â òå÷åíèå 15 ìèí. Äîáàâëÿþò ïî 3 ìë 0,5 Ì ðàñòâîðà íàòðèÿ ãèäðîêñèäà è ïåðåìå- øèâàþò. Îïðåäåëÿþò ôëóîðåñöåíöèþ (2.1.2.20) ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ è èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà ïðè äëèíå âîëíû âîçáóæäàþùåãî èçëó÷åíèÿ 340 íì è äëèíå âîëíû èñïóñêàåìîãî èçëó÷åíèÿ îò 440 íì äî 455 íì. Èçìåðÿþò èíòåíñèâíîñòü ôëóîðåñöåíöèè ïîëó÷åííûõ ðàñòâîðîâ òîëüêî îäèí ðàç, ïîñêîëüêó èçëó÷åíèå ñíèæàåò èíòåí- ñèâíîñòü ôëóîðåñöåíöèè. Ðàñ÷åòû. Çàâèñèìîñòü ôëóîðåñöåíöèè îò êîíöåíòðàöèè áåëêà ÿâëÿåòñÿ ëèíåéíîé. Ñòðîÿò ãðàôèê çàâèñèìîñòè èíòåíñèâíîñòè ôëóîðåñ- öåíöèè ðàñòâîðîâ ñðàâíåíèÿ îò êîíöåíòðàöèé áåëêà è, èñïîëüçóÿ ëèíåéíóþ ðåãðåññèþ, ñòðîÿò êàëèáðîâî÷íóþ êðèâóþ. Íà îñíîâàíèè êàëèáðî- âî÷íîé êðèâîé è èíòåíñèâíîñòè ôëóîðåñöåíöèè èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà îïðåäåëÿþò êîíöåíòðà- öèþ áåëêà â èñïûòóåìîì ðàñòâîðå. ÌÅÒÎÄ 7 Äàííûé ìåòîä îñíîâàí íà îïðåäåëåíèè àçî- òà êàê ñïîñîáå îïðåäåëåíèÿ áåëêà. Ïðèñóòñòâèå äðóãèõ àçîòñîäåðæàùèõ âåùåñòâ â èñïûòóåìîì îáðàçöå ìîæåò îêàçûâàòü ìåøàþùåå âëèÿíèå íà îïðåäåëåíèå áåëêà äàííûì ìåòîäîì. Ìåòîäèêà îïðåäåëåíèÿ àçîòà îñíîâàíà íà ðàçðóøåíèè èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà â õîäå àíàëèçà, íî íå ëèìè- òèðóåòñÿ ñîäåðæàíèåì áåëêà â âîäíîé ñðåäå. Ìåòîäèêà À. Îïðåäåëåíèå ïðîâîäÿò â ñîîò- âåòñòâèè ñ òðåáîâàíèÿìè îïðåäåëåíèÿ àçîòà ïî- ñëå ìèíåðàëèçàöèè ñåðíîé êèñëîòîé (2.1.5.9) èëè èñïîëüçóþò äîñòóïíûé â ïðîäàæå ïðèáîð Êüåëüäàëÿ äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ àçîòà. Ìåòîäèêà Â. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ àçîòà ïðèãîä- íû äîñòóïíûå â ïðîäàæå ïðèáîðû.  áîëüøèí- ñòâå ïðèáîðîâ äëÿ îïðåäåëåíèÿ àçîòà èñïîëüçó- þòñÿ ïèðîëèç (ò.å. ñæèãàíèå îáðàçöà â ïðèñóòñò- âèè êèñëîðîäà ïðè òåìïåðàòóðå, äîñòèãàþùåé 1000 °C). Ïðè ýòîì èç àçîòà, ïðèñóòñòâóþùåãî â èñïûòóåìûõ îáðàçöàõ, îáðàçóåòñÿ îêñèä àçîòà (NO) è äðóãèå îêñèäû àçîòà (NOx).  íåêîòîðûõ ïðèáîðàõ îêñèäû àçîòà ïðåîáðàçóþòñÿ â ãàçîîá- ðàçíûé àçîò, êîòîðûé êîëè÷åñòâåííî îïðåäåëÿ- åòñÿ ñ ïîìîùüþ äåòåêòîðà ïî òåïëîïðîâîäíî- ñòè.  äðóãèõ ïðèáîðàõ îêñèä àçîòà (NO) ñìå- øèâàåòñÿ ñ îçîíîì (O3) äëÿ ïîëó÷åíèÿ àçîòà äèîêñèäà â âîçáóæäåííîì ñîñòîÿíèè (NO2*), èñïóñêàþùåãî èçëó÷åíèå ïðè ðàñïàäå, êîòîðûé ìîæåò áûòü êîëè÷åñòâåííî îïðåäåëåí ñ ïîìî- ùüþ õåìèëþìèíåñöåíòíîãî äåòåêòîðà. Äëÿ îïòèìèçàöèè ââåäåíèÿ ïðîáû è ïàðà- ìåòðîâ ïèðîëèçà, à òàêæå îöåíêè ñòàáèëüíîñòè ïðîöåññà àíàëèçà èñïîëüçóþò îòíîñèòåëüíî 207 ÷èñòûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö áåëêà, ñîñòàâ êî- òîðîãî ïîäîáåí ñîñòàâó èñïûòóåìîãî áåëêà. Ðàñ÷åòû. Êîíöåíòðàöèþ áåëêà ðàññ÷èòûâà- þò ïóòåì äåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ àçîòà â èñïûòóå- ìîì îáðàçöå íà èçâåñòíîå ñîäåðæàíèå àçîòà â áåëêå. Èçâåñòíîå ñîäåðæàíèå àçîòà â áåëêå ìîæíî îïðåäåëèòü, èñõîäÿ èç õèìè÷åñêîãî ñî- ñòàâà áåëêà èëè ñðàâíèâàÿ ñ ïîäõîäÿùèì ñòàí- äàðòíûì îáðàçöîì. 201050015-2019 2.1.5.15. Àíèçèäèíîâîå ÷èñëî Àíèçèäèíîâûì ÷èñëîì (IAH) íàçûâàåòñÿ ÷èñëî, îïðåäåëÿþùåå ñîäåðæàíèå â èñïûòóå- ìîì âåùåñòâå (ìàñëå, òâåðäûõ æèðàõ, ëèïèäàõ) âòîðè÷íûõ ïðîäóêòîâ îêèñëåíèÿ (àëüäåãèäîâ, êåòîíîâ), ðàâíîå óâåëè÷åííîé â 100 ðàç îïòè÷å- ñêîé ïëîòíîñòè, èçìåðåííîé â êþâåòå ñ òîëùè- íîé ñëîÿ 1 ñì, ðàñòâîðà, ñîäåðæàùåãî 1 ã èñïû- òóåìîãî âåùåñòâà â 100 ìë ñìåñè ðàñòâîðèòåëåé ïîñëå ðåàêöèè ñ ï-àíèçèäè- íîì â ñîîòâåòñòâèè ñî ñëåäóþùåé ìåòîäèêîé. Âûïîëíÿþò îïåðàöèè ïî âîçìîæíîñòè áû- ñòðî, èçáåãàÿ âîçäåéñòâèÿ ñîëíå÷íîãî ñâåòà. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð (à).
Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå0,500 ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàñòâîðÿþò â òðèìåòèëïåíòàíå Ð è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâî- ðà òåì æå ðàñòâîðèòåëåìäî 25,0 ìë. Èñïûòóåìûé ðàñòâîð (á). Ê 5,0 ìë èñïûòóå- ìîãî ðàñòâîðà (à) ïðèáàâëÿþò 1,0 ìë ðàñòâîðà 2,5 ã/ë ï-àíèçèäèíà Ð â óêñóñíîé êèñëîòå ëåäÿ- íîé Ð, âñòðÿõèâàþò è õðàíÿò â çàùèùåííîì îò- ñâåòà ìåñòå. Ðàñòâîð ñðàâíåíèÿ. Ê 5,0 ìë òðèìåòèëïåí- òàíà Ð ïðèáàâëÿþò 1,0 ìë ðàñòâîðà 2,5 ã/ë ï-àíèçèäèíà Ð â óêñóñíîé êèñëîòå ëåäÿíîé Ð, âñòðÿõèâàþò è õðàíÿò â çàùèùåííîì îòñâåòà ìåñòå. Ðàñòâîð ï-àíèçèäèíà Ð èñïîëüçóþò ñâå- æåïðèãîòîâëåííûì. Èçìåðÿþò îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü (2.1.2.24) èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà (à) â ìàêñèìóìå ïîãëî- ùåíèÿ ïðè äëèíå âîëíû 350 íì, èñïîëüçóÿ òðè- ìåòèëïåíòàí Ð â êà÷åñòâå êîìïåíñàöèîííîé æèäêîñòè. Èçìåðÿþò îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòüèñ- ïûòóåìîãî ðàñòâîðà (á) ïðè 350 íì ðîâíî ÷åðåç 10 ìèí ïîñëå åãî ïðèãîòîâëåíèÿ, èñïîëüçóÿ ðàñ- òâîð ñðàâíåíèÿ â êà÷åñòâå êîìïåíñàöèîííîãî ðàñòâîðà. Àíèçèäèíîâîå ÷èñëî ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîð- ìóëå: I A A m ÀÍ = × -25 12 1 2( , ) , ãäå: À1 — îïòè÷åñêàÿ ïëîòíîñòü èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà (á) ïðè 350 íì; À2 — îïòè÷åñêàÿ ïëîòíîñòü èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà (à) ïðè 350 íì; m — íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà, âçÿòàÿ äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ èñïûòóåìîãî ðàñ- òâîðà (à), â ãðàììàõ; 1,2 — êîýôôèöèåíò, ó÷èòûâàþùèé îáú¸ì èñïûòóåìûõ ðàñòâîðîâ. 208 2.1.6. ÁÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÅ ÈÑÏÛÒÀÍÈß 201060001-2019 2.1.6.1. Ñòåðèëüíîñòü Íàñòîÿùàÿ îáùàÿ ôàðìàêîïåéíàÿ ñòàòüÿ ðàñïðîñòðàíÿåòñÿ íà ìåòîäû èñïûòàíèÿ íà ñòå- ðèëüíîñòü ðàçëè÷íûõ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ (ËÑ) — ïðåïàðàòîâ äëÿ èíúåêöèé, èíôóçèé, ãëàçíûõ êàïåëü, ïëåíîê, ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóá- ñòàíöèé è âñïîìîãàòåëüíûõ âåùåñòâ, âêëþ÷àÿ áèîëîãè÷åñêèå ëåêàðñòâåííûå ïðåïàðàòû è èõ ðàñòâîðèòåëè è äð., ê êîòîðûì ïðåäúÿâëÿåòñÿ òðåáîâàíèå ñòåðèëüíîñòè. ÓÑËÎÂÈß ÏÐÎÂÅÄÅÍÈß ÈÑÏÛÒÀÍÈß Èñïûòàíèå íà ñòåðèëüíîñòü ïðîâîäÿò â àñåïòè÷åñêèõ óñëîâèÿõ â ëàìèíàðíûõ óñòàíîâ- êàõ, ÷èñòûõ ïîìåùåíèÿõ èëè èçîëÿòîðàõ êëàññà ÷èñòîòû À. Ìåðû, ïðåäîòâðàùàþùèå êîíòàìè- íàöèþ, íå äîëæíû îêàçûâàòü ãóáèòåëüíîãî âëèÿíèÿ íà ìèêðîîðãàíèçìû, êîòîðûå ìîãóò ñî- äåðæàòüñÿ â èñïûòóåìûõ îáðàçöàõ ËÑ, âêëþ÷àÿ áèîëîãè÷åñêèå ëåêàðñòâåííûå ïðåïàðàòû (ÁËÏ). Óñëîâèÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ ðåãóëÿð- íî êîíòðîëèðóþò â ñîîòâåòñòâèè ñ ïðàâèëàìè íàäëåæàùèõ ïðîèçâîäñòâåííîé è ëàáîðàòîðíîé ïðàêòèê. ÌÅÒÎÄÛ ÈÑÏÛÒÀÍÈß ÑÒÅÐÈËÜÍÎÑÒÈ Èñïûòàíèå íà ñòåðèëüíîñòü ïðîâîäÿò äâóìÿ ìåòîäàìè: ìåòîäîì ïðÿìîãî ïîñåâà èëè ìåòî- äîì ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè. Ìåòîä ìåìáðàí- íîé ôèëüòðàöèè èñïîëüçóþò âî âñåõ ñëó÷àÿõ, êîãäà ïðèðîäà ïðåïàðàòà, åãî ôèçèêî-õèìè÷å- ñêèå ñâîéñòâà ïîçâîëÿþò ôèëüòðîâàòü åãî ÷åðåç ìåìáðàííûå ôèëüòðû. Ìåòîä ïðÿìîãî ïîñåâà èñïîëüçóþò äëÿ èñ- ïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü ËÑ, íå îáëàäàþùèõ àíòèìèêðîáíûì äåéñòâèåì èëè àíòèìèêðîáíîå äåéñòâèå êîòîðûõ ìîæíî óñòðàíèòü ðàçâåäåíè- åì èëè èíàêòèâèðîâàíèåì, à òàêæå äëÿ îáðàç- öîâ, èñïûòàíèå êîòîðûõ íåâîçìîæíî âûïîë- íèòü ìåòîäîì ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè. Ïðè èñïûòàíèè íà ñòåðèëüíîñòü ïàðàëëåëü- íî ïðîâîäÿòñÿ ñîîòâåòñòâóþùèå îòðèöàòåëüíûå êîíòðîëè. 1. Ïðîâåðêà ïðèãîäíîñòè ìåòîäèêè èñïûòàíèÿ (îïðåäåëåíèå àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ) Ïðîâåðêó ïðèãîäíîñòè ìåòîäèêè èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü ñëåäóåò ïðîâîäèòü â ñëåäóþ- ùèõ ñëó÷àÿõ: à) ïðè ïðîâåäåíèè èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëü- íîñòü íîâîãî ïðåïàðàòà; á) ïðè âíåñåíèè ëþáûõ èçìåíåíèé â ýêñïå- ðèìåíòàëüíûå óñëîâèÿ èñïûòàíèÿ; â) â ñëó÷àå èçìåíåíèÿ ñîñòàâà ïðåïàðàòà èëè ïðè èçìåíåíèÿõ â òåõíîëîãèè åãî ïðîèçâîä- ñòâà. Äëÿ ïðîâåðêè àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ èñ- ïîëüçóþò òå æå òåñò-øòàììû, ÷òî è ïðè îöåíêå ðîñòîâûõ ñâîéñòâ ïèòàòåëüíûõ ñðåä (òàáëèöà 2.1.6.1.-3).
Îïðåäåëåíèå àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ ïðîâîäÿò òåìè æå ìåòîäàìè è â òåõ æå óñëîâèÿõ, ÷òî è èñïûòàíèå íà ñòåðèëüíîñòü. Ìåìáðàííàÿ ôèëüòðàöèÿ. Ïðîâåðêà ïðè- ãîäíîñòè (îïðåäåëåíèå àíòèìèêðîáíîãî äåéñò- âèÿ) ìîæåò âûïîëíÿòüñÿ îäíîâðåìåííî ñ èñïû- òàíèåì ñòåðèëüíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàçöà (ï. 2.2.). Ïîñëå ïåðåíîñà òðåáóåìîãî êîëè÷åñòâà èñïûòóåìîãî îáðàçöà íà ôèëüòð â ïîñëåäíþþ ïîðöèþ æèäêîñòè äëÿ ïðîìûâàíèÿ âíîñÿò íå áîëåå 100 êîëîíèåîáðàçóþùèõ åäèíèö (ÊÎÅ) òåñò-øòàììîâ ìèêðîîðãàíèçìîâ (ï. 2.2.8.). Ïðÿìîé ïîñåâ. Ïðè ïðîâåðêå ïðèãîäíîñòè (îïðåäåëåíèè àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ) ãîòî- âÿò âçâåñè òåñò-øòàììîâ ñ êîíå÷íîé êîíöåíòðà- öèåé íå áîëåå 100 ÊÎÅ â 1 ìë. Èñïûòàíèå ïðî- âîäÿò ñ êàæäûì âèäîì ìèêðîîðãàíèçìîâ. Èñïîëüçóþò ïî 4 ïðîáèðêè äëÿ êàæäîãî òåñò-øòàììà ñ 10 ìë ñîîòâåòñòâóþùåé ïèòà- òåëüíîé ñðåäû.  ïåðâûå äâå ïðîáèðêè ñ êóëüòó- ðîé ìèêðîîðãàíèçìà âíîñÿò ïî 1 ìë (ã) èñïû- òóåìîãî îáðàçöà, à â äâå äðóãèå — ïî 1 ìë ðàñ- òâîðèòåëÿ (ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü). Âî âñå ÷åòûðå ïðîáèðêè âíîñÿò ïî 1 ìë ñîîòâåòñòâóþ- ùåãî òåñò-øòàììà. Ïîñåâû íà òèîãëèêîëåâîé ñðåäå èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå 32,5 ± 2,5 °Ñ â òå÷åíèå 3 ñóò. Ïîñåâû íà æèäêîé ñîåâî-êàçåèíîâîé ñðåäå èëè æèäêîé ñðåäå Ñàáóðî èíêóáèðóþò ïðè òåìïåðà- òóðå 22,5 ± 2,5 °Ñ â òå÷åíèå 5 ñóò. 209 Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäÿò âèçóàëüíî â ïðî- õîäÿùåì ñâåòå, ñðàâíèâàÿ ðîñò òåñò-øòàììîâ ìèêðîîðãàíèçìîâ â îïûòíûõ è êîíòðîëüíûõ ïî- ñåâàõ. Åñëè îáíàðóæåííûé ðîñò â îïûòíûõ ïðî- áèðêàõ âèçóàëüíî ñðàâíèì ñ ðîñòîì â êîíòðîëü- íûõ ïîñåâàõ, íå ñîäåðæàùèõ èñïûòóåìûé îáðà- çåö, äåëàþò âûâîä î òîì, ÷òî ïðåïàðàò â óñëîâèÿõ èñïûòàíèÿ íå îáëàäàåò àíòèìèêðîá- íûì äåéñòâèåì.  ýòîì ñëó÷àå èñïûòàíèå íà ñòåðèëüíîñòü ïðîâîäÿò ñòàíäàðòíûìè ìåòîäà- ìè.  ñëó÷àå åñëè â êîíòðîëå íàáëþäàþò ðîñò òåñò-øòàììà, à â îïûòå ðîñò îòñóòñòâóåò, ñ÷èòà- þò, ÷òî èñïûòóåìûé îáðàçåö îáëàäàåò àíòèìèê- ðîáíûì äåéñòâèåì, êîòîðîå ñëåäóåò óñòðàíèòü. 1.1. Óñòðàíåíèå àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ ïðåïàðàòà Äëÿ óñòðàíåíèÿ àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ ïðåïàðàòà èñïîëüçóþò ñëåäóþùåå: À) Óâåëè÷èâàþò ðàçâåäåíèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà, âçÿâ áîëüøèé îáúåì ðàñòâîðèòåëÿ/ðàç- áàâèòåëÿ/ïèòàòåëüíîé ñðåäû (íî íå áîëåå 200 ìë íà 1 ìë (ã) èñïûòóåìîãî îáðàçöà). Äëÿ ÁËÏ äîïóñêàåòñÿ òîëüêî ðàçáàâëåíèå ïèòàòåëü- íîé ñðåäîé. Ýêñïåðèìåíòàëüíî óñòàíîâëåííîå ñîîòíî- øåíèå îáúåìîâ ïèòàòåëüíîé ñðåäû è ïîñåâíîãî ìàòåðèàëà, îáåñïå÷èâàþùåå íåéòðàëèçàöèþ àí- òèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ ïðåïàðàòà, äîëæíî ñî- áëþäàòüñÿ ïðè èñïûòàíèè ïðåïàðàòà íà ñòåðèëü- íîñòü. Á) Ïðèìåíÿþò ìåòîä ìåìáðàííîé ôèëüòðà- öèè ñ ïîñëåäóþùèì ïðîìûâàíèåì ôèëüòðîâ, åñëè ïðåïàðàò ðàñòâîðèì â âîäíûõ ðàçáàâèòå- ëÿõ èëè â èçîïðîïèëìèðèñòàòå (ÈÏÌ). Â) Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàòü ñòåðèëüíóþ íåéòðàëèçóþùóþ æèäêîñòü, ïðîìûøëåííîãî ïðîèçâîäñòâà èëè ïðèãîòîâëåííóþ â ëàáîðàòî- ðèè, ñëåäóþùåãî ñîñòàâà: l Òâèíà-80 30,0 ã l Ëåöèòèíà ÿè÷íîãî 3,0 ã l L-ãèñòèäèíà ãèäðîõëîðèäà 1,0 ã l Ïåïòîíà (ìÿñíîãî èëè êàçåèíîâîãî) 1,0 ã l Íàòðèÿ õëîðèäà 4,3 ã l Êàëèÿ ôîñôàòà îäíîçàìåùåííîãî 3,6 ã l Íàòðèÿ ôîñôàòà äâóçàìåùåííîãî 7,2 ã l Âîäû î÷èùåííîé 1000 ìë ðÍ 7,0 ± 0,2. Ã) Èñïîëüçóþò íåñïåöèôè÷åñêèå èíàêòèâà- òîðû. Äëÿ èíàêòèâàöèè êîíñåðâàíòîâ, âõîäÿùèõ â ñîñòàâ ðÿäà ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, â ðàç- áàâèòåëü è/èëè â ïèòàòåëüíûå ñðåäû äî ñòåðè- ëèçàöèè âíîñÿò ñëåäóþùèå íåñïåöèôè÷åñêèå èíàêòèâàòîðû: 3 % òâèíà-80 èëè 0,3 % ëåöèòèíà (ÿè÷íîãî èëè ñîåâîãî) îò îáúåìà ñðåäû.  ñëó- ÷àå, åñëè â ïðåïàðàòå èìååòñÿ áîëåå äâóõ êîí- ñåðâàíòîâ ðàçëè÷íîé õèìè÷åñêîé ñòðóêòóðû, â ñðåäó âíîñÿò 3 % òâèíà-80, 0,3 % ëåöèòèíà, 0,1 % L-ãèñòèäèíà è 0,5 % íàòðèÿ òèîñóëüôàòà îäíîâðåìåííî.
Åñëè ðàçâåäåíèå â âûøåïðèâå- äåííîì ðàñòâîðå íå èíàêòèâèðóåò àíòèìèêðîá- íûå ñâîéñòâà ËÑ, óâåëè÷èâàþò êîíöåíòðàöèþ òâèíà-80 èëè ëåöèòèíà. Íåêîòîðûå èíàêòèâàòîðû àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ óêàçàíû â ÎÔÑ «Ìèêðîáèîëîãè÷åñêàÿ ÷èñòîòà». Ó÷èòûâàÿ, ÷òî â ñîñòàâ òèîãëèêîëåâîé ñðå- äû âõîäèò òèîãëèêîëÿò íàòðèÿ — èíàêòèâàòîð ðòóòíûõ ñîåäèíåíèé, ïåðåä ïðîâåäåíèåì èñïû- òàíèé ÁËÏ, ñîäåðæàùèõ ðòóòíûå êîíñåðâàíòû, ìåòîäîì ïðÿìîãî ïîñåâà, ïðîâîäÿò îïðåäåëåíèå íåéòðàëèçóþùèõ ñâîéñòâ ýòîé ñðåäû, ïîäòâåð- æäàþùèõ èíàêòèâàöèþ. Äëÿ íåéòðàëèçàöèè äåéñòâèÿ äðóãèõ êîíñåð- âàíòîâ, âõîäÿùèõ â ñîñòàâ ÁËÏ, èíàêòèâàòîðû íå èñïîëüçóþòñÿ, à îñíîâíûì ñïîñîáîì óñòðà- íåíèÿ èõ äåéñòâèÿ ÿâëÿåòñÿ ðàçâåäåíèå ïèòà- òåëüíîé ñðåäîé. Ïîñåâ èñïûòóåìîãî îáðàçöà â ïèòàòåëüíóþ ñðåäó ìîãóò ïðîâîäèòü â ñîîòíî- øåíèè 1:20, ñ ó÷åòîì ðåçóëüòàòîâ îïðåäåëåíèÿ àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ ïðåïàðàòà. Ä) Ïðèìåíÿþò ñïåöèôè÷åñêèå èíàêòèâàòî- ðû, íåéòðàëèçóþùèå àíòèìèêðîáíîå äåéñòâèå ËÑ, íî íå óãíåòàþùèå ðîñò ìèêðîîðãàíèçìîâ. Äëÿ èíàêòèâàöèè ïåíèöèëëèíîâ è öåôàëîñ- ïîðèíîâ, íåçàâèñèìî îò èõ ëåêàðñòâåííîé ôîð- ìû, â áóôåðíûé ðàñòâîð, èñïîëüçóåìûé äëÿ ðàñ- òâîðåíèÿ, ñóñïåíäèðîâàíèÿ èëè ýìóëüãèðîâà- íèÿ îáðàçöà, à òàêæå â ïèòàòåëüíûå ñðåäû ïåðåä èõ ïðèìåíåíèåì, àñåïòè÷åñêè âíîñÿò ñòåðèëü- íûé ðàñòâîð â-ëàêòàìàçû â êîëè÷åñòâå, óêàçàí- íîì â ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå èëè íîðìàòèâíîé äîêóìåíòàöèè. Èíàêòèâèðóþùåå äåéñòâèå â-ëàêòàìàçû íà ïåíèöèëëèíû è öåôàëîñïîðèíû íåîáõîäèìî îïðåäåëÿòü, âíîñÿ â ñðåäû ñ ôåðìåíòîì è àíòè- áèîòèêîì îò 50 äî 100 ÊÎÅ S.aureus. Òèïè÷íûé ðîñò òåñò-øòàììà â ïèòàòåëüíîé ñðåäå ñëóæèò ïîäòâåðæäåíèåì òîãî, ÷òî êîíöåíòðàöèÿ ôåð- ìåíòà â-ëàêòàìàçû äîñòàòî÷íà. Äëÿ èíàêòèâàöèè ñóëüôàíèëàìèäíûõ ïðåïà- ðàòîâ, íåçàâèñèìî îò èõ ëåêàðñòâåííîé ôîðìû, â áóôåðíûé ðàñòâîð, èñïîëüçóåìûé äëÿ ðàñòâî- 210 ðåíèÿ, ñóñïåíäèðîâàíèÿ èëè ýìóëüãèðîâàíèÿ îáðàçöà, à òàêæå â ïèòàòåëüíûå ñðåäû, åñëè íå- îáõîäèìî, äî ñòåðèëèçàöèè âíîñÿò ïàðààìèíî- áåíçîéíóþ êèñëîòó (ÏÀÁÊ) èç ðàñ÷åòà 0,05 – 0,1 ã/ë ñðåäû. Ïðè ðàçðàáîòêå íîâûõ ïðåïàðàòîâ â ÷àñò- íóþ ôàðìàêîïåéíóþ ñòàòüþ è íîðìàòèâíûé äî- êóìåíò ïî êà÷åñòâó ñëåäóåò âêëþ÷àòü ñâåäåíèÿ î íàëè÷èè/îòñóòñòâèè àíòèìèêðîáíîãî äåéñò- âèÿ ïðåïàðàòà ñ ðåêîìåíäàöèÿìè ïî åãî óñòðà- íåíèþ è èíôîðìàöèþ î ìåòîäå åãî èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü.  ñëó÷àå èçìåíåíèÿ òåõíîëî- ãè÷åñêîãî ïðîöåññà èëè ñîñòàâà ïðåïàðàòà íåîá- õîäèìî ïîäòâåðäèòü îòñóòñòâèå àíòèìèêðîáíî- ãî äåéñòâèÿ. 2. Èñïûòàíèå íà ñòåðèëüíîñòü 2.1. Îòáîð îáðàçîâ äëÿ èñïûòàíèÿ Ïðè ïðîâåäåíèè èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü ÷èñëî êîíòðîëèðóåìûõ ïåðâè÷íûõ óïàêîâîê îï- ðåäåëÿåòñÿ ñ ó÷åòîì îáùåãî êîëè÷åñòâà åäèíèö â ñåðèè. Îòáèðàþò îáðàçöû ïðåïàðàòà, êàê óêà- çàíî â Òàáëèöå 1. Èñïûòàíèå íà ñòåðèëüíîñòü â ïðîöåññå ïðî- èçâîäñòâà ÁËÏ ïðîâîäÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ ðåãëà- ìåíòîì ïðîèçâîäñòâà. Ïðè íåîáõîäèìîñòè, ìîãóò áûòü ðåãëàìåí- òèðîâàíû îñîáûå òðåáîâàíèÿ â îòíîøåíèè íå- îáõîäèìîãî êîëè÷åñòâà êîíòðîëèðóåìûõ åìêî- ñòåé, îáåñïå÷èâàþùèå íàäåæíîñòü êîíòðîëÿ ñòåðèëüíîñòè ïðåïàðàòà. Äëÿ ïîñåâà íà ñîîòâåòñòâóþùóþ ïèòàòåëü- íóþ ñðåäó èñïîëüçóþò îáðàçåö â êîëè÷åñòâå, ïðèâåäåííîì â Òàáëèöå 2. 2.2. Ìåòîä ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè Ïðè îïðåäåëåíèè ñòåðèëüíîñòè ËÑ, îáëà- äàþùèõ âûðàæåííûì àíòèìèêðîáíûì äåéñòâè- åì, è ËÑ â åìêîñòÿõ âìåñòèìîñòüþ áîëåå 100 ìë, ïðåäïî÷òèòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ ìåòîä ìåì- áðàííîé ôèëüòðàöèè. Èñêëþ÷åíèå ñîñòàâëÿþò ïðåïàðàòû ñ àíòèìèêðîáíûì äåéñòâèåì, íåðàñ- òâîðèìûå â âîäíûõ ðàçáàâèòåëÿõ èëè ÈÏÌ. 211 Òàáëèöà 1.
— Êîëè÷åñòâî åäèíèö ïðåïàðàòà äëÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü â çàâèñèìîñòè îò îáúåìà ñåðèè Êîëè÷åñòâî åäèíèö (àìïóë, ôëàêîíîâ è äð.) â ñåðèè* Ìèíèìàëüíîå êîëè÷åñòâî åäèíèö (àìïóë, ôëàêîíîâ è äð.) äëÿ ïîñåâà íà êàæäóþ ïèòàòåëüíóþ ñðåäó** Ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà 1. Ïàðåíòåðàëüíûå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà: Íå áîëåå 100 10 % èëè 4 Îò 100 äî 500 10 Áîëåå 500 2 % èëè 20 Ïàðåíòåðàëüíûå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà áîëüøîãî îáúåìà (áîëåå 100 ìë) 2 % èëè 10 2. Íåèíúåêöèîííûå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà (â òîì ÷èñëå ãëàçíûå): Íå áîëåå 200 5 % èëè 2 Áîëåå 200 10 Ïðåïàðàòû â îäíîäîçîâîé óïàêîâêå Ñì. ãðàôó «Ïàðåíòåðàëüíûå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà» 3.Òâåðäûå ôîðìû, àíãðî: Íå áîëåå 4 óïàêîâîê Êàæäóþ Ñâûøå 4, íî íå áîëåå 50 20 % èëè 4 Ñâûøå 50 2 % èëè 10 * Åñëè êîëè÷åñòâî åäèíèö â ñåðèè íåèçâåñòíî, òî èñïîëüçóþò ìàêñèìàëüíîå êîëè÷åñòâî, óêàçàííîå â êîëîí- êå. ** åñëè ñîäåðæèìîãî îäíîé åìêîñòè ËÑ (êðîìå ÁËÏ) äîñòàòî÷íî äëÿ èíîêóëèðîâàíèÿ äâóõ ïèòàòåëüíûõ ñðåä, òî â ýòîé êîëîíêå ïðèâîäèòñÿ êîëè÷åñòâî îáðàçöîâ, íåîáõîäèìûõ äëÿ èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü íà äâóõ ïèòà- òåëüíûõ ñðåäàõ. Ïðîöåäóðà èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü ìå- òîäîì ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè ñîñòîèò èç ñëå- äóþùèõ îñíîâíûõ ñòàäèé: ñìà÷èâàíèå ìåì- áðàí, ïîäãîòîâêà îáðàçöîâ è ôèëüòðàöèÿ ñîäåð- æèìîãî âñåõ åìêîñòåé ÷åðåç ìåìáðàííûå ôèëüòðû, îòìûâêà ìåìáðàííûõ ôèëüòðîâ ñîîò- âåòñòâóþùèì ñòåðèëüíûì ðàñòâîðîì, äîáàâëå- íèå ïèòàòåëüíîé ñðåäû è èíêóáèðîâàíèå ïîñå- âîâ. Èñïûòàíèå âûïîëíÿþò ñ èñïîëüçîâàíèåì ôèëüòðàöèîííûõ óñòàíîâîê îòêðûòîãî èëè çà- êðûòîãî òèïà, ïîçâîëÿþùèõ â àñåïòè÷åñêèõ óñ- ëîâèÿõ ïåðåíîñèòü è ôèëüòðîâàòü èñïûòóåìûé îáðàçåö ÷åðåç ìåìáðàííûå ôèëüòðû (âíåøíèé äèàìåòð 47 ìì; äèàìåòð ïîð 0,45 ìêì), ñïîñîá- íûå óëàâëèâàòü ìèêðîîðãàíèçìû. Ôèëüòðàöè- îííàÿ óñòàíîâêà îòêðûòîãî òèïà äîëæíà áûòü ñìîíòèðîâàíà òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû èñïûòóå- ìûé îáðàçåö ìîæíî áûëî âíåñòè è ïðîôèëüòðî- âàòü â óñëîâèÿõ àñåïòèêè. Ïîñëå îêîí÷àíèÿ ôèëüòðàöèè ìåìáðàíó àñåïòè÷åñêè ïåðåíîñÿò â ïèòàòåëüíóþ ñðåäó. Ïðè èñïîëüçîâàíèè çàêðû- òîé ñòåðèëüíîé ñèñòåìû ñ ìåìáðàíîé, âìîíòè- ðîâàííîé â êàíèñòðó, ïîñëå ôèëüòðàöèè ïèòà- òåëüíóþ ñðåäó âíîñÿò íåïîñðåäñòâåííî â êàíè- ñòðó íà ìåìáðàíó. Ôèëüòðû èç íèòðàòöåëëþëî- çû èñïîëüçóþò äëÿ âîäíûõ, ìàñëÿíûõ è ñëàáûõ ñïèðòîâûõ ðàñòâîðîâ, ôèëüòðû èç àöåòàòöåëëþ- ëîçû – äëÿ êîíöåíòðèðîâàííûõ ñïèðòîâûõ ðàñ- òâîðîâ è êèñëîò. Ãèäðîôîáíûé êðàé ôèëüòðà è íèçêàÿ ñîðáöèîííàÿ ñïîñîáíîñòü îáåñïå÷èâàþò ýôôåêòèâíóþ îòìûâêó ìåìáðàíû è ñâîäÿò ê ìè- íèìóìó àäñîðáöèþ ïðåïàðàòà, îáëàäàþùåãî àí- òèìèêðîáíûì äåéñòâèåì. Äëÿ ïðåïàðàòîâ, íå îáëàäàþùèõ àíòèìèê- ðîáíûì äåéñòâèåì, ìîæíî èñïîëüçîâàòü ôèëüò- ðû áåç ãèäðîôîáíîãî êðàÿ, ñìà÷èâàÿ èõ ïåðåä ôèëüòðàöèåé èñïîëüçóåìûì ðàçáàâèòåëåì. Åñëè èñïûòóåìûé îáðàçåö íå îáëàäàåò àíòè- ìèêðîáíûì äåéñòâèåì, â õîäå èñïûòàíèÿ âîç- ìîæíî èñêëþ÷èòü ïðîöåäóðó ïðîìûâàíèÿ ôèëüòðîâ. 2.2.1. Èñïûòàíèå âîäíûõ ðàñòâîðîâ ËÑ Îïðåäåëåííûé îáúåì ïðåïàðàòà, ñòåðèëüíî îòîáðàííûé èç âñåõ îáðàçöîâ, ïåðåìåøèâàþò è àñåïòè÷åñêè ïåðåíîñÿò íà îäèí èëè íåñêîëüêî ïðåäâàðèòåëüíî ñìî÷åííûõ ôèëüòðîâ. Ôèëüòðû àñåïòè÷åñêè ñíèìàþò ñ ôèëüòðîäåðæàòåëÿ è ïî- ìåùàþò â ñðåäû èëè çàëèâàþò èõ â åìêîñòè ñ ôèëüòðîäåðæàòåëÿìè. Ïðè èñïîëüçîâàíèè çàìê- íóòîé ñèñòåìû êàíèñòðû çàïîëíÿþò ðàâíûì îáúåìîì ñðåä. Ïðè ýòîì ñëåäóåò èçáåãàòü àýðà- öèè òèîãëèêîëåâîé ñðåäû. 2.2.2. Èñïûòàíèå æèäêèõ ïðåïàðàòîâ, íå ñìåøèâàþùèõñÿ ñ âîäîé Èñïûòàíèå ïðîâîäÿò òàê æå, êàê è äëÿ âîä- íûõ ðàñòâîðîâ ËÑ. Ïðè èñïûòàíèè âÿçêèõ æèä- êîñòåé ê îáùåé ïðîáå ïåðåä ôèëüòðàöèåé àñåï- òè÷åñêè äîáàâëÿþò äîñòàòî÷íîå êîëè÷åñòâî ïîäõîäÿùåãî ñòåðèëüíîãî ðàñòâîðèòåëÿ äëÿ óâå- ëè÷åíèÿ ñêîðîñòè ôèëüòðàöèè. 212 Òàáëèöà 2.
— Ìèíèìàëüíîå êîëè÷åñòâî îáðàçöà äëÿ ïîñåâà íà ïèòàòåëüíûå ñðåäû Êîëè÷åñòâî ïðåïàðàòà â ïåðâè÷íîé óïàêîâêå Ìèíèìàëüíîå êîëè÷åñòâî ïðåïàðàòà äëÿ ïîñåâà íà êàæäóþ ïèòàòåëüíóþ ñðåäó, åñëè íå îáîñíîâàíî è íå ðàçðåøåíî èíîå Æèäêèå: Ìåíåå 1 ìë âåñü îáúåì ïåðâè÷íûõ óïàêîâîê, îáúåäèíåííûõ äî 1 ìë 1 – 40 ìë 1/2 ñîäåðæèìîãî, íî íå ìåíåå 1 ìë 40 – 100 ìë 20 ìë áîëåå 100 ìë 10 % ñîäåðæèìîãî, íî íå ìåíåå 20 ìë Àíòèáèîòèêè (æèäêîñòè) 1 ìë Äðóãèå ïðåïàðàòû, ðàñòâîðèìûå â âîäå èëè ÈÏÌ ñîäåðæèìîå óïàêîâêè, íî íå ìåíåå 200 ìã Íåðàñòâîðèìûå ïðåïàðàòû, ìàçè è êðåìû, ïîä- äàþùèåñÿ ýìóëüãèðîâàíèþ èëè ñóñïåíäèðîâàíèþ ñîäåðæèìîå óïàêîâêè, íî íå ìåíåå 200 ìã Òâåðäûå: Ìåíåå 50 ìã âñå ñîäåðæèìîå 50 – 300 ìã 1/2 ñîäåðæèìîãî, íî íå ìåíåå 50 ìã 300 ìã – 5 ã 150 ìã áîëåå 5 ã 500 ìã Åñëè â ñîñòàâ èñïûòóåìîãî îáðàçöà âõîäèò ëåöèòèí, ìàñëî èëè êîíñåðâàíò, à ñàì ïðåïàðàò îáëàäàåò àíòèìèêðîáíûì äåéñòâèåì, äëÿ ïðî- ìûâàíèÿ ôèëüòðîâ èñïîëüçóþò æèäêîñòü ¹ 2. 2.2.3. Ïðîáîïîäãîòîâêà è èñïûòàíèå ìàçåé, êðåìîâ, ðàñòâîðèìûõ â ÈÏÌ, è ðàñòâîðîâ â ìàñëàõ Ìàçè íà æèðîâîé îñíîâå è ýìóëüñèè òèïà «âîäà â ìàñëå» ðàñòâîðÿþò â ÈÏÌ, ïðåäâàðè- òåëüíî ïðîñòåðèëèçîâàííîì ìåòîäîì ôèëüòðà- öèè (ìåìáðàíà ñ äèàìåòðîì ïîð 0,22 ìêì). Ñòå- ðèëüíûé ðàçáàâèòåëü/ðàñòâîðèòåëü è, åñëè íå- îáõîäèìî, èñïûòóåìûé îáðàçåö, íåïîñðåäñò- âåííî ïåðåä ôèëüòðàöèåé íàãðåâàþò äî òåìïå- ðàòóðû íå áîëåå 44 °Ñ. Ôèëüòðóþò ðàñòâîð èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà â ÈÏÌ è ïðîìûâàþò ìåì- áðàíó òðåìÿ ïîðöèÿìè æèäêîñòè ¹ 2 ïî 100 ìë êàæäàÿ. Èñïûòàíèå ïðîâîäÿò íà ïèòàòåëüíûõ ñðåäàõ ñ äîáàâëåíèåì 1 ã/ë òâèíà-80. Åñëè â ñîñòàâ èñïûòóåìîãî îáðàçöà âõîäèò âàçåëèí, äëÿ ïðîìûâàíèÿ ìåìáðàííûõ ôèëüò- ðîâ èñïîëüçóþò æèäêîñòü ¹ 3. Åñëè ïðåïàðàò ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ðàñòâîð â ìàñëå, ôèëüòð è óñòàíîâêà ïåðåä ïðèìåíåíèåì äîëæíû áûòü òùàòåëüíî âûñóøåíû. 2.2.4. Èñïûòàíèå ïðåïàðàòîâ â øïðèö-òþáèêàõ Ñîäåðæèìîå êàæäîãî øïðèö-òþáèêà ïåðå- íîñÿò â óñòàíîâêè äëÿ ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè èëè ñîáèðàþò îáùóþ ïðîáó â ñòåðèëüíóþ ïðî- áèðêó äëÿ ïîñëåäóþùåãî ïåðåíîñà íà ôèëüòð. 2.2.5. Èñïûòàíèå òâåðäûõ ëåêàðñòâåííûõ ôîðì äëÿ èíúåêöèé (êðîìå àíòèáèîòèêîâ) Èñïûòóåìûé îáðàçåö ðàçâîäÿò, êàê óêàçàíî â èíñòðóêöèè ïî ïðèìåíåíèþ, è ïðîâîäÿò èñïû- òàíèå ñîãëàñíî ìåòîäèêå, ïðèâåäåííîé â ðàçäå- ëàõ 2.2.1 è 2.2.2. 2.2.6. Èñïûòàíèå ñòåðèëüíûõ àýðîçîëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ôîðì Òðåáóåìîå êîëè÷åñòâî èñïûòóåìîãî îáðàçöà â àýðîçîëüíîé óïàêîâêå àñåïòè÷åñêè ïåðåíîñÿò â ñòåðèëüíóþ êîëáó íàæàòèåì íà øòîê ðàñïûëè- òåëüíîãî êëàïàíà. Åñëè âîçìîæíî, óäàëÿþò ïðî- ïåëëåíò ïóòåì èñïàðåíèÿ. Äîáàâëÿþò â êîëáó æèäêîñòü ¹ 2 è îñòîðîæíî ïåðåìåøèâàþò. Èñ- ïûòàíèå ïðîâîäÿò, êàê óêàçàíî â ðàçäåëàõ 2.2.1 è 2.2.2. 2.2.7. Æèäêîñòè äëÿ ïðîìûâàíèÿ ìåìáðàííûõ ôèëüòðîâ ïðè èñïûòàíèè îáðàçöîâ, îáëàäàþùèõ àíòèìèêðîáíûì äåéñòâèåì Äëÿ ïðîìûâàíèÿ ôèëüòðîâ ìîæíî èñïîëüçî- âàòü ëþáóþ ñòåðèëüíóþ æèäêîñòü, íå ïîäàâ- ëÿþùóþ ðîñò ìèêðîîðãàíèçìîâ: l 0,9 % ðàñòâîð íàòðèÿ õëîðèäà ðÍ 7,0 ± 0,2 (ïîñëå ñòåðèëèçàöèè). l Æèäêîñòü ¹ 1: ðàñòâîðÿþò 1 ã ôåðìåíòà- òèâíîãî ïåïòîíà â 1000 ìë âîäû, ôèëüòðóþò èëè öåíòðèôóãèðóþò äëÿ îñâåòëåíèÿ, ðàçëèâàþò â ñîñóäû è ñòåðèëèçóþò; ðÍ 7,0 ± 0,2. Ïðè ôèëüòðàöèè îáðàçöîâ ïåíèöèëëèíîâ èëè öåôàëîñïîðèíîâ (åñëè íåîáõîäèìî) ê æèä- êîñòè ¹ 1 äîáàâëÿþò âàëèäèðîâàííîå êîëè÷å- ñòâî b-ëàêòàìàçû, óêàçàííîå â ÷àñòíîé ôàðìà- êîïåéíîé ñòàòüå è íîðìàòèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó, äîñòàòî÷íîå äëÿ èíàêòèâàöèè îñòàòî÷- íîãî àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ àíòèáèîòèêà íà ôèëüòðå.
l Æèäêîñòü ¹ 2: äîáàâëÿþò 1 ìë òâèíà-80 ê 1000 ìë æèäêîñòè ¹ 1, ðàçëèâàþò â ñîñóäû è ñòåðèëèçóþò; ðÍ 7,0 ± 0,2 l Æèäêîñòü ¹ 3: ðàñòâîðÿþò 5 ã ôåðìåíòà- òèâíîãî ïåïòîíà, 3 ã ìÿñíîãî ýêñòðàêòà è 10 ã òâèíà-80 â 1000 ìë âîäû, ðàçëèâàþò âî ôëàêîíû è ñòåðèëèçóþò; ðÍ 7,0 ± 0,2. Ïðè èñïûòàíèè ÁËÏ ïðîìûâêó ìåìáðàííûõ ôèëüòðîâìîæíî ïðîâîäèòü ëþáûì ñòåðèëüíûì ðàñòâîðîì, íå ïîäàâëÿþùèì ðîñò ìèêðîîðãà- íèçìîâ, èñïîëüçîâàííûì ïðè îïðåäåëåíèè àí- òèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ ïðåïàðàòà, íàïðèìåð: 0,9 % ðàñòâîð íàòðèÿ õëîðèäà (ðÍ 7,0 ± 0,2) èëè æèäêîñòü ¹ 1. 2.2.8. Ïðîâåðêà ïðèãîäíîñòè ìåòîäà ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè ïðè èñïûòàíèè îáðàçöîâ, îáëàäàþùèõ àíòèìèêðîáíûì äåéñòâèåì Ôèëüòðóþò îáúåì èñïûòóåìîãî îáðàçöà, èñ- ïîëüçóÿ äëÿ îäíîãî ôèëüòðà òî æå êîëè÷åñòâî åäèíèö (àìïóë, ôëàêîíîâ è ò.ä.), ÷òî è â èñïûòà- íèè íà ñòåðèëüíîñòü (Òàáëèöà 2). Ôèëüòð ïðî- ìûâàþò, êàê ìèíèìóì, òðåìÿ ïîðöèÿìè ñîîò- âåòñòâóþùåé æèäêîñòè ïî 100 ìë êàæäàÿ.  ïî- ñëåäíþþ ïîðöèþ æèäêîñòè äëÿ ïðîìûâàíèÿ âíîñÿò ïî 1 ìë ïðèãîòîâëåííûõ âçâåñåé òåñò- øòàììîâ ìèêðîîðãàíèçìîâ (êàæäîãî â îòäåëü- íîñòè) ñ êîíöåíòðàöèåé 100 ÊÎÅ/ìë (Òàáëè- öà 3). 213 Ôèëüòð ïîìåùàþò â åìêîñòü ñî 100 ìë ñîîò- âåòñòâóþùåé ïèòàòåëüíîé ñðåäû èëè äîáàâëÿ- þò ñðåäó â êàíèñòðó çàìêíóòîé ñèñòåìû. Ïîñå- âû èíêóáèðóþò ïðè ñîîòâåòñòâóþùåé òåìïåðà- òóðå â òå÷åíèå íå áîëåå 3 ñóò äëÿ áàêòåðèé è 5 ñóò äëÿ ãðèáîâ.  õîäå ó÷åòà ðåçóëüòàòîâ îïðåäåëÿþò âèçó- àëüíî â ïðîõîäÿùåì ñâåòå íàëè÷èå ðîñòà òåñò-øòàììîâ ìèêðîîðãàíèçìîâ.  ñëó÷àå îá- íàðóæåíèÿ ðîñòà ñ÷èòàþò, ÷òî àíòèìèêðîáíîå äåéñòâèå ïîëíîñòüþ èíàêòèâèðîâàíî è ïðîâî- äÿò èñïûòàíèå ñòåðèëüíîñòè, èñïîëüçóÿ òî æå êîëè÷åñòâî ïðåïàðàòà, àíàëîãè÷íûé îáúåì æèä- êîñòè äëÿ ïðîìûâàíèÿ è òå æå ïèòàòåëüíûå ñðå- äû. Åñëè ðîñò òåñò-øòàììîâ ìèêðîîðãàíèçìîâ îòñóòñòâóåò, äåëàþò âûâîä, ÷òî àíòèìèêðîáíîå äåéñòâèå íå èíàêòèâèðîâàíî. Èñïûòàíèå ïîâòî- 214 Òàáëèöà 3. — Òåñò-øòàììû ìèêðîîðãàíèçìîâ, èñïîëüçóåìûå äëÿ îïðåäåëåíèÿ ðîñòîâûõ ñâîéñòâ ïèòàòåëü- íûõ ñðåä è ïðîâåðêè àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ ïðåïàðàòà* Ïèòàòåëüíûå ñðåäû Òåñò-øòàììû ìèêðîîðãàíèçìîâ Óñëîâèÿ èíêóáàöèè Òåìïåðàòóðà Âðåìÿ Æèäêàÿ òèîãëèêîëåâàÿ ñðåäà Àýðîáíûå áàêòåðèè: 32,5 ± 2,5 °Ñ 3 ñóò Bacillus subtilis ÃÊÏÌ 010011, ÀÒÑÑ 6633, CIP 52.62, NCIMB 8054, NBRC 3134 èëè Âacillus cereus ÃÊÏÌ 010014, ATCC 10702 Staphylococcus aureus ÃÊÏÌ 201108,, ATCC 6538, CIP 4.83, NCTC 10788, NCIMB 9518, NBRC 13276 Pseudomonas aeruginosa ÃÊÏÌ 190155, ATCC 9027, NCIMB 8626, CIP 82.118, NBRC 13275 Alcaligenes faecalis 415** ÃÊÏÌ 300205 2 ñóò Àíàýðîáíûå áàêòåðèè: 3 ñóò Clostridium sporogenes 272 ÃÊÏÌ 300524, ATCC 19404, CIP 79.3, NCTC 532, ATCC 11437, NBRC 14293 Clostridium novyi 198** ÃÊÏÌ 242484 2 ñóò Ãðèáû**: 22,5 ± 2,5 °Ñ 5 ñóò Candida albicans NCTC 885-653, ÀÒÑÑ 10231, IP 48.72, NCPF 3179, NBRC 1594 Æèäêàÿ ñîåâî- êàçåèíîâàÿ ñðåäà Àýðîáíûå áàêòåðèè: 22,5 ± 2,5 °Ñ 5 ñóò Bacillus subtilis ÃÊÏÌ 010011, ÀÒÑÑ 6633, CIP 52.62, NCIMB 8054, NBRC 3134 èëè Âacillus cereus ÃÊÏÌ 010014, ATCC 10702 Ãðèáû: Candida albicans NCTC 885-653, ÀÒÑÑ 10231, IP 48.72, NCPF 3179, NBRC 1594 Aspergillus brasiliensis ÀÒÑÑ 9642, ÀÒÑÑ 16404, IP 1431.83, IMI 149007, NBRC 9455 Æèäêàÿ Ñðåäà Ñàáóðî Ãðèáû: 22,5 ± 2,5 °Ñ 5 ñóò Candida albicans NCTC 885-653, ÀÒÑÑ 10231, IP 48.72, NCPF 3179, NBRC 1594 Aspergillus brasiliensis ÀÒÑÑ 9642, ÀÒÑÑ 16404, IP 1431.83, IMI 149007, NBRC 9455 * ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû è äðóãèå òåñò-øòàììû èç ðàçëè÷íûõ êîëëåêöèé, òèïè÷íûå ïî êóëüòóðàëüíî-ìîð- ôîëîãè÷åñêèì, òèíêòîðèàëüíûì è áèîõèìè÷åñêèì ñâîéñòâàì. Íàáîð òåñò-øòàììîâ ìîæåò áûòü èçìåíåí â çà- âèñèìîñòè îò ñïîñîáà ïðèìåíåíèÿ èëè ñîñòàâà èñïûòóåìîãî ïðåïàðàòà.
** îáîçíà÷åíû òåñò-øòàììû äëÿ ñëó÷àåâ èñïîëüçîâàíèÿ òèîãëèêîëåâîé ñðåäû â êà÷åñòâå óíèâåðñàëüíîé ïðè èñïûòàíèè ÁËÏ. Êóëüòèâèðîâàíèå ïðîèçâîäÿò ïðè äâóõ òåìïåðàòóðíûõ ðåæèìàõ — 32,5 ± 2,5 °Ñ è 22,5 ± 2,5 °Ñ. ðÿþò, óâåëè÷èâàÿ îáúåì æèäêîñòè äëÿ ïðîìûâà- íèÿ ôèëüòðà (íî íå áîëåå 500 ìë) èëè èñïîëüçó- þò äðóãèå ñïîñîáû íåéòðàëèçàöèè (ï.1.1). 2.3. Ìåòîä ïðÿìîãî ïîñåâà Ìåòîä ïðÿìîãî ïîñåâà èñïîëüçóþò äëÿ èñ- ïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü ËÑ, íå îáëàäàþùèõ àíòèìèêðîáíûì äåéñòâèåì, èëè òåõ îáðàçöîâ, èñïûòàíèå êîòîðûõ íåâîçìîæíî âûïîëíèòü ìå- òîäîì ìåìáðàííîé ôèëüòðàöèè.  òîì ñëó÷àå, åñëè âûÿâëåíî àíòèìèêðîáíîå äåéñòâèå â óñëîâèÿõ èñïûòàíèÿ, åãî íåéòðàëè- çóþò ïóòåì äîáàâëåíèÿ ïîäõîäÿùèõ èíàêòèâà- òîðîâ èëè óâåëè÷èâàÿ îáúåì ïèòàòåëüíîé ñðåäû (ï. 1.1). Äîáàâëÿåìûé èíàêòèâàòîð â çàäàííîé êîíöåíòðàöèè íå äîëæåí ïîäàâëÿòü ðîñò òåñò-øòàììîâ. Ïðè íåîáõîäèìîñòè èíàêòèâàòîð ìîæíî äîáàâëÿòü è â ïèòàòåëüíóþ ñðåäó. Èñïûòóåìûå îáðàçöû çàñåâàþò íåïîñðåäñò- âåííî â ïèòàòåëüíûå ñðåäû â ñîîòíîøåíèè, êàê ïðàâèëî, 1:10. Ñîîòíîøåíèå êîëè÷åñòâà èñïû- òóåìîãî ìàòåðèàëà è èñïîëüçóåìîé ïèòàòåëüíîé ñðåäû äîëæíî áûòü îïðåäåëåíî ïðè ïðîâåðêå àíòèìèêðîáíîãî äåéñòâèÿ ïðåïàðàòà. 2.3.1.Èñïûòàíèå íåôèëüòðóþùèõñÿ æèäêîñòåé Èç îïðåäåëåííîãî êîëè÷åñòâà ôëàêîíîâ, àì- ïóë è ò.ä. (Òàáëèöà 1) àñåïòè÷åñêè îòáèðàþò îáúåì îáðàçöà, äîñòàòî÷íûé äëÿ ïîñåâà íà ïèòà- òåëüíûå ñðåäû â ñîîòíîøåíèè 1:10. Ïîñëå ïîñå- âà àêêóðàòíî ïåðåìåøèâàþò ñðåäó, èñêëþ÷àÿ àýðàöèþ. 2.3.2. Èñïûòàíèå ìàçåé, êðåìîâ è ðàñòâîðîâ â ìàñëàõ Îò êàæäîé èñïûòóåìîé ñåðèè îòáèðàþò íå- îáõîäèìîå êîëè÷åñòâî åäèíèö (Òàáëèöà 1). Ðàñòâîðû â ìàñëàõ. Ãîòîâÿò ýìóëüñèþ ïðå- ïàðàòà â ðàçâåäåíèè 1:10, ïîìåùàÿ â ñòåðèëü- íóþ êîëáó, ñîäåðæàùóþ ñîîòâåòñòâóþùèé ñòåðèëüíûé ðàçáàâèòåëü, ñòåêëÿííûå áóñû äèà- ìåòðîì 5 – 6 ìì, è, ïðè íåîáõîäèìîñòè, îïðåäå- ëåííîå êîëè÷åñòâî òâèíà-80. Ïîñåâû ðàñòâîðîâ â ìàñëàõ åæåäíåâíî àêêó- ðàòíî ïåðåìåøèâàþò. Ìàçè è êðåìû. Òóáû (ôëàêîíû) ïåðåä èñïû- òàíèåì äåçèíôèöèðóþò, âñêðûâàþò èõ àñåïòè- ÷åñêèè ïåðâóþ ïîðöèþ ïðåïàðàòà óäàëÿþò, íå èññëåäóÿ. Ìàçè è êðåìû, ëåãêî ýìóëüãèðóåìûå â âîäå. Ãîòîâÿò ðàçâåäåíèå ËÑ 1:10, ïîìåùàÿ îáðàçåö â ñòåðèëüíóþ êîëáó ñ ñîîòâåòñòâóþùèì ñòåðèëü- íûì ðàçáàâèòåëåì (íàïðèìåð, ðàñòâîðîì 0,9 % íàòðèÿ õëîðèäà èëè æèäêîñòüþ ¹ 1) è ñòåêëÿí- íûìè áóñàìè äèàìåòðîì 5 – 6 ìì. Ñìåñü íàãðå- âàþò íà âîäÿíîé áàíåäî òåìïåðàòóðû 40 °Ñ è ýíåðãè÷íî âñòðÿõèâàþò â òå÷åíèå 5 – 15 ìèíóò äî ïîëó÷åíèÿ ãîìîãåííîé ýìóëüñèè, êîòîðóþ âûñåâàþò â æèäêèå ñðåäû — òèîãëèêîëåâóþ, ñîåâî-êàçåèíîâóþ èëè Ñàáóðî. Ìàçè è êðåìû, òðóäíî ñìåøèâàåìûå ñ âî- äîé. Ãîòîâÿò ðàçâåäåíèå èñïûòóåìîãî îáðàçöà 1:10, ïîìåùàÿ â ñòåðèëüíóþ êîëáó ñ ñîîòâåòñò- âóþùèì ñòåðèëüíûì ðàçáàâèòåëåì (íàïðèìåð, ðàñòâîðîì 0,9 % íàòðèÿ õëîðèäà èëè æèäêî- ñòüþ ¹ 3), òâèíîì-80 â êîëè÷åñòâå 50 % îò ìàñ- ñû íàâåñêè è ñòåêëÿííûìè áóñàìè äèàìåòðîì 5 – 6 ìì. Ñìåñü íàãðåâàþò íà âîäÿíîé áàíå äî òåìïåðàòóðû 40 °Ñ (â èñêëþ÷èòåëüíûõ ñëó÷àÿõ äî òåìïåðàòóðû 45 °Ñ), ýíåðãè÷íî âñòðÿõèâàþò â òå÷åíèå 5 – 15 ìèí (ìàêñèìàëüíî 30 ìèí), äî ïîëó÷åíèÿ ãîìîãåííîé ýìóëüñèè, êîòîðóþ çàòåì âûñåâàþò â æèäêèå ñðåäû — òèîãëèêîëåâóþ, ñîåâî-êàçåèíîâóþ èëè Ñàáóðî. 2.3.3. Èñïûòàíèå òâåðäûõ ôîðì Èñïûòóåìûé îáðàçåö â âèäå ïîðîøêà ïåðå- íîñÿò â êîëè÷åñòâå, óêàçàííîì â Òàáëèöå 2, â æèäêèå ñðåäû — òèîãëèêîëåâóþ, ñîåâî-êàçåè- íîâóþ èëè Ñàáóðî è îñòîðîæíî ïåðåìåøèâàþò. Åñëè â îáðàçåö äîáàâëåí ñòåðèëüíûé ðàñòâîðè- òåëü, òî èñïûòàíèþ íà ñòåðèëüíîñòü ïîäâåðãà- þò ïîëó÷åííóþ ñóñïåíçèþ. 2.4.
Óñëîâèÿ èíêóáàöèè ïîñåâîâ Ïîñåâû èíêóáèðóþò íåçàâèñèìî îò ìåòîäà ïîñåâà íå ìåíåå 14 ñóò ïðè òåìïåðàòóðå 32,5 ± 2,5 °Ñ â æèäêîé òèîãëèêîëåâîé ñðåäå è ïðè òåìïåðàòóðå 22,5 ± 2,5 °Ñ â æèäêèõ ñîåâî- êàçåèíîâîé ñðåäå èëè ñðåäå Ñàáóðî. Ïðè èñïûòàíèè ÁËÏ âîçìîæíî èñïîëüçîâà- íèå òîëüêî òèîãëèêîëåâîé ñðåäû è èíêóáèðîâà- íèå ïîñåâîâ ïðè äâóõ òåìïåðàòóðíûõ ðåæèìàõ 32,5 ± 2,5 °Ñ è 22,5 ± 2,5 °Ñ. 2.5. Ó÷åò è èíòåðïðåòàöèÿ ðåçóëüòàòîâ èñïûòàíèÿ Âî âðåìÿ èíêóáàöèè ïåðèîäè÷åñêè ïðîñìàò- ðèâàþò ïîñåâû. Íàëè÷èå ðîñòà ìèêðîîðãàíèç- ìîâ îïðåäåëÿþò âèçóàëüíî â ïðîõîäÿùåì ñâåòå. Åñëè èñïûòóåìûé îáðàçåö âûçûâàåò ïîìóòíå- íèå ïèòàòåëüíîé ñðåäû è âèçóàëüíî íåëüçÿ îï- ðåäåëèòü íàëè÷èå èëè îòñóòñòâèå ìèêðîáíîãî ðîñòà, ÷åðåç 14 ñóò ïîñëå íà÷àëà èñïûòàíèÿ ïå- ðåíîñÿò íå ìåíåå 1 ìë ïîìóòíåâøåé ñðåäû â ïðîáèðêè ñ àíàëîãè÷íîé ñòåðèëüíîé ñðåäîé. Èíêóáèðóþò èñõîäíûå è ïîâòîðíûå ïîñåâû. 215 Îáùåå âðåìÿ èíêóáàöèè äîëæíî ñîñòàâëÿòü íå ìåíåå ÷åì 14 + 4 ñóòîê îò íà÷àëà èñïûòàíèÿ. Ïðè îòñóòñòâèè ðîñòà ìèêðîîðãàíèçìîâ, ñ÷èòàþò, ÷òî èñïûòóåìûé îáðàçåö ñîîòâåòñòâó- åò òðåáîâàíèÿì èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü. Ïðè îáíàðóæåíèè ðîñòà ìèêðîîðãàíèçìîâ, îïðåäåëÿåìîãî âèçóàëüíî ïî íàëè÷èþ ìóòíî- ñòè, îñàäêà, õëîïüåâ è äðóãèõ èçìåíåíèé ñðåäû è ïîäòâåðæäàåìîãî ìèêðîñêîïè÷åñêèì èññëå- äîâàíèåì, ñ÷èòàþò, ÷òî èñïûòóåìûé îáðàçåö íå ñîîòâåòñòâóåò òðåáîâàíèÿì èñïûòàíèÿ íà ñòå- ðèëüíîñòü.  ýòîì ñëó÷àå ïðîâîäÿò ðàññëåäîâà- íèå ïðè÷èí íåñîîòâåòñòâèÿ. Ðåçóëüòàòû èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü ìî- ãóò áûòü ïðèçíàíû íåäîñòîâåðíûìè â ñëó÷àå, åñëè âûïîëíÿåòñÿ îäíî èëè íåñêîëüêî óñëîâèé, ïðèâåäåííûõ íèæå: 1) ïîëó÷åíû íåóäîâëåòâîðèòåëüíûå ðåçóëü- òàòû ìèêðîáèîëîãè÷åñêîãî êîíòðîëÿ îêðóæàþ- ùåé ñðåäû (âîçäóøíîé ñðåäû, ïîâåðõíîñòåé è ðóê ïåðñîíàëà è äð.) ïðè ïðîâåäåíèè èñïûòàíèÿ íà ñòåðèëüíîñòü; 2) âûÿâëåíû îøèáêè, äîïóùåííûå â õîäå èñïûòàíèÿ; 3) îáíàðóæåí ðîñò ìèêðîîðãàíèçìîâ â îò- ðèöàòåëüíîì êîíòðîëå (êîíòðîëü ñòåðèëüíîãî ðàñòâîðèòåëÿ/ðàçáàâèòåëÿ èëè ïèòàòåëüíîé ñðå- äû); 4) ïèòàòåëüíàÿ ñðåäà íåñòåðèëüíà è/èëè å¸ ðîñòîâûå ñâîéñòâà íåóäîâëåòâîðèòåëüíû; 5) âûÿâëåíû îøèáêè â õîäå ïðîöåññà ñòåðè- ëèçàöèè ìàòåðèàëîâ. Åñëè ðåçóëüòàòû èñïûòàíèÿ ïðèçíàíû íå- äîñòîâåðíûìè (â ñëó÷àå îáíàðóæåíèÿ îøèáîê â õîäå àíàëèçà), òåñò ïîâòîðÿþò íà òîì æå êîëè÷å- ñòâå îáðàçöîâ, ÷òî è ïåðâîíà÷àëüíî, èñêëþ÷àÿ ïðåïàðàòû ÁËÏ, ïîâòîðíîå èñïûòàíèå êîòîðûõ ïðîâîäÿò íà óäâîåííîì êîëè÷åñòâå îáðàçöîâ. Åñëè â ðåçóëüòàòå ïîâòîðíîãî èñïûòàíèÿ íå îáíàðóæèâàþò ðîñò ìèêðîîðãàíèçìîâ, ñ÷èòàþò, ÷òî èññëåäóåìûé îáðàçåö ñòåðèëåí. Åñëè â ðå- çóëüòàòå ïîâòîðíîãî èñïûòàíèÿ îáíàðóæèâàþò ðîñò ìèêðîîðãàíèçìîâ, ñ÷èòàþò, ÷òî èññëåäóå- ìûé îáðàçåö íå ñîîòâåòñòâóåò òðåáîâàíèÿì íîð- ìàòèâíîé äîêóìåíòàöèè ïî ïîêàçàòåëþ «Ñòå- ðèëüíîñòü». Åñëè â õîäå ðàññëåäîâàíèÿ äîêàçàíà ïðà- âèëüíîñòü âûïîëíåíèÿ òåñòà íà ñòåðèëüíîñòü, ñ÷èòàþò, ÷òî èñïûòóåìûé îáðàçåö íå ñîîòâåòñò- âóåò òðåáîâàíèÿì íîðìàòèâíîé äîêóìåíòàöèè ïî ïîêàçàòåëþ «Ñòåðèëüíîñòü». 3. Ïèòàòåëüíûå ñðåäû Äëÿ èñïûòàíèÿ ñòåðèëüíîñòè èñïîëüçóþò æèäêèå ñðåäû — òèîãëèêîëåâóþ, ñîåâî-êàçåè- íîâóþ èëè Ñàáóðî. Òèîãëèêîëåâóþ ñðåäó ïðè- ìåíÿþò äëÿ âûÿâëåíèÿ àýðîáíûõ è àíàýðîáíûõ áàêòåðèé. Æèäêóþ ñîåâî-êàçåèíîâóþ ñðåäó — äëÿ âûÿâëåíèÿ ãðèáîâ è àýðîáíûõ áàêòåðèé. Æèäêóþ ñðåäó Ñàáóðî èñïîëüçóþò äëÿ âûÿâëå- íèÿ ãðèáîâ. Ïðè èñïûòàíèè íà ñòåðèëüíîñòü ÁËÏ íå ðå- êîìåíäóåòñÿ èñïîëüçîâàòü æèäêóþ ñðåäó Ñàáó- ðî.
Ïðè èñïûòàíèè íà ñòåðèëüíîñòü ÁËÏ, â òîì ÷èñëå, ñîäåðæàùèõ ðòóòíûå êîíñåðâàíòû, äî- ïóñòèìî èñïîëüçîâàíèå òîëüêî òèîãëèêîëåâîé ñðåäû â êà÷åñòâå óíèâåðñàëüíîé äëÿ âûÿâëåíèÿ àýðîáíûõ è àíàýðîáíûõ áàêòåðèé è ãðèáîâ (ïðè óñëîâèè ïðåäâàðèòåëüíîãî îïðåäåëåíèÿ å¸ ðîñ- òîâûõ è íåéòðàëèçóþùèõ ñâîéñòâ ñ èñïîëüçîâà- íèåì òåñò-ìèêðîîðãàíèçìîâ â ñîîòâåòñòâèè ñ Òàáëèöåé 3). Èíêóáàöèþ ïîñåâîâ îñóùåñòâëÿ- þò ïðè äâóõ òåìïåðàòóðíûõ ðåæèìàõ. 3.1. Ïðèãîòîâëåíèå ïèòàòåëüíûõ ñðåä Ïèòàòåëüíûå ñðåäû ãîòîâÿò â ëàáîðàòîðèè, èñïîëüçóÿ ñóõèå ïèòàòåëüíûå ñðåäû ïðîìûø- ëåííîãî ïðîèçâîäñòâà èëè îòäåëüíûå êîìïîíåí- òû. Äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíåíèå ñðåä, ãîòîâûõ ê èñïîëüçîâàíèþ, ñ ñåðòèôèêàòîì ïðîèçâîäèòåëÿ. Ïðèãîòîâëåííûå â ëàáîðàòîðèè ïèòàòåëüíûå ñðåäû ïðîâåðÿþò íà ñòåðèëüíîñòü è îïðåäåëÿþò èõ ðîñòîâûå ñâîéñòâà. Ïèòàòåëüíûå ñðåäû è æèäêîñòè äëÿ ïðîìû- âàíèÿ ôèëüòðîâ ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâåïðè òåìïåðàòóðå 121 °Ñ â òå÷åíèå 15 ìèí, åñëè íåò äðóãèõ óêàçàíèéâ ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå èëè íîðìàòèâíîé äîêóìåíòàöèè. Òèîãëèêîëåâàÿ ñðåäà l L-öèñòèíà 0,5 ã l Íàòðèÿ õëîðèäà 2,5 ã l Ãëþêîçû ìîíîãèäðàòà 5,5 ã l Àãàðà ìèêðîáèîëîãè÷åñêîãî (âëàæíîñòü íå áîëåå 15 %) 0,75 ã l Äðîææåâîãî ýêñòðàêòà (âîäîðàñòâîðèìîãî) 5,0 ã l Ïàíêðåàòè÷åñêîãî ãèäðîëèçàòà êàçåèíà 15,0 ã l Íàòðèÿ òèîãëèêîëÿòà 0,5 ã l èëè êèñëîòû òèîãëèêîëåâîé 0,3 ìë l Ðàñòâîðà ðåçàçóðèíà íàòðèÿ (1 ã/ë), ñâåæåïðèãîòîâëåííîãî 1,0 ìë l Âîäû î÷èùåííîé 1000,0 ìë 216 ðÍ ïîñëå ñòåðèëèçàöèè 7,1 ± 0,2. Äîáàâëÿþò â âîäó î÷èùåííóþ L-öèñòèí, àãàð ìèêðîáèîëîãè÷åñêèé, íàòðèÿ õëîðèä, ãëþ- êîçó, âîäîðàñòâîðèìûé äðîææåâîé ýêñòðàêò è ïàíêðåàòè÷åñêèé ãèäðîëèçàò êàçåèíà è íàãðåâà- þò äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ. Ïîñëå ýòîãî âíîñÿò- íàòðèÿ òèîãëèêîëÿò èëè òèîãëèêîëåâóþ êèñëîòó è, åñëè íåîáõîäèìî, äîâîäÿò ðÍ ñðåäû 1Ì ðàñ- òâîðîì íàòðèÿ ãèäðîêñèäà äî íåîáõîäèìîãî çíà- ÷åíèÿ. Äîáàâëÿþò ðàñòâîð ðåçàçóðèíà, ïåðåìå- øèâàþò, ðàçëèâàþò â ïðîáèðêè ñîîòâåòñòâóþ- ùåãî îáúåìà è ñòåðèëèçóþò. Æèäêàÿ ñîåâî-êàçåèíîâàÿ ñðåäà l Ïàíêðåàòè÷åñêîãî ãèäðîëèçàòà êàçåèíà 17,0 ã l Ïàïàèíîâîãî ãèäðîëèçàòà ñîåâîé ìóêè 3,0 ã l Íàòðèÿ õëîðèäà 5,0 ã l Êàëèÿ ôîñôàòà äâóçàìåùåííîãî 2,5 ã l Ãëþêîçû 2,5 ã l Âîäû î÷èùåííîé 1000,0 ìë ðÍ ïîñëå ñòåðèëèçàöèè 7,3 ± 0,2. Êîìïîíåíòû ðàñòâîðÿþò â âîäå (åñëè íåîá- õîäèìî — ïðè íàãðåâàíèè). Îõëàæäàþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå. Åñëè òðåáóåòñÿ, äîáàâ- ëÿþò 1 Ì ðàñòâîð íàòðèÿ ãèäðîêñèäà, ÷òîáû ïî- ñëå ñòåðèëèçàöèè çíà÷åíèå ðÍ ñðåäû áûëî 7,3 ± 0,2. Ôèëüòðóþò äëÿ ïîëó÷åíèÿ ïðîçðà÷íîé ñðåäû, ðàçëèâàþò â ïðîáèðêè è ñòåðèëèçóþò. Æèäêàÿ ñðåäà Ñàáóðî l Ïåïòîíà ôåðìåíòàòèâíîãî 10,0 ã l Ãëþêîçû ìîíîãèäðàòà 40,0 ã l Âîäû î÷èùåííîé 1000,0 ìë ðÍ ïîñëå ñòåðèëèçàöèè 5,6 ± 0,2. Ïåïòîí è ãëþêîçó äîáàâëÿþò â âîäó î÷èùåí- íóþ è ïîëíîñòüþ ðàñòâîðÿþò ïðè ñëàáîì íàãðå- âàíèè. Îõëàæäàþò äî êîìíàòíîé òåìïåðàòóðû è äîâîäÿò ðÍ äî òðåáóåìîãî çíà÷åíèÿ. Åñëè íåîá- õîäèìî, ôèëüòðóþò, ðàçëèâàþò â ïðîáèðêè è ñòåðèëèçóþò. Äîïóñêàåòñÿ, ÷òîáû ñîñòàâ ñóõèõ è ãîòîâûõ ê ïðèìåíåíèþ ñðåä ïðîìûøëåííîãî ïðîèçâîä- ñòâà ðàçëè÷àëñÿ, ïðè óñëîâèè èõ ñîîòâåòñòâèÿ òðåáîâàíèÿì ïî ðîñòîâûì ñâîéñòâàì. 3.2. Ñòåðèëüíîñòü ïèòàòåëüíûõ ñðåä Ïîñëå ñòåðèëèçàöèè íå ìåíåå 5 % åìêîñòåé îò êàæäîé ïàðòèè ïèòàòåëüíîé ñðåäû ïîìåùàþò â òåðìîñòàò è èíêóáèðóþò â òå÷åíèå êàê ìèíè- ìóì 14 ñóò. Êîíòðîëü ïðîâîäÿò äî èñïûòàíèÿ ËÑ èëè ïàðàëëåëüíî ñ ïîñåâîì èñïûòóåìîãî îá- ðàçöà íà ñòåðèëüíîñòü. Ðîñò ìèêðîîðãàíèçìîâ äîëæåí îòñóòñòâîâàòü. 3.3. Îïðåäåëåíèå ðîñòîâûõ ñâîéñòâ ïèòà- òåëüíûõ ñðåä Ðîñòîâûå ñâîéñòâà ñðåä îïðåäåëÿþò äëÿ êà- æäîé ñåðèè ïèòàòåëüíîé ñðåäû, âûïóùåííîé ïðîìûøëåííîñòüþ è èìåþùåé íîìåð, è äëÿ êà- æäîé ïàðòèè ñðåäû, èçãîòîâëåííîé â ëàáîðàòî- ðèè.