Текст очень длинный, поэтому разбит на части. Часть 4 из 11.
Ñèòà âûáèðàþò òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû îíè îõâàòûâàëè ïîëíûé äèàïàçîí ðàçìåðîâ ÷àñòèö, ïðèñóòñòâóþùèé â èñïûòóåìîì îáðàçöå. Ðåêî- ìåíäóåòñÿ èñïîëüçîâàòü íàáîð ñèò, ïëîùàäü îò- âåðñòèé êîòîðûõ èçìåíÿåòñÿ â v-ïðîãðåññèè. Íàáîð ñèò óñòàíàâëèâàþò òàê, ÷òîáû ñèòî ñ ñà- ìûì êðóïíûì ðàçìåðîì îòâåðñòèé áûëî âåðõ- íèì, à ñ ñàìûì ìåëêèì ðàçìåðîì îòâåðñòèé — íèæíèì. Ðàçìåð îòâåðñòèé àíàëèòè÷åñêèõ ñèò âûðàæàþò â ìèêðîìåòðàõ èëè ìèëëèìåòðàõ. Äëÿ èçãîòîâëåíèÿ àíàëèòè÷åñêèõ ñèò èñïîëüçó- þò ïðîâîëîêó èç íåðæàâåþùåé ñòàëè èëè, ìå- íåå ïðåäïî÷òèòåëüíî, ìåäè èëè äðóãîãî ïîäõî- äÿùåãî õèìè÷åñêè íåàêòèâíîãî ìåòàëëà. Êàëèáðîâêà è ïîâòîðíàÿ êàëèáðîâêà àíàëè- òè÷åñêèõ ñèò ïðîèçâîäèòñÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ äåéñòâóþùèì èçäàíèåì ISO 3310-1. Ïåðåä èñ- ïîëüçîâàíèåì ñèòà òùàòåëüíî ïðîâåðÿþò íà ãðóáûå èñêðèâëåíèÿ è èçëîìû, â îñîáåííîñòè ñîåäèíåíèÿ ñèòîâîãî êàðêàñà. Äîïóñêàåòñÿ îï- òè÷åñêàÿ êàëèáðîâêà ñèò äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñðåä- íåãî ðàçìåðà îòâåðñòèÿ è ðàçëè÷èé â ðàçìåðàõ îòâåðñòèé. Äëÿ îöåíêè ýôôåêòèâíîñòè îòâåðñòèé àíà- ëèòè÷åñêèõ ñèò â äèàïàçîíå ðàçìåðîâ (212 – 850) ìêì ïðèìåíÿþò òàêæå ñòàíäàðòíûå ñòåêëÿííûå øàðèêè. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíûõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòüÿõ ñè- òîâîé àíàëèç ïðîâîäÿò ïðè êîíòðîëèðóåìîé êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå è îòíîñèòåëüíîé âëàæ- íîñòè îêðóæàþùåé ñðåäû. Î÷èñòêà àíàëèòè÷åñêèõ ñèò.  èäåàëüíîì ñëó÷àå äëÿ î÷èñòêè àíàëèòè÷åñêèõ ñèò èñïîëü- çóþò òîëüêî âîçäóøíóþ ñòðóþ ïîä íèçêèì äàâ- ëåíèåì èëè ñòðóþ æèäêîñòè. Åñëè íåêîòîðûå îòâåðñòèÿ âñå æå çàêóïîðèâàþòñÿ ÷àñòèöàìè èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà, òî â êðàéíåì ñëó÷àå äîïóñ- êàåòñÿ ïðèìåíåíèå ìÿãêîé ùåòêè. Èñïûòóåìûé îáðàçåö. Åñëè â ÷àñòíîé ôàð- ìàêîïåéíîé ñòàòüå íåò óêàçàíèé îòíîñèòåëüíî ìàññû íàâåñêè äëÿ êîíêðåòíîãî èñïûòóåìîãî îáðàçöà, òî äëÿ èñïûòàíèÿ íà àíàëèòè÷åñêèõ ñèòàõ äèàìåòðîì 200 ìì èñïîëüçóþò èñïûòóå- ìûé îáðàçåö ìàññîé (25 – 100) ã â çàâèñèìîñòè îò åãî íàñûïíîé ïëîòíîñòè. Äëÿ ñèò äèàìåòðîì 76 ìì êîëè÷åñòâî èñïûòóåìîãî îáðàçöà äîëæíî ñîñòàâëÿòü îêîëî 1/7 îò åãî êîëè÷åñòâà, ïðåäó- ñìîòðåííîãî äëÿ èñïûòàíèé íà àíàëèòè÷åñêèõ ñèòàõ äèàìåòðîì 200 ìì. Íàèáîëåå ïðèåìëå- ìóþ ìàññó äëÿ êîíêðåòíîãî îáðàçöà îïðåäåëÿþò ïðîñåèâàíèåì òî÷íûõ íàâåñîê ðàçíûõ ìàññ, íà- ïðèìåð, 25 ã, 50 ã è 100 ã â òå÷åíèå îäíîãî è òîãî æå ïåðèîäà âðåìåíè, èñïîëüçóÿ ìåõàíè÷åñêèé âñòðÿõèâàòåëü (ïðèìå÷àíèå: åñëè ðåçóëüòàòû èñïûòàíèÿ ñõîäíû äëÿ íàâåñîê 25 ã è 50 ã, íî äëÿ íàâåñêè 100 ã ïîëó÷åí áîëåå íèçêèé â ïðî- öåíòàõ ðåçóëüòàò ïðîñåèâàíèÿ ñêâîçü ñàìîå ìåëêîå ñèòî, òî íàâåñêà 100 ã ñëèøêîì âåëèêà äëÿ äàííîãî îáðàçöà). Åñëè â íàëè÷èè èìååòñÿ òîëüêî (10 – 25) ã èñïûòóåìîãî îáðàçöà, äîïóñ- êàåòñÿ çàìåíà àíàëèòè÷åñêèõ ñèò íà ñèòà ìåíü- øåãî äèàìåòðà è ñ ñåòêîé, ñîîòâåòñòâóþùåé òåì æå ñïåöèôèêàöèÿì, îäíàêî êîíå÷íàÿ òî÷êà ïðî- ñåèâàíèÿ äîëæíà áûòü óñòàíîâëåíà çàíîâî. Äî- ïóñêàåòñÿ ïðîâåäåíèå èñïûòàíèÿ ñ íàâåñêîé ìåíüøåé ìàññû (ò.å. íå ìåíåå 5 ã).  ñëó÷àå îá- ðàçöîâ ñ íèçêîé êàæóùåéñÿ (íàñûïíîé) ïëîòíî- ñòüþ ÷àñòèö èëè îáðàçöîâ, ñîñòîÿùèõ áîëüøåé ÷àñòüþ èç ÷àñòèö âûðàæåííîé èçîäèàìåòðè÷å- ñêîé ôîðìû, ìîãóò ïîòðåáîâàòüñÿ íàâåñêè ìàñ- ñîé ìåíåå 5 ã â èñïûòàíèÿõ íà ñèòàõ äèàìåòðîì 200 ìì äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ ÷ðåçìåðíîãî ïðè- ëèïàíèÿ ÷àñòèö ê ñèòó. Ïðè ïðîâåäåíèè âàëèäà- öèè îïðåäåëåííîé ìåòîäèêè àíàëèòè÷åñêîãî ïðîñåèâàíèÿ íåîáõîäèìî îöåíèòü ïðîáëåìû, ñâÿçàííûå ñ çàêóïîðèâàíèåì îòâåðñòèé ñèòà ÷àñòèöàìè èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Ñïîñîáû âñòðÿõèâàíèÿ. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ ñèòîâîãî àíàëèçà ìîãóò èñïîëüçîâàòüñÿ ðàçëè÷- íûå âèäû ñèò è ïðèñïîñîáëåíèé äëÿ âñòðÿõèâà- íèÿ ïîðîøêîâ, èìåþùèåñÿ â ïðîäàæå.
Îäíàêî ðàçëè÷íûå ñïîñîáû âñòðÿõèâàíèÿ ìîãóò äàâàòü ðàçíûå ðåçóëüòàòû ñèòîâîãî àíàëèçà è îïðåäå- ëåíèÿ êîíå÷íûõ òî÷åê ïðîñåèâàíèÿ, òàê êàê íà êàæäóþ ÷àñòèöó âî âðåìÿ èñïûòàíèÿ äåéñòâóþò ñèëû ðàçëè÷íîãî òèïà è âåëè÷èíû.  ñóùåñò- âóþùèõ ïðèáîðàõ èñïîëüçóþò ìåõàíè÷åñêîå èëè ýëåêòðîìàãíèòíîå âñòðÿõèâàíèå; ìåòîäû, âûçûâàþùèå âåðòèêàëüíîå êîëåáàíèå èëè ãîðè- çîíòàëüíîå êðóãîâîå äâèæåíèå ÷àñòèö, âèáðà- öèþ èëè êîìáèíàöèþ âèáðàöèè è ãîðèçîíòàëü- íîãî êðóãîâîãî äâèæåíèÿ ÷àñòèö. Äëÿ âñòðÿõè- âàíèÿ ÷àñòèö äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíåíèå òàêæå âîçäóøíîé ñòðóè.  ðåçóëüòàòàõ äîëæíû áûòü óêàçàíû èñïîëüçóåìûå ìåòîä è ïàðàìåòðû âñòðÿõèâàíèÿ (â ñëó÷àå èõ âîçìîæíîãî èçìåíå- íèÿ), òàê êàê èçìåíåíèå óñëîâèé âñòðÿõèâàíèÿ ìîæåò ïðèâåñòè ê îòëè÷àþùèìñÿ è íåêîððåêò- íûì ðåçóëüòàòàì ñèòîâîãî àíàëèçà è îïðåäåëå- íèÿ êîíå÷íûõ òî÷åê ïðîñåèâàíèÿ. Îïðåäåëåíèå êîíå÷íîé òî÷êè ïðîñåèâà- íèÿ. Ñèòîâîé àíàëèç ñ÷èòàþò çàâåðøåííûì, êî- 142 143 Òàáëèöà 2.1.10.8.-1. — Àíàëèòè÷åñêèå ñèòà èç ìåòàëëè÷åñêîé ñåòêè Íîìèíàëüíûé ðàçìåð îòâåðñòèÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ ISO ÑØÀ ñèòà ¹ Ñèòà, ðåêîìåíäî- âàííûå Ô ÑØÀ (ìêì) Åâðîïåéñêèå ñèòà ¹ ßïîíñêèå ñèòà ¹Îñíîâíîé ðàçìåð Äîïîëíèòåëüíûé ðàçìåð R 20/3 R 20 R 40/3 11,20 ìì 11,20 ìì 11,20 ìì 11 200 10,00 ìì 9,50 ìì 9,00 ìì 8,00 ìì 8,00 ìì 8,00 ìì 7,10 ìì 6,70 ìì 6,30 ìì 5,60 ìì 5,60 ìì 5,60 ìì 5600 3,5 5,00 ìì 4,75 ìì 4 4,50 ìì 4.00 ìì 4,00 ìì 4,00 ìì 5 4000 4000 4,7 3,55 ìì 3,35 ìì 6 5,5 3,15 ìì 2,80 ìì 2,80 ìì 2,80 ìì 7 2800 2800 6,5 2,50 ìì 2,36 ìì 8 7,5 2,24 ìì 2,00 ìì 2,00 ìì 2,00 ìì 10 2000 2000 8,6 1,80 ìì 1,70 ìì 12 10 1,60 ìì 1,40 ìì 1,40 ìì 1,40 ìì 14 1400 1400 12 1,25 ìì 1,18 ìì 16 14 1,12 ìì 1,00 ìì 1,00 ìì 1,00 ìì 18 1000 1000 16 900 ìêì 850 ìêì 20 18 800 ìêì 710 ìêì 710 ìêì 710 ìêì 25 710 710 22 630 ìêì 600 ìêì 30 26 560 ìêì 500 ìêì 500 ìêì 500 ìêì 35 500 500 30 450 ìêì 425 ìêì 40 36 ãäà ìàññà îñòàòêà íà ëþáîì àíàëèòè÷åñêîì ñèòå íå îòëè÷àåòñÿ áîëåå ÷åì íà 5 % èëè íà 0,1 ã (10 % ïðè ïðîñåèâàíèè íà ñèòå äèàìåòðîì 76 ìì) îò åãî ìàññû íà äàííîì ñèòå ïðè ïðåäû- äóùåì âçâåøèâàíèè. Åñëè ìàññà îñòàòêà íà ñèòå ñîñòàâëÿåò ìåíåå 5 % îò îáùåé ìàññû íàâåñêè, òî êîíå÷íóþ òî÷êó ïðîñåèâàíèÿ óâåëè÷èâàþò òàêèì îáðàçîì, ÷òîáû ðàçíîñòü ìàññ íà îäíîì è òîì æå ñèòå ïðè äâóõ ïîâòîðíûõ âçâåøèâàíè- ÿõ ñîñòàâëÿëà íå áîëåå 20 %. Åñëè ìàññà îñòàòêà íà ñèòå ñîñòàâëÿåò áîëåå 50 % îò îáùåé ìàññû íàâåñêè, òî, ïðè îòñóòñò- âèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå, èñïûòàíèå ïîâòîðÿþò ñ äîáàâëåíèåì ê íàáîðó ñèò äîïîëíèòåëüíîãî ñèòà, ïðîìåæó- òî÷íîãî ïî ðàçìåðó îòâåðñòèé ìåæäó ñèòîì, ñî- äåðæàùèì èçáûòî÷íóþ ìàññó îáðàçöà, è ñëåäóþùèì ñèòîì ñ íàèáîëüøèì ðàçìåðîì îòâåðñòèé èç îðèãèíàëüíîãî íàáîðà, ò.å. äîáàâ- ëåíèåì ñèòà èç ñåðèè â ñîîòâåòñòâèè ñ ISO, èñ- êëþ÷åííîãî èç òèïîâîãî íàáîðà ñèò. ÌÅÒÎÄÛ ÏÐÎÑÅÈÂÀÍÈß Ìåõàíè÷åñêîå âñòðÿõèâàíèå (Ìåòîä ñóõî- ãî ïðîñåèâàíèÿ). Êàæäîå àíàëèòè÷åñêîå ñèòî âçâåøèâàþò ñ òî÷íîñòüþ 0,1 ã. Òî÷íóþ íàâåñêó èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïîìåùàþò íà âåðõíåå 144 Íîìèíàëüíûé ðàçìåð îòâåðñòèÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ ISO ÑØÀ ñèòà ¹ Ñèòà, ðåêîìåíäî- âàííûå Ô ÑØÀ (ìêì) Åâðîïåéñêèå ñèòà ¹ ßïîíñêèå ñèòà ¹Îñíîâíîé ðàçìåð Äîïîëíèòåëüíûé ðàçìåð 400 355 ìêì 355 ìêì 355 ìêì 45 355 355 42 315 300 ìêì 50 50 280 ìêì 250 ìêì 250 ìêì 250 ìêì 60 250 250 60 224 ìêì 212 ìêì 70 70 200 ìêì 180 ìêì 180 ìêì 180 ìêì 80 180 180 83 160 ìêì 150 ìêì 100 100 140 ìêì 125 ìêì 125 ìêì 125 ìêì 120 125 125 119 112 ìêì 106 ìêì 140 140 100 ìêì 90 ìêì 90 ìêì 90 ìêì 170 90 90 166 80 ìêì 75 ìêì 200 200 71 ìêì 63 ìêì 63 ìêì 63 ìêì 230 63 63 235 56 ìêì 53 ìêì 270 282 50 ìêì 45 ìêì 45 ìêì 45 ìêì 325 45 45 330 40 ìêì 38 ìêì 38 391 Òàáëèöà 2.1.10.8.-1.
— Îêîí÷àíèå ñèòî (ñ íàèáîëüøèì ðàçìåðîì îòâåðñòèé) è íà- êðûâàþò êðûøêîé. Íàáîð ñèò âñòðÿõèâàþò â òå- ÷åíèå 5 ìèí, çàòåì àêêóðàòíî, áåç ïîòåðè îáðàç- öà, âûíèìàþò êàæäîå ñèòî èç íàáîðà. Âçâåøèâàþò êàæäîå ñèòî è îïðåäåëÿþò ìàñ- ñó îñòàòêà íà êàæäîì ñèòå ïîñëå ïðîñåèâàíèÿ. Àíàëîãè÷íûì îáðàçîì îïðåäåëÿþò ìàññó îñòàò- êà â ñîáèðàòåëüíîé ÷àøêå. Ïîâòîðíî ñîáèðàþò íàáîð ñèò è âñòðÿõèâàþò â òå÷åíèå 5 ìèí. Ñíè- ìàþò êàæäîå ñèòî è âçâåøèâàþò â ñîîòâåòñòâèè ñ îïèñàííûì ðàíåå. Ïîâòîðÿþò ïðîöåäóðó äî äîñòèæåíèÿ êîíå÷íîé òî÷êè ïðîñåèâàíèÿ (ñì. Îïðåäåëåíèå êîíå÷íîé òî÷êè ïðîñåèâàíèÿ â ðàç- äåëå Àíàëèòè÷åñêèå ñèòà). Ïîñëå çàâåðøåíèÿ àíàëèçà ñðàâíèâàþò ìàññû ôðàêöèé èñïûòóåìî- ãî îáðàçöà. Ñóììàðíàÿ ïîòåðÿ ìàññû íå äîëæíà ïðåâûøàòü 5 % îò èñõîäíîé ìàññû íàâåñêè èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà. Ïîâòîðÿþò àíàëèç ñ íîâûì îáðàçöîì, ïðîâîäÿ îäíîêðàòíîå ïðîñåèâàíèå â òå÷åíèå âðåìåíè, ðàâíîãî ñóììàðíîìó âðåìå- íè ïðîñåèâàíèÿ ïðè ïðåäûäóùåì îïðåäåëåíèè. Ïîäòâåðæäàþò, ÷òî äàííîå âðåìÿ ïðîñåèâàíèÿ ñîîòâåòñòâóåò òðåáîâàíèÿì ïî îïðåäåëåíèþ êî- íå÷íîé òî÷êè ïðîñåèâàíèÿ. Åñëè áûëà ïðîâåäåíà âàëèäàöèÿ îïðåäåëå- íèÿ êîíå÷íîé òî÷êè ïðîñåèâàíèÿ äëÿ äàííîãî îáðàçöà, â ïîñëåäóþùèõ èñïûòàíèÿõ äîïóñêà- åòñÿ èñïîëüçîâàíèå îäíîêðàòíîãî ïðîñåèâàíèÿ â òå÷åíèå óñòàíîâëåííîãî ïåðèîäà âðåìåíè ïðè óñëîâèè ñîîòâåòñòâèÿ ðàñïðåäåëåíèÿ ÷àñòèö ïî ðàçìåðó íîðìàëüíîìó ðàñïðåäåëåíèþ. Ïðè íàëè÷èè ïðèçíàêîâ çàäåðæêè íà êà- êîì-ëèáî èç ñèò íå îòäåëüíûõ ÷àñòèö, à èõ àãðå- ãàòîâ, ïðèìåíåíèå ìåòîäà ìåõàíè÷åñêîãî ñóõîãî ïðîñåèâàíèÿ íå îáåñïå÷èò ïîëó÷åíèå ðåçóëüòà- òîâ ñ íàäëåæàùåé âîñïðîèçâîäèìîñòüþ, ÷òî òðåáóåò èñïîëüçîâàíèÿ äðóãîãî ìåòîäà îïðåäå- ëåíèÿ ðàçìåðà ÷àñòèö. Ìåòîäû ñ èñïîëüçîâàíèåì âîçäóõà (âîç- äóøíî-ñòðóéíîå ïðîñåèâàíèå è óëüòðàçâóêî- âîå ïðîñåèâàíèå). Äëÿ ïðîñåèâàíèÿ ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû ðàçëè÷íûå òèïû îáîðóäîâàíèÿ ñ ïðèìåíåíèåì ïîòîêà âîçäóõà. Âîçäóøíî- ñòðóéíîå ïðîñåèâàíèå ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ìå- òîä îäíîêðàòíîãî ïðîñåèâàíèÿ. Ïðè èñïîëüçî- âàíèè äàííîãî ìåòîäà ïðèìåíÿþò ìåòîäèêó, îïèñàííóþ â ðàçäåëå Ìåòîä ñóõîãî ïðîñåèâà- íèÿ, â êîòîðîé îáû÷íûé ìåõàíèçì âñòðÿõèâàíèÿ çàìåíÿþò ñòàíäàðòèçèðîâàííîé âîçäóøíîé ñòðóåé. Äëÿ ïîëó÷åíèÿ ðåçóëüòàòîâ ïî ðàñïðåäåëå- íèþ ÷àñòèö ïî ðàçìåðó ìåòîäèêà òðåáóåò ïðîâå- äåíèÿ ïîñëåäîâàòåëüíûõ èñïûòàíèé íà îòäåëüíûõ ñèòàõ, íà÷èíàÿ ñ ñèòà ñ íàèìåíüøèì ðàçìåðîì îòâåðñòèé. Âîçäóøíî-ñòðóéíîå ïðî- ñåèâàíèå, êàê ïðàâèëî, âêëþ÷àåò ïðèìåíåíèå àíàëèòè÷åñêèõ ñèò ñ ìåíüøèì ðàçìåðîì îòâåð- ñòèé, ÷åì ïðè îáû÷íîì ñóõîì ïðîñåèâàíèè. Äàííûé ìåòîä íàèáîëåå ïîäõîäèò äëÿ ñëó÷àåâ, êîãäà íåîáõîäèìî âûäåëèòü îòäåëüíûå ôðàêöèè ñ íàèáîëüøèì è íàèìåíüøèì ðàçìåðîì ÷àñòèö.  ìåòîäå óëüòðàçâóêîâîãî ïðîñåèâàíèÿ òàê- æå èñïîëüçóþò íàáîð ñèò, à èñïûòóåìûé îáðà- çåö âíîñÿò â êîëîíêó, îáåñïå÷èâàþùóþ âåðòè- êàëüíûå êîëåáàíèÿ âîçäóõà, êîòîðûé ïîäíèìàåò îáðàçåö è çàòåì â òå÷åíèå îïðåäåëåííîãî êîëè- ÷åñòâà èìïóëüñîâ â ìèíóòó âîçâðàùàåò åãî ÷å- ðåç ñèòîâûå îòâåðñòèÿ. Ïðè ïðèìåíåíèè óëüòðà- çâóêîâîãî ïðîñåèâàíèÿ íàâåñêà èñïûòóåìîãî îáðàçöà ìîæåò áûòü óìåíüøåíà äî 5 ã. Ìåòîäû âîçäóøíî-ñòðóéíîãî è óëüòðàçâóêî- âîãî ïðîñåèâàíèÿ ìîãóò áûòü ïðèãîäíû äëÿ ïî- ðîøêîâ èëè ãðàíóë, êîãäà ìåõàíè÷åñêîå ïðîñåè- âàíèå íå ïîçâîëÿåò ïîëó÷èòü äîñòîâåðíûé ðå- çóëüòàò. Óêàçàííûå ìåòîäû â âûñîêîé ñòåïåíè çàâè- ñÿò îò ïðàâèëüíîãî ðàñïðåäåëåíèÿ ÷àñòèö ïî- ðîøêà â âîçäóøíîì ïîòîêå. Äàííîå òðåáîâàíèå ìîæåò áûòü òðóäíî âûïîëíèìûì, åñëè äëÿ ïðî- ñåèâàíèÿ èñïîëüçóþò ñèòà ñ î÷åíü ìåëêèìè ðàç- ìåðàìè îòâåðñòèé (ìåíåå 75 ìêì), åñëè ÷àñòèöû èìåþò òåíäåíöèþ ê ñëèïàíèþ è, îñîáåííî, åñëè îáðàçåö ìîæåò áûòü èñòî÷íèêîì ýëåêòðîñòàòè- ÷åñêîãî çàðÿäà.
Ïî óêàçàííûì âûøå ïðè÷èíàì îïðåäåëåíèå êîíå÷íîé òî÷êè ïðîñåèâàíèÿ ÿâëÿ- åòñÿ îñîáåííî êðèòè÷íûì, à ïîäòâåðæäåíèå òîãî, ÷òî ÷àñòèöû ñ ðàçìåðîì áîëüøå îáû÷íîãî ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé îòäåëüíûå ÷àñòèöû, à íå àãðåãàòû, — ÷ðåçâû÷àéíî âàæíûì. ÎÖÅÍÊÀ ÐÅÇÓËÜÒÀÒΠÏîìèìî ìàññ îñòàòêîâ, ïîëó÷åííûõ íà îò- äåëüíûõ ñèòàõ è â ñîáèðàòåëüíîé ÷àøêå, ïåð- âè÷íûå äàííûå äîëæíû âêëþ÷àòü ìàññó íàâåñ- êè èñïûòóåìîãî îáðàçöà, îáùåå âðåìÿ è òî÷íóþ ìåòîäèêó ïðîñåèâàíèÿ, çàäàííûå âåëè÷èíû âñåõ èçìåíÿåìûõ ïàðàìåòðîâ. Äëÿ óäîáñòâà äîïóñêàåòñÿ ïðåîáðàçîâàíèå ïåðâè÷íûõ äàííûõ â ñóììàðíîå ðàñïðåäåëåíèå ìàññ è âûðàæåíèå ðàñïðåäåëåíèÿ â âèäå ñóì- ìàðíîé ìàññû ÷àñòèö ñ ðàçìåðîì ìåíüøå óñòà- íîâëåííîãî ïðåäåëà. Äèàïàçîí èñïîëüçîâàííûõ ñèò äîëæåí âêëþ÷àòü ñèòî, ñêâîçü êîòîðîå ïðî- õîäèò âåñü èñïûòóåìûé îáðàçåö. Ïðè íàëè÷èè 145 ïðèçíàêîâ òîãî, ÷òî îñòàòîê îáðàçöà, çàäåðæàâ- øèéñÿ íà ñèòå, ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé àãðåãàòû ÷àñòèö, îáðàçîâàâøèåñÿ â ïðîöåññå ïðîñåèâà- íèÿ, èñïûòàíèå ñ÷èòàþò íåäåéñòâèòåëüíûì. 201100009-2022 2.1.10.9. Èçìåëü÷åííîñòü ïîðîøêîâ  íàñòîÿùåé îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ïðèâåäåíà ïðîñòàÿ îïèñàòåëüíàÿ êëàññèôèêà- öèÿ èçìåëü÷åííîñòè ïîðîøêîâ. Äëÿ îïðåäåëå- íèÿ èçìåëü÷åííîñòè ïîðîøêîâ ïðîâîäÿò, êàê ïðàâèëî, ñèòîâîé àíàëèç ñ ïðèìåíåíèåì ñèò îï- ðåäåëåííîãî ðàçìåðà (îáùàÿ ôàðìàêîïåéíàÿ ñòàòüÿ 2.1.1.4. Ñèòà). Ñèòîâîé àíàëèç ÿâëÿåòñÿ íàèáîëåå ïðèãîäíûì, åñëè ðàçìåð ÷àñòèö ïî- ðîøêà ïðåâûøàåò 75 ìêì, à òàêæå äëÿ îòäåëü- íûõ ïîðîøêîâ, èìåþùèõ è ìåíüøèé ðàçìåð ÷àñòèö, åñëè òàêàÿ ìåòîäèêà âàëèäèðîâàíà. Ðàñïðåäåëåíèå ïî ðàçìåðàì ÷àñòèö ïîðîø- êîâ óñòàíàâëèâàþò ìåòîäîì àíàëèòè÷åñêîãî ïðîñåèâàíèÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ îáùåé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüåé 2.1.10.8. Îöåíêà ðàñïðåäåëåíèÿ ÷àñòèö ïî ðàçìåðó ìåòîäîì àíàëèòè÷åñêîãî ïðîñåèâàíèÿ èëè äðóãèìè ðåëåâàíòíûìè ìåòî- äàìè. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ðàñïðåäåëåíèÿ ïî ðàç- ìåðàì ÷àñòèö øèðîêîãî äèàïàçîíà èñïîëüçóþò òàêæå ìåòîä äèôðàêöèè ñâåòà (îáùàÿ ôàðìàêî- ïåéíàÿ ñòàòüÿ 2.1.9.26. Îïðåäåëåíèå ðàçìåðà ÷àñòèö ìåòîäîì äèôðàêöèè ëàçåðíîãî èçëó÷å- íèÿ), ïîçâîëÿþùèé èçìåðÿòü ÷àñòèöû â äèàïà- çîíå îò 0,1 ìêì äî 3,0 ìì. Ïðè îïðåäåëåíèè ñóììàðíîãî ðàñïðåäåëå- íèÿ ìåòîäîì àíàëèòè÷åñêîãî ïðîñåèâàíèÿ èëè äðóãèìè ïîäõîäÿùèìè ìåòîäàìè, ðàçìåð ÷àñ- òèö ìîæåò áûòü îïèñàí ñëåäóþùèì îáðàçîì: õ90 — ðàçìåð ÷àñòèö, ñîîòâåòñòâóþùèé 90 % îò ñóììàðíîãî ðàñïðåäåëåíèÿ ÷àñòèö, ïðîõîäÿ- ùèõ ñêâîçü ñèòî; õ50 — ñðåäíèé ðàçìåð ÷àñòèö (ò.å. 50 % ÷àñ- òèö ìåíüøåãî ðàçìåðà è 50 % ÷àñòèö áîëüøåãî ðàçìåðà); õ10 — ðàçìåð ÷àñòèö, ñîîòâåòñòâóþùèé 10 % îò ñóììàðíîãî ðàñïðåäåëåíèÿ ÷àñòèö, ïðîõîäÿ- ùèõ ñêâîçü ñèòî. Äëÿ îáîçíà÷åíèÿ äàííûõ âåëè÷èí øèðîêî ïðèìåíÿþò òàêæå ñèìâîë d. Òàêèì îáðàçîì, äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå ñèìâîëîâ d90, d50, d10. Íà îñíîâå ñóììàðíîãî ðàñïðåäåëåíèÿ (Qr (x)) ìîãóò áûòü îïðåäåëåíû ïàðàìåòðû ïî- ðîøêà, èñïîëüçóåìûå â òåõíîëîãè÷åñêèõ ïðî- öåññàõ ïðîèçâîäñòâà ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ. Ýòè ïàðàìåòðû îòðàæåíû â òàáëèöå 2.1.10.9.-1. Qr(x) — ñóììàðíîå ðàñïðåäåëåíèå ÷àñòèö ñ ðàçìåðàìè íå áîëåå x, ãäå èíäåêñ r îòðàæàåò òèï ðàñïðåäåëåíèÿ. Òàêèì îáðàçîì, ñîãëàñíî ýòîìó îïðåäåëå- íèþ: Qr(x) =0,90, åñëè õ = õ90; Qr(x) =0,50, åñëè õ = õ50; Qr(x) =0,10, åñëè õ = õ10. Òàêæå ìîæåò áûòü èñïîëüçîâàí äðóãîé ìå- íåå èíôîðìàòèâíûé ìåòîä êëàññèôèêàöèè èç- ìåëü÷åííîñòè ïîðîøêîâ, èñïîëüçóþùèé óêà- çàííûå äàííûå äëÿ îïèñàíèÿ ðàñïðåäåëåíèÿ ÷àñòèö ïî ðàçìåðàì, ïðåäñòàâëåííûé â òàáëèöå 2.1.10.9.-2. 146 Òàáëèöà 2.1.10.9.-1. — Òèï ðàñïðåäåëåíèÿ r Òèï ðàñïðåäåëåíèÿ 0 ×èñëî 1 Äëèíà 2 Ïëîùàäü 3 Îáúåì Òàáëèöà 2.1.10.9.-2.
— Êëàññèôèêàöèÿ ïîðîøêîâ ïî èõ èçìåëü÷åííîñòè Òåðìèí, èñïîëüçóå- ìûé äëÿ îïèñàíèÿ ïîðîøêîâ õ50 (ìêì) Ñóììàðíîå ðàñïðåäå- ëåíèå íà îñíîâå îáúåìà, Q3(x) Êðóïíûé >355 Q3 (355) < 0,50 Ñðåäíåêðóïíûé 180 — 355 Q3 (180) < 0,50 è Q3 (355) ³ 0,50 Ìåëêèé 125 — 180 Q3 (125) < 0,50 è Q3 (180) ³ 0,50 Î÷åíü ìåëêèé £ 125 Q3 (125) ³ 0,50 2.2. ÐÅÀÊÒÈÂÛ 147 2.2.1. ÐÅÀÊÒÈÂÛ, ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÅ ÐÀÑÒÂÎÐÛ, ÁÓÔÅÐÍÛÅ ÐÀÑÒÂÎÐÛ 202010001-2022 2.2.1.1. Ðåàêòèâû ÄÎÏÎËÍÅÍÈÅ Àçîòíàÿ êèñëîòà, ñâîáîäíàÿ îò íèêåëÿ. Äîëæíà âûäåðæèâàòü äîïîëíèòåëüíîå èñ- ïûòàíèå äëÿ àçîòíîé êèñëîòû Ð. Íèêåëü: íå áî- ëåå 0,005 ppm. Áåòóëèí â ìåòèëåíõëîðèäå. Ðàñòâîð 2 ã/ë Ñ30Í50Î2 â ìåòèëåíõëîðèäå Ð. Áðîìôåíîëîâûé ñèíèé â 96 % ýòàíîëå. Ðàñòâîð 0,4 ã/ë Ñ19Í10Br4O5Sâ ýòàíîëå (96 %) Ð. òðåò-Áóòèëãèäðîïåðîêñèä â òåòðàãèäðî- ôóðàíå. Ðàñòâîð 10 ã/ë C4H10O2 â òåòðàãèäðîôóðàíå Ð. Áóòèëèðîâàííûé ãèäðîêñèòîëóîë â òðè- ìåòèëïåíòàíå. Ðàñòâîð 50 ìã/ë C15H24O â òðèìåòèëïåíòà- íå Ð. 1,1,1,3,3,3-Ãåêñàôòîðïðîïàí-2-îë. C3H2F6O. (Mr 168,0). [920-66-1]. Cîäåðæèò íå ìåíåå 99,0 % C3H2F6O. Îïðå- äåëåíèå ïðîâîäèòñÿ ìåòîäîì ãàçîâîé õðîìàòî- ãðàôèè. Ïðîçðà÷íàÿ áåñöâåòíàÿ æèäêîñòü, ñìåøèâà- åòñÿ ñ âîäîé è ýòàíîëîì áåçâîäíûì. d 20 20 îêîëî 1,596. Òåìïåðàòóðà êèïåíèÿ îêîëî 59 °C. Äèîêñàíà ðàñòâîð Ð2. 2,0 ìë äèîêñàíà ðàñòâîðà Ð äîâîäÿò âîäîé Ð äî îáúåìà 50,0 ìë (0,02 ìã/ìë äèîêñàíà). 2,2¢-Äè(îêòàäåöèëîêñè)-5,5¢-ñïèðîáè(1,3,2-äè- îêñàôîñôîðèíàí). C41H82O6P2. (Mr 733,0). Äîáàâêà ê ïîëèìåð- íîìó ìàòåðèàëó 14. Òâåðäîå âîñêîîáðàçíîå âåùåñòâî áåëîãî èëè ïî÷òè áåëîãî öâåòà. Ïðàêòè÷åñêè íå ðàñòâîðèì â âîäå, ðàñòâîðèì â óãëåâîäîðîäàõ. Òåìïåðàòóðà ïëàâëåíèÿ îò 40 °C äî 70 °C. Äèíîíèëôòàëàò â òåòðàãèäðîôóðàíå äëÿ õðîìàòîãðàôèè. Ðàñòâîð 1 ìã/ë C26H42O4 â òåòðàãèäðîôóðà- íå äëÿ õðîìàòîãðàôèè Ð. Äèíîíèëôòàëàò â 96 % ýòàíîëå. Ðàñòâîð 5 ìêã/ë C26H42O4 â ýòàíîëå (96 %) Ð. Äèòèçîí â ìåòèëåíõëîðèäå. Ðàñòâîð 0,02 ã/ë C13H12N4S â ìåòèëåíõëî- ðèäå Ð. Äèõëîðôåíîëèíäîôåíîëà íàòðèåâàÿ ñîëü â 96 % ýòàíîëå. Ðàñòâîð 2 ã/ë Cl2H6Cl2NNaO2·2Í2Î â ýòàíîëå (96 %) Ð. Äèõëîðôëóîðåñöåèí â 96 % ýòàíîëå. Ðàñòâîð 2 ã/ë C20H10Cl2O5 â ýòàíîëå (96 %) Ð. Äîêîçàãåêñàåíîâîé êèñëîòû ìåòèëîâûé ýôèð. Ñ23Í34Î2. (Mr 342,5). [301-01-9]. Öåðâîíî- âîé êèñëîòû ìåòèëîâûé ýôèð. (all-Z)-Äîêîçà-4,7,10,13,16,19-ãåêñàåíîâîé êèñëîòû ìåòèëîâûé ýôèð. Ñîäåðæèò íå ìåíåå 90,0 % Ñ23Í34Î2. Îïðå- äåëåíèå ïðîâîäÿò ìåòîäîì ãàçîâîé õðîìàòîãðà- ôèè. Èçîïðîïèëìåòàíñóëüôîíàò. C4H10O3S. (Mr 138,2). [926-06-7]. 1-ìåòèëýòèëìåòàíñóëüôîíàò. Ïðîçðà÷íàÿ áåñöâåòíàÿ æèäêîñòü. Ñîäåðæèò íå ìåíåå 99,0 % C4H10O3S. Ïëîòíîñòü îêîëî 1,129 ã/ñì3 (ïðè 20 °C). nD 20 îò 1,418 äî 1,421. Òåìïåðàòóðà êèïåíèÿ îêîëî 82 °C ïðè äàâ- ëåíèè 6 ìì ðò. ñò. 148 Êàëèÿ ãèäðîêñèä â ìåòàíîëå. Ðàñòâîð 60 ã/ë KOH â ìåòàíîëå Ð. Ìåòàíñóëüôîíèëõëîðèä. CH3ClO2S. (Mr 114,6). [124-63-0]. Ïðîçðà÷íàÿ áåñöâåòíàÿ èëè æåëòîâàòàÿ æèäêîñòü. Ñîäåðæèò íå ìåíåå 99,0 % CH3ClO2S. Ïëîòíîñòü îêîëî 1,48 ã/ñì3. nD 20 îêîëî 1,452. Òåìïåðàòóðà êèïåíèÿ îêîëî 161 °C. Ìåòèëìåòàíñóëüôîíàò. C2H6O3S. (Mr 110,1). [66-27-3]. Ïðîçðà÷íàÿ áåñöâåòíàÿ èëè æåëòîâàòàÿ æèäêîñòü. Ñîäåðæèò íå ìåíåå 99,0 % C2H6O3S. Ïëîòíîñòü îêîëî 1,3 ã/ñì3 (ïðè 25 °C). nD 20 îêîëî 1,414. Òåìïåðàòóðà êèïåíèÿ îêîëî 202 °C. Íàòðèÿ éîäèä â óêñóñíîé êèñëîòå áåçâîä- íîé. Ðàñòâîð 200 ã/ë NaI â óêñóñíîé êèñëîòå áåç- âîäíîé Ð. Íàòðèÿ òåòðàãèäðîáîðàò. NaBH4. (Mr 37,8). [16940-66-2]. Íàòðèÿ áîðîãèäðàò. Áåñöâåòíûå ãèãðîñêîïè÷íûå êðèñòàëëû. Î÷åíü ëåãêî ðàñòâîðèì â âîäå, ðàñòâîðèì â ýòà- íîëå áåçâîäíîì. Ðàçëàãàåòñÿ ïðè âûñîêîé òåì- ïåðàòóðå èëè ïîä äåéñòâèåì êèñëîò èëè íåêîòî- ðûõ ñîëåé ìåòàëëîâ, îáðàçóÿ áóðó è âîäîðîä. Õðàíÿò â âîçäóõîíåïðîíèöàåìîì êîíòåé- íåðå. Íàòðèÿ òåòðàãèäðîáîðàòà ðàñòâîð.
5,0 ã íàòðèÿ ãèäðîêñèäà Ð â ãðàíóëàõ èëè ïëàñòèíêàõ è 2,5 ã òåòðàáîðàòà Ð ðàñòâîðÿþò â 100 ìë âîäû Ð è äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âîäîé Ð äî 500,0 ìë. Ðàñòâîð ãîòîâÿò íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èñ- ïîëüçîâàíèåì. Íàôòèëàìèí â 0,1 Ì õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòå. Ðàñòâîð 0,01 ã/ë C10H9N â 0,1 Ì õëîðîâîäî- ðîäíîé êèñëîòå. Íèêåëÿ íèòðàòà ãåêñàãèäðàò. Ni(NO3)2·6H2O. (Mr 290,8). [13478-00-7]. Íèêåëÿ ñóëüôàò. NiSO4·7H2O. (Mr 280,9). [10101-98-1]. Íèêåëÿ ñóëüôàòà ãåïòàãèäðàò. Êðèñòàëëè÷åñêèé ïîðîøîê èëè êðèñòàëëû çåëåíîãî öâåòà. Ëåãêî ðàñòâîðèì â âîäå, ìàëî ðàñòâîðèì â 96 % ýòàíîëå. Îêòàäåöèë[3-[3,5-áèñ(1,1-äèìåòèëýòèë)- 4-ãèäðîêñèôåíèë]ïðîïèîíàò]. Ñ35Í62Î3. (Mr 530,9). [2082-79-3]. Îêòàäåöèë 3-(3,5-äè-òðåò-áóòèë-4-ãèäðî- êñèôåíèë)ïðîïèîíàò. Äîáàâêà ê ïîëèìåðíîìó ìàòåðèàëó 11. Êðèñòàëëè÷åñêèé ïîðîøîê áåëîãî èëè ñëåã- êà æåëòîâàòîãî öâåòà. Ïðàêòè÷åñêè íå ðàñòâî- ðèì â âîäå, õîðîøî ðàñòâîðèì â àöåòîíå è ãåêñà- íå, ìàëî ðàñòâîðèì â ìåòàíîëå. Òåìïåðàòóðà ïëàâëåíèÿ îò 49 °C äî 55 °C. Îëîâà(II) õëîðèä â 1 Ì õëîðîâîäîðîäíîé êèñëîòå. Ðàñòâîð 250 ã/ë SnCl2·2Í2Î â 1 Ì õëîðîâîäî- ðîäíîé êèñëîòå. Òåòðàáóòèëàììîíèÿ ãèäðîêñèä â òîëóîëå. Ðàñòâîð 10 ã/ë C16H37NO·30Í2Î â òîëóîëå Ð. Òåòðàêîç-15-åíîâîé êèñëîòû ìåòèëîâûé ýôèð. Ñ25Í48Î2. (Mr 380,7). [2733-88-2]. 15-Òåò- ðàêîçåíîâîé êèñëîòû ìåòèëîâûé ýôèð. Ìåòèëòåòðàêîç-15-åíîàò. Íåðâîíîâîé êè- ñëîòû ìåòèëîâûé ýôèð. Ñîäåðæèò íå ìåíåå 99,0 % Ñ25Í48Î2. Îïðå- äåëåíèå ïðîâîäÿò ìåòîäîì ãàçîâîé õðîìàòîãðà- ôèè. N,O-áèñ(Òðèìåòèëñèëèë)òðèôòîðàöåòà- ìèä. C8H18F3NOSi2. (Mr 257,4). [25561-30-2]. Áåñöâåòíàÿ æèäêîñòü. d 20 20 îêîëî 0,97. nD 20 îêîëî 1,38. Òåìïåðàòóðà êèïåíèÿ îêîëî 40 °C ïðè äàâ- ëåíèè 12 ìì ðò. ñò. a-Òîêîôåðîë. [10191-41-0]. Ñì. Òîêîôåðîë. 149 1,3,5-Òðèñ[3,5-äè(1,1-äèìåòèëýòèë)-4-ãèä- ðîêñèáåíçèë]-1,3,5-òðèàçèí-2,4,6(1Í,3Í,5Í)- òðèîí. Ñ48Í69Î6N3. (Mr 784,1). [27676-62-6]. Äîáàâêà ê ïîëèìåðíîìó ìàòåðèàëó 13. Êðèñòàëëè÷åñêèé ïîðîøîê áåëîãî èëè ïî÷- òè áåëîãî öâåòà. Òåìïåðàòóðà ïëàâëåíèÿ îò 218 °C äî 222 °C. Òðèñ[2,4-äè(1,1-äèìåòèëýòèë)ôåíèë]ôîñ- ôèò. C42H63O3P. (Mr 647,0). [31570-04-4]. Äîáàâêà ê ïîëèìåðíîìó ìàòåðèàëó 12. Ïîðîøîê áåëîãî èëè ïî÷òè áåëîãî öâåòà. Òåìïåðàòóðà ïëàâëåíèÿ îò 182 °C äî 186 °C. ÒÑÕ ïëàñòèíêà ñî ñëîåì ñèëèêàãåëÿ îê- òàäåöèëñèëèëüíîãî. Ïîäëîæêà èç ñòåêëà, ìåòàëëà èëè ïîëèìåðà, ïîêðûòàÿ ñëîåì ñèëèêàãåëÿ îêòàäåöèëñèëèëü- íîãî. Ñîðáåíò ìîæåò ñîäåðæàòü ñâÿçóþùåå îð- ãàíè÷åñêîå âåùåñòâî. ÒÑÕ ïëàñòèíêà ñî ñëîåì ñèëèêàãåëÿ îê- òàäåöèëñèëèëüíîãî F254. Ïîäëîæêà èç ñòåêëà, ìåòàëëà èëè ïîëèìåðà, ïîêðûòàÿ ñëîåì ñèëèêàãåëÿ îêòàäåöèëñèëèëü- íîãî. Ñîäåðæèò ôëóîðåñöåíòíûé èíäèêàòîð ñ ìàêñèìóìîì ïîãëîùåíèÿ ïðè äëèíå âîëíû 254 íì. Ôåíèë(5)ìåòèë(95)ïîëèñèëîêñàí. Íåïîäâèæíàÿ ôàçà äëÿ ãàçîâîé õðîìàòîãðà- ôèè. Ñîäåðæèò 5 % ôåíèëüíûõ ãðóïï è 95 % ìå- òèëüíûõ ãðóïï. Ôîñôîðíîìîëèáäåíîâàÿ êèñëîòà â 96 % ýòàíîëå. Ðàñòâîð 40 ã/ë 12MoO3·H3PO4·Í2Î â ýòàíîëå (96 %) Ð. (5a)-Õîëåñòàí. Ñ27Í48. (Mr 372,7). [481-21-0]. Ìàëî ðàñòâîðèì â ýòàíîëå áåçâîäíîì. Òåìïåðàòóðà ïëàâëåíèÿ îêîëî 81 °C. Õðîìîòðîïîâîé êèñëîòû íàòðèåâàÿ ñîëü â ñåðíîé êèñëîòå. Ðàñòâîð 1 ã/ë C10H6Na2O8S2 â ñåðíîé êèñëî- òå Ð. 202010002-2022 2.2.1.2. Ñòàíäàðòíûå ðàñòâîðû äëÿ èñïûòàíèé íà ïðåäåëüíîå ñîäåðæàíèå ïðèìåñåé ÄÎÏÎËÍÅÍÈÅ Ôòîðèä-èîíîâ ñòàíäàðòíûé ðàñòâîð (100 ppm F–). 4,199 ã íàòðèÿ ôòîðèäà P, ïðåäâàðèòåëüíî âûñóøåííîãî ïðè òåìïåðàòóðå 300 °Ñ â òå÷åíèå 12 ÷, ðàñòâîðÿþò â âîäå Ð è äîâîäÿò îáúåì ðàñ- òâîðà òåì æå ðàñòâîðèòåëåì äî 1000,0 ìë (2000 ìêã/ìë F–). Ðàñòâîð õðàíÿò â ïîëèýòèëåíîâîì èëè ïîëè- ïðîïèëåíîâîì êîíòåéíåðå ïðè êîìíàòíîé òåì- ïåðàòóðå íå áîëåå 3 ìåñ. 150 2.3. ÎÁÙÈÅ ÒÅÊÑÒÛ 151 203010002-2022 2.3.1.2.
Òðåáîâàíèÿ ê ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé ÷èñòîòå ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé è âñïîìîãàòåëüíûõ âåùåñòâ äëÿ èõ ïðîèçâîäñòâà Íàñòîÿùàÿ îáùàÿ ôàðìàêîïåéíàÿ ñòàòüÿ îï- ðåäåëÿåò êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè ìèêðîáèîëî- ãè÷åñêîé ÷èñòîòû ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé è âñïîìîãàòåëü- íûõ âåùåñòâ äëÿ èõ ïðîèçâîäñòâà. Íåñòåðèëüíûå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà ìî- ãóò áûòü êîíòàìèíèðîâàíû ìèêðîîðãàíèçìàìè. Äîïóñêàåòñÿ ëèìèòèðîâàííîå êîëè÷åñòâî áàê- òåðèé è ãðèáîâ ïðè îòñóòñòâèè îïðåäåëåííûõ âèäîâ, ïðåäñòàâëÿþùèõ îïàñíîñòü äëÿ çäîðîâüÿ ÷åëîâåêà. Ïðèñóòñòâèå ìèêðîîðãàíèçìîâ â íå- ñòåðèëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòàõ ìîæåò îêàçàòü íåáëàãîïðèÿòíîå âîçäåéñòâèå íà çäîðî- âüå ïàöèåíòà è ïðèâåñòè ê ñíèæåíèþ òåðàïåâòè- ÷åñêîé ýôôåêòèâíîñòè ïðåïàðàòà. Ïîýòîìó ïðî- èçâîäèòåëè äîëæíû îáåñïå÷èòü ñîîòâåòñòâóþ- ùèé óðîâåíü ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé ÷èñòîòû ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ ïóòåì âûïîëíåíèÿ äåé- ñòâóþùèõ ðóêîâîäñòâ ïî íàäëåæàùåé ïðàêòèêå ïðîèçâîäñòâà, õðàíåíèÿ è äèñòðèáüþöèè ëåêàð- ñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ (GõP). Ìèêðîáèîëîãè÷åñêîå èñïûòàíèå íåñòåðèëü- íûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ ïðîâîäÿò â ñîîò- âåòñòâèè ñ ìåòîäàìè, ïðèâåäåííûìè â îáùèõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòüÿõ 2.1.6.6. Ìèêðîáèîëîãè- ÷åñêèå èñïûòàíèÿ íåñòåðèëüíûõ ëåêàðñòâåí- íûõ ñðåäñòâ: îáùåå êîëè÷åñòâî æèçíåñïîñîá- íûõ àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ è 2.1.6.7. Ìèê- ðîáèîëîãè÷åñêèå èñïûòàíèÿ íåñòåðèëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ íà íàëè÷èå îòäåëüíûõ âèäîâ ìèêðîîðãàíèçìîâ. Äëÿ íåñòåðèëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðà- òîâ êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè, îñíîâàííûå íà ïîäñ÷åòå îáùåãî ÷èñëà àýðîáíûõ ìèêðîîðãà- íèçìîâ (Î×Ì, ÒÀÌÑ) è îáùåãî ÷èñëà äðîææå- âûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ (Î×Ã, TYMC), ïðèâå- äåíû â òàáëèöå 2.3.1.2.-1. Êðèòåðèè ïðèåìëåìî- ñòè óñòàíàâëèâàþò íà îñíîâàíèè îòäåëüíûõ ðåçóëüòàòîâ èëè íà ñðåäíåì çíà÷åíèè âñåõ ïîä- ñ÷åòîâ ïðè èñïîëüçîâàíèè ðåïëèêàöèè (íàïðè- ìåð, ìåòîä ïðÿìîãî ïîñåâà). Ðåçóëüòàòû èíòåð- ïðåòèðóþò ñëåäóþùèì îáðàçîì: – 101 ÊÎÅ èëè íå áîëåå 101 ÊÎÅ — ìàêñè- ìàëüíî äîïóñòèìîå ÷èñëî 20 ÊÎÅ/ã (ìë); – 102 ÊÎÅ èëè íå áîëåå 102 ÊÎÅ — ìàêñè- ìàëüíî äîïóñòèìîå ÷èñëî 200 ÊÎÅ/ã (ìë); – 103 ÊÎÅ èëè íå áîëåå 103 ÊÎÅ — ìàêñè- ìàëüíî äîïóñòèìîå ÷èñëî 2000 ÊÎÅ/ã (ìë). Óêàçàíèå òðåáîâàíèé â âèäå «íå áîëåå 100 ÊÎÅ/ã (ìë)» èëè «íå áîëåå 200 ÊÎÅ/ã (ìë)» îçíà÷àåò, ÷òî êîëè÷åñòâî îáíàðóæèâàåìûõ àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ è äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ íå äîëæíî ïðåâûøàòü óêà- çàííîãî ÷èñëà. Ïðè óñòàíîâëåíèè íîðìàòèâíûõ òðåáîâàíèé ê êà÷åñòâó ïî ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé ÷èñòîòå îò- äåëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ è ñîñòàâëåíèè íîðìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïî êà÷åñòâó ìîãóò ïðèìåíÿòüñÿ êàê öèôðîâûå îáîçíà÷åíèÿ êàòåãî- ðèé, òàê è óêàçàíèå òðåáîâàíèé ê êà÷åñòâó ïî ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé ÷èñòîòå â ñîîòâåòñòâèè ñî ñïîñîáîì ïðèìåíåíèÿ. Äëÿ ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé, èñïîëü- çóåìûõ â ïðîèçâîäñòâå ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðà- òîâ (çà èñêëþ÷åíèåì ðàñòèòåëüíûõ ôàðìàöåâòè- ÷åñêèõ ñóáñòàíöèé), îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ äîëæíî ñîñòàâëÿòü íå áîëåå 103 ÊÎÅ â 1 ã (ìë), à îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ – íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë). Íà îñíîâàíèè àíàëèçà ðèñêîâ ïðîèçâîäèòå- ëåì ìîãóò áûòü óñòàíîâëåíû èíûå êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè êà÷åñòâà ïî ìèêðîáèîëîãè÷å- ñêîé ÷èñòîòå ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé è âñïîìîãàòåëüíûõ âåùåñòâ. Ïðè ýòîì ó÷èòûâà- þò îñîáåííîñòè ïðîèçâîäñòâåííîãî ïðîöåññà è íàçíà÷åíèÿ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, â ïîëó- ÷åíèè êîòîðîãî èñïîëüçóåòñÿ ôàðìàöåâòè÷åñêàÿ ñóáñòàíöèÿ, à òàêæå íàëè÷èå âñïîìîãàòåëüíûõ âåùåñòâ òðåáóåìîãî êà÷åñòâà (òàáëèöà 2.3.1.2.-2). 152 Òàáëèöà 2.3.1.2.-1.
— Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè êà÷åñòâà ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ ïî ìèêðîáèîëîãè÷åñêèì ïîêàçàòåëÿì Êàòå- ãîðèÿ Ñïîñîá ïðèìåíåíèÿ èëè ïóòü ââåäåíèÿ Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè 1 Ëåêàðñòâåííûå ïðåïàðàòû, ê êîòîðûì ïðåäúÿâëÿåòñÿ òðåáîâàíèå Ñòåðèëü- íîñòü Äîëæíû áûòü ñòåðèëüíûìè 153 Êàòå- ãîðèÿ Ñïîñîá ïðèìåíåíèÿ èëè ïóòü ââåäåíèÿ Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè 2 l Äëÿ ïðèìåíåíèÿ ìåñòíî (íà ñëèçè- ñòóþ îáîëî÷êó ïîëîñòè ðòà, íàçàëüíî, ââåäåíèå â íàðóæíûé ñëóõîâîé ïðîõîä è äð.) è (èëè) íàðóæíî (íà íåïîâðåæ- äåííûå è (èëè) ïîâðåæäåííûå êîæíûå ïîêðîâû) Çà èñêëþ÷åíèåì òåõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, êîòîðûå äîëæíû áûòü ñòå- ðèëüíûìè l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) ïðåïàðàòà l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 101 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Pseudomonas aeruginosa â 1 ã (ìë) ïðåïàðàòà l Îòñóòñòâèå Staphylococcus aureus â 1 ã (ìë) ïðåïàðàòà l Äëÿ âàãèíàëüíîãî ïðèìåíåíèÿ Çà èñêëþ÷åíèåì òåõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, êîòîðûå äîëæíû áûòü ñòå- ðèëüíûìè l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) ïðåïàðàòà l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 101 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Pseudomonas aeruginosa â 1 ã (ìë) ïðåïàðàòà l Îòñóòñòâèå Staphylococcus aureus â 1 ã (ìë) ïðåïàðàòà l Îòñóòñòâèå Candida albicans â 1 ã (ìë) l Äëÿ èíãàëÿöèîííîãî ïðèìåíåíèÿ Çà èñêëþ÷åíèåì òåõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, êîòîðûå äîëæíû áûòü ñòå- ðèëüíûìè l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) ïðåïàðàòà l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 101 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Pseudomonas aeruginosa â 1 ã (ìë) ïðåïàðàòà l Îòñóòñòâèå Staphylococcus aureus â 1 ã (ìë) ïðåïàðàòà l Îòñóòñòâèå ýíòåðîáàêòåðèé, óñòîé÷èâûõ ê æåë÷è, â 1 ã (ìë) ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ l Òðàíñäåðìàëüíûå ïëàñòûðè Çà èñêëþ÷åíèåì òåõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, êîòîðûå äîëæíû áûòü ñòå- ðèëüíûìè l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ íà 1 ïëàñòûðå (âêëþ÷àÿ êëåéêóþ ñòîðîíó è îñíîâó) l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 101 ÊÎÅ íà 1 ïëàñòûðå (âêëþ÷àÿ êëåéêóþ ñòîðîíó è îñíîâó) l Îòñóòñòâèå Pseudomonas aeruginosa íà 1 ïëàñòûðå (âêëþ- ÷àÿ êëåéêóþ ñòîðîíó è îñíîâó) l Îòñóòñòâèå Staphylococcus aureus íà 1 ïëàñòûðå (âêëþ÷àÿ êëåéêóþ ñòîðîíó è îñíîâó) 3À Òâåðäûå (íåâîäíûå) ïðåïàðàòû äëÿ ïðèåìà âíóòðü l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 103 ÊÎÅ â 1 ã l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã l Îòñóòñòâèå Escherichia coli â 1 ã Æèäêèå ïðåïàðàòû äëÿ ïðèåìà âíóòðü l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 101 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Escherichia coli â 1 ã (ìë) Ïðåïàðàòû äëÿ ââåäåíèÿ ðåêòàëüíî l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 103 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) 3Á Äëÿ ïðèåìà âíóòðü — èç ñûðüÿ ïðèðîä- íîãî ïðîèñõîæäåíèÿ, óðîâåíü ìèêðîá- íîé çàãðÿçíåííîñòè êîòîðîãî íåâîç- ìîæíî ñíèçèòü â ïðîöåññå ïðåäâàðè- òåëüíîé îáðàáîòêè. Òðåáîâàíèÿ ê ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé ÷èñòîòå ðàñòèòåëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ ïðèâåäåíû â îáùåé ôàðìà- êîïåéíîé ñòàòüå 2.3.1.4. l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 104 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Ýíòåðîáàêòåðèé, óñòîé÷èâûõ ê æåë÷è, — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Escherichia coli â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå áàêòåðèé ðîäà Salmonella spp. â 10 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Staphylococcus aureus â 1 ã (ìë) Òàáëèöà 2.3.1.2.-1. — Ïðîäîëæåíèå 154 Òàáëèöà 2.3.1.2.-2.
— Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè êà÷åñòâà ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé è âñïîìîãàòåëüíûõ âåùåñòâ äëÿ ïðîèçâîäñòâà ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ ïî ìèêðîáèîëîãè÷åñêèì ïîêàçàòåëÿì Êàòå- ãîðèÿ Ôàðìàöåâòè÷åñêèå ñóáñòàíöèè Âñïîìîãàòåëüíûå âåùåñòâà Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè 1.2.À. Ôàðìàöåâòè÷åñêèå ñóáñòàíöèè è âñïîìîãàòåëü- íûå âåùåñòâà äëÿ ïðîèçâîäñòâà ñòåðèëüíûõ ëå- êàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, êîòîðûå íå ïîäâåðãà- þòñÿ ñòåðèëèçàöèè Äîëæíû áûòü ñòåðèëüíûìè 1.2.Á. Ôàðìàöåâòè÷åñêèå ñóáñòàíöèè è âñïîìîãàòåëü- íûå âåùåñòâà äëÿ ïðîèçâîäñòâà: – ñòåðèëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, êî- òîðûå ïîäâåðãàþòñÿ ñòåðèëèçàöèè â óïàêîâêå; – ñòåðèëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, ïðè ïðîèçâîäñòâå/èçãîòîâëåíèè êîòîðûõ äëÿ îáåñ- ïå÷åíèÿ ñòåðèëüíîñòè èñïîëüçóåòñÿ ñòåðèëè- çóþùàÿ ôèëüòðàöèÿ; – íåñòåðèëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, îòíîñÿùèõñÿ ê êàòåãîðèè 2 l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 101 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå ýíòåðîáàêòåðèé, óñòîé÷èâûõ ê æåë- ÷è, â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Pseudomonas aeruginosa â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Staphylococcus aureus â 1 ã (ìë) 2.2 Ôàðìàöåâòè÷åñêèå ñóáñòàíöèè è âñïîìîãàòåëü- íûå âåùåñòâà ñèíòåòè÷åñêîãî ïðîèñõîæäåíèÿ äëÿ ïðîèçâîäñòâà íåñòåðèëüíûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 103 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Escherichia coli â 1 ã (ìë) 3.2 Ôàðìàöåâòè÷åñêèå ñóáñòàíöèè ïðèðîäíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ äëÿ ïðîèçâîäñòâà íåñòåðèëü- íûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ. Êðèòåðèè ïðèåìëåìîñòè ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé ÷èñòîòû ëåêàðñòâåííîãî ðàñòèòåëüíîãî ñûðüÿ / ðàñòèòåëüíûõ ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé ïðèâåäåíû â îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå 2.3.1.4 l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 104 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Escherichia coli â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå áàêòåðèé ðîäà Salmonella â 25 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Pseudomonas aeruginosa â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Staphylococcus aureus â 1 ã (ìë) l Ýíòåðîáàêòåðèé, óñòîé÷èâûõ ê æåë÷è, íå áîëåå 102 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) Ïðèìå÷àíèÿ ê òàáëèöàì 2.3.1.2.-1 è 2.3.1.2.-2: 1. Ïðè îáíàðóæåíèè âî âðåìÿ ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ äðóãèõ ïàòîãåííûõ áàêòåðèé, êðîìå óêàçàííûõ âûøå, ñ÷èòàþò, ÷òî êà÷åñòâî ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ, ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé è âñïîìîãàòåëüíûõ âåùåñòâ íå ñîîòâåòñòâóåò òðåáîâàíèÿì ïî ïîêàçàòåëþ Ìèêðîáèîëîãè÷åñêàÿ ÷èñòîòà. 2. Äëÿ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà ìîãóò áûòü óñòàíîâëåíû äðóãèå íîðìû â çàâèñèìîñòè: – îò ñîñòàâà ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà è îñîáåííîñòåé òåõíîëîãè÷åñêîãî ïðîöåññà åãî ïðîèçâîäñòâà; – íàçíà÷åíèÿ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà (îïàñíîñòü âàðüèðóåò â çàâèñèìîñòè îò ñïîñîáà ïðèìåíåíèÿ èëè ïóòè ââåäåíèÿ); – îò ïðåäïîëàãàåìîãî ðåöèïèåíòà (îïàñíîñòü âàðüèðóåò äëÿ íîâîðîæäåííûõ, äåòåé, îñëàáëåííûõ ëþäåé). Ââåäåíèå èíûõ íîðì äîëæíî áûòü îáîñíîâàíî. 3 Ãîòîâûå ñìåñè äëÿ ëå÷åáíûõ êîðìîâ, ïðèìåíÿåìûõ â âåòåðèíàðèè, ñ èñïîëü- çîâàíèåì íàïîëíèòåëåé ïðèðîäíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ, äëÿ êîòîðûõ ïðîòèâî- ìèêðîáíàÿ îáðàáîòêà íåâîçìîæíà l Îáùåå ÷èñëî àýðîáíûõ ìèêðîîðãàíèçìîâ — íå áîëåå 105 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îáùåå ÷èñëî äðîææåâûõ è ïëåñíåâûõ ãðèáîâ — íå áîëåå 104 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Ýíòåðîáàêòåðèé, óñòîé÷èâûõ ê æåë÷è, — íå áîëåå 104 ÊÎÅ â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå Escherichia coli â 1 ã (ìë) l Îòñóòñòâèå áàêòåðèé ðîäà Salmonella spp. â 25 ã (ìë) Òàáëèöà 2.3.1.2.-1. — Îêîí÷àíèå 203100000-2022 2.3.10.0.
Ïðèìåñè ýëåìåíòîâ Äàííàÿ îáùàÿ ôàðìàêîïåéíàÿ ñòàòüÿ ñîäåð- æèò îñíîâíûå ïðèíöèïû è ïîäõîäû ê îöåíêå è êîíòðîëþ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ òîêñèêîëîãè- ÷åñêîãî çíà÷åíèÿ, êîòîðûå ìîãóò ïðèñóòñòâî- âàòü â ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâàõ. Ïîñêîëüêó ïðèìåñè ýëåìåíòîâ íå îáëàäàþò òåðàïåâòè÷åñêèì äåéñòâèåì, èõ ñîäåðæàíèå â ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâàõ äîëæíî ïîäëåæàòü êîíòðîëþ è íå ïðåâûøàòü äîïóñòèìûõ ïðåäå- ëîâ. Ñòðàòåãèÿ êîíòðîëÿ äëÿ îãðàíè÷åíèÿ ñî- äåðæàíèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ â ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâàõ äîëæíà ðàçðàáàòûâàòüñÿ ñ èñïîëüçî- âàíèåì ïðèíöèïîâ óïðàâëåíèÿ ðèñêàìè. Ïðîöåññû îöåíêè äàííûõ î òîêñè÷íîñòè ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ, âîçìîæíûõ â ëåêàðñòâåí- íûõ ñðåäñòâàõ, îïèñàíû â íîðìàòèâíîì äîêó- ìåíòå Ñîþçà «Òðåáîâàíèÿ ê ïîâåäåíèþ èññëå- äîâàíèé (èñïûòàíèé) ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ â ÷àñòè îöåíêè è êîíòðîëÿ ïðèìåñåé» (÷àñòü V. Ïðèìåñè ýëåìåíòîâ).  óêàçàííûõ òðåáîâàíèÿõ ïðèâîäÿòñÿ çíà÷åíèÿ äîïóñòèìîãî ñóòî÷íîãî âîçäåéñòâèÿ (ÄÑÂ) ýëåìåíòîâ ïðè ðàçëè÷íûõ ïóòÿõ ââåäåíèÿ, à òàêæå ïðåäñòàâëåíû ïîäõîäû ê îïðåäåëåíèþ êîíöåíòðàöèé ïðèìåñåé ýëåìåí- òîâ â ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòàõ è (èëè) èõ êîì- ïîíåíòàõ (àêòèâíûõ ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóá- ñòàíöèÿõ, âñïîìîãàòåëüíûõ âåùåñòâàõ), êîòî- ðûå ãàðàíòèðîâàëè áû, ÷òî çíà÷åíèÿ ÄÑ äëÿ ýòèõ ïðèìåñåé íå ïðåâûøåíû. ÎÁËÀÑÒÜ ÏÐÈÌÅÍÅÍÈß Äàííàÿ îáùàÿ ôàðìàêîïåéíàÿ ñòàòüÿ ðàñ- ïðîñòðàíÿåòñÿ íà ñóáñòàíöèè äëÿ ôàðìàöåâòè- ÷åñêîãî ïðèìåíåíèÿ, ïîëó÷åííûå ïóòåì õèìè- ÷åñêîãî ñèíòåçà, è ïðîèçâåäåííûå èç íèõ ëåêàð- ñòâåííûå ïðåïàðàòû. Êðîìå òîãî, â îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ ñòàòüè âõîäÿò ëåêàðñòâåííûå ñðåä- ñòâà, ñîäåðæàùèå î÷èùåííûå áåëêè è ïîëèïåï- òèäû (â òîì ÷èñëå ðåêîìáèíàíòíûå è íåðåêîì- áèíàíòíûå áåëêè è ïîëèïåïòèäû), èõ ïðîèçâîä- íûå è ïðîäóêòû, ÿâëÿþùèåñÿ èõ êîìïîíåíòàìè (íàïðèìåð, êîíúþãàòû), à òàêæå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà, ñîäåðæàùèå ñèíòåòè÷åñêèå ïîëèïåï- òèäû, ïîëèíóêëåîòèäû è îëèãîñàõàðèäû. Òðåáîâàíèÿ äàííîé ñòàòüè íå ðàñïðîñòðàíÿ- þòñÿ íà ðàñòèòåëüíûå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà, ðàäèîôàðìàöåâòè÷åñêèå ëåêàðñòâåííûå ïðåïà- ðàòû, âàêöèíû, ïðîäóêòû êëåòî÷íîãî ìåòàáî- ëèçìà, ïðåïàðàòû ÄÍÊ, ýêñòðàêòû àëëåðãåíîâ, êëåòêè, öåëüíóþ êðîâü, êëåòî÷íûå êîìïîíåíòû êðîâè èëè ïðîèçâîäíûå êðîâè, âêëþ÷àÿ ïëàçìó è ïðîèçâîäíûå ïëàçìû, ðàñòâîðû äëÿ äèàëèçà, íå ïðåäíàçíà÷åííûå äëÿ ââåäåíèÿ â ñèñòåìíûé êðîâîòîê, è ýëåìåíòû, ïðåäíàìåðåííî âêëþ÷åí- íûå â ñîñòàâ ëåêàðñòâåííîãî ñðåäñòâà äëÿ îêàçà- íèÿ òåðàïåâòè÷åñêîãî äåéñòâèÿ, à òàêæå ëåêàð- ñòâåííûå ñðåäñòâà, ïîëó÷åííûå íà îñíîâå ãåíîâ (ãåííàÿ òåðàïèÿ), êëåòîê (êëåòî÷íàÿ òåðàïèÿ) è òêàíåé ìåòîäàìè òêàíåâîé èíæåíåðèè. Ê ýòîé æå ãðóïïå îòíîñÿòñÿ ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà äëÿ âåòåðèíàðíîãî ïðèìåíåíèÿ è ëåêàðñòâåí- íûå ïðåïàðàòû, íå ïîäëåæàùèå ðåãèñòðàöèè. Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ äàííîé ñòàòüè íå âêëþ÷àåò ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà, íàõîäÿùèåñÿ íà ýòàïå êëèíè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé â ïðîöåññå ðàçðàáîòêè. Ïðè ðàçðàáîòêå ïðîöåññà ïðîèçâîä- ñòâà â ïðîìûøëåííîì ìàñøòàáå èçëîæåííûå âûøå ïðèíöèïû è ïîäõîäû ìîãóò èñïîëüçîâàòü- ñÿ äëÿ îöåíêè ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ, êîòîðûå ìî- ãóò ïðèñóòñòâîâàòü â íîâûõ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâàõ. ÂÎÇÌÎÆÍÛÅ ÈÑÒÎ×ÍÈÊÈ ÏÐÈÌÅÑÅÉ ÝËÅÌÅÍÒΠ ËÅÊÀÐÑÒÂÅÍÍÛÕ ÑÐÅÄÑÒÂÀÕ Ïðèìåñè ýëåìåíòîâ â ëåêàðñòâåííûõ ñðåä- ñòâàõ ìîãóò âîçíèêàòü èç ðàçíûõ èñòî÷íèêîâ.
Îíè ìîãóò ïðåäñòàâëÿòü ñîáîé: – îñòàòî÷íûå ïðèìåñè ýëåìåíòîâ, âîçíè- êàþùèå â ðåçóëüòàòå ïðåäíàìåðåííîãî èñïîëü- çîâàíèÿ ñîäåðæàùèõ èõ ìàòåðèàëîâ â ïðîöåññå ïðîèçâîäñòâà ñóáñòàíöèé äëÿ ôàðìàöåâòè÷åñêî- ãî ïðèìåíåíèÿ èëè äðóãèõ êîìïîíåíòîâ ëåêàð- ñòâåííîãî ïðåïàðàòà (íàïðèìåð, êàòàëèçàòîðû, ðåàêòèâû); – ïðèìåñè ýëåìåíòîâ, íå èñïîëüçóåìûå ïðåäíàìåðåííî â ïðîöåññå ïðîèçâîäñòâà, íî ïðèñóòñòâóþùèå â ñóáñòàíöèÿõ äëÿ ôàðìàöåâ- òè÷åñêîãî ïðèìåíåíèÿ, âîäå è äðóãèõ ìàòåðèà- ëàõ, ïðèìåíÿåìûõ äëÿ ïîëó÷åíèÿ ëåêàðñòâåííî- ãî ïðåïàðàòà; – ïðèìåñè ýëåìåíòîâ, çàíåñåííûå â ñóá- ñòàíöèè äëÿ ôàðìàöåâòè÷åñêîãî ïðèìåíåíèÿ è (èëè) ëåêàðñòâåííûé ïðåïàðàò â ðåçóëüòàòå âçàèìîäåéñòâèÿ ñ ïðîèçâîäñòâåííûì îáîðóäî- âàíèåì; – ïðèìåñè ýëåìåíòîâ, çàíåñåííûå â ñóá- ñòàíöèè äëÿ ôàðìàöåâòè÷åñêîãî ïðèìåíåíèÿ 155 è (èëè) ëåêàðñòâåííûé ïðåïàðàò â ðåçóëüòàòå âçàèìîäåéñòâèÿ ñ ìàòåðèàëàìè óïàêîâêè. Çàãðÿçíåíèå ëåêàðñòâåííîãî ñðåäñòâà ïðè- ìåñÿìè ýëåìåíòîâ ìîæåò ïðîèñõîäèòü êàê çà ñ÷åò îòäåëüíîãî èñòî÷íèêà, òàê è êîìáèíàöèè ïåðå÷èñëåííûõ èñòî÷íèêîâ. Îïðåäåëåíèå îáùå- ãî çàãðÿçíåíèÿ ëåêàðñòâåííîãî ñðåäñòâà ïðèìå- ñÿìè ýëåìåíòîâ äîëæíî áûòü îñíîâàíî íà îöåí- êå ðèñêîâ âîçìîæíîãî çàãðÿçíåíèÿ èç êàæäîãî èñòî÷íèêà. ÊËÀÑÑÈÔÈÊÀÖÈß ÏÐÈÌÅÑÅÉ ÝËÅÌÅÍÒΠ ËÅÊÀÐÑÒÂÅÍÍÛÕ ÑÐÅÄÑÒÂÀÕ Êëàññèôèêàöèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ â ëå- êàðñòâåííûõ ñðåäñòâàõ îñíîâàíà íà îöåíêå ðèñ- êîâ, êîòîðàÿ ñâÿçàíà ñ èõ òîêñè÷íîñòüþ, õàðàê- òåðèçóþùåéñÿ çíà÷åíèÿìè ÄÑÂ, è âåðîÿòíî- ñòüþ ïðèñóòñòâèÿ â ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòàõ. Âåðîÿòíîñòü ïðèñóòñòâèÿ ýëåìåíòîâ â ëå- êàðñòâåííîì ïðåïàðàòå çàâèñèò îò íåñêîëüêèõ ôàêòîðîâ, â òîì ÷èñëå: – âåðîÿòíîñòè èñïîëüçîâàíèÿ â òåõíîëîãè- ÷åñêèõ ïðîöåññàõ; – âåðîÿòíîñòè òîãî, ÷òî ýëåìåíò ÿâëÿåòñÿ ïðèìåñüþ, èçîëèðîâàííîé ñîâìåñòíî ñ äðóãèìè ïðèìåñÿìè ýëåìåíòîâ â ìàòåðèàëàõ, èñïîëüçóå- ìûõ â òåõíîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññàõ; – ðàñïðîñòðàíåííîñòè ýëåìåíòà â ïðèðîäå è åãî ýêîëîãè÷åñêîãî ðàñïðåäåëåíèÿ.  äàííîé îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ýëå- ìåíòîì ñ íèçêîé ðàñïðîñòðàíåííîñòüþ â ïðèðî- äå è ýêîëîãè÷åñêèì ðàñïðåäåëåíèåì ñ÷èòàåòñÿ ýëåìåíò ñ çàðåãèñòðèðîâàííîé ðàñïðîñòðàíåí- íîñòüþ íå áîëåå 1 àòîìà íà 106 àòîìîâ êðåìíèÿ.  çàâèñèìîñòè îò çíà÷åíèÿ ÄÑ è âåðîÿòíî- ñòè ïðèñóòñòâèÿ â ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâàõ ïðèìåñè ýëåìåíòîâ îòíîñÿò ê îäíîìó èç ñëå- äóþùèõ êëàññîâ: Êëàññ 1 — ýëåìåíòû, ÿâëÿþùèåñÿ íàèáîëåå òîêñè÷íûìè äëÿ ÷åëîâåêà, íàïðèìåð, As, Cd, Hg è Pb. Òàêèå ýëåìåíòû íå èñïîëüçóþòñÿ ñîâñåì èëè æå èñïîëüçóþòñÿ ñ áîëüøîé îñòîðîæíî- ñòüþ ïðè ïðîèçâîäñòâå ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðà- òîâ. Èõ ïðèñóòñòâèå â ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâàõ îáû÷íî ñâÿçàíî ñ ÷àñòî ïðèìåíÿåìûìè ìàòå- ðèàëàìè (íàïðèìåð, ïðèðîäíûìè ìèíåðàëüíû- ìè âåùåñòâàìè, âûñòóïàþùèìè â êà÷åñòâå âñïîìîãàòåëüíûõ âåùåñòâ). Ïðè îöåíêå ðèñêîâ ïðîâîäÿò ïðîâåðêó íà âåðîÿòíîñòü çàãðÿçíåíèÿ äëÿ âñåõ âîçìîæíûõ èñòî÷íèêîâ ïðèìåñåé ýëå- ìåíòîâ è âñåõ ïóòåé ââåäåíèÿ. Ïî ðåçóëüòàòàì îöåíêè ðèñêîâ îïðåäåëÿþò òå êîìïîíåíòû, äëÿ êîòîðûõ ìîæåò ïîíàäîáèòüñÿ äîïîëíèòåëüíûé êîíòðîëü â âèäå èñïûòàíèé íà ýëåìåíòû äàííî- ãî êëàññà. Òàêèå èñïûòàíèÿ íå îáÿçàòåëüíû äëÿ âñåõ êîìïîíåíòîâ è äîëæíû ïðîâîäèòüñÿ ëèøü â ñëó÷àå, åñëè ïðè îöåíêå ðèñêîâ îíè áóäóò ñî- ÷òåíû íåîáõîäèìîé ìåðîé êîíòðîëÿ. Êëàññ 2 — ýëåìåíòû, òîêñè÷íîñòü êîòîðûõ äëÿ ÷åëîâåêà çàâèñèò îò ïóòè ââåäåíèÿ. Ýëåìåí- òû äàííîãî êëàññà ïîäðàçäåëÿþò íà êëàññû 2À è 2 â çàâèñèìîñòè îò îòíîñèòåëüíîé âåðîÿòíî- ñòè èõ ïðèñóòñòâèÿ â ëåêàðñòâåííîì ñðåäñòâå. Êëàññ 2À — ýëåìåíòû, èìåþùèå îòíîñè- òåëüíî âûñîêóþ âåðîÿòíîñòü ïðèñóòñòâèÿ â ëå- êàðñòâåííîì ñðåäñòâå, íàïðèìåð, Co, Ni è V. Òà- êèå ýëåìåíòû òðåáóþò ïðîâåäåíèÿ îöåíêè ðèñ- êîâ äëÿ âñåõ âîçìîæíûõ èñòî÷íèêîâ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ è âñåõ ïóòåé ââåäåíèÿ.
Êëàññ 2 — ýëåìåíòû, èìåþùèå íèçêóþ âå- ðîÿòíîñòü ïðèñóòñòâèÿ â ëåêàðñòâåííîì ñðåäñò- âå ââèäó íèçêîé ðàñïðîñòðàíåííîñòè â ïðèðîäå è ñëàáîé ñïîñîáíîñòè ê ñîâìåñòíîé èçîëÿöèè ñ äðóãèìè ìàòåðèàëàìè, íàïðèìåð, Ag, Au, Ir, Os, Pd, Pt, Rh, Ru, Se è Tl. Òàêèå ýëåìåíòû ìîãóò íå âêëþ÷àòüñÿ â îöåíêó ðèñêîâ, åñëè òîëüêî èõ íå èñïîëüçóþò ïðåäíàìåðåííî â ïðîèçâîäñòâå àêòèâíûõ ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé èëè äðóãèõ êîìïîíåíòîâ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà. Êëàññ 3 — ýëåìåíòû, îáëàäàþùèå îòíîñè- òåëüíî íèçêîé òîêñè÷íîñòüþ ïðè ïåðîðàëüíîì ïóòè ââåäåíèè, íàïðèìåð, Ba, Cr, Cu, Li, Mo, Sb è Sn. Îíè õàðàêòåðèçóþòñÿ âûñîêèìè çíà÷åíèÿ- ìè ÄÑÂ, êàê ïðàâèëî, ïðåâûøàþùèìè 500 ìêã/ñóò. Òàêèå ýëåìåíòû ìîãóò íå âêëþ- ÷àòüñÿ â îöåíêó ðèñêîâ äëÿ ïåðîðàëüíîãî ïóòè ââåäåíèÿ, åñëè òîëüêî èõ íå èñïîëüçóþò ïðåäíà- ìåðåííî â ïðîöåññå ïðîèçâîäñòâà àêòèâíûõ ôàðìàöåâòè÷åñêèõ ñóáñòàíöèé èëè äðóãèõ êîì- ïîíåíòîâ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà. Ïðè ïàðåí- òåðàëüíîì è èíãàëÿöèîííîì ïóòÿõ ââåäåíèÿ âå- ðîÿòíîñòü èõ ïðèñóòñòâèÿ â ëåêàðñòâåííîì ïðå- ïàðàòå ñëåäóåò îöåíèâàòü âî âðåìÿ ïðîâåäåíèÿ îöåíêè ðèñêîâ. Èñêëþ÷åíèåì ÿâëÿåòñÿ ñëó÷àé, êîãäà çíà÷åíèÿ ÄÑ äëÿ îïðåäåëåííîãî ïóòè ââåäåíèÿ ïðåâûøàþò 500 ìêã/ñóò. Äðóãèå ýëåìåíòû — ýëåìåíòû ñ íåóñòàíîâ- ëåííûìè çíà÷åíèÿìè ÄÑ âñëåäñòâèå èõ íèç- êîé òîêñè÷íîñòè, íàïðèìåð, Al, B, Ca, Fe, K, Mg, Mn, Na, W è Zn. Òàêèå ýëåìåíòû â ñëó÷àå ïðè- ñóòñòâèÿ èëè âêëþ÷åíèÿ â ñîñòàâ ëåêàðñòâåííî- ãî ïðåïàðàòà âõîäÿò â îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ äðó- 156 ãèõ íîðìàòèâíûõ àêòîâ, âõîäÿùèõ â ïðàâî Ñîþ- çà, îòíîñÿùèõñÿ ê îïðåäåëåííûì ýëåìåíòàì (íàïðèìåð, Mn è Zn äëÿ ïàöèåíòîâ ñ íàðóøåíè- åì ôóíêöèè ïå÷åíè, Al – ñ íàðóøåíèåì ôóíê- öèè ïî÷åê) èëè àñïåêòàì êà÷åñòâà ëåêàðñòâåí- íîãî ïðåïàðàòà (íàïðèìåð, ïðèñóòñòâèå ïðèìå- ñè W â òåðàïåâòè÷åñêèõ áåëêàõ).  òàáëèöå 2.3.10.0.-1 ïåðå÷èñëåíû ýëåìåíòû ðàçëè÷íûõ êëàññîâ, ïîäëåæàùèå ó÷åòó ïðè îöåíêå ðèñêîâ. ÎÖÅÍÊÀ ÁÅÇÎÏÀÑÍÎÑÒÈ È ÓÑÒÀÍÎÂËÅÍÈÅ ÄÑ ÏÐÈÌÅÑÅÉ ÝËÅÌÅÍÒΠÎöåíêó áåçîïàñíîñòè ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ, âîçìîæíûõ â ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòàõ, ïðîâî- äÿò äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ÄÑ êàæäîãî ýëåìåíòà. Ïîëó÷åííûå çíà÷åíèÿ ÄÑ ïðåäîñòàâëÿþò èí- ôîðìàöèþ î ìàêñèìàëüíîì äîïóñòèìîì êîëè- ÷åñòâå ýëåìåíòà, êîòîðîå ìîæåò ñîäåðæàòüñÿ â ìàêñèìàëüíîì êîëè÷åñòâå ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, ïðèíèìàåìîì â ñóòêè. Ïðè îöåíêå áåçîïàñíîñòè è óñòàíîâëåíèè ÄÑ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ ðàññìàòðèâàþò ñëå- äóþùèå ôàêòîðû: – âåðîÿòíóþ ñòåïåíü îêèñëåíèÿ ýëåìåíòà â ëåêàðñòâåííîì ïðåïàðàòå; – âîçäåéñòâèå íà îðãàíèçì ÷åëîâåêà è äàí- íûå î áåçîïàñíîñòè, åñëè îíè ñîäåðæàò íåîáõî- äèìóþ èíôîðìàöèþ; – íàèáîëåå ðåëåâàíòíîå èññëåäîâàíèå íà æèâîòíûõ; – ïóòü ââåäåíèÿ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà; – ðåëåâàíòíîå êîíå÷íîå çíà÷åíèå(ÿ) ÄÑÂ. Îöåíêó áåçîïàñíîñòè è óñòàíîâëåíèå ÄÑ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ îñóùåñòâëÿþò, â îñíîâ- íîì, äëÿ ïåðîðàëüíîãî, ïàðåíòåðàëüíîãî è èíãà- ëÿöèîííîãî ïóòåé ââåäåíèÿ ëåêàðñòâåííîãî 157 Òàáëèöà 2.3.10.0.-1. — Ýëåìåíòû, ïîäëåæàùèå ó÷åòó ïðè îöåíêå ðèñêîâ Ýëåìåíò Êëàññ Ïðåäíàìåðåííîå èñïîëüçîâàíèå (äëÿ âñåõ ïóòåé ââåäåíèÿ) Íåïðåäíàìåðåííîå èñïîëüçîâàíèå ïåðîðàëüíûé ïóòü ââåäåíèÿ ïàðåíòåðàëüíûé ïóòü ââåäåíèÿ èíãàëÿöèîííûé ïóòü ââåäåíèÿ Cd 1 äà äà äà äà Pb 1 äà äà äà äà As 1 äà äà äà äà Hg 1 äà äà äà äà Co 2A äà äà äà äà V 2A äà äà äà äà Ni 2A äà äà äà äà Tl 2 äà íåò íåò íåò Au 2 äà íåò íåò íåò Pd 2 äà íåò íåò íåò Ir 2 äà íåò íåò íåò Os 2 äà íåò íåò íåò Rh 2 äà íåò íåò íåò Ru 2 äà íåò íåò íåò Se 2 äà íåò íåò íåò Ag 2 äà íåò íåò íåò Pt 2 äà íåò íåò íåò Li 3 äà íåò äà äà Sb 3 äà íåò äà äà Ba 3 äà íåò íåò äà Mo 3 äà íåò íåò äà Cu 3 äà íåò äà äà Sn 3 äà íåò íåò äà Cr 3 äà íåò íåò äà ïðåïàðàòà.
Äëÿ äðóãèõ ïóòåé ââåäåíèÿ â êà÷åñò- âå èñõîäíîãî çíà÷åíèÿ îáû÷íî èñïîëüçóþò ÄÑ ïðè ïåðîðàëüíîì ïóòè ââåäåíèÿ è â ïîñëåäóþ- ùåì ïðîâîäÿò îöåíêó âåðîÿòíîñòè âîçíèêíîâå- íèÿ ìåñòíûõ ðåàêöèé è, ïî âîçìîæíîñòè, áèî- äîñòóïíîñòè ýëåìåíòà ïðè ïðåäïîëàãàåìîì ïóòè ââåäåíèÿ ïóòåì ïðèìåíåíèÿ ïîïðàâî÷íûõ êîýôôèöèåíòîâ.  êà÷åñòâå èñõîäíîãî çíà÷åíèÿ òàêæå äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàíèå ÄÑ ïðè ïà- ðåíòåðàëüíîì èëè èíãàëÿöèîííîì ïóòÿõ ââåäå- íèÿ, ÷òî òðåáóåò ñîîòâåòñòâóþùåãî îáîñíîâà- íèÿ. Çíà÷åíèÿ ÄÑ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ äëÿ ðàç- ëè÷íûõ ïóòåé ââåäåíèÿ, óñòàíîâëåííûå íà îñ- íîâàíèè ñóùåñòâóþùèõ äàííûõ î áåçîïàñíî- ñòè, ïðèâîäÿòñÿ â òàáëèöå 2.3.10.0.-2. ÊÎÍÒÐÎËÜ ÏÐÈÌÅÑÅÉ ÝËÅÌÅÍÒΠ ËÅÊÀÐÑÒÂÅÍÍÛÕ ÑÐÅÄÑÒÂÀÕ Êîíòðîëü ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ ÿâëÿåòñÿ ÷à- ñòüþ îáùåé ñòðàòåãèè êîíòðîëÿ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ, êîòîðàÿ îáåñïå÷èâàåò, ÷òîáû ñîäåðæà- íèå ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ â ëåêàðñòâåííûõ ïðå- ïàðàòàõ íå ïðåâûøàëî çíà÷åíèé ÄÑÂ.  ñëó÷àå ïðåâûøåíèÿ ïîðîãà êîíòðîëÿ ïðèíèìàþò äî- ïîëíèòåëüíûå ìåðû, êîòîðûå ìîãóò âêëþ÷àòü ñëåäóþùèå: – ìîäèôèêàöèþ ýòàïîâ ïðîöåññà ïðîèçâîä- ñòâà, ñïîñîáñòâóþùóþ ñîêðàùåíèþ ñîäåðæà- íèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ ïîñðåäñòâîì ñïåöèôè- ÷åñêèõ èëè íåñïåöèôè÷åñêèõ ìåðîïðèÿòèé ïî î÷èñòêå äî çíà÷åíèé, íå ïðåâûøàþùèõ ïîðîãà êîíòðîëÿ; – âûïîëíåíèå âíóòðèïðîèçâîäñòâåííûõ è ïðåäøåñòâóþùèõ íà÷àëó ïðîèçâîäñòâà âèäîâ êîíòðîëÿ, ðàçðàáîòàííûõ ñ öåëüþ îãðàíè÷åíèÿ ñîäåðæàíèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ â ëåêàðñòâåí- íîì ïðåïàðàòå (íèæå ïîðîãà êîíòðîëÿ); – óñòàíîâëåíèå ïðåäåëîâ ñîäåðæàíèÿ ïðè- ìåñåé ýëåìåíòîâ â ñïåöèôèêàöèÿõ âñïîìîãà- òåëüíûõ âåùåñòâ, ñèíòåòè÷åñêèõ ïðîìåæóòî÷- íûõ ïðîäóêòîâ è äð.; – óñòàíîâëåíèå ïðåäåëîâ ñîäåðæàíèÿ ïðè- ìåñåé ýëåìåíòîâ â ñïåöèôèêàöèè àêòèâíîé ôàð- ìàöåâòè÷åñêîé ñóáñòàíöèè; – óñòàíîâëåíèå ïðåäåëîâ ñîäåðæàíèÿ ïðè- ìåñåé ýëåìåíòîâ â ñïåöèôèêàöèè ëåêàðñòâåííî- ãî ïðåïàðàòà. Åñëè ïðèìåñè ýëåìåíòîâ â ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòàõ íå ïðåâûøàþò ÄÑÂ, óæåñòî÷åíèå ïðåäåëîâ ñîäåðæàíèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ, îñ- íîâàííîå íà âîçìîæíîñòÿõ òåõíîëîãè÷åñêîãî ïðîöåññà, ìîæåò áûòü íå îáÿçàòåëüíûì äëÿ çàÿ- âèòåëÿ. Îäíàêî â íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ ìîãóò óñòà- íàâëèâàòüñÿ áîëåå íèçêèå óðîâíè ñîäåðæàíèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ, åñëè áûëî ïîêàçàíî, ÷òî èõ ñîäåðæàíèå, õîòÿ è íèæå ïîðîãîâ òîêñè÷íî- ñòè, îêàçûâàåò âëèÿíèå íà êà÷åñòâåííûå õàðàê- òåðèñòèêè ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà (íàïðè- 158 Òàáëèöà 2.3.10.0.-2. — Äîïóñòèìîå ñóòî÷íîå âîçäåé- ñòâèå (ÄÑÂ) ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ äëÿ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ Ýëåìåíò Êëàññ Äîïóñòèìîå ñóòî÷íîå âîçäåéñòâèå* (ìêã/ñóò) ïåðîðàëü- íûé ïóòü ââåäåíèÿ ïàðåíòå- ðàëüíûé ïóòü ââåäåíèÿ èíãàëÿöè- îííûé ïóòü ââåäåíèÿ Cd 1 5 2 3 Pb 1 5 5 5 As 1 15 15 2 Hg 1 30 3 1 Co 2A 50 5 3 V 2A 100 10 1 Ni 2A 200 20 5 Tl 2 8 8 8 Au 2 100 100 1 Pd 2 100 10 1 Ir 2 100 10 1 Os 2 100 10 1 Rh 2 100 10 1 Ru 2 100 10 1 Se 2 150 80 130 Ag 2 150 10 7 Pt 2 100 10 1 Li 3 550 250 25 Sb 3 1 200 90 20 Ba 3 1 400 700 300 Mo 3 3 000 1 500 10 Cu 3 3 000 300 30 Sn 3 6 000 600 60 Cr 3 11 000 1 100 3 Ïðèìå÷àíèå. * Äëÿ óäîáñòâà ïðèìåíåíèÿ íà ïðàêòè- êå çíà÷åíèÿ ÄÑ ìåíåå 10 èìåþò îäíó çíà÷àùóþ öèôðó è îêðóãëåíû äî áëèæàéøåãî öåëîãî ÷èñëà. Çíà- ÷åíèÿ ÄÑ áîëåå 10 îêðóãëåíû äî îäíîé èëè äâóõ çíà÷àùèõ öèôð â óñòàíîâëåííîì ïîðÿäêå. ìåð, åñëè ýëåìåíò óñêîðÿåò äåãðàäàöèþ äåéñò- âóþùèõ âåùåñòâ).  îòäåëüíûõ ñëó÷àÿõ äîïóñêàåòñÿ áîëåå âû- ñîêèé óðîâåíü ñîäåðæàíèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ îòíîñèòåëüíî ÄÑÂ.
Ê òàêèì ñëó÷àÿì ìîãóò îò- íîñèòüñÿ ñëåäóþùèå: – èíòåðìèòòèðóþùèé ðåæèì äîçèðîâàíèÿ; – êðàòêîñðî÷íûé ïðèåì ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà (íàïðèìåð, â òå÷åíèå 30 äíåé èëè ìå- íåå); – ñïåöèôè÷åñêèå ïîêàçàíèÿ ê ïðèìåíåíèþ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà (íàïðèìåð, çàáîëåâà- íèÿ, óãðîæàþùèå æèçíè, è ðåäêèå çàáîëåâà- íèÿ). ÓÑÒÀÍÎÂËÅÍÈÅ ÏÐÅÄÅËÜÍÎÉ ÄÎÏÓÑÒÈÌÎÉ ÊÎÍÖÅÍÒÐÀÖÈÈ ÏÐÈÌÅÑÅÉ ÝËÅÌÅÍÒΠÏîñêîëüêó ÄÑ îòðàæàåò îáùåå âîçäåéñò- âèå ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà íà îðãàíèçì ÷åëîâåêà, äëÿ îöåíêè ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ â ëå- êàðñòâåííîì ïðåïàðàòå èëè åãî êîìïîíåíòàõ çíà÷åíèÿ ÄÑ ìîãóò áûòü ïðåîáðàçîâàíû â ñî- îòâåòñòâóþùèå èì çíà÷åíèÿ ïðåäåëüíîé äîïóñ- òèìîé êîíöåíòðàöèè (ÏÄÊ). Âåëè÷èíà ÏÄÊ âûðàæàåò ìàêñèìàëüíóþ äî- ïóñòèìóþ êîíöåíòðàöèþ ýëåìåíòà â ìèêðî- ãðàììàõ â ðàñ÷åòå íà ãðàìì ëåêàðñòâåííîãî ïðå- ïàðàòà èëè åãî êîìïîíåíòîâ. ÏÄÊ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ â ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòàõ è èõ êîìïîíåíòàõ ìîãóò èñïîëüçî- âàòüñÿ: – â êà÷åñòâå èíñòðóìåíòà îöåíêè ðèñêîâ ïðè ñðàâíåíèè íàáëþäàåìîãî è ïðåäïîëàãàåìî- ãî óðîâíåé ñîäåðæàíèÿ ïðèìåñè ýëåìåíòà îòíî- ñèòåëüíî ÄÑÂ; – ïðè êîíòðîëå ñî ñòîðîíû ïîñòàâùèêîâ ñûðüÿ íà ýòàïàõ, ïðåäøåñòâóþùèõ ïðîèçâîäñò- âó ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, äëÿ îáåñïå÷åíèÿ òîãî, ÷òîáû çíà÷åíèå ÄÑ íå áûëî ïðåâûøåíî; – äëÿ óñòàíîâëåíèÿ êîíöåíòðàöèé ïðèìå- ñåé ýëåìåíòîâ ïðè ðàçðàáîòêå èõ âíóòðèïðîèç- âîäñòâåííîãî êîíòðîëÿ; – äëÿ âêëþ÷åíèÿ ñâåäåíèé ïî êîíòðîëþ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ â äîêóìåíòû, ïðåäíàçíà- ÷åííûå äëÿ ïîäà÷è â ðåãóëÿòîðíûå îðãàíû. Äëÿ ðàñ÷åòà ÏÄÊ ýëåìåíòà èñïîëüçóþò íå- ñêîëüêî ïîäõîäîâ, âûáîð ëþáîãî èç êîòîðûõ îñ- íîâàí íà èíôîðìàöèè î êîëè÷åñòâå ëåêàðñòâåí- íîãî ïðåïàðàòà, ïðèíèìàåìîãî â ñóòêè. Ðàñ÷åò ÏÄÊ ýëåìåíòà (C) â ëåêàðñòâåííîì ïðåïàðàòå ïðîâîäÿò ïî ôîðìóëå: Ñ à ( ) ( ) ( ) ìêã/ã = ÄÑ ìêã/ñóò ã/ñóò , ãäå à — êîëè÷åñòâî ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, ïðèíèìàåìîå â ñóòêè.  çàâèñèìîñòè îò êîëè÷åñòâà ëåêàðñòâåííî- ãî ïðåïàðàòà, ïðèíèìàåìîãî â ñóòêè, âîçìîæíû ñëåäóþùèå ïîäõîäû: – ðàñ÷åò ÏÄÊ ýëåìåíòà â êàæäîì êîìïîíåí- òå ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, ïðèíèìàåìîãî â êîëè÷åñòâå íå áîëåå 10 ã â ñóòêè; 159 Òàáëèöà 2.3.10.0.-3. — Ïðåäåëüíàÿ äîïóñòèìàÿ êîí- öåíòðàöèÿ (ÏÄÊ) ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ â îòäåëüíîì êîìïîíåíòå ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà Ýëåìåíò Êëàññ Ïðåäåëüíàÿ äîïóñòèìàÿ êîíöåíòðàöèÿ (ìêã/ã) ïåðîðàëü- íûé ïóòü ââåäåíèÿ ïàðåíòå- ðàëüíûé ïóòü ââåäåíèÿ èíãàëÿöè- îííûé ïóòü ââåäåíèÿ Cd 1 0,5 0,2 0,3 Pb 1 0,5 0,5 0,5 As 1 1,5 1,5 0,2 Hg 1 3 0,3 0,1 Co 2A 5 0,5 0,3 V 2A 10 1 0,1 Ni 2A 20 2 0,5 Tl 2 0,8 0,8 0,8 Au 2 10 10 0,1 Pd 2 10 1 0,1 Ir 2 10 1 0,1 Os 2 10 1 0,1 Rh 2 10 1 0,1 Ru 2 10 1 0,1 Se 2 15 8 13 Ag 2 15 1 0,7 Pt 2 10 1 0,1 Li 3 55 25 2,5 Sb 3 120 9 2 Ba 3 140 70 30 Mo 3 300 150 1 Cu 3 300 30 3 Sn 3 600 60 6 Cr 3 1 100 110 0,3 – ðàñ÷åò ÏÄÊ ýëåìåíòà â êàæäîì êîìïîíåí- òå ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, ïðèíèìàåìîãî â ëþáîì óñòàíîâëåííîì êîëè÷åñòâå â ñóòêè. Ïîñëåäíèé ïîäõîä ïðåäïîëàãàåò ðàñ÷åò ÏÄÊ ýëåìåíòà êàê âî âñåõ ïî îòäåëüíîñòè êîì- ïîíåíòàõ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, òàê è âû- áîðî÷íî â ëþáîì åãî êîìïîíåíòå. Âûáîð êîìïî- íåíòîâ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà äîëæåí áûòü îñíîâàí íà ñâåäåíèÿõ î ðàñïðåäåëåíèè ïðèìå- ñåé ýëåìåíòîâ â êîìïîíåíòàõ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà (íàïðèìåð, áîëåå âûñîêèå êîíöåíòðà- öèè â îòäåëüíûõ êîìïîíåíòàõ). Äëÿ êàæäîãî ýëåìåíòà, ïîòåíöèàëüíî ïðè- ñóòñòâóþùåãî â êîìïîíåíòàõ ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, ìàêñèìàëüíàÿ ìàññà ïðèìåñè ýëå- ìåíòà, ïðåäïîëàãàåìàÿ â ëåêàðñòâåííîì ïðåïà- ðàòå, ìîæåò áûòü âû÷èñëåíà ïóòåì óìíîæåíèÿ ìàññû êàæäîãî êîìïîíåíòà íà ÏÄÊ, óñòàíîâ- ëåííóþ äëÿ êàæäîãî ýëåìåíòà, è ñëîæåíèÿ ïî- ëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ äëÿ âñåõ êîìïîíåíòîâ.
Çíà÷åíèå ìàêñèìàëüíîé ìàññû íå äîëæíî ïðå- âûøàòü çíà÷åíèå ÄÑ ïðèìåñè ýëåìåíòà: ÄÑ (ìêã/ñóò) ìêã/ã ã/ñóò³ × = åC mk k N k 1 ( ) ( ), ãäå k — èíäåêñ äëÿ êàæäîãî èç N êîìïîíåíòîâ â ëåêàðñòâåííîì ïðåïàðàòå; C k — ÏÄÊ ïðèìåñè ýëåìåíòà â êîìïîíåíòå k; mk — ìàññà êîìïîíåíòà k â ìàêñèìàëüíîì êîëè÷åñòâå ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðà- òà, ïðèíèìàåìîãî â ñóòêè. Ïðèâåäåííîå âûðàæåíèå ïîçâîëÿåò âû÷èñ- ëèòü çíà÷åíèå ÏÄÊ äëÿ êàæäîé ïðèìåñè ýëå- ìåíòà â êàæäîì êîìïîíåíòå ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, êîòîðîå îáåñïå÷èò ñîîòâåòñòâèå çíà- ÷åíèþ ÄÑÂ. Çíà÷åíèÿ ÏÄÊ, íåîáõîäèìûå äëÿ îöåíêè ñî- äåðæàíèÿ ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ â îòäåëüíîì êîì- ïîíåíòå ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà ñ ñóòî÷íîé äîçîé íå áîëåå 10 ã ïðèâîäÿòñÿ â òàáëèöå 2.3.10.0.-3. Êîíöåíòðàöèþ êàæäîãî ýëåìåíòà â ëåêàðñò- âåííîì ïðåïàðàòå ìîæíî òàêæå èçìåðèòü â ïðî- öåññå àíàëèçà ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà. Ïðè èñïîëüçîâàíèè ìàêñèìàëüíîãî êîëè÷åñòâà ëå- êàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, ïðèíèìàåìîãî â ñóòêè, ðàññ÷èòûâàþò ìàêñèìàëüíóþ äîïóñòèìóþ êîí- öåíòðàöèþ ïðèìåñè ýëåìåíòà â ëåêàðñòâåííîì ïðåïàðàòå. ÌÅÒÎÄÈÊÈ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß ÏÐÈÌÅÑÅÉ ÝËÅÌÅÍÒΠÎïðåäåëåíèå ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ ñëåäóåò ïðîâîäèòü â ñîîòâåòñòâèè ñ òðåáîâàíèÿìè îá- ùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüè 2.1.4.23. Îïðåäåëå- íèå ïðèìåñåé ýëåìåíòîâ. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãî- ãî îáîñíîâàíèÿ èñïûòàíèÿ äîëæíû áûòü ñïåöè- ôè÷íûìè äëÿ êàæäîé ïðèìåñè ýëåìåíòà, ïîäëåæàùåé êîíòðîëþ íà îñíîâå îöåíêè ðèñ- êîâ. 203110000-2022 2.3.11.0. Ñòàíäàðòíûå îáðàçöû Äàííàÿ îáùàÿ ôàðìàêîïåéíàÿ ñòàòüÿ ðàñ- ïðîñòðàíÿåòñÿ íà ñòàíäàðòíûå îáðàçöû, èñ- ïîëüçóåìûå ïðè ðàçðàáîòêå è ïîñëåäóþùåì êîíòðîëå êà÷åñòâà ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ. Ñòàíäàðòíûå îáðàçöû óòâåðæäàþòñÿ â óñòà- íîâëåííîì ïîðÿäêå, à èõ ïðèãîäíîñòü äëÿ ïî- ñëåäóþùåãî ïðèìåíåíèÿ ïðîâåðÿåòñÿ ñîãëàñíî ïðåäïèñàííîé ïðîãðàììå. Íåîáõîäèìîñòü èñ- ïîëüçîâàíèÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà óêàçûâàåòñÿ â îáùèõ è ÷àñòíûõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòüÿõ èëè íîðìàòèâíûõ äîêóìåíòàõ ïî êà÷åñòâó. Åñëè â ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå ïðåäïèñàíî èñïîëüçîâàíèå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà Ôàðìàêî- ïåè Ñîþçà, òî â ñïîðíûõ ñëó÷àÿõ òîëüêî îí ïðè- íèìàåòñÿ çà àðáèòðàæíûé ñòàíäàðòíûé îáðà- çåö. ÒÅÐÌÈÍÛ È ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß Áèîëîãè÷åñêèé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö — ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ïðåäñòàâëÿþùèé ñîáîé âåùåñòâî (èëè ñìåñü âåùåñòâ), êàê ïðàâèëî, áèîëîãè÷åñêîãî ïðîèñõîæäåíèÿ, ïðåäíàçíà÷åí- íûé äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçà- íèÿìè íîðìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïî êà÷åñòâó. Áèîëîãè÷åñêèé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö Ôàð- ìàêîïåè Åâðàçèéñêîãî ýêîíîìè÷åñêîãî Ñîþçà — áèîëîãè÷åñêèé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ïðèìå- íÿåìûé â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè îáùèõ è ÷àñòíûõ ñòàòåé Ôàðìàêîïåè Ñîþçà. Áèîëîãè- ÷åñêèå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû Ôàðìàêîïåè Ñîþ- çà ÿâëÿþòñÿ âòîðè÷íûìè ñòàíäàðòíûìè îáðàç- öàìè, ñåðòèôèöèðîâàííûìè (àòòåñòîâàííûìè) â Ìåæäóíàðîäíûõ åäèíèöàõ, èëè ïåðâè÷íûìè ñòàíäàðòíûìè îáðàçöàìè, êîòîðûå ìîãóò èñ- ïîëüçîâàòüñÿ äëÿ óñòàíîâëåíèÿ èíûõ åäèíèö, 160 íàïðèìåð, òèòðà âèðóñà èëè êîëè÷åñòâà áàêòå- ðèé. Âòîðè÷íûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö — ñòàí- äàðòíûé îáðàçåö ñî çíà÷åíèåì ñâîéñòâà, óñòà- íîâëåííûì ïóòåì ñðàâíåíèÿ ñ ïåðâè÷íûì ñòàí- äàðòíûì îáðàçöîì. Ìåæäóíàðîäíûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö — ïåðâè÷íûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, îïðåäåëÿþ- ùèé Ìåæäóíàðîäíóþ åäèíèöó àêòèâíîñòè èëè äðóãèå ïîäõîäÿùèå åäèíèöû, ïîçâîëÿþùèå âû- ðàæàòü ðåçóëüòàòû áèîëîãè÷åñêîãî èëè èììóíî- ëîãè÷åñêîãî àíàëèçà åäèíûì ñïîñîáîì âî âñåì ìèðå. Âñåìèðíàÿ îðãàíèçàöèÿ çäðàâîîõðàíåíèÿ óñòàíàâëèâàåò åäèíèöû àêòèâíîñòè äëÿ ïåðâîé ïàðòèè ìåæäóíàðîäíîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà íà îñíîâå ïðîâåäåííûõ ìåæäóíàðîäíûõ ìåæëà- áîðàòîðíûõ èññëåäîâàíèé.
Àêòèâíîñòü â ìåæ- äóíàðîäíûõ åäèíèöàõ äëÿ ïîñëåäóþùèõ ïàð- òèé ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà ïðè íåîáõîäèìîñòè óñòàíàâëèâàþò ïóòåì ñðàâíåíèÿ ñ ïðåäûäóùåé ñåðèåé ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. Ïåðâè÷íûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö — ñòàí- äàðòíûé îáðàçåö, îáëàäàþùèé íåîáõîäèìûìè ñâîéñòâàìè äëÿ ïðåäïîëàãàåìîãî èñïîëüçîâà- íèÿ, óñòàíîâëåííûìè áåç ñðàâíåíèÿ ñ ñóùåñò- âóþùèìè ñòàíäàðòíûìè îáðàçöàìè. Äàííîå îï- ðåäåëåíèå íå îòíîñèòñÿ ê ìåæäóíàðîäíûì ñòàí- äàðòíûì îáðàçöàì. Ðàñòèòåëüíûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö — ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ïîëó÷åííûé èç ëåêàðñò- âåííîãî ðàñòèòåëüíîãî ñûðüÿ, ïðåäíàçíà÷åííûé äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè íîðìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïî êà÷åñòâó. Ðàñòèòåëüíûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö Ôàð- ìàêîïåè Åâðàçèéñêîãî ýêîíîìè÷åñêîãî Ñîþçà — ðàñòèòåëüíûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ïðèìåíÿå- ìûé â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè îáùèõ è ÷àñò- íûõ ñòàòåé Ôàðìàêîïåè Ñîþçà. Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé ðàñòèòåëüíûé ñòàíäàðòíûé îá- ðàçåö Ôàðìàêîïåè Ñîþçà ÿâëÿåòñÿ ïåðâè÷íûì ñòàíäàðòíûì îáðàçöîì äëÿ ïðåäïîëàãàåìîãî èñ- ïîëüçîâàíèÿ. Ñòàíäàðòíûé ÈÊ-ñïåêòð Ôàðìàêîïåè Ñîþçà (ÈÊ ÔÅÀÝÑ) — ãðàôè÷åñêîå îòîáðàæå- íèå çàâèñèìîñòè ïðîïóñêàíèÿ ÈÊ-èçëó÷åíèÿ (%) îò âîëíîâîãî ÷èñëà (ñì–1), çàïèñàííîå ñ èñ- ïîëüçîâàíèåì ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà ñóáñòàíöèè â óñëîâèÿõ óêàçàííûõ â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå. Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö — ìàòåðèàë, äîñòà- òî÷íî îäíîðîäíûé è ñòàáèëüíûé â îòíîøåíèè îïðåäåëåííûõ ñâîéñòâ äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ åãî ïðè êîëè÷åñòâåííîé èëè êà÷åñòâåííîé îöåíêå ñâîéñòâ â ñîîòâåòñòâèè ñ ïðåäïîëàãàåìûì íà- çíà÷åíèåì. Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö ïðåäïðèÿòèÿ — ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, óòâåðæäåííûé èëè äîïó- ùåííûé ðóêîâîäèòåëåì ïðåäïðèÿòèÿ ê ïðèìå- íåíèþ íà äàííîì ïðåäïðèÿòèè â ñîîòâåòñòâèè ñ òðåáîâàíèÿìè äîêóìåíòîâ ïî êîíòðîëþ êà÷å- ñòâà ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà èëè ñóáñòàíöèè äëÿ ôàðìàöåâòè÷åñêîãî ïðèìåíåíèÿ Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö Ôàðìàêîïåè Åâðà- çèéñêîãî ýêîíîìè÷åñêîãî Ñîþçà (ÑÎ ÔÅÀÝÑ) — ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ïðåäíàçíà÷åííûé äëÿ èñ- ïîëüçîâàíèÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè ôàð- ìàêîïåéíûõ ñòàòåé Ôàðìàêîïåè Ñîþçà.  êà÷å- ñòâå ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ Ôàðìàêîïåè Ñîþçà ïðèíèìàþòñÿ ñòàíäàðòíûå îáðàçöû ôàðìàêî- ïåé ãîñóäàðñòâ — ÷ëåíîâ Ñîþçà è îñíîâíûõ ôàðìàêîïåé, ñ êîòîðûìè ãàðìîíèçèðîâàíà Ôàð- ìàêîïåÿ Ñîþçà. Ïåðå÷åíü ÑÎ ÔÅÀÝÑ ïðèâî- äèòñÿ íà ñàéòå Åâðàçèéñêîãî ýêîíîìè÷åñêîãî ñîþçà â ðàçäåëå «Ôàðìàêîïåÿ Ñîþçà». Õèìè÷åñêèé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö — ñòàí- äàðòíûé îáðàçåö, ïðåäñòàâëÿþùèé ñîáîé, êàê ïðàâèëî, õèìè÷åñêîå âåùåñòâî (èëè ñìåñü õè- ìè÷åñêèõ âåùåñòâ), ïðåäíàçíà÷åííûé äëÿ èñ- ïîëüçîâàíèÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè íîð- ìàòèâíîãî äîêóìåíòà ïî êà÷åñòâó. Õèìè÷åñêèé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö Ôàðìà- êîïåè Åâðàçèéñêîãî ýêîíîìè÷åñêîãî Ñîþçà — õèìè÷åñêèé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ïðèìåíÿå- ìûé â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè îáùèõ è ÷àñò- íûõ ñòàòåé Ôàðìàêîïåè Ñîþçà. Õèìè÷åñêèå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû Ôàðìàêîïåè Ñîþçà, êàê ïðàâèëî, ÿâëÿþòñÿ ïåðâè÷íûìè ñòàíäàðòíûìè îáðàçöàìè, çà èñêëþ÷åíèåì ñòàíäàðòíûõ îáðàç- öîâ (ïðåèìóùåñòâåííî àíòèáèîòèêîâ) ñ óñòà- íîâëåííûì çíà÷åíèåì, âûðàæåííûì â Ìåæäó- íàðîäíûõ åäèíèöàõ, êîòîðûå ÿâëÿþòñÿ âòîðè÷- íûìè ñòàíäàðòíûìè îáðàçöàìè, ïðîñëåæèâàå- ìûìè ïî îòíîøåíèþ ê ìåæäóíàðîäíûì ñòàí- äàðòíûì îáðàçöàì. ÊËÀÑÑÈÔÈÊÀÖÈß ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÕ ÎÁÐÀÇÖΠÑòàíäàðòíûå îáðàçöû ìîãóò áûòü êëàññèôè- öèðîâàíû íà îñíîâàíèè ðÿäà ïðèçíàêîâ (òàáëè- öà 2.3.11.0.-1). Ñòàíäàðòíûå îáðàçöû ìîãóò áûòü ðàçðàáî- òàíû íà îñíîâå ñóáñòàíöèé äëÿ ôàðìàöåâòè÷å- ñêîãî ïðèìåíåíèÿ, âåùåñòâ, ÿâëÿþùèõñÿ ïðè- ìåñÿìè ê ñóáñòàíöèè, ñìåñè ñóáñòàíöèè è ïðè- 161 ìåñè(åé). Äëÿ öåëåé ôàðìàêîïåéíîãî àíàëèçà ê ñòàíäàðòíûì îáðàçöàì ïðèðàâíèâàþòñÿ ñòàí- äàðòíûå ÈÊ-ñïåêòðû Ôàðìàêîïåè Ñîþçà.
Êðî- ìå òîãî, äëÿ ðàçðàáîòêè ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà äëÿ áèîëîãè÷åñêîãî ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà ìîæåò èñïîëüçîâàòüñÿ ïðîìûøëåííàÿ ñåðèÿ áèîëîãè÷åñêîãî ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, ðå- ïðåçåíòàòèâíàÿ ñåðèè ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðà- òà, èñïîëüçîâàííîé â êëèíè÷åñêèõ èññëåäîâà- íèÿõ. ÏÐÎÈÇÂÎÄÑÒÂÎ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÕ ÎÁÐÀÇÖΠÏðîèçâîäñòâî ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ îáó- ñëàâëèâàåòñÿ èõ ïðèðîäîé. Âñå ïðîèçâîäñòâåííûå îïåðàöèè îñóùåñòâ- ëÿþò ñîãëàñíî òðåáîâàíèÿì ñîîòâåòñòâóþùèõ ìåæãîñóäàðñòâåííûõ ñòàíäàðòîâ ñ öåëüþ îáåñ- ïå÷åíèÿ îäíîðîäíîñòè, ïðîñëåæèâàåìîñòè è ñî- õðàííîñòè ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. Ïðîèçâîäñò- âåííàÿ äîêóìåíòàöèÿ äîëæíà ñîäåðæàòü ïîë- íóþ èíôîðìàöèþ îòíîñèòåëüíî óïàêîâêè, ìàðêèðîâêè è õðàíåíèÿ. ÓÑÒÀÍÎÂËÅÍÈÅ ÑÂÎÉÑÒ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÕ ÎÁÐÀÇÖΠ äàííîì ðàçäåëå ïðèâîäèòñÿ èíôîðìàöèÿ, ðàçúÿñíÿþùàÿ ëèøü íåêîòîðûå îñîáåííîñòè ïðîöåäóðû óñòàíîâëåíèÿ ñâîéñòâ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. 1. ÏÅÐÂÈ×ÍÛÅ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÅ ÎÁÐÀÇÖÛ Äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ñâîéñòâ âåùåñòâ èëè ìà- òåðèàëîâ ïðè ñîçäàíèè ïåðâè÷íûõ ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ, èõ õàðàêòåðèçóþò ñ ïðèìåíåíèåì ðàç- ëè÷íûõ àíàëèòè÷åñêèõ ìåòîäèê. Ê ñòàíäàðòíîìó îáðàçöó, èñïîëüçóåìîìó äëÿ êîíòðîëÿ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ, îáû÷íî ïðè- ìåíÿþò ïîäõîäÿùèå ÷àñòè ïðîãðàììû èñïûòà- íèé, îïèñàííîé íèæå. – Îïèñàíèå âåùåñòâà (ïîäòâåðæäåíèå ñòðóêòóðû) ïóòåì îïðåäåëåíèÿ ñîîòâåòñòâóþ- ùèõ õèìè÷åñêèõ ñâîéñòâ, òàêèõ êàê ñòðóêòóð- íàÿ ôîðìóëà, ìîëåêóëÿðíàÿ ôîðìóëà, îòíîñè- òåëüíàÿ ìîëåêóëÿðíàÿ ìàññà èëè ñîñòàâ. Ïðè ýòîì ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû ðàçëè÷íûå ìåòî- äû, âêëþ÷àÿ: – ñïåêòðîìåòðèþ ÿäåðíîãî ìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà; – ìàññ-ñïåêòðîìåòðèþ; – ñïåêòðîôîòîìåòðèþ â èíôðàêðàñíîé îáëàñòè; – ýëåìåíòíûé àíàëèç. – Îïðåäåëåíèå ÷èñòîòû: – îïðåäåëåíèå ñîäåðæàíèÿ ðîäñòâåííûõ ïðèìåñåé ïîäõîäÿùèìè ìåòîäàìè ðàçäåëå- íèÿ è äåòåêòèðîâàíèÿ, åñëè ïðèìåíèìî; – îïðåäåëåíèå ñîäåðæàíèÿ âîäû; – îïðåäåëåíèå ñîäåðæàíèÿ îñòàòî÷íûõ îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé; – îïðåäåëåíèå ïîòåðè â ìàññå ïðè âûñó- øèâàíèè, êîòîðîå ìîæåò â íåêîòîðûõ ñëó÷à- ÿõ çàìåíèòü îïðåäåëåíèå ñîäåðæàíèÿ âîäû 162 Òàáëèöà 2.3.11.0.-1. — Êëàññèôèêàöèÿ ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ ¹ ï/ï Ïðèçíàê êëàññèôèêàöèè Âèä ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà 1 Ïðîãðàììà óñòàíîâëåíèÿ çíà÷åíèÿ Ïåðâè÷íûé Âòîðè÷íûé 2 Ïðèðîäà âåùåñòâà Õèìè÷åñêèé Áèîëîãè÷åñêèé Ðàñòèòåëüíûé 3 Íàçíà÷åíèå Èäåíòèôèêàöèÿ ×èñòîòà Êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå Êâàëèôèêàöèÿ îáîðóäîâàíèÿ 4 Óðîâåíü ïðèçíàíèÿ Ìåæäóíàðîäíûé Ìåæãîñóäàðñòâåííûé Ôàðìàêîïåéíûé Ãîñóäàðñòâåííûé Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö ïðåäïðèÿòèÿ è îñòàòî÷íûõ êîëè÷åñòâ îðãàíè÷åñêèõ ðàñ- òâîðèòåëåé; – îïðåäåëåíèå íåîðãàíè÷åñêèõ ïðèìå- ñåé (íàïðèìåð, ñóëüôàòíàÿ çîëà, àòîìíî-àá- ñîðáöèîííàÿ ñïåêòðîìåòðèÿ, ñïåêòðîìåòðèÿ èíäóêòèâíî ñâÿçàííîé ïëàçìû, ñïåêòðîìåò- ðèÿ ðåíòãåíîâñêîé ôëóîðåñöåíöèè); ïîëó- ÷åííûå ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ îáû÷íî íå èñïîëüçóþò ïðè óñòàíîâëåíèè çíà÷åíèÿ ñâîéñòâà, çà èñêëþ÷åíèåì çíà÷èòåëüíîãî âëèÿíèÿ íà ýòî çíà÷åíèå; – îïðåäåëåíèå ÷èñòîòû àáñîëþòíûì ìå- òîäîì (íàïðèìåð, ñïåêòðîìåòðèÿ ÿäåðíîãî ìàãíèòíîãî ðåçîíàíñà (êîëè÷åñòâåííûé àíà- ëèç), äèôôåðåíöèàëüíàÿ ñêàíèðóþùàÿ êàëî- ðèìåòðèÿ èëè òèòðîâàíèå; ðåçóëüòàòû ýòèõ îïðåäåëåíèé èñïîëüçóþò äëÿ ïîäòâåðæäå- íèÿ ðåçóëüòàòîâ, ïîëó÷åííûõ ñ èñïîëüçîâà- íèåì ìåòîäîâ ðàçäåëåíèÿ; ïîëó÷åííûå ðå- çóëüòàòû íå èñïîëüçóþò ïðè óñòàíîâëåíèè çíà÷åíèÿ ñâîéñòâà. Ïðè óñòàíîâëåíèè ñâîéñòâ ïåðâè÷íûõ áèî- ëîãè÷åñêèõ ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ èñïîëüçóþò îáùåïðèíÿòûå ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ èõ ïîäëèí- íîñòè è ñïåöèôè÷åñêîé àêòèâíîñòè, à òàêæå, ïðè íåîáõîäèìîñòè, ìåòîäû, èñïîëüçîâàâøèåñÿ äëÿ õàðàêòåðèñòèêè àêòèâíîãî (äåéñòâóþùåãî) âåùåñòâà ïðè ðàçðàáîòêå ëåêàðñòâåííîãî ïðåïà- ðàòà.
Ïðè ýòîì ïîäõîäÿùèå ñåðèè áèîëîãè÷å- ñêîãî ëåêàðñòâåííîãî ïðåïàðàòà, ïðåäïî÷òè- òåëüíî èç êëèíè÷åñêè îöåíåííûõ, äîëæíû áûòü ïîëíîñòüþ îõàðàêòåðèçîâàíû íà ïðåäìåò õèìè- ÷åñêîãî ñîñòàâà, ÷èñòîòû, áèîëîãè÷åñêîé àêòèâ- íîñòè, ãäå ýòî âîçìîæíî, ñ ïîëíûì îïðåäåëåíè- åì ïîñëåäîâàòåëüíîñòè àìèíîêèñëîò, è óòâåð- æäåíû äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ êàê áèîëîãè÷åñêèå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû. 2. ÂÒÎÐÈ×ÍÛÅ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÅ ÎÁÐÀÇÖÛ Âòîðè÷íûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö äîëæåí îáëàäàòü òåìè æå çíà÷èìûìè äëÿ èñïûòàíèÿ ñâîéñòâàìè, ÷òî è ïåðâè÷íûé ñòàíäàðòíûé îá- ðàçåö, äî êîòîðîãî îí äîëæåí áûòü ïðîñëåæè- âàåì. 3. ÕÈÌÈ×ÅÑÊÈÅ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÅ ÎÁÐÀÇÖÛ Äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ñâîéñòâ õèìè÷åñêîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà îáúåì èñïûòàíèé, ïîä- òâåðæäàþùèõ åãî ïðèãîäíîñòü äëÿ èñïîëüçîâà- íèÿ ïî íàçíà÷åíèþ, çàâèñèò îò ïðåäïîëàãàåìîãî ïðèìåíåíèÿ äàííîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. 3.1. Õèìè÷åñêèå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû äëÿ èäåíòèôèêàöèè. Êàê ïðàâèëî, âûáðàííàÿ äëÿ ñîçäàíèÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà ñåðèÿ ñóá- ñòàíöèè äëÿ ôàðìàöåâòè÷åñêîãî ïðèìåíåíèÿ äîëæíà âûäåðæèâàòü ñîîòâåòñòâóþùèå òðåáî- âàíèÿ ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüè èëè ñïå- öèôèêàöèè ïðîèçâîäèòåëÿ. Äîïóñêàåòñÿ ïðîâî- äèòü ïîëíîå ñòðóêòóðíîå îïèñàíèå òîëüêî äëÿ ïåðâîé ñåðèè ïåðâè÷íîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. 3.2. Õèìè÷åñêèå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû äëÿ èñïûòàíèÿ íà ðîäñòâåííûå ïðèìåñè. Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö ñîîòâåòñòâóþùåé ïðèìå- ñè, õàðàêòåðèçóþò ïî ïîêàçàòåëÿì ïîäëèííîñòè è ÷èñòîòû.  ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ ñòàíäàðòíî- ãî îáðàçöà äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ êîí- êðåòíîé ïðèìåñè, ïðåäïî÷òèòåëüíî, ÷òîáû ñî- äåðæàíèå ýòîé ïðèìåñè â ñòàíäàðòíîì îáðàçöå ñîñòàâëÿëî íå ìåíåå 95,0 %; åñëè ýòî óñëîâèå âûïîëíÿåòñÿ, òî çíà÷åíèå íå óêàçûâàþò è ïðè- íèìàþò ðàâíûì 100,0 %; òàêîå ïðèáëèæåííîå çíà÷åíèå äîïóñòèìî, òàê êàê îíî íå áóäåò îêàçû- âàòü ñóùåñòâåííîãî âëèÿíèÿ íà îïðåäåëåíèå ïðèìåñåé. Åñëè óêàçàííîå ìèíèìàëüíîå ñîäåð- æàíèå íå ìîæåò áûòü äîñòèãíóòî, òî óêàçûâàþò óñòàíîâëåííîå çíà÷åíèå äëÿ ñòàíäàðòíîãî îá- ðàçöà. Îáû÷íî èñïîëüçóþò ñòàíäàðòíûé îáðàçåö â òîé æå êèñëîòíîé, îñíóâíîé èëè ñîëåâîé ôîð- ìå, ÷òî è ñóáñòàíöèÿ äëÿ ôàðìàöåâòè÷åñêîãî ïðèìåíåíèÿ, äëÿ êîíòðîëÿ êà÷åñòâà êîòîðîé îí èñïîëüçóåòñÿ.  ïðîòèâíîì ñëó÷àå, ïðè îòñóòñò- âèè äðóãèõ óêàçàíèé â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå è íîðìàòèâíîì äîêóìåíòå ïî êà÷åñòâó, èñïîëüçóþò ñîîòâåòñòâóþùèé ñòåõèîìåòðè÷å- ñêèé êîýôôèöèåíò ïåðåñ÷åòà. Åñëè ïðèìåñü íåäîñòóïíà â äîñòàòî÷íîì äëÿ ïîëó÷åíèÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà êîëè÷åñòâå, èñïîëüçóþò ñëåäóþùèå ïîäõîäû: – ïðèãîòîâëåíèå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, êî- òîðûé ñîäåðæèò ñìåñü îñíîâíîãî(ûõ) êîìïî- íåíòà(îâ) è ïðèìåñè(åé); – ïðèãîòîâëåíèå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, ñî- äåðæàùåãî ñìåñü ñïåöèôèöèðîâàííûõ ïðèìå- ñåé.  ñëó÷àå åñëè òàêàÿ ñìåñü èñïîëüçóåòñÿ è äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñîäåðæàíèÿ êîíêðåòíîé ïðè- ìåñè, êîëè÷åñòâåííîå ñîäåðæàíèå ïðèìåñè â ñòàíäàðòíîì îáðàçöå óñòàíàâëèâàþò ïðè ïî- ìîùè ñòàíäàðòíûõ ìåòîäîâ ðàçäåëåíèÿ, à ïîëó- ÷åííîå çíà÷åíèå ÿâëÿåòñÿ óñòàíîâëåííûì çíà- ÷åíèåì ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. 163 3.3. Õèìè÷åñêèå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû äëÿ êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ 3.3.1. Õèìè÷åñêèå, ôèçèêî-õèìè÷åñêèå è ôè- çè÷åñêèå ìåòîäû êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ. Îáúåì èñïûòàíèé ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà äëÿ êî- ëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ øèðå, ÷åì â ñëó÷àå äðóãîãî íàçíà÷åíèÿ. Óñòàíîâëåííîå çíà÷åíèå, êàê ïðàâèëî, ðàñ- ñ÷èòûâàþò èñõîäÿ èç ðåçóëüòàòîâ, ïîëó÷åííûõ ïðè îïðåäåëåíèè ïðèìåñåé (ðîäñòâåííûõ ïðè- ìåñåé, íåîðãàíè÷åñêèõ ïðèìåñåé, âîäû è îñòà- òî÷íûõ îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé), èñïîëü- çóÿ ïðèíöèï áàëàíñà ìàññ. Òàêæå ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû è äðóãèå ïîäõîäÿùèå ìåòîäû. Ïî âîçìîæíîñòè, óñòàíîâëåííîå çíà÷åíèå ïîäòâåð- æäàþò ïóòåì ñðàâíåíèÿ ñ ðåçóëüòàòàìè, ïîëó- ÷åííûìè ïðè èñïîëüçîâàíèè àáñîëþòíîãî ìå- òîäà.
Ïðè îòñóòñòâèè äðóãèõ óêàçàíèé óñòàíîâ- ëåííîå çíà÷åíèå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, ïîñòàâ- ëÿåìîãî â óïàêîâêå, ïðèíèìàåòñÿ áåç äîïîëíè- òåëüíûõ ïåðåñ÷åòîâ «êàê åñòü», è ñîäåðæèìîå óïàêîâêè íå òðåáóåò âûñóøèâàíèÿ ïåðåä èñ- ïîëüçîâàíèåì. Äëÿ ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ, èñ- ïîëüçóåìûõ ïðè êîëè÷åñòâåííîì îïðåäåëåíèè è ïîëó÷åííûõ ïóòåì ëèîôèëèçàöèè, óêàçûâàþò ñîäåðæàíèå ÷èñòîãî âåùåñòâà â ìèëëèãðàììàõ èëè â Ìåæäóíàðîäíûõ åäèíèöàõ íà óïàêîâêó. 3.3.2. Ìèêðîáèîëîãè÷åñêèå ìåòîäû êîëè÷å- ñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ. Àêòèâíîñòü âûðàæàþò â Ìåæäóíàðîäíûõ åäèíèöàõ èëè â Ôàðìàêîïåé- íûõ åäèíèöàõ äåéñòâèÿ (â ñëó÷àå îòñóòñòâèÿ ìåæäóíàðîäíîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà). Çàÿâ- ëåííóþ àêòèâíîñòü è äîâåðèòåëüíûå èíòåðâàëû ðåçóëüòàòîâ ìåæëàáîðàòîðíîãî èñïûòàíèÿ ðàñ- ñ÷èòûâàþò ñîãëàñíî îáùåïðèíÿòûì ñòàòèñòè- ÷åñêèì ìåòîäèêàì. 3.3.3. Êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå êîìïî- íåíòîâ â ëåêàðñòâåííîì ðàñòèòåëüíîì ñûðüå è ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâàõ íà åãî îñíîâå. Êîìïîíåíòû ñ èçâåñòíîé òåðàïåâòè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ èëè ìàðêåðû, èñïîëüçóåìûå â êà- ÷åñòâå ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ, îöåíèâàþò ïî ïî- êàçàòåëÿì ïîäëèííîñòè è ÷èñòîòû; óñòàíîâëåí- íîå çíà÷åíèå óêàçûâàþò íåçàâèñèìî îò ñòåïåíè ÷èñòîòû. 4. ÐÀÑÒÈÒÅËÜÍÛÅ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÅ ÎÁÐÀÇÖÛ Äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ñâîéñòâ ðàñòèòåëüíîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà îáúåì èñïûòàíèé, ïîä- òâåðæäàþùèõ åãî ïðèãîäíîñòü äëÿ èñïîëüçîâà- íèÿ ïî íàçíà÷åíèþ, çàâèñèò îò ïðåäïîëàãàåìîãî ïðèìåíåíèÿ äàííîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. Êàê ïðàâèëî èõ õàðàêòåðèçóþò ñ ïðèìåíåíè- åì ðàçëè÷íûõ ìåòîäîâ è ïðèìåíÿþò ïîäõîäÿ- ùèå ÷àñòè îïèñàííîé íèæå ïðîãðàììû èñïûòà- íèé: – îïèñàíèå (âíåøíèå ïðèçíàêè è ìåòîäû ìèêðîñêîïè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé); – òîíêîñëîéíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ; – ãàçîâàÿ õðîìàòîãðàôèÿ; – æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ; – êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå ñîäåðæàíèÿ âîäû; – ñîäåðæàíèå îñòàòî÷íûõ îðãàíè÷åñêèõ ðàñòâîðèòåëåé; – ïîòåðÿ â ìàññå ïðè âûñóøèâàíèè; – ïðèìåñè; – êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå êîìïîíåí- òîâ (íàïðèìåð, êîìïîíåíòîâ ñ èçâåñòíîé òåðà- ïåâòè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ, àêòèâíûõ ìàðêåðîâ, àíàëèòè÷åñêèõ ìàðêåðîâ). Ðàñ÷åò ïðîâîäÿò îòíîñèòåëüíî ïîäõîäÿùåãî îáðàçöà ÷èñòîãî êîìïîíåíòà èëè êîìïîíåíòîâ, èìåþùåãî óñòàíîâëåííîå çíà÷åíèå. 5. ÁÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÅ È ÕÈÌÈ×ÅÑÊÈÅ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÅ ÎÁÐÀÇÖÛ, ÏÐÅÄÍÀÇÍÀ×ÅÍÍÛÅ ÄËß ÊÎÍÒÐÎËß ÊÀ×ÅÑÒÂÀ ÁÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÕ ËÅÊÀÐÑÒÂÅÍÍÛÕ ÑÐÅÄÑÒ Áèîëîãè÷åñêèé è õèìè÷åñêèé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ïðåäíàçíà÷åííûé äëÿ êîíòðîëÿ êà÷åñò- âà áèîëîãè÷åñêèõ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ, êàê ïðàâèëî, ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé âòîðè÷íûé ñòàí- äàðòíûé îáðàçåö, êàëèáðîâàííûé ïî ñîîòâåòñò- âóþùåìó ìåæäóíàðîäíîìó ñòàíäàðòíîìó îá- ðàçöó Âñåìèðíîé îðãàíèçàöèè çäðàâîîõðàíå- íèÿ, à â ñëó÷àå îòñóòñòâèÿ ìåæäóíàðîäíîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ïåð- âè÷íûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö ñ óñòàíîâëåííûì çíà÷åíèåì, âûðàæåííûì â åäèíèöàõ äåéñòâèÿ Ôàðìàêîïåè Ñîþçà èëè â äðóãèõ ïîäõîäÿùèõ åäèíèöàõ. ÌÀÐÊÈÐÎÂÊÀ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÕ ÎÁÐÀÇÖΠÍà ýòèêåòêå ïåðâè÷íîé óïàêîâêè ñî ñòàí- äàðòíûì îáðàçöîì êàê ìèíèìóì óêàçûâàþò íà- èìåíîâàíèå è àäðåñ ïðîèçâîäèòåëÿ, íàèìåíîâà- íèå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, èíäåêñ, ïðèñâîåí- íûé ïðîèçâîäèòåëåì, íîìåð ñåðèè (ïàðòèè), êîëè÷åñòâî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà â óïàêîâêå (ïî 164 âîçìîæíîñòè), íåîáõîäèìóþ ïðåäóïðåæäàþ- ùóþ èíôîðìàöèþ î âðåäå äëÿ çäîðîâüÿ èëè î áåçîïàñíîñòè. Òàêæå ïðåäîñòàâëÿåòñÿ äîêóìåíòàöèÿ (ñåð- òèôèêàò/ïàñïîðò è èíñòðóêöèÿ ïî ïðèìåíåíèþ (ïðè íàëè÷èè)) íà ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ãäå óêàçûâàþò îáùåå îïèñàíèå îáðàçöà, íàçíà÷å- íèå, óêàçàíèÿ ïî ïðàâèëüíîìó èñïîëüçîâàíèþ è ñîîòâåòñòâóþùèì óñëîâèÿì õðàíåíèÿ, óñòà- íîâëåííîå çíà÷åíèå ñâîéñòâ ñ óêàçàíèåì íåîï- ðåäåëåííîñòè (ïðè íåîáõîäèìîñòè), äàòó èñòå- ÷åíèÿ ñðîêà ãîäíîñòè.
ÕÐÀÍÅÍÈÅ È ÄÈÑÒÐÈÁÜÞÖÈß ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÕ ÎÁÐÀÇÖΠÑòàíäàðòíûé îáðàçåö äîëæåí õðàíèòüñÿ è òðàíñïîðòèðîâàòüñÿ â ïðåäïèñàííûõ ïðîèçâî- äèòåëåì óñëîâèÿõ, ãàðàíòèðóþùèõ åãî ñòàáèëü- íîñòü. Èñïîëüçóþò ïîäõîäÿùóþ òðàíñïîðòíóþ òàðó (óïàêîâêó) äëÿ ìèíèìèçàöèè ðèñêà ïîâðå- æäåíèÿ ïðè òðàíñïîðòèðîâêå, à òàêæå äëÿ õðà- íåíèÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà ïðè îïðåäåëåííîé òåìïåðàòóðå è ñîîòâåòñòâèÿ äåéñòâóþùèì ðó- êîâîäñòâàì ïî òðàíñïîðòèðîâêå. ÏÐÈÌÅÍÅÍÈÅ ÑÒÀÍÄÀÐÒÍÛÕ ÎÁÐÀÇÖΠÑòàíäàðòíûé îáðàçåö äîëæåí áûòü ïðèçíàí ïîëüçîâàòåëåì ïðèãîäíûì äëÿ ïðèìåíåíèÿ ïî íàçíà÷åíèþ. Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö Ôàðìàêîïåè Ñîþçà äîëæåí èñïîëüçîâàòüñÿ â öåëÿõ, îïèñàí- íûõ â ñîîòâåòñòâóþùèõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòü- ÿõ, åñëè èíîå íå ðàçðåøåíî óïîëíîìî÷åííûì îðãàíîì. Åñëè ñòàíäàðòíûé îáðàçåö ïðåäïîëàãàåòñÿ èñïîëüçîâàòü äëÿ öåëåé, îòëè÷íûõ îò òåõ, äëÿ êîòîðûõ åãî çíà÷åíèå ñâîéñòâà áûëî óñòàíîâëå- íî, åãî ïðèãîäíîñòü â ýòîì ñëó÷àå äîëæíà áûòü äîêàçàíà è ïîëíîñòüþ îïèñàíà â ðåãèñòðàöèîí- íîì äîñüå. Êàê ïðàâèëî, ñòàíäàðòíûé îáðàçåö ôàñóåòñÿ â êîëè÷åñòâå, íåîáõîäèìîì äëÿ íåìåäëåííîãî èñïîëüçîâàíèÿ ïîñëå âñêðûòèÿ óïàêîâêè. Çà ïðèìåíåíèå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà â äðóãèõ óñ- ëîâèÿõ îòâåòñòâåííîñòü íåñåò ïîëüçîâàòåëü. Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö â íåâñêðûòîé çàâîäñêîé óïàêîâêå ïðèãîäåí äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ íà ïðîòÿ- æåíèè ñðîêà, óñòàíîâëåííîãî ïðîèçâîäèòåëåì äàííîãî ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. Âòîðè÷íûå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû. Âòîðè÷- íûå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû, êàê ïðàâèëî, ðàçðà- áàòûâàþòñÿ äëÿ ñîêðàùåíèÿ èñïîëüçîâàíèÿ ïåðâè÷íûõ ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ è ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû â ðàáîòå äëÿ ðóòèííîãî êîíòðîëÿ êà÷åñòâà. Âòîðè÷íûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö ìî- æåò áûòü èñïîëüçîâàí òîëüêî â òåõ æå öåëÿõ, ÷òî è ïåðâè÷íûé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ïî êîòîðîìó ïðîâîäèëîñü óñòàíîâëåíèå åãî ñâîéñòâ. Ñòàíäàðòíûå ÈÊ-ñïåêòðû Ôàðìàêîïåè Åâðàçèéñêîãî ýêîíîìè÷åñêîãî Ñîþçà ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû äëÿ óñòàíîâëåíèÿ ïîäëèí- íîñòè ñóáñòàíöèé äëÿ ôàðìàöåâòè÷åñêîãî ïðè- ìåíåíèÿ â ñîîòâåòñòâèè ñ óêàçàíèÿìè ÷àñòíûõ ôàðìàêîïåéíûõ ñòàòåé. ÏÐÎÃÐÀÌÌÀ ÏÎÂÒÎÐÍÎÃÎ ÊÎÍÒÐÎËß Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ïðèãîäíîñòè ñòàíäàðò- íûõ îáðàçöîâ äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ ðàçðàáàòûâà- þò è ïðèìåíÿþò ïðîãðàììó ìîíèòîðèíãà ñòà- áèëüíîñòè ñòàíäàðòíûõ îáðàçöîâ ñ ó÷åòîì èç- âåñòíûõ ôèçèêî-õèìè÷åñêèõ ñâîéñòâ è äàííûõ ïî ñòàáèëüíîñòè. Ïðîãðàììà ìîíèòîðèíãà ïðè- çâàíà îáíàðóæèâàòü íà ðàííåé ñòàäèè ëþáûå ïðèçíàêè èçìåíåíèÿ ïîêàçàòåëåé êà÷åñòâà, âëèÿþùèõ íà ïðèìåíåíèå ñòàíäàðòíûõ îáðàç- öîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì ñîîòâåòñòâóþùèõ àíàëè- òè÷åñêèõ ìåòîäèê. Îáû÷íî âûáèðàþò ìåòîäèêè èç èñïîëüçîâàííûõ â ïðîöåññå ñîçäàíèÿ ñòàí- äàðòíûõ îáðàçöîâ. Ïåðèîä ìîíèòîðèíãà (ïðîäëåíèå ñðîêà ãîä- íîñòè) ìîæåò áûòü óâåëè÷åí ïðè íàëè÷èè äîñ- òàòî÷íîãî êîëè÷åñòâà ýêñïåðèìåíòàëüíûõ äàí- íûõ, îáîñíîâûâàþùèõ ýòó âîçìîæíîñòü. Äî- ïóñòèìûå êðèòåðèè îòêëîíåíèé äîëæíû áûòü çàðàíåå îïðåäåëåíû.  ñëó÷àå èõ ïðåâûøåíèÿ, íåîáõîäèìî ïîâòîðíî óñòàíîâèòü ñâîéñòâà ñå- ðèè ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà èëè ïðîèçâåñòè çàìå- íó ñåðèè. 165 203120000-2022 2.3.12.0. Ñòàòèñòè÷åñêàÿ îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ áèîëîãè÷åñêèõ èñïûòàíèé ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ  äàííîé îáùåé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå èç- ëîæåíû îñíîâíûå ìåòîäû ñòàòèñòè÷åñêîé îáðà- áîòêè ðåçóëüòàòîâ ôàðìàêîïåéíûõ áèîëîãè÷å- ñêèõ èñïûòàíèé ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ. Äëÿ ðàñ÷åòîâ ìîæíî èñïîëüçîâàòü ýëåêòðîí- íûå òàáëèöû. Ïðè ýòîì, çà ñ÷åò ðàçíèöû â òî÷- íîñòè âû÷èñëåíèé, ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ìî- ãóò íåçíà÷èòåëüíî îòëè÷àòüñÿ îò ïðèâåäåííûõ â ñòàòüå. Âîçìîæíî ïðèìåíåíèå ñïåöèàëüíîãî âàëèäèðîâàííîãî ñòàòèñòè÷åñêîãî, â òîì ÷èñëå áèîìåòðè÷åñêîãî: ïðîãðàììíîãî îáåñïå÷åíèÿ (CombiStats, PLA èëè àíàëîãè÷íûå).
ÓÑËÎÂÍÛÅ ÎÁÎÇÍÀ×ÅÍÈß Èñïîëüçóþò ñëåäóþùèå îñíîâíûå óñëîâíûå îáîçíà÷åíèÿ: a — ñâîáîäíûé ÷ëåí ëèíåéíîé ðåãðåññèè; b — óãëîâîé êîýôôèöèåíò ëèíåéíîé ðåã- ðåññèè (òàíãåíñ óãëà íàêëîíà ëèíèè çàâèñèìîñòè âåëè÷èíû îòâåòà òåñò-îáúåêòà îò äîçû èëè åå ëîãàðèô- ìà; c — ÷èñëî ñòîëáöîâ â òàáëèöå (ðàçäåë 4.2.3); d, D — ðàçíîñòü íåêîòîðûõ âåëè÷èí; — ÷èñëî äîç äëÿ êàæäîãî îáðàçöà, èñ- êëþ÷àÿ êîíòðîëü (ðàçäåë 3.2.8); — ÷èñëî òåñò-îáúåêòîâ, ïðîäåìîíñòðè- ðîâàâøèõ íàëè÷èå îòâåòà íà «Îáðà- çåö 2» (ðàçäåë 4.2.3); e — îñíîâàíèå íàòóðàëüíîãî ëîãàðèôìà; f — ÷èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû; h — ÷èñëî îáðàçöîâ â èñïûòàíèè, âêëþ÷àÿ ñòàíäàðòíûé îáðàçåö (ðàçäåë 3.2.8); k — ÷èñëî îáðàçöîâ â èñïûòàíèè (âêëþ- ÷àÿ ñòàíäàðòíûé îáðàçåö), óìíîæåí- íîå íà êîëè÷åñòâî äîç â èñïûòàíèè; n — ÷èñëî îòâåòîâ â ãðóïïå; p — óðîâåíü çíà÷èìîñòè; r — ÷èñëî ñòðîê â òàáëèöå (ðàçäåë 4.2.3); s2 (s2) — äèñïåðñèÿ; s (s) — ñðåäíåå êâàäðàòè÷åñêîå îòêëîíåíèå; s1, s2 è s3 — ìàëàÿ, ñðåäíÿÿ è áîëüøàÿ äîçà ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà S; t — êðèòåðèé Ñòüþäåíòà, t-êðèòåðèé (òàáëèöà 2 Ïðèëîæåíèÿ); u — îòâåò òåñò-îáúåêòà â ðàçäåëå 4.10; u1, u2 è u3 — ìàëàÿ, ñðåäíÿÿ è áîëüøàÿ äîçà èñïûòóåìîãî îáðàçöà U; x, y — îòâåò òåñò-îáúåêòà èëè ëîãàðèôì äîçû (ðàçäåë 3); y S è yU — ñðåäíèé îòâåò íà ñòàíäàðòíûé îáðàçåö è èñïûòóåìûé îáðàçåö; c 2 — çíà÷åíèå êðèòåðèÿ õè-êâàäðàò; A, B, C è D — ÷èñëî òåñò-îáúåêòîâ, ïðîäåìîí- ñòðèðîâàâøèõ íàëè÷èå èëè îò- ñóòñòâèå îòâåòà (ðàçäåë 4.2.3); AU — îæèäàåìàÿ àêòèâíîñòü èñïûòóå- ìîãî îáðàçöà; A1 è A0 — êîýôôèöèåíòû äëÿ âû÷èñëåíèÿ ñðåäíåé ñìåðòåëüíîé äîçû (ðàç- äåë 4.2.1); B — ñóììà îòâåòîâ çà 2 äíÿ äëÿ êàæ- äîãî æèâîòíîãî (ðàçäåë 3.1.1.4); — ñóììà îòâåòîâ êîíòðîëüíîé ãðóïïû (ðàçäåë 3.2.8); C — ñòàòèñòèêà, ïðèìåíÿåìàÿ äëÿ âû- ÷èñëåíèÿ äîâåðèòåëüíîãî èíòåð- âàëà; — ñóììà ñòîëáöîâ â ìåòîäå ñëó÷àé- íûõ áëîêîâ (ðàçäåë 3.2.3) è ëà- òèíñêîì êâàäðàòå (ðàçäåëû 3.2.4 è 3.2.5); D — äîçà èñïûòóåìîãî ïðåïàðàòà (ðàçäåë 4.2.1); D — ÷èñëî òåñò-îáúåêòîâ, ïðîäåìîí- ñòðèðîâàâøèõ íàëè÷èå ýôôåêòà ïðè äåéñòâèè «Îáðàçöà 2» (ðàç- äåë 4.2.3); DI è DII — ñóììà îòâåòîâ â ïåðâûé è âòîðîé äåíü äâîéíîãî ïåðåêðåñòà (ðàç- äåë 3.2.6); E — ñóììà êâàäðàòîâ ïîêàçàòåëÿ Ðåã- ðåññèÿ (ðàçäåë 3.2); — îæèäàåìîå ÷èñëî íàáëþäåíèé â ÿ÷åéêå (ðàçäåë 4.2.3); F — çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà (îò- íîøåíèå áóëüøåé äèñïåðñèè ê ìåíüøåé, òàáëèöà 3 Ïðèëîæå- íèÿ); G — êîìáèíàöèè óñëîâèé (ðàçäåë 3.2.8); H — ìíîæèòåëü äëÿ äèñïåðñèîííîãî àíàëèçà (ðàçäåë 3.2.8); I — äåñÿòè÷íûé ëîãàðèôì ñîîòíî- øåíèÿ äîç; 166 JS, JU, JU’ — ñòàòèñòèêè äëÿ âû÷èñëåíèÿ ïîêà- çàòåëÿ Íåëèíåéíîñòü ïðè äèñïåð- ñèîííîì àíàëèçå (ðàçäåë 3.2.8); Ê — ïîïðàâî÷íûé êîýôôèöèåíò äëÿ äèñïåðñèîííîãî àíàëèçà; L — ðàçíîñòü ëîãàðèôìîâ âåðõíåé è íèæíåé äîâåðèòåëüíîé ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè; LS è LU — ëèíåéíûå êîíòðàñòû ñòàíäàðòíî- ãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàç- öà; — ëèíåéíûå ïðîèçâåäåíèÿ ñòàíäàðò- íîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îá- ðàçöà (ðàçäåë 3.2.8); ÌU — äåñÿòè÷íûé ëîãàðèôì áèîëîãè÷å- ñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îá- ðàçöà; MU ¢ — âåëè÷èíà, íà êîòîðóþ íàéäåííàÿ áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü èñïû- òóåìîãî îáðàçöà îòëè÷àåòñÿ îò åãî îæèäàåìîé áèîëîãè÷åñêîé àêòèâ- íîñòè (â ëîãàðèôìè÷åñêîì âèäå); N — îáùåå ÷èñëî îòâåòîâ â îïûòå; O — ôàêòè÷åñêîå ÷èñëî íàáëþäåíèé â ÿ÷åéêå (ðàçäåë 4.2.3); P — äîâåðèòåëüíàÿ âåðîÿòíîñòü; — çíà÷åíèå ïðîáèòà (ðàçäåë 4.2.1); — ñòàòèñòèêà, âû÷èñëÿåìàÿ ïî ôîð- ìóëå Ôèøåðà (ðàçäåë 4.2.3); Q — êîíòðîëüíûé êðèòåðèé âûÿâëåíèÿ ãðóáûõ îøèáîê; QS è QU — êâàäðàòè÷åñêèé êîíòðàñò äëÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóå- ìîãî îáðàçöà â äèñïåðñèîííîì àíàëèçå; R — ñóììà áëîêîâ â ìåòîäå ñëó÷àéíûõ áëîêîâ, ñóììà ñòðîê â ìåòîäå ëà- òèíñêîãî êâàäðàòà (ðàçäåë 3.1.1.3); — îòíîøåíèå óãëîâûõ êîýôôèöèåí-
òîâ (ðàçäåë 3.1.2); RU — íàéäåííàÿ áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâ- íîñòü èñïûòóåìîãî îáðàçöà (10Ìu); S — ñòàíäàðòíûé îáðàçåö; S — ñóììàðíûé îòâåò íà ñòàíäàðòíûé îáðàçåö; S1, S2 è S3 — ñóììàðíûå îòâåòû íà ìàëóþ, ñðåäíþþ è áîëüøóþ äîçó ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà S; U — èñïûòóåìûé îáðàçåö; U — ñóììàðíûé îòâåò íà èñïûòóåìûé îáðàçåö; U1, U2 è U3 — ñóììàðíûå îòâåòû íà ìàëóþ, ñðåäíþþ è áîëüøóþ äîçó èñïû- òóåìîãî îáðàçöà U; W — âåñîâîé êîýôôèöèåíò äëÿ ïðî- áèò-ìåòîäà (ðàçäåë 4.2.1, òàáëèöà 4 Ïðèëîæåíèÿ); — âåñîâîé êîýôôèöèåíò äëÿ îáúåäèíå- íèÿ íåçàâèñèìûõ áèîëîãè÷åñêèõ èñ- ïûòàíèé (ðàçäåë 5); V — êîýôôèöèåíò äèñïåðñèè äëÿ âû÷èñ- ëåíèÿ äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö (ðàç- äåë 3.2.8); ÄÈ (CI) — äîâåðèòåëüíûé èíòåðâàë, äèàïàçîí âîêðóã ñðåäíåãî çíà÷åíèÿ y, â êîòî- ðîì ñ îïðåäåëåííûì óðîâíåì íà- äåæíîñòè èëè äîâåðèÿ, íàõîäèòñÿ èñòèííîå çíà÷åíèå y. 1. ÐÀÍÄÎÌÈÇÀÖÈß Ïîðÿäîê ââåäåíèÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà, ðàçëè÷íûõ âîçäåéñòâèé íà òåñò-îáúåêòû äîëæíî áûòü îñóùåñòâëåíî ñëó÷àéíûì îáðàçîì. Ðåêîìåíäóåòñÿ èñïîëüçî- âàòü «ñìåøàííûå» ãðóïïû, òî åñòü òåñò-îáúåê- òû, ïîëó÷àþùèå îäèíàêîâóþ äîçó îäíîãî è òîãî æå îáðàçöà, äîëæíû áûòü ðàâíîìåðíî ðàñïðåäå- ëåíû ïî êëåòêàì, ïëàíøåòàì è ò.ä. Íåñìåøàí- íûå ãðóïïû äîïóñòèìû òîëüêî ïðè íàëè÷èè äî- êàçàòåëüñòâ îòñóòñòâèÿ ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìî- ãî âëèÿíèÿ ìåñòà è âðåìåíè ïðîâåäåíèÿ èñïûòàíèÿ íà åãî ðåçóëüòàòû. Ðàñïðåäåëåíèå òåñò-îáúåêòîâ ïî ãðóïïàì è èñêëþ÷åíèå òåñò-îáúåêòîâ èç ãðóïï ïðè óðàâ- íèâàíèè èõ ÷èñëåííîñòè ñëåäóåò ïðîâîäèòü ìå- òîäîì ñëó÷àéíûõ ÷èñåë. Äëÿ ýòîãî ìîæíî âîñ- ïîëüçîâàòüñÿ ïðîãðàììíûì îáåñïå÷åíèåì, íà- ïðèìåð ôóíêöèåé ýëåêòðîííûõ òàáëèö ÑËÓ×ÌÅÆÄÓ (MS Excel, Calc è äð.). 2. ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈÅ ÀÊÒÈÂÍÎÑÒÈ ËÅÊÀÐÑÒÂÅÍÍÎÃÎ ÑÐÅÄÑÒÂÀ ÁÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÌÈ ÌÅÒÎÄÀÌÈ Ôèçè÷åñêèå è õèìè÷åñêèå ïîêàçàòåëè íå âñåãäà â ïîëíîé ìåðå õàðàêòåðèçóþò êà÷åñòâî ëåêàðñòâåííîãî ñðåäñòâà.  ïîäîáíûõ ñëó÷àÿõ íåîáõîäèìî îïðåäåëåíèå ïîêàçàòåëåé, âûïîë- íÿåìûõ áèîëîãè÷åñêèìè ìåòîäàìè. Ñ ïîìîùüþ ôàðìàêîïåéíûõ áèîëîãè÷åñêèõ èñïûòàíèé îïðåäåëÿþò áèîëîãè÷åñêóþ àêòèâ- íîñòü èëè òîêñè÷íîñòü ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ, à òàêæå íåæåëàòåëüíûå ïðèìåñè. Ñîãëàñíî Ïðàâèëàì ïðîâåäåíèÿ èññëåäîâà- íèé áèîëîãè÷åñêèõ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ Åâ- ðàçèéñêîãî ýêîíîìè÷åñêîãî ñîþçà, óòâåðæäåí- íûì Ðåøåíèåì Ñîâåòà Åâðàçèéñêîé ýêîíîìè÷å- ñêîé êîìèññèè îò 3 íîÿáðÿ 2016 ã. ¹ 89, áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü îïðåäåëÿåò îñîáóþ ñïîñîáíîñòü èëè ñâîéñòâî ëåêàðñòâåííîãî ñðåä- 167 ñòâà ïðîèçâîäèòü îïðåäåëåííûé áèîëîãè÷åñêèé ýôôåêò. Ïðè îïðåäåëåíèè áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíî- ñòè â ïîäàâëÿþùåì áîëüøèíñòâå ñëó÷àåâ èñ- ïîëüçóþò ñòàíäàðòíûé îáðàçåö: âåùåñòâî, ïî- ñðåäñòâîì ñðàâíåíèÿ ñ êîòîðûì îñóùåñòâëÿþò êîíòðîëü êà÷åñòâà èññëåäóåìîãî ëåêàðñòâåííî- ãî ñðåäñòâà (ðàçäåë 3.2.1 – 3.2.6).  äàííîì ñëó- ÷àå ñòàíäàðòíûé îáðàçåö äîëæåí áûòü àòòåñòî- âàí ïî áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè. Îïðåäåëåíèå íàëè÷èÿ ïðîëîíãèðîâàííîãî (óäëèíåííîãî) äåéñòâèÿ ïðåïàðàòîâ èíñóëèíà è åãî àíàëîãîâ îñíîâàíî íà òîì æå ïðèíöèïå (ðàçäåë 3.2.7).  íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ áèîëîãè÷åñêóþ àêòèâ- íîñòü îöåíèâàþò áåç ïðèìåíåíèÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, íàïðèìåð, ïðè êîñâåííîì îïðåäåëåíèè ýôôåêòèâíûõ äîç (ðàçäåë 4.1). 2.1. Ñîñòàâëåíèå ãðóïï è âûðàâíèâàíèå èõ ÷èñëåííîñòè Ïðè ñîñòàâëåíèè ãðóïï ñëåäóåò îáåñïå÷è- âàòü îäíîðîäíîñòü òåñò-îáúåêòîâ (ïî ïîëó, âîç- ðàñòó, ìàññå òåëà, ïðîèñõîæäåíèþ, óñëîâèÿì ñî- äåðæàíèÿ è ò.ä.) âíóòðè ãðóïï, à òàêæå îïòè- ìàëüíîå ðàñïðåäåëåíèå òåñò-îáúåêòîâ ïî ãðóïïàì ïðè ïîìîùè ðàíäîìèçàöèè (ðàçäåë 1). Êðîìå òîãî, ñëåäóåò ñòðåìèòüñÿ ê òîìó, ÷òîáû ÷èñëî òåñò-îáúåêòîâ âî âñåõ ãðóïïàõ áûëî îäè- íàêîâî. Ýòî ÿâëÿåòñÿ óñëîâèåì ïðèìåíèìîñòè ðÿäà ïðîöåäóð ñòàòèñòè÷åñêîãî àíàëèçà è âñåãäà óïðîùàåò âû÷èñëåíèå.
Åñëè ïî êàêîé-ëèáî ïðè÷èíå (îøèáêà â ýêñ- ïåðèìåíòå, ãèáåëü æèâîòíîãî, íå ñâÿçàííàÿ ñ èñïûòàíèåì) â íåêîòîðûõ èç ãðóïï âûïàë îäèí èëè íåñêîëüêî ðåçóëüòàòîâ, ìîæíî óðàâ- íÿòü ÷èñëåííîñòü ãðóïï îäíèì èç ñëåäóþùèõ ñïîñîáîâ: à) èç êàæäîé áîëüøîé ãðóïïû èñêëþ÷èòü ïî îäíîìó ðåçóëüòàòó; á) ê êàæäîé ìåíüøåé ãðóïïå ïðèáàâèòü îäèí ðåçóëüòàò, ðàâíûé ñðåäíåìó èç îñòàâøèõñÿ â ýòîé ãðóïïå ðåçóëüòàòîâ, íî â äàëüíåéøèõ ðàñ- ÷åòàõ ÷èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû, îòíîñÿùèõñÿ ê äàííîé ãðóïïå, äîëæíî ñ÷èòàòüñÿ íà åäèíèöó ìåíüøèì. Âûáîð ñïîñîáà âûðàâíèâàíèÿ ÷èñëåííîñòè â ãðóïïàõ çàâèñèò, ãëàâíûì îáðàçîì, îò ÷èñëà ãðóïï, â êîòîðûõ îáðàçîâàëèñü ïðîáåëû. Âûðàâ- íèâàíèå ñëåäóåò ïðîâîäèòü ñ ïðèìåíåíèåì ðàí- äîìèçàöèè (ðàçäåë 1). Ýòè ïðîöåäóðû ìîæíî ïðèìåíÿòü è ïðè ðàç- ëè÷èè â ÷èñëåííîñòè ãðóïï íà äâå-òðè èëè áîëüøåå ÷èñëî åäèíèö, íî ýòî âñåãäà ìåíåå æå- ëàòåëüíî, òàê êàê ñíèæàåò òî÷íîñòü è íàäåæ- íîñòü îêîí÷àòåëüíûõ âûâîäîâ ïî ðåçóëüòàòàì èñïûòàíèÿ. Èñïîëüçîâàíèå ñïåöèàëüíîãî ïðîãðàììíîãî îáåñïå÷åíèÿ (CombiStats, PLA èëè àíàëîãè÷- íûå) ïîçâîëÿåò íå óðàâíèâàòü ÷èñëåííîñòü ãðóïï. 2.2. Âûÿâëåíèå ãðóáûõ îøèáîê è ïåðâè÷íàÿ îáðàáîòêà ïîëó÷åííûõ äàííûõ ×àñòî îòâåò òåñò-îáúåêòà, õàðàêòåðèçóþùèé áèîëîãè÷åñêóþ àêòèâíîñòü ëåêàðñòâåííîãî ñðåäñòâà, âûðàæàþò â êîëè÷åñòâåííîé ôîðìå, íàïðèìåð êîíöåíòðàöèÿ ãëþêîçû â êðîâè ïðè îïðåäåëåíèè áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èíñó- ëèíà, âðåìÿ ñâåðòûâàíèÿ êðîâè ïðè äåéñòâèè ãåïàðèíà è ò.ä.  òàêèõ ñëó÷àÿõ êîíå÷íûì ðå- çóëüòàòîì èñïûòàíèÿ ÷àùå âñåãî ñ÷èòàþò ñðåä- íåå çíà÷åíèå y, à òî÷íåå — åãî äîâåðèòåëüíûé èíòåðâàë (ÄÈ), åñëè â ÷àñòíîé ôàðìàêîïåéíîé ñòàòüå íå óêàçàíî èíîå. Ïðè ïðîâåðêå, íå ÿâëÿåòñÿ ëè çíà÷åíèå îòâå- òà òàê íàçûâàåìîé «ãðóáîé îøèáêîé», êîòîðóþ ñëåäóåò èñêëþ÷èòü èç äàëüíåéøèõ ðàñ÷åòîâ, èñ- ïîëüçóþò êîíòðîëüíûé Q-êðèòåðèé (n £ 10). Çíà÷åíèå, êîòîðîå ìîæåò ðàññìàòðèâàòüñÿ êàê ãðóáàÿ îøèáêà, îáîçíà÷àþò êàê x1, à n îòâåòîâ óïîðÿäî÷èâàþò ïî âåëè÷èíå. Çàòåì âû÷èñëÿþò äëÿ n = 3 ... 7 Q x x x x n = - - ½ ½ ½ ½ ½ ½1 2 1 , äëÿ n = 8 ... 10 Q x x x x n = - - ½ ½ ½ ½ ½ ½ - 1 2 1 1 . Íàéäåííîå çíà÷åíèå Q ñîïîñòàâëÿþò ñ òàá- ëè÷íûì Q (P; n). Âåëè÷èíó x1 ìîæíî ñ÷èòàòü ãðóáîé îøèáêîé, åñëè íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå Q ïðåâûøàåò òàáëè÷íîå (òàáëèöà 1 Ïðèëîæåíèÿ). Íàïðèìåð, ïðè îïðåäåëåíèè áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî íà êðûñàõ-ñàìêàõ, â îäíîé èç ãðóïï áûëè ïîëó÷å- íû ñëåäóþùèå ðåçóëüòàòû (îòíîøåíèå ìàññû ìàòêè â ìã ê ìàññå òåëà â ã): 1,769; 2,556; 2,977; 3,123; 3,331; 3,354; 3,447; 3,525; 3,995; 4,382. Çíà÷åíèå 1,769 ëåæèò íåñêîëüêî â ñòîðîíå îò îñòàëüíûõ è äîëæíî áûòü ïðîâåðåíî ñ ïîìî- ùüþ Q-êðèòåðèÿ. Ñîãëàñíî âûøåóêàçàííîé ôîðìóëå ïðè n = 10 Q x x x x n = - - ½ ½ ½ ½ ½ ½= - - ½ ½ ½ ½ ½ ½= - 1 2 1 1 1 769 2 556 1 769 3 995 , , , , 0 354, . Ïîëó÷åííîå çíà÷åíèå Q-êðèòåðèÿ ìåíüøå êðèòè÷åñêîãî, ñîñòàâëÿþùåãî 0,48 (P = 0,95). 168 Ñëåäîâàòåëüíî, çíà÷åíèå 1,769 íå ÿâëÿåòñÿ ãðó- áîé îøèáêîé. Ïðè 10 < n < 1000 ïî âñåì äàííûì, êðîìå ïîäîçðèòåëüíîãî çíà÷åíèÿ âû÷èñëÿþò ñðåäíåå àðèôìåòè÷åñêîå è ñðåäíåå êâàäðàòè÷åñêîå îò- êëîíåíèå. Ïîäîçðèòåëüíîå çíà÷åíèå ñ÷èòàþò ãðóáîé îøèáêîé, åñëè îíî óäàëåíî îò ñðåäíåãî áîëåå ÷åì íà 4s.  ðåçóëüòàòå ïîëó÷àþò îäíîðîäíóþ âûáîð- êó, äëÿ êîòîðîé âû÷èñëÿþò ñðåäíèé îòâåò y, äèñïåðñèþ îòâåòà s2 , åãî ñðåäíåå êâàäðàòè÷å- ñêîå îòêëîíåíèå è äîâåðèòåëüíûé èíòåðâàë.  êà÷åñòâå ïðèìåðà ïåðâè÷íîé îáðàáîòêè ïîëó÷åííûõ äàííûõ ìîæíî ïðèâåñòè îïðåäåëå- íèå óäëèíåííîãî (ïðîëîíãèðîâàííîãî) äåéñòâèÿ èíñóëèíà è åãî àíàëîãîâ (ðàçäåë 3.2.7).
 êîí- òðîëüíîé âðåìåííîé òî÷êå (5,84 ÷) êîíöåíòðà- öèÿ ãëþêîçû â êðîâè æèâîòíûõ ãðóïïû, ïîëó- ÷èâøåé ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, ñîñòàâèëà (â %) 92,25; 105,24; 98,34; 106,28; 102,99; 89,12; 95,94; 111,68; 98,71. Ðàñ÷åò ïðîâîäÿò ïî ñëåäóþùèì ôîðìóëàì ïðè p = 0,05. Ñðåäíèé îòâåò y y n i n = = å 1 100,0%. Äèñïåðñèÿ îòâåòà s y y n i n 2 2 1 1 51 45= - - = å( ) , . Ñðåäíåå êâàäðàòè÷åñêîå îòêëîíåíèå s = 7 17, . ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû f n= - =1 8. Êðèòè÷åñêîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà t( , ; ) ,0 05 8 2 31= (òàáëèöà 2 Ïðèëîæåíèÿ). Ïîëóøèðèíà äîâåðèòåëüíîãî èíòåðâàëà Dy t s n = × = ( , ; ) , 0 05 8 5 52 %. y y± = ±D 100,0 5,5 %; y min 94,5 %= ; y max 105,5 %= . 2.3. Ñðàâíåíèå âûáîðîê Äëÿ ìíîæåñòâåííîãî ñðàâíåíèÿ íåçàâèñè- ìûõ ãðóïï èñïîëüçóþò äèñïåðñèîííûé àíàëèç. Åñëè ãðóïï âñåãî äâå è ðàñïðåäåëåíèå îòâåòîâ ÿâëÿåòñÿ íîðìàëüíûì, èõ ñðàâíåíèå ìîæíî ïðî- âåñòè ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà. 2.3.1. Ñðàâíåíèå ñðåäíèõ çíà÷åíèé äâóõ íåçàâèñèìûõ âûáîðîê Ñðàâíåíèå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóå- ìîãî îáðàçöà ïî ñðåäíåìó çíà÷åíèþ êîëè÷åñò- âåííîãî ïîêàçàòåëÿ, ïðèìåíÿåìîãî äëÿ îïðåäå- ëåíèÿ êàêîãî-ëèáî ïîêàçàòåëÿ êà÷åñòâà, íàïðè- ìåð ïðîëîíãèðîâàííîãî äåéñòâèÿ ìîæíî ïðîâîäèòü ïðè ïîìîùè êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà äëÿ íåçàâèñèìûõ âûáîðîê: | |t x x s f s f f f n n n n f niíàáë. 1 2 1 2 1 2 1 1 2 1 , ãäå 1= - + + × + = - 2 2 2 2 ; t fêðèòè÷. = + +1958788 2 429953, , / + + +2189891 4 630189 13981792 3 9 , / , / , / ,f f f ïðè f = n1 + n2– 2 è p = 0,05.  êà÷åñòâå ïðèìåðà ìîæíî ïðèâåñòè ôè- íàëüíóþ ñòàäèþ îáðàáîòêè äàííûõ, ïîëó÷åí- íûõ ïðè îïðåäåëåíèè ïðîëîíãèðîâàííîãî äåé- ñòâèÿ èíñóëèíà (ðàçäåë 3.2.7).  êîíòðîëüíîé âðåìåííîé òî÷êå êîíöåíòðà- öèÿ ãëþêîçû â êðîâè æèâîòíûõ ãðóïïû, ïîëó- ÷èâøåé èñïûòóåìûé îáðàçåö, ñîñòàâèëà (â %) 80,75; 64,06; 84,82; 70,88; 86,59; 61,30; 77,37; 67,91; 70,28. Ðàñ÷åò ïî âûøåóêàçàííûì ôîðìóëàì äàåò: y1 73 77 %= , ; s1 2 8160= , ; s1 9 03= , ; f 1 8= , f îáù. 14= ; t íàáë. 6 83= , ; t êðèòè÷. 0 05 16 212( , ; ) ,= . Èç ýòîãî ìîæíî çàêëþ÷èòü, ÷òî âåðîÿòíîñòü, òîãî, ÷òî ïðîëîíãèðîâàííîå äåéñòâèå ïðåïàðàòà èìå- åò ìåñòî, ïðåâûøàåò 95 %. Åñëè s s1 2 2 2 / ïðåâûøàåò êðèòè÷åñêîå çíà÷å- íèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà (òàáëèöà 3 Ïðèëîæåíèÿ), òî äëÿ âû÷èñëåíèÿ íàáëþäàåìîãî çíà÷åíèÿ êðè- òåðèÿ Ñòüþäåíòà ñëåäóåò ïðèìåíÿòü ôîðìóëó: | |t x x s n s n íàáë. 1 2 1 2 1 2 = - +/ /2 2 ïðè 2 0,51 1 2 2 2 1 4 f n n s s s s = + - + + æ è ç ç ö ø ÷ ÷ ( )2 2 4 . Âû÷èñëåííîå çíà÷åíèå tíàáë. ñðàâíèâàþò ñ têðèòè÷., êàê óêàçàíî âûøå (÷èñëî ñòåïåíåé ñâî- áîäû f îêðóãëÿþò äî öåëîãî ÷èñëà). Êðèòè÷å- ñêîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà ìîæíî òàê- æå íàéòè â ïðèëîæåíèÿõ (òàáëèöà 2 Ïðèëîæå- íèÿ). Ïðè ñðàâíåíèè áèîëîãè÷åñêèõ àêòèâíîñòåé âåðîÿòíîñòü ðàçëè÷èÿ 95 % â áîëüøèíñòâå ñëó- ÷àåâ ñ÷èòàþò ïðèåìëåìîé, â çàâèñèìîñòè îò òðåáîâàíèé, óñòàíîâëåííûõ â ÷àñòíîé ôàðìàêî- ïåéíîé ñòàòüå íà êîíêðåòíûé ïðåïàðàò. 169 Åñëè ðàñïðåäåëåíèå îòâåòîâ â ãðóïïàõ íå ÿâëÿåòñÿ íîðìàëüíûì, òî äëÿ ñðàâíåíèÿ äâóõ íåçàâèñèìûõ âûáîðîê ñëåäóåò âîñïîëüçîâàòüñÿ íåïàðàìåòðè÷åñêèì êðèòåðèåì Ìàííà – Óèòíè. Ïðåäâàðèòåëüíóþ ïðîâåðêó íîðìàëüíîñòè ìîæíî ïðîâîäèòü ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ Êîëìî- ãîðîâà – Ñìèðíîâà, W-êðèòåðèÿ Øàïèðî – Óèë- êà èëè, ÷òî ïðåäïî÷òèòåëüíåå, ãèñòîãðàìì ñ íà- ëîæåíèåì êðèâîé íîðìàëüíîãî ðàñïðåäåëåíèÿ, èëè íîðìàëüíûõ âåðîÿòíîñòíûõ ãðàôèêîâ (ïî îñè àáñöèññ —íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå, ïî îñè îðäèíàò — îæèäàåìîå íîðìàëüíîå çíà÷åíèå). ×åì ðîâíåå òî÷êè ëîæàòñÿ íà ïðÿìóþ, òåì ðàñ- ïðåäåëåíèå áëèæå ê íîðìàëüíîìó. 2.3.2. Ñðàâíåíèå ñðåäíèõ çíà÷åíèé äâóõ çàâèñèìûõ âûáîðîê Ïðè ñðàâíåíèè äâóõ îáðàçöîâ ðåêîìåíäóåò- ñÿ èñïîëüçîâàòü ðÿä äîñòàòî÷íî îäíîðîäíûõ (ñîïðÿæåííûõ) ïàð òåñò-îáúåêòîâ.
Ñîïðÿæåí- íóþ ïàðó ìîãóò ñîñòàâèòü, íàïðèìåð, æèâîòíûå èç îäíîãî ïîìåòà, îäèíàêîâîãî ïîëà è áëèçêîé ìàññû òåëà èëè, åñëè ýòî äîïóñêàåòñÿ ìåòîäè- êîé èñïûòàíèÿ, äâà ïîâòîðíûõ îïðåäåëåíèÿ íà îäíîì òåñò-îáúåêòå ñ äîñòàòî÷íûì ðàçðûâîì âî âðåìåíè, îáåñïå÷èâàþùèì âîññòàíîâëåíèå èñ- õîäíîãî ñîñòîÿíèÿ ïîñëå ïåðâîãî îïûòà.  òàêèõ ñëó÷àÿõ ïðèìåíÿþò ïàðíûé êðèòå- ðèé Ñòüþäåíòà äëÿ çàâèñèìûõ âûáîðîê. Äëÿ ýòîãî ïðè èñïîëüçîâàíèè ï ñîïðÿæåí- íûõ ïàð y1, ¢y1 , y2, ¢y 2 , ... yn, ¢y n ñîñòàâëÿþò ðÿä ðàçíîñòåé d1 = y1 – ¢y1 , d2 = y2 – ¢y 2 , ... dn = yn – ¢y n è âû÷èñëÿþò âåëè÷èíó | |t d s n d = , ãäå d d n= å / ; s d d n d i n = - - å( )2 1 . Ïîëó÷åííóþ âåëè÷èíó t ñðàâíèâàþò ñ òàá- ëè÷íûì çíà÷åíèåì t (p, f) äëÿ ïðèíÿòîãî óðîâíÿ çíà÷èìîñòè p è ÷èñëà ñòåïåíåé ñâîáîäû f = n – 1. Íàïðèìåð, òðåáóåòñÿ âûÿñíèòü, âëèÿåò ëè ïðåäâàðèòåëüíîå ââåäåíèå ãåïàòîïðîòåêòîðà íà äåéñòâèå ãåêñåíàëà. Äëÿ ýòîãî 7 ìûøàì âíóòðèáðþøèííî ââî- äÿò ðàñòâîð ãåêñåíàëà â äîçå 100 ìã/êã. Ïîëó÷å- íû ñëåäóþùèå âåëè÷èíû ïðîäîëæèòåëüíîñòè íàðêîçà yi (â ìèíóòàõ): 35; 83; 53; 60; 71; 62; 39. Ñðåäíåå çíà÷åíèå ñîñòàâèëî 57,6 ìèí. Âòîðîé ãðóïïå èç 7 ìûøåé çà 15 ìèí äî ââå- äåíèÿ òîé æå äîçû ãåêñåíàëà ââîäèëè (òàêæå âíóòðèáðþøèííî) ãåïàòîïðîòåêòîð â äîçå 150 ìã/êã. Ïðè ýòîì òåñò-îáúåêòû ¹ 1, 2, ... 7 èç ãðóï- ïû 1 áûëè ñîïðÿæåíû ñ òåñò-îáúåêòàìè ¹ 3, 1, 5, 2, 6, 4, 7 èç ãðóïïû 2 (â êàæäîé ïàðå áûëè ìûøè èç îäíîãî ïîìåòà ñ ïðèìåðíî îäèíàêîâîé ìàññîé òåëà). Äëèòåëüíîñòü íàðêîòè÷åñêîãî ñíà îêàçàëàñü (â ìèíóòàõ): 75; 78; 114; 110; 93; 100; 87. Ñðåä- íåå çíà÷åíèå ñîñòàâèëî 93,9 ìèí. d = =254 7 36,3/ , sd = 27 27, , t íàáë. 3 52= , , ïðè têðèòè÷.(p = 0,05, f = 6) = 2,45 è têðèòè÷.(p = 0,01, f = 6) = 3,71; têðèòè÷.(p = 0,001, f = 6) = 5,96. Òàêèì îáðàçîì, ìîæíî çàêëþ÷èòü, ÷òî âëèÿ- íèå ãåïàòîïðîòåêòîðà íà äëèòåëüíîñòü íàðêîòè- ÷åñêîãî ñíà èìååò ìåñòî ñ äîâåðèòåëüíîé âåðî- ÿòíîñòüþ 95 %. Åñëè ðàñïðåäåëåíèå îòâåòîâ â ãðóïïàõ íå ÿâëÿåòñÿ íîðìàëüíûì, òî äëÿ ñðàâíåíèÿ äâóõ çà- âèñèìûõ âûáîðîê ñëåäóåò âîñïîëüçîâàòüñÿ íå- ïàðàìåòðè÷åñêèì êðèòåðèåì Âèëêîêñîíà. Ïðåäâàðèòåëüíóþ ïðîâåðêó íîðìàëüíîñòè ïðîâîäÿò, êàê óêàçàíî âûøå â ðàçäåëå 2.3.1. 3. ÁÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÅ ÈÑÏÛÒÀÍÈß Ñ ÊÎËÈ×ÅÑÒÂÅÍÍÛÌ ÒÈÏÎÌ ÎÒÂÅÒÀ Êîëè÷åñòâåííûå äàííûå (îòâåòû) ïîääàþò- ñÿ íåïîñðåäñòâåííîìó èçìåðåíèþ èëè ñ÷åòó è ìîãóò ïðèíèìàòü ëþáîå çíà÷åíèå â îïðåäå- ëåííîì äèàïàçîíå. Îíè ìîãóò áûòü ëèáî íåïðå- ðûâíûìè (íàïðèìåð, ïîëó÷åííûìè ñ ïîìîùüþ ïðèáîðà), ïîäñ÷èòàííûìè (íàïðèìåð, áëÿøêî- îáðàçóþùèìè åäèíèöàìè), ëèáî äèñêðåòíûìè (íàïðèìåð, òèòðàìè ðàçáàâëåíèÿ êîíå÷íîé òî÷- êè). Ãëàâíàÿ îñîáåííîñòü êîëè÷åñòâåííûõ äàí- íûõ çàêëþ÷àåòñÿ â âîçìîæíîñòè âûïîëíÿòü íàä íèìè ëþáûå ìàòåìàòè÷åñêèå ïðåîáðàçîâàíèÿ: ñêëàäûâàòü, âû÷èòàòü, ïåðåìíîæàòü, âîçâîäèòü â öåëî÷èñëåííóþ ñòåïåíü, èçâëåêàòü êâàäðàò- íûé êîðåíü (äëÿ âåëè÷èí, ïðèíèìàþùèõ òîëüêî íåîòðèöàòåëüíûå çíà÷åíèÿ), ëîãàðèôìèðîâàòü (òîëüêî ïîëîæèòåëüíûå âåëè÷èíû) è ò.ä. 3.1. Îáùèå ïðèíöèïû ðàñ÷åòîâ 3.1.1. Ìîäåëü ïàðàëëåëüíûõ ïðÿìûõ Äëÿ îïðåäåëåíèÿ áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè íàèáîëåå ÷àñòî ïðèìåíÿþò ìîäåëü ïàðàëëåëü- 170 íûõ ïðÿìûõ. Îíà îñíîâàíà íà òîì, ÷òî â ïîäàâ- ëÿþùåì áîëüøèíñòâå ñëó÷àåâ â èíòåðâàëå îáû÷íî ïðèìåíÿåìûõ äîç îòâåò, êîãäà îí âûðà- æåí êîëè÷åñòâåííî, ñâÿçàí ëèíåéíî ñ ëîãàðèô- ìîì äîçû. Ýòó ñâÿçü îòðàæàåò óðàâíåíèå ëèíåé- íîé ðåãðåññèè: y = a + bx, ãäå a — ñâîáîäíûé ÷ëåí ëèíåéíîé ðåãðåññèè; b — óãëîâîé êîýôôèöèåíò ëèíåéíîé ðåã- ðåññèè; x — ëîãàðèôì äîçû (äåñÿòè÷íûé èëè íà- òóðàëüíûé). Îïðåäåëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ïðîâîäÿò ïóòåì ñðàâíåíèÿ ëèíèé äîçîçàâèñè- ìîñòè ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îá- ðàçöà.
Ãðàôè÷åñêè âåëè÷èíó áèîëîãè÷åñêîé àê- òèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàçöà ìîæíî âûðàçèòü ÷åðåç ðàññòîÿíèå ìåæäó ëèíèÿìè äîçîçàâèñè- ìîñòè ïî îñè x (ðèñóíîê 3.1.1.-1). Ïðè ïðîâåäåíèè ðóòèííûõ áèîëîãè÷åñêèõ èñïûòàíèé îáû÷íî èñïîëüçóþò 2 èëè 3 äîçû ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà, òàê êàê îäíîäîçîâàÿ ïîñòàíîâêà íå ïîçâîëÿåò âû÷èñëèòü äèñïåðñèþ ðåçóëüòàòîâ îïûòà, áåç êîòîðîé íåâîçìîæíà íè ïðîâåðêà ïðèãîäíîñòè ðåçóëüòàòîâ, íè âû÷èñëåíèå äîâåðèòåëüíûõ ãðà- íèö áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Êàæäóþ äîçó ââîäÿò îòäåëüíîé ãðóïïå òåñò-îáúåêòîâ.  ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ èçîëè- ðîâàííîãî îðãàíà, âñå äîçû èñïûòûâàþò íà îä- íîì òåñò-îáúåêòå. Ïîëó÷àþò îäèíàêîâîå ÷èñëî îòâåòîâ íà êàæäóþ äîçó ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà (ò.í. ñáàëàíñèðîâàííàÿ ñõåìà). Ïðè íàëè÷èè ñïåöèàëüíîãî áèîìåòðè÷å- ñêîãî ïðîãðàììíîãî îáåñïå÷åíèÿ (CombiStats, PLA èëè àíàëîãè÷íûå) ìîæíî èñïîëüçîâàòü íå- ñáàëàíñèðîâàííóþ ñõåìó.  ðàìêàõ ìîäåëè ïàðàëëåëüíûõ ïðÿìûõ ñó- ùåñòâóåò íåñêîëüêî îñíîâíûõ òèïîâ ïîñòà- íîâêè. 3.1.1.1. Ðàíäîìèçèðîâàííàÿ ïîñòàíîâêà Íàèáîëåå îáùèé ñëó÷àé, êîãäà ðàññìàòðèâà- þò öåëèêîì âåñü ïîëó÷åííûé ìàññèâ äàííûõ (ðàçäåë 3.2.1 è 3.2.2). 3.1.1.2. Ðàíäîìèçèðîâàííûå (ñëó÷àéíûå) áëîêè Êàæäûé ïîëíûé íàáîð èññëåäóåìûõ äîç ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàññìàòðèâàþò êàê îòäåëüíûé áëîê, êîòîðûé ìîæåò áûòü èñêëþ÷¸í èç îáùèõ ðàñ÷¸òîâ â ñëó- ÷àå, åñëè îí ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìî îòëè÷àåòñÿ îò îñòàëüíûõ áëîêîâ, ïîëó÷åííûõ â ðåçóëüòàòå èñïûòàíèÿ (ðàçäåë 3.2.3). 3.1.1.3. Ëàòèíñêèé êâàäðàò ×èñëî ñòðîê ðàâíî ÷èñëó äîç, èñïîëüçîâàí- íûõ â èñïûòàíèè.  ñëó÷àå äâóõäîçîâîé ïîñòà- íîâêè èñïîëüçóåòñÿ êâàäðàò 4 íà 4, à â ñëó÷àå òð¸õäîçîâîé ïîñòàíîâêè — êâàäðàò 6 íà 6. Ïðè ýòîì ìîæíî èñïîëüçîâàòü îäèí è òîò æå òåñò-îáúåêò, íàïðèìåð èçîëèðîâàííûé îðãàí. Äîçû ââîäÿò â îïðåäåë¸ííîé ïîñëåäîâàòåëüíî- ñòè.  êà÷åñòâå ïðèìåðà òàêîé ïîñëåäîâàòåëü- íîñòè ìîæíî ïðèâåñòè òàê íàçûâàåìûé öèêëè- ÷åñêèé ñäâèã. Ïðè ýòîì ïðè èñïîëüçîâàíèè äâóõ äîç ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàç- öà, ïîðÿäîê ââåäåíèÿ äîç ñëåäóþùèé: s1, s2, u1, u2. Êàæäàÿ ïîñëåäóþùàÿ ñòðîêà íà÷èíàåòñÿ ñ äîçû, êîòîðîé çàêîí÷èëàñü ïðåäûäóùàÿ, òî åñòü ïîðÿäîê äîç ñäâèãàåòñÿ âïðàâî ñ íà÷àëîì êàæäîé ñòðîêè.  íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ ýòî ïîçâî- ëÿåò óñòðàíèòü âîçìîæíîå âëèÿíèå îäíîé äîçû íà äðóãóþ (ðàçäåë 3.2.4 è 3.2.5). 3.1.1.4. Äâîéíîé ïåðåêðåñò Åñëè êàæäûé òåñò-îáúåêò ìîæíî âçÿòü â îïûò òîëüêî îäèí ðàç, èññëåäîâàòåëü âûíóæ- äåí èìåòü äåëî òîëüêî ñ ìåæãðóïïîâîé äèñïåð- ñèåé ðåçóëüòàòîâ. Åñëè æå îò êàæäîãî òåñò-îáú- åêòà ìîæíî ïîëó÷èòü áîëåå îäíîãî îòâåòà, òî ïîÿâëÿåòñÿ âíóòðèãðóïïîâàÿ äèñïåðñèÿ.  òîì ñëó÷àå, åñëè îíà ìåíüøå ìåæãðóïïîâîé, òî ìîæíî èñïîëüçîâàòü äâîéíîé ïåðåêðåñò. Ýòî ïî- 171 Ðèñóíîê 3.1.1.-1. — Ìîäåëü ïàðàëëåëüíûõ ïðÿìûõ (ïî 3 äîçû ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îá- ðàçöà) çâîëÿåò ñíèçèòü îòðèöàòåëüíîå âëèÿíèå åñòåñò- âåííîé âàðèàáåëüíîñòè îòâåòîâ è ïîâûñèòü òî÷- íîñòü è äîñòîâåðíîñòü ðåçóëüòàòîâ.  êà÷åñòâå ïðèìåðà òàêîãî èñïûòàíèÿ ìîæíî ïðèâåñòè îï- ðåäåëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èíñóëèíà íà êðîëèêàõ èëè ìûøàõ, îñíîâàííîå íà ñíèæå- íèè êîíöåíòðàöèè ãëþêîçû â êðîâè. Ââåäåíèå èíñóëèíà ïðîâîäÿò ïî îñîáîé ñõåìå, òàêèì îá- ðàçîì, ÷òî êàæäàÿ èç 4 ãðóïï æèâîòíûõ çà 2 äíÿ îïûòà ïîëó÷àåò êàê ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, òàê è èñïûòóåìûé îáðàçåö â ðàçíûõ äîçàõ (ðàçäåë 3.2.6). Òàêèì îáðàçîì, êàæäàÿ ãðóïïà ïîëó÷àåò äâå ðàçíûõ äîçû ðàçíûõ îáðàçöîâ. Åñëè ãðóïïà â ïåðâûé äåíü ïîëó÷àëà ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, âî âòîðîé äåíü îíà ïîëó÷àåò èñïûòóåìûé îáðà- çåö, åñëè èñïûòóåìûé îáðàçåö, òî ñòàíäàðòíûé îáðàçåö, åñëè ìàëóþ äîçó, òî áîëüøóþ, åñëè áîëüøóþ, òî ìàëóþ.
 ñâÿçè ñ ýòèì, ãðàôè÷åñêîå èçîáðàæåíèå äâîéíîãî ïåðåêðåñòà îòëè÷àåòñÿ îò íåïåðåêðå- ñòíûõ ïëàíîâ. Äëÿ êàæäîãî èç äâóõ äíåé ñòðîÿò ïðÿìóþ ëèíèþ. Ïî îñè àáñöèññ îòêëàäûâàþò ðàçíîñòè ëîãàðèôìîâ äîç, à ïî îñè îðäèíàò ðàç- íîñòè ñîîòâåòñòâóþùèõ èì ñóìì îòâåòîâ. Ðèì- ñêèå öèôðû îçíà÷àþò äåíü (òàáëèöà 3.1.1.4.-1, ðèñóíîê 3.1.1.4.-2). Ïîñëå ïîñòðîåíèÿ ëèíèé «Äåíü I» è «Äåíü II» ïðîâîäÿò ñðåäíþþ ëèíþ (ò.í. ëèíèþ îòâåòà). Åñëè îíà ïðîõîäèò ÷åðåç íà÷àëî êîîðäèíàò, òî íàéäåííàÿ àêòèâíîñòü èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàâíà 100 %. Îòðåçîê ìåæäó òî÷êîé ïåðåñå÷å- íèÿ ëèíèè îòâåòà ñ îñüþ àáñöèññ è íà÷àëîì êî- îðäèíàò ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ðàçíîñòü ìåæäó ëî- ãàðèôìàìè îæèäàåìîé è íàéäåííîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàçöà.  ñëó÷àå, èçîáðàæ¸ííîì íà ðèñóíêå 3.1.1.4.-2, áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü èñïûòóåìîãî îáðàçöà ñîñòàâëÿåò 108,9 % áèî- ëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà. 3.1.2. Ìîäåëü óãëîâûõ êîýôôèöèåíòîâ Äàííóþ ìîäåëü ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäåëå- íèÿ áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè íåêîòîðûõ ëå- êàðñòâåííûõ ñðåäñòâ ñ ïîìîùüþ ìèêðîáèîëî- ãè÷åñêèõ èñïûòàíèé. Ïî îñè àáñöèññ îòêëàäûâàþò çíà÷åíèÿ äîç. Íà÷àëî îñè êîîðäèíàò ñîîòâåòñòâóåò íóëåâîé äîçå, çíà÷åíèÿ äîç âîçðàñòàþò ñëåâà íàïðàâî. Ïî îñè îðäèíàò îòêëàäûâàþò ïîëó÷åííûå îòâå- òû. Äâå ëèíèè, èñõîäÿùèå èç îäíîé òî÷êè, ñîîò- 172 Ðèñóíîê 3.1.1.4.-2. — Ìîäåëü äâîéíîé ïåðåêðåñòíîé ïîñòàíîâêè (÷àñòíûé ñëó÷àé ìîäåëè ïàðàëëåëüíûõ ëèíèé) Òàáëèöà 3.1.1.4.-1. — Ôîðìóëû äëÿ ïîñòðîåíèÿ ãðà- ôèêà äâîéíîãî ïåðåêðåñòà õ ó Äåíü I lg äîçû u1I – lg äîçû s2II U S n I II1 2 0,5 - lg äîçû u2I – lg äîçû s1II U S n I II2 1 0,5 - Äåíü II lg äîçû u1II – lg äîçû s2I U S n II I1 2 0,5 - lg äîçû u2II – lg äîçû s1I U S n II I2 1 0,5 - âåòñòâóþùåé íóëåâîé äîçå, ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé çàâèñèìîñòè «äîçà-ýôôåêò», ðàññ÷èòàííûå äëÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà (ðèñóíîê 3.1.2.-3).  îòëè÷èå îò ìîäåëè ïàðàë- ëåëüíûõ ïðÿìûõ, çíà÷åíèÿ äîç íå ëîãàðèôìèðó- þò. Áèîëîãè÷åñêóþ àêòèâíîñòü èñïûòóåìîãî îáðàçöà õàðàêòåðèçóåò ñîîòíîøåíèå óãëîâûõ êîýôôèöèåíòîâ ýòèõ äâóõ ëèíèé äîçîçàâèñèìî- ñòè R b b U S = . Êàê è â ñëó÷àå ìîäåëè ïàðàëëåëüíûõ ëèíèé, âàæíî, ÷òîáû îæèäàåìàÿ àêòèâíîñòü áûëà áëèç- êà ê èñòèííîé àêòèâíîñòè, è ÷òîáû áûëè ïîäãî- òîâëåíû ýêâèïîòåíòíûå ðàçâåäåíèÿ ñòàíäàðòíî- ãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà (åñëè ýòî âîç- ìîæíî). ×åì áëèæå çíà÷åíèå îæèäàåìîé áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ê íàéäåííîé, òåì áëèæå áóäóò äâå ëèíèè. Åñëè óãëîâîé êîýôôè- öèåíò èñïûòóåìîãî îáðàçöà áîëüøå, ÷åì ó ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà, íàéäåííàÿ àêòèâíîñòü èñïû- òóåìîãî îáðàçöà âûøå îæèäàåìîé, è íàîáîðîò. Ðåêîìåíäóåìûå ïàðàìåòðû ìåòîäèêè ïðîâå- äåíèÿ áèîëîãè÷åñêîãî èñïûòàíèÿ: – îäèíàêîâîå ÷èñëî äîç ñòàíäàðòíîãî îáðàç- öà è èñïûòóåìîãî ïðåïàðàòà ñ îäèíàêîâûìè èí- òåðâàëàìè; – âîçìîæíîå íàëè÷èå äîïîëíèòåëüíîé (êîí- òðîëüíîé) ãðóïïû; – îäèíàêîâîå ÷èñëî òåñò-îáúåêòîâ â êàæäîé ãðóïïå. Ïðèìåð îáðàáîòêè ïîëó÷åííûõ äàííûõ ïðè- âåä¸í â ðàçäåëå 3.2.8. Ìîäåëü óãëîâûõ êîýôôèöèåíòîâ ðåàëèçîâà- íà â ñïåöèàëüíîì áèîìåòðè÷åñêîì ïðîãðàìì- íîì îáåñïå÷åíèè (íàïðèìåð, CombiStats èëè àíàëîãè÷íûå). 3.1.3. ×åòûðåõïàðàìåòðè÷åñêèé ìåòîä àíàëèçà S-îáðàçíûõ êðèâûõ äîçîçàâèñèìîñòè Äàííûé ìåòîä ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èììóíîáèîëîãè÷å- ñêèõ ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ. Êðèâàÿ äîçîçîçàâèñèìîñòè êàê ñòàíäàðòíî- ãî îáðàçöà, òàê è èñïûòóåìîãî ïðåïàðàòà, õàðàê- òåðèçóåòñÿ ÷åòûðüìÿ ïàðàìåòðàìè: – âåðõíåå ïëàòî (a); – íèæíåå ïëàòî (d); – óãëîâîé êîýôôèöèåíò (b); – ðàññòîÿíèå ìåæäó êðèâûìè ïî îñè x (g). Çàâèñèìîñòü îòâåòà u îò íàòóðàëüíîãî ëîãà- ðèôìà äîçû x âûðàæàþò ñëåäóþùåé ôîðìóëîé: u e x y = + - + - - d a d b 1 ( ) .
Êðèâûå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìî- ãî îáðàçöà ìîæíî ñðàâíèâàòü ïðè îäèíàêîâîì íàêëîíå, à òàêæå îäèíàêîâîì óðîâíå âåðõíåãî è íèæíåãî ïëàòî. Òàêèì îáðàçîì, êðèâûå äîëæ- íû ðàçëè÷àòüñÿ òîëüêî ïî ïàðàìåòðó ã, êîòîðûé ÿâëÿåòñÿ ïîêàçàòåëåì àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî 173 Ðèñóíîê 3.1.2.-3. — Ìîäåëü óãëîâûõ êîýôôèöèåíòîâ Ðèñóíîê 3.1.3.-4. — ×åòûðåõïàðàìåòðè÷åñêèé ìå- òîä àíàëèçà S-îáðàçíûõ êðèâûõ îáðàçöà. Ðàâåíñòâî òðåõ îñòàëüíûõ ïàðàìåòðîâ äîêàçûâàþò ïðè âàëèäàöèè ìåòîäèêè äëÿ ðó- òèííûõ èñïûòàíèé. Ïîâòîðíàÿ ïðîâåðêà ðàâåí- ñòâà äàííûõ ïàðàìåòðîâ íåîáõîäèìà òîëüêî ïðè èçìåíåíèè óñëîâèé èñïûòàíèÿ. ×åòûðåõïàðàìåòðè÷åñêèé ìåòîä ðåàëèçîâàí â ñïåöèàëüíîì áèîìåòðè÷åñêîì ïðîãðàììíîì îáåñïå÷åíèè (íàïðèìåð, CombiStats, PLA èëè àíàëîãè÷íûå).  ñëó÷àå îòñóòñòâèÿ òàêîãî ïðîãðàììíîãî îáåñïå÷åíèÿ, ìîæíî âûáðàòü ëèíåéíûå ó÷àñòêè êðèâûõ è ñðàâíèòü èõ ñ ïîìîùüþ ìåòîäà òðåõ- äîçîâîé ðàíäîìèçèðîâàííîé ïîñòàíîâêè (ðàç- äåë 3.2.2). 3.1.4. Äèñïåðñèîííûé àíàëèç ðåçóëüòàòîâ áèîëîãè÷åñêîãî èñïûòàíèÿ, âû÷èñëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè, åå äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö è îáúåäèíåíèå ðåçóëüòàòîâ áèîëîãè÷åñêèõ èñïûòàíèé  ïðîöåññå ñòàòèñòè÷åñêîé îáðàáîòêè ïðî- âîäÿò ñïåöèôè÷åñêóþ ìîäèôèêàöèþ äèñïåðñè- îííîãî àíàëèçà ðåçóëüòàòîâ êàæäîãî ðóòèííîãî áèîëîãè÷åñêîãî èñïûòàíèÿ äëÿ òîãî, ÷òîáû ïðî- âåðèòü ïðèãîäíîñòü ðåçóëüòàòîâ îïûòà è âû÷èñ- ëèòü åãî äèñïåðñèþ. Îïðåäåëÿþò ñëåäóþùèå êîìïîíåíòû èëè èñòî÷íèêè äèñïåðñèè (ïîêàçà- òåëè): Ëèíåéíîñòü (ïðè èñïîëüçîâàíèè íå ìåíåå òðåõ äîç ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà). Äëÿ «ëèàíåðèçàöèè» äîçîçàâèñèìî- ñòè, îòâåòû òåñò-îáúåêòîâ (y) ìîæíî ïîäâåðãàòü ðàçëè÷íûì ïðåîáðàçîâàíèÿì (ëîãàðèôìèðî- âàòü, èçâëåêàòü êâàäðàòíûé êîðåíü, âîçâîäèòü â êâàäðàò è äð.); Íåïàðàëëåëüíîñòü; Äîçîçàâèñèìîñòü; Áëîêè èëè ñòðîêè (ïðè íåîáõîäèìîñòè); Ñòîëáöû (ïðè íåîáõîäèìîñòè); Äíè ´ íåïàðàëëåëüíîñòü (ïðè íåîáõîäè- ìîñòè); Äðóãèå âñïîìîãàòåëüíûå ïîêàçàòåëè. Äëÿ âñåõ òèïîâ ïîñòàíîâîê îáÿçàòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ íåçíà÷èìîñòü ïîêàçàòåëÿ Íåïàðàë- ëåëüíîñòü (p = 0,05) è çíà÷èìîñòü ïîêàçàòåëÿ Ðåãðåññèÿ (p = 0,01), õàðàêòåðèçóþùåãî äîçîçà- âèñèìîñòü. Äèñïåðñèîííûé àíàëèç îòëè÷àåòñÿ ïðè èñ- ïîëüçîâàíèè äâîéíîãî ïåðåêðåñòà è íåïåðåêðå- ñòíûõ ïëàíîâ.  êà÷åñòâå äèñïåðñèè îïûòà èñ- ïîëüçóþò âíóòðèãðóïïîâóþ äèñïåðñèþ. Åå ïðè- ìåíÿþò, êàê äëÿ ïðîâåðêè ïðèãîäíîñòè ðåçóëüòàòîâ èñïûòàíèÿ, òàê è äëÿ âû÷èñëåíèÿ äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíî- ñòè èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Ïðè ýòîì ïàðàëëåëüíîñòü ëèíèè ïåðâîãî äíÿ è ëèíèè âòîðîãî äíÿ îòðàæàåò íå ïîêàçàòåëü Íåïàðàëëåëüíîñòü, êîòîðûé âû÷èñëÿþò ïî ìåæãðóïïîâîé äèñïåðñèè, à ïîêàçàòåëü Äíè ´ íå- ïàðàëëåëüíîñòü, êîòîðûé âû÷èñëÿþò ïî âíóò- ðèãðóïïîâîé äèñïåðñèè. Îí õàðàêòåðèçóåò ïî- ñòîÿíñòâî ðåàêöèè ðàçíûõ ãðóïï òåñò-îáúåêòîâ íà ââåäåíèå îäíîé è òîé æå äîçû îäíîãî è òîãî æå îáðàçöà. Çàòåì âû÷èñëÿþò áèîëîãè÷åñêóþ àêòèâ- íîñòü èñïûòóåìîãî îáðàçöà îòíîñèòåëüíî ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà (åå ñðåäíåå çíà÷åíèå è äîâå- ðèòåëüíûå ãðàíèöû). Îáúåäèíåíèå ðåçóëüòàòîâ äâóõ è áîëåå áèî- ëîãè÷åñêèõ èñïûòàíèé îäíîãî è òîãî æå îáðàç- öà ïðîâîäÿò ñîãëàñíî ðàçäåëó 5 «Îáúåäèíåíèå ðåçóëüòàòîâ íåçàâèñèìûõ îïðåäåëåíèé áèîëî- ãè÷åñêîé àêòèâíîñòè». Íèæå, â êà÷åñòâå ïðèìåðîâ, ïðèâåäåíû ðå- êîìåíäóåìûå àëãîðèòìû âû÷èñëåíèÿ áèîëîãè- ÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìûõ îáðàçöîâ ñ ïî- ìîùüþ íàèáîëåå ðàñïðîñòðàí¸ííûõ ìåòîäîâ èñïûòàíèé ñ êîëè÷åñòâåííûì òèïîì îòâåòîâ (ðàçäåë 3.2). Âîçìîæíî ïðèìåíåíèå ñïåöèàëü- íîãî áèîìåòðè÷åñêîãî ïðîãðàììíîãî îáåñïå÷å- íèå (CombiStats, PLA èëè àíàëîãè÷íûå). 3.2.
Ïðèìåðû ñòàòèñòè÷åñêîé îáðàáîòêè ðåçóëüòàòîâ áèîëîãè÷åñêèõ èñïûòàíèé ñ êîëè÷åñòâåííûì òèïîì îòâåòîâ  äàííîì ðàçäåëå ïðèâåäåíû êîíòðîëüíûå ïðèìåðû âû÷èñëåíèÿ áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíî- ñòè, êëàññèôèöèðîâàííûå ïî íàèáîëåå ðàñïðî- ñòðàí¸ííûì òèïàì ïîñòàíîâîê (ìîäåëü ïàðàë- ëåëüíûõ ïðÿìûõ).  êîíöå ðàçäåëà äàí ïðèìåð ïðîâåðêè íàëè÷èÿ ïðîëîíãèðîâàííîãî (óäëè- íåííîãî) äåéñòâèÿ ïðåïàðàòîâ èíñóëèíà è åãî àíàëîãîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì êðèòåðèÿ Ñòüþäåí- òà (ðàçäåë 3.2.7). Äëÿ óäîáñòâà èñïîëüçîâàíèÿ, âî âñåõ ïðèìå- ðàõ ðàñ÷åòû äàíû â ïîëíîì îáúåìå. 3.2.1. Ðàíäîìèçèðîâàííàÿ ïîñòàíîâêà ñ èñïîëüçîâàíèåì äâóõ äîç (íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî) Åñëè â êà÷åñòâå òåñò-îáúåêòà èñïîëüçóþò êðûñ-ñàìîê, òî â êà÷åñòâå îòâåòà æèâîòíîãî 174 ïðèíèìàþò îòíîøåíèå ìàññû ìàòêè â ìã ê ìàñ- ñå òåëà â ã.  ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ ñàìöîâ, îò- âåò æèâîòíîãî ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé îòíîøåíèå ìàññû äîáàâî÷íûõ ïîëîâûõ æåëåç â ìã ê ìàññå òåëà â ã. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî èñïîëüçîâàëè 4 ãðóïïû êðûñ- ñàìîê ïî 10 îñîáåé â êàæäîé. Êàæäóþ èç äîç èñ- ïûòóåìîãî îáðàçöà è ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, ââî- äèëè îäíîé ãðóïïå æèâîòíûõ (ñîîòíîøåíèå äîç 1:2).  òàáëèöå 3.2.1.-2 äàíû îòâåòû êðûñ-ñàìîê íà ââåäåíèå äâóõ äîç ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è äâóõ äîç èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Äëÿ òîãî ÷òîáû ïðîâåðèòü ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà- ÷èìîñòü èñòî÷íèêîâ âàðèàöèè, ïðèãîäíîñòü ðå- çóëüòàòîâ è âû÷èñëèòü äèñïåðñèþ îïûòà, ïðîâî- äÿò äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîëó÷åííûõ äàííûõ. Ïðè ýòîì ðàññ÷èòûâàþò çíà÷åíèÿ äèñïåðñèé äëÿ 6 èñòî÷íèêîâ (òàáëèöà 4 Ïðèëîæåíèÿ). Äëÿ ýòîãî íà îñíîâàíèè äàííûõ, ïðåäñòàâëåí- íûõ â òàáëèöå 3.2.1.-2 è 3.2.1.-3, à òàêæå ïîïðà- âî÷íîãî êîýôôèöèåíòà, âû÷èñëÿþò ñóììû êâàäðàòîâ èñòî÷íèêîâ äèñïåðñèè. Ïîïðàâî÷íûé êîýôôèöèåíò ( )K y N = = = å 2 2 70 65 40 124,8 , ; Ïðåïàðàòû S U n K= + - = 2 2 2 = + - = 3216 38 49 20 124,8 0 99 2 2 , , , ; Ðåãðåññèÿ L L n ES U = + = = = ( ) , , 2 2 4 48 35 40 58 44 ; Íåïàðàëëåëüíîñòü L L n ES U = + - = 2 2 2 = + - = 2192 26 43 20 58 44 0 51 2 2 , , , , ; Ïîñòàíîâêè S S U U n K= + + + - =1 2 2 2 1 2 2 2 = + + + - = 512 27 04 6 03 32 46 10 124,8 59 94 2 2 2 2 , , , , , ; Èòîã y K= - = - =å( ) , ,2 192 03 124,8 67 23; Îòêëîíåíèå èòîã ïîñòàíîâêè= - = = - =67 23 59 94 7 29, , , . Çíà÷èìîñòü ðàçëè÷èé äèñïåðñèé ïðîâåðÿþò ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ Ôèøåðà. Îáÿçàòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ âûïîëíåíèå òðåáîâàíèé äëÿ ïîêàçàòå- ëåé Ðåãðåññèÿ è Íåïàðàëëåëüíîñòü. Ýòè òðåáî- âàíèÿ çàêëþ÷àþòñÿ â òîì, ÷òî äëÿ Ðåãðåññèè íà- áëþäàåìîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà äîëæíî áûòü áîëüøå êðèòè÷åñêîãî (p = 0,01), à äëÿ Íå- ïàðàëëåëüíîñòè — ìåíüøå êðèòè÷åñêîãî (p = 0,05). Äëÿ òîãî ÷òîáû íàéòè Fíàáë., ñðåäíèå êâàäðà- òû ïîêàçàòåëåé äåëÿò íà ñðåäíèé êâàäðàò ïîêà- çàòåëÿ Îòêëîíåíèå. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñðàâíèâàþò ñ òàáëè÷íûìè êðèòè÷åñêèìè çíà÷å- 175 Òàáëèöà 3.2.1.-2. — Îòíîñèòåëüíàÿ ìàññà ìàòêè êðûñ (ðàíäîìèçèðîâàííàÿ ïîñòàíîâêà ñ èñïîëüçîâà- íèåì äâóõ äîç íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî) Ãðóïïà 1 Ãðóïïà 2 Ãðóïïà 3 Ãðóïïà 4 s1 s2 u1 u2 0,398 2,233 0,533 3,447 0,443 2,129 0,663 3,123 0,483 2,872 0,434 3,354 0,623 2,732 0,710 1,769 0,462 3,043 0,637 4,382 0,619 2,717 0,470 3,525 0,436 2,939 0,650 3,331 0,495 1,785 0,600 3,995 0,568 3,474 0,820 2,977 0,593 3,120 0,512 2,556 Òàáëèöà 3.2.1.-3.
— Ñóììû îòâåòîâ è êîíòðàñòû (ðàíäîìèçèðîâàííàÿ ïîñòàíîâêà ñ èñïîëüçîâàíèåì äâóõ äîç íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî) Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö S Èñïûòóåìûé îáðàçåö U Ñóììà Ìàëàÿ äîçà S1 = 5,12 U1 = 6,03 Áîëüøàÿ äîçà S2 = 27,04 U2 = 32,46 Ñóììà S = 32,16 U = 38,49 y =å 70 65, Ëèíåéíûé êîíòðàñò LS = S2 – S1 = 21,92 LU = U2 – U1 = 26,43 L =å 48 35, íèÿìè êðèòåðèÿ Ôèøåðà (òàáëèöà 3 Ïðèëîæå- íèÿ). ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû f1 = 1, à f2 = 36. Äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîêàçàë ïðèãîä- íîñòü ðåçóëüòàòîâ îïûòà: ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà- ÷èìîñòü äîçîçàâèñèìîñòè (Ðåãðåññèÿ) è ïàðàë- ëåëüíîñòü äâóõ ëèíèé ðåãðåññèè (Íåïàðàëëåëü- íîñòü). Âû÷èñëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè è åå äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö Ñîîòíîøåíèå äîç ðàâíî 2, ñëåäîâàòåëüíî I = =lg2,0 0 3010, ; t = 2 03, ïðè f = 36 è p = 0,05; b L L I n S U = + ´ = = 2 48 35 6 02 8 03; , , , y S n S = = = 2 3216 20 161; , , y U n U = = 2 192;, ¢ = - =M y y bU U S 0 039;, AU =1000ÅÄ/ôë . M M AU U U= ¢ + =lg 3 039;, Áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü RU = =10 1093 96ÌÅ/ôë .3 039, , C E E s t= - =/ ( )2 2 = - × =58 44 58 44 0 20 2 03 1014.2 , / ( , , , ) , Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà âû÷èñëÿþò ïî ôîðìóëå: CM C CM IU U ¢ ± - ¢ + =( )( )1 2 2 = × ± × × +1014 0 039 0 014 1014 0 039 0 30102 2 , , , ( , , , ). Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà ñîñòàâëÿþò 0,0036 è 0,0755. Íèæíÿÿ è âåðõ- íÿÿ äîâåðèòåëüíàÿ ãðàíèöà ñîñòàâëÿåò 10lgÀU +0 0036, è 10lgÀU +0 0755, , ò.å. 1008,3 ÌÅ/ôë. è 1189,9 ÌÅ/ôë. ñîîòâåòñòâåííî. 3.2.2. Ðàíäîìèçèðîâàííàÿ ïîñòàíîâêà ñ èñïîëüçîâàíèåì òðåõ äîç (íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî) Åñëè â êà÷åñòâå òåñò-îáúåêòà èñïîëüçóþò êðûñ-ñàìîê, òî â êà÷åñòâå îòâåòà æèâîòíîãî ïðèíèìàþò îòíîøåíèå ìàññû ìàòêè â ìã ê ìàñ- ñå òåëà â ã.  ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ ñàìöîâ, îò- âåò æèâîòíîãî ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé îòíîøåíèå ìàññû äîáàâî÷íûõ ïîëîâûõ æåëåç â ìã ê ìàññå òåëà â ã. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî èñïîëüçîâàëè 6 ãðóïï êðûñ-ñà- ìîê ïî 10 îñîáåé â êàæäîé. Êàæäóþ äîçó èñïû- òóåìîãî îáðàçöà è ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, ââîäè- ëè îäíîé ãðóïïå æèâîòíûõ (ñîîòíîøåíèå äîç 1:2).  òàáëèöå 3.2.2.-5 äàíû îòâåòû êðûñ-ñàìîê íà ââåäåíèå òðåõ äîç ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è òðåõ äîç èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Äëÿ òîãî ÷òîáû ïðîâåðèòü ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà÷èìîñòü èñòî÷íèêîâ âàðèàöèè, ïðèãîäíîñòü ðåçóëüòàòîâ è âû÷èñëèòü äèñïåðñèþ îïûòà, 176 Òàáëèöà 3.2.1.-4. — Ñâîäíàÿ òàáëèöà äèñïåðñèîííîãî àíàëèçà (ðàíäîìèçèðîâàííàÿ ïîñòàíîâêà ñ èñïîëüçîâà- íèåì äâóõ äîç íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî) Èñòî÷íèê äèñïåðñèè (ïîêàçàòåëü) ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû (f) Ñóììà êâàäðàòîâ Ñðåäíèé êâàäðàò Ñóììà êâàäðàòîâ f æ è çç ö ø ÷÷ Íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå êðèòå- ðèÿ Ôèøåðà Fíàáë. Êðèòè÷åñêîå çíà÷åíèå êðèòå- ðèÿ Ôèøåðà Fêðèòè÷. Ïðåïàðàòû 1 0,99 0,99 Ðåãðåññèÿ 1 58,44 58,44 292,2 >7,40 (p = 0,01) Íåïàðàëëåëüíîñòü 1 0,51 0,51 2,55 <4,11 (p = 0,05) Ïîñòàíîâêè k fn- = - = =1 4 1 3 . 59,94 19,98 Îòêëîíåíèå N f mn- - - =1 . 39 3 36- = 7,29 0,20 Èòîã N m- - =1 39 67,23 n = 10 (÷èñëî îòâåòîâ â ãðóïïå); N = 40 (îáùåå ÷èñëî îòâåòîâ â îïûòå); m = 0 (÷èñëî óòðà÷åííûõ è çàìåíåííûõ çíà÷åíèé). ïðîâîäÿò äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîëó÷åííûõ äàííûõ. Ïðè ýòîì ðàññ÷èòûâàþò çíà÷åíèÿ äèñ- ïåðñèé äëÿ 8 èñòî÷íèêîâ (ñâîäíàÿ òàáëèöà 3.2.2.-7). Äëÿ ýòîãî íà îñíîâàíèè äàííûõ, ïðåäñòàâ- ëåííûõ â òàáëèöå 3.2.2.-5 è 3.2.2.-6, à òàêæå ïî- ïðàâî÷íîãî êîýôôèöèåíòà, âû÷èñëÿþò ñóììû êâàäðàòîâ èñòî÷íèêîâ äèñïåðñèè.
Ïîïðàâî÷íûé êîýôôèöèåíò ( )K y N = = = å 2 2 10196 60 173 26 , , ; Ïðåïàðàòû S U n K= + - = 2 3 2 = + - = 46 38 55 58 30 173 26 1 41 2 2 , , , , ; Ðåãðåññèÿ L L n ES U = + = = = ( ) , , 2 2 4 48 35 40 58 44 ; Íåïàðàëëåëüíîñòü L L n ES U = + - = 2 2 2 = + - = 2192 26 43 20 58 44 0 51 2 2 , , , , ; Êâàäðàòè÷íîñòü Q Q n S U = + = = ( ) , , 2 2 12 8 03 120 0 54; Ðàçíîñòü êâàäðàòè÷íîñòåé Q Q n S U = + - 2 6 2 - = - »êâàäðàòè÷íîñòü 32 41 60 0 54 0 0002 , , , ; Ïîñòàíîâêè = = + + + + + - = S S S U U U n K1 2 2 2 3 2 1 2 2 2 3 2 = + + + + + - 5 12 14 22 27 04 6 03 17 09 32 46 10 2 2 2 2 2 2 , , , , , , - =173 26 60,9, ; Èòîã y K= - = - =å( ) , ,2 247,3 173 26 74 04; Îòêëîíåíèå èòîã ïîñòàíîâêè= - = = - =74 04 60,9 1314, , . Çíà÷èìîñòü ðàçëè÷èé äèñïåðñèé ïðîâåðÿþò ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ Ôèøåðà. Îáÿçàòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ âûïîëíåíèå òðåáîâàíèé äëÿ ïîêàçàòå- ëåé Ðåãðåññèÿ, Íåïàðàëëåëüíîñòü, Êâàäðàòè÷- íîñòü è Ðàçíîñòü êâàäðàòè÷íîñòåé. Äëÿ Ðåã- ðåññèè íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà äîëæíî áûòü áîëüøå êðèòè÷åñêîãî (p = 0,01), à äëÿ îñòàëüíûõ ïîêàçàòåëåé – ìåíüøå êðèòè÷å- ñêîãî (p = 0,05). Äëÿ òîãî ÷òîáû íàéòè Fíàáë. ñðåäíèå êâàäðà- òû ïîêàçàòåëåé äåëÿò íà ñðåäíèé êâàäðàò ïîêà- çàòåëÿ Îòêëîíåíèå. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñðàâíèâàþò ñ òàáëè÷íûìè êðèòè÷åñêèìè çíà÷å- íèÿìè êðèòåðèÿ Ôèøåðà (òàáëèöà 3 Ïðèëîæå- íèÿ). ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû f1 = 1, à f2 = 54. 177 Òàáëèöà 3.2.2.-5. — Îòíîñèòåëüíàÿ ìàññà ìàòêè êðûñ (ðàíäîìèçèðîâàííàÿ ïîñòàíîâêà ñ èñïîëüçîâà- íèåì òðåõ äîç íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî) Ãðóïïà 1 Ãðóïïà 2 Ãðóïïà 3 Ãðóïïà 4 Ãðóïïà 5 Ãðóïïà 6 s1 s2 s3 u1 u2 u3 0,398 1,583 2,233 0,533 1,655 3,447 0,443 0,780 2,129 0,663 0,935 3,123 0,483 2,380 2,872 0,434 1,973 3,354 0,623 0,984 2,732 0,71 2,199 1,769 0,462 1,265 3,043 0,637 0,886 4,382 0,619 1,568 2,717 0,47 1,097 3,525 0,436 1,167 2,939 0,65 2,447 3,331 0,495 1,743 1,785 0,600 1,941 3,995 0,568 1,375 3,474 0,820 1,151 2,977 0,593 1,375 3,120 0,512 2,804 2,556 Òàáëèöà 3.2.2.-6. — Ñóììû îòâåòîâ è êîíòðàñòû (ðàíäîìèçèðîâàííàÿ ïîñòàíîâêà ñ èñïîëüçîâàíèåì òðåõ äîç íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî) Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö S Èñïûòóåìûé îáðàçåö U Ñóììà Ìàëàÿ äîçà S1 = 5,12 U1 = 6,03 Ñðåäíÿÿ äîçà S2 = 14,22 U2 = 17,09 Áîëüøàÿ äîçà S3 = 27,04 U3 = 32,46 Ñóììà S = 46,38 U = 55,58 y =å 101 96, Ëèíåéíûé êîíòðàñò LS = S3 – S1 = 21,92 LU = U3 – U1 = 26,43 L =å 48 35, Êâàäðàòè÷åñêèé êîíòðàñò Q S S SS = - + =1 32 3 722 , Q U U UU = - + =1 32 4 312 , Qå = 8 03, Äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîêàçàë ïðèãîä- íîñòü ðåçóëüòàòîâ îïûòà: ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà- ÷èìîñòü äîçîçàâèñèìîñòè (Ðåãðåññèÿ), ïàðàë- ëåëüíîñòü è ëèíåéíîñòü äâóõ ëèíèé ðåãðåññèè (Íåïàðàëëåëüíîñòü, Êâàäðàòè÷íîñòü è Ðàç- íîñòü êâàäðàòè÷íîñòåé). Âû÷èñëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè è åå äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö Ñîîòíîøåíèå äîç ðàâíî 2, ñëåäîâàòåëüíî I = =lg2,0 0 3010, ; t f f=1,958788 + 2,429953 / + 2,189891 / +2 = =4,630189 / +1,398179 / 2 003 9 f f , ïðè f= 54 è p = 0,05; b L L I n S U = + × = = 4 48 35 12 04 4 02; , , , y S n S = = = 3 46 38 18 155; , , y U n U = = 3 185;, ¢ = - =M y y bU U S 0 075;, Îæèäàåìàÿ àêòèâíîñòü 1000ÌÅ/ôë .AU = M M AU U U= ¢ + =lg 3 075;, Áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü RU = =10 1188 50ÌÅ/ôë .;3 075, , C E E s t= - =/ ( )2 2 = - × =58 44 58 44 0 24 2 00 1017.2 , / ( , , , ) , Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà âû÷èñëÿþò ïî ôîðìóëå: CM C CM IU U ¢ ± - ¢ + × =( )( / )1 8 3 22 = × ±1017 0 075, , ± × × + ×0 017 1017 0 075 8 3 0 30102 2 , ( , , / , ).
Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà ñîñòàâëÿþò 0,0114 è 0,1411. Íèæíÿÿ è âåðõ- íÿÿ äîâåðèòåëüíàÿ ãðàíèöà ñîñòàâëÿåò 10lgÀU +0 0114, è 10lgÀU +0 1411, , ò.å. 1026,6 ÌÅ/ôë. è 1383,9 ÌÅ/ôë. ñîîòâåòñòâåííî. 3.2.3. Ìåòîä ñëó÷àéíûõ áëîêîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì äâóõ äîç (íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè îêñèòîöèíà íà ïåòóøêå) Ïðè èñïîëüçîâàíèè ïåòóøêà â êà÷åñòâå òåñò-îáúåêòà, îòâåòîì ÿâëÿåòñÿ âåëè÷èíà ïàäå- íèÿ àðòåðèàëüíîãî äàâëåíèÿ (ìì.ðò.ñò.) ïðè ââå- äåíèè äâóõ äîç ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà îêñèòîöè- íà è äâóõ äîç èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Ïåòóøêó ââîäèëè ïî äâå äîçû ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è äâå äîçû èñïûòóåìîãî îáðàçöà îêñè- òîöèíà (ñîîòíîøåíèå äîç 1:2). Ïîðÿäîê ââåäå- 178 Òàáëèöà 3.2.2.-7. — Ñâîäíàÿ òàáëèöà äèñïåðñèîííîãî àíàëèçà (ðàíäîìèçèðîâàííàÿ ïîñòàíîâêà ñ èñïîëüçîâà- íèåì òðåõ äîç íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè ãîíàäîòðîïèíà õîðèîíè÷åñêîãî) Èñòî÷íèê äèñïåðñèè (ïîêàçàòåëü) ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû (f) Ñóììà êâàäðàòîâ Ñðåäíèé êâàäðàò Ñóììà êâàäðàòîâ f æ è çç ö ø ÷÷ Íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå êðèòå- ðèÿ Ôèøåðà Fíàáë. Êðèòè÷åñêîå çíà÷åíèå êðèòå- ðèÿ Ôèøåðà Fêðèòè÷. Ïðåïàðàòû 1 1,41 1,41 Ðåãðåññèÿ 1 58,44 58,44 243,5 >7,13 (p = 0,01) Íåïàðàëëåëüíîñòü 1 0,51 0,51 2,13 <4,02 (p = 0,05) Êâàäðàòè÷íîñòü 1 0,54 0,54 2,25 <4,02 (p = 0,05) Ðàçíîñòü êâàäðàòè÷íîñòåé 1 0,0002 0,0002 0,0008 <4,02 (p = 0,05) Ïîñòàíîâêè k fn- = - = =1 6 1 5 . 60,9 12,18 Îòêëîíåíèå N f mn- - - = - =1 59 5 54. 13,14 0,24 Èòîã N m- - =1 59 74,04 n = 10 (÷èñëî îòâåòîâ â ãðóïïå); N = 60 (îáùåå ÷èñëî îòâåòîâ â îïûòå); m = 0 (÷èñëî óòðà÷åííûõ è çàìåíåííûõ çíà÷åíèé). íèÿ äîç è îòâåòû òåñò-îáúåêòà ïðèâåäåíû â òàá- ëèöå 3.2.3.-8. Äëÿ òîãî ÷òîáû ïðîâåðèòü ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà÷èìîñòü èñòî÷íèêîâ âàðèàöèè, ïðèãîäíîñòü ðåçóëüòàòîâ è âû÷èñëèòü äèñïåðñèþ îïûòà, ïðîâîäÿò äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîëó÷åííûõ äàííûõ. Ïðè ýòîì ðàññ÷èòûâàþò çíà÷åíèÿ äèñ- ïåðñèé äëÿ 7 èñòî÷íèêîâ (ñâîäíàÿ òàáëèöà 3.2.3.-10). Äëÿ ýòîãî íà îñíîâàíèè äàííûõ, ïðåäñòàâ- ëåííûõ â òàáëèöàõ 3.2.3.-8 è 3.2.3.-9, à òàêæå ïî- ïðàâî÷íîãî êîýôôèöèåíòà, âû÷èñëÿþò ñóììû êâàäðàòîâ èñòî÷íèêîâ äèñïåðñèè. Ïîïðàâî÷íûé êîýôôèöèåíò ( )K y N = = = å 2 2 287 16 5148 06, ; Ïðåïàðàòû S U n K= + - = 2 2 2 = + - = 140 147 8 5148 06 3 065 2 2 , , ; Ðåãðåññèÿ L L n ES U = + = = = ( ) , 2 2 4 57 16 203 06 ; Íåïàðàëëåëüíîñòü L L n ES U = + - = 2 2 2 = + - = 26 31 8 203 06 1565 2 2 , , ; Ïîñòàíîâêè S S U U n K= + + + - =1 2 2 2 1 2 2 2 = + + + - = 57 83 58 89 4 5148 06 207 69; 2 2 2 2 , , Áëîêè R R R R K= + + + - =1 2 4 2 2 3 2 4 2 = + + + - = 66 76 72 73 4 5148 06 1319; 2 2 2 2 , , Èòîã y K= - = - =å( ) , ,2 5381 5148 06 232 94; Îòêëîíåíèå èòîã ïîñòàíîâêè áëîêè= - - = = - - =232 94 207 69 1319 12 06, , , , . 179 Òàáëèöà 3.2.3.-8. — Ïîðÿäîê ââåäåíèÿ äîç è îòâåòû ïåòóøêà íà ââåäåíèå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïû- òóåìîãî îáðàçöà îêñèòîöèíà (ìåòîä ñëó÷àéíûõ áëî- êîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì äâóõ äîç) s1 s2 u1 u2 Áëîêè (R) 1. 12 20 14 20 66 2. 15 23 16 22 76 3. 15 20 14 23 72 4. 15 20 14 24 73 Òàáëèöà 3.2.3.-9. — Ñóììû îòâåòîâ è êîíòðàñòû (ìåòîä ñëó÷àéíûõ áëîêîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì äâóõ äîç) Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö S Èñïûòóåìûé îáðàçåö U Ñóììà Ìàëàÿ äîçà S1 = 57 U1 = 58 Áîëüøàÿ äîçà S2 = 83 U2 = 89 Ñóììà S = 140 U = 147 y =å 287 Ëèíåéíûé êîíòðàñò LS = 26 LU = 31 L =å 57 Òàáëèöà 3.2.3.-10. — Ñâîäíàÿ òàáëèöà äèñïåðñèîííîãî àíàëèçà (ìåòîä ñëó÷àéíûõ áëîêîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì äâóõ äîç) Èñòî÷íèê äèñïåðñèè (ïîêàçàòåëü) ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû (f) Ñóììà êâàäðàòîâ Ñðåäíèé êâàäðàò Ñóììàêâàäðàòîâ f æ è çç ö ø ÷÷ Íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà Fíàáë. Êðèòè÷åñêîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà Fêðèòè÷.
Ïðåïàðàòû 1 3,065 3,065 Ðåãðåññèÿ 1 203,06 203,06 151,54 >10,56 (p = 0,01) Íåïàðàëëåëüíîñòü 1 1,565 1,565 1,17 <5,12 (p = 0,05) Ïîñòàíîâêè k fï- = - = =1 4 1 3 . 207,69 69,23 Áëîêè n fá- = =1 3 . 13,19 4,40 3,28 <6,99 (p = 0,01) Îòêëîíåíèå N f f mï á- - - - =1 9. . 12,06 1,34 Èòîã N m- - =1 15 232,94 15,53 n = 4 (÷èñëî îòâåòîâ íà äîçó); N = 16 (îáùåå ÷èñëî îòâåòîâ â îïûòå); m = 0 (÷èñëî óòðà÷åííûõ è çàìåíåííûõ çíà÷åíèé). Çíà÷èìîñòü ðàçëè÷èé äèñïåðñèé ïðîâåðÿþò ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ Ôèøåðà. Îáÿçàòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ âûïîëíåíèå òðåáîâàíèé äëÿ ïîêàçàòå- ëåé Ðåãðåññèÿ, Íåïàðàëëåëüíîñòü è Áëîêè. Äëÿ Ðåãðåññèè íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ôè- øåðà äîëæíî áûòü áîëüøå êðèòè÷åñêîãî (p = 0,01), à äëÿ Íåïàðàëëåëüíîñòè è Áëîêîâ – ìåíüøå êðèòè÷åñêîãî (p = 0,05 è p = 0,01 ñîîò- âåòñòâåííî). Äëÿ òîãî ÷òîáû íàéòè Fíàáë., ñðåä- íèå êâàäðàòû ïîêàçàòåëåé äåëÿò íà ñðåäíèé êâàäðàò ïîêàçàòåëÿ Îòêëîíåíèå. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñðàâíèâàþò ñ òàáëè÷íûìè êðèòè÷å- ñêèìè çíà÷åíèÿìè êðèòåðèÿ Ôèøåðà (òàáëèöà 3 Ïðèëîæåíèÿ). ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû f1 = 1 èëè 3, à f2 = 9. Äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîêàçàë ïðèãîä- íîñòü ðåçóëüòàòîâ îïûòà: ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà- ÷èìîñòü äîçîçàâèñèìîñòè (Ðåãðåññèÿ), ïàðàë- ëåëüíîñòü äâóõ ëèíèé ðåãðåññèè (Íåïàðàëëåëü- íîñòü) è îòñóòñòâèå ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìûõ ðàçëè÷èé ìåæäó áëîêàìè (Áëîêè). Âû÷èñëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè è åå äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö Ñîîòíîøåíèå äîç ðàâíî 2, ñëåäîâàòåëüíî I = =lg2,0 0 3010, ; t f f=1,958788 + 2,429953 / + 2,189891 / +2 = =4,630189 / +1,398179 / 2 2623 9 f f , , ïðè f = 9 è p = 0,05; b L L I n S U = + × = = 2 57 2 408 23 67; , , y S n S = = = 2 140 8 17 50;, y U n U = = 2 18 38;, M y y b U U S` ,= - = 0 037; Îæèäàåìàÿ àêòèâíîñòü 5ÌÅ/ìëAU = M M AU U U= ¢ + =lg 0 736;, Áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü RU = =10 5 45ÌÅ/ìë0 736, , C E E s t= - =/ ( )2 2 = - × =203 06 203 06 134 2 262 1035.2 , / ( , , , ) , Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà âû÷èñëÿþò ïî ôîðìóëå: CM C CM IU U ¢ ± - ¢ + = × ±( )( ) , ,1 1035 0 037 2 2 0 035 1035 0 037 0 30102 2 , ( , , , )× × + . Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà ñîñòàâëÿþò –0,0185 è 0,0950. Íèæíÿÿ è âåðõ- íÿÿ äîâåðèòåëüíàÿ ãðàíèöà ñîñòàâëÿåò 10lgÀU + -( , )0 0185 è 10lgÀU +0 0950, , ò.å. 4,79 ÌÅ/ìë è 6,22 ÌÅ/ìë ñîîòâåòñòâåííî. 3.2.4. Äâóõäîçîâûé ëàòèíñêèé êâàäðàò (íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè îêñèòîöèíà íà èçîëèðîâàííîì îðãàíå) Ïðè èñïîëüçîâàíèè â êà÷åñòâå òåñò-îáúåêòà èçîëèðîâàííîãî ðîãà ìàòêè êðûñû, ïîìåù¸ííî- ãî â òåðìîñòàòèðóåìóþ âàííî÷êó ñ ïèòàòåëüíûì ðàñòâîðîì. Îòâåòàìè èçîëèðîâàííîãî îðãàíà ÿâëÿþòñÿ âåëè÷èíû èçîòîíè÷åñêèõ ñîêðàùåíèé ïîñëå ââåäåíèÿ â ðàâíûõ îáúåìàõ äâóõ êîíöåí- òðàöèé ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è äâóõ êîíöåíòðà- öèé èñïûòóåìîãî îáðàçöà îêñèòîöèíà. Ñîêðà- ùåíèÿ ðåãèñòðèðóþò â âèäå àìïëèòóäû ïåðåìå- ùåíèÿ ïèñ÷èêà ðåãèñòðèðóþùåãî óñòðîéñòâà èëè, â ñëó÷àå êîìïüþòåðèçèðîâàííîãî ïðèáîðà, àâòîìàòè÷åñêè ðåãèñòðèðóþò ñ ïîìîùüþ ïðî- ãðàììíîãî îáåñïå÷åíèÿ. Ïîðÿäîê ââåäåíèÿ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïðèâåäåí â òàáëèöå 3.2.4.-11. Äëÿ òîãî ÷òîáû ïðîâåðèòü ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà÷èìîñòü èñòî÷íèêîâ âàðèàöèè, ïðèãîäíîñòü ðåçóëüòàòîâ è âû÷èñëèòü äèñïåðñèþ îïûòà, ïðîâîäÿò äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîëó÷åííûõ äàííûõ. Ïðè ýòîì ðàññ÷èòûâàþò çíà÷åíèÿ äèñ- ïåðñèé äëÿ 8 èñòî÷íèêîâ (ñâîäíàÿ òàáëèöà 3.2.4.-14). Äëÿ ýòîãî íà îñíîâàíèè äàííûõ, ïðåäñòàâ- ëåííûõ â òàáëèöàõ 3.2.4.-12 è 3.2.4.-13, à òàêæå ïîïðàâî÷íîãî êîýôôèöèåíòà, âû÷èñëÿþò ñóì- ìû êâàäðàòîâ èñòî÷íèêîâ äèñïåðñèè. Ïîïðàâî÷íûé êîýôôèöèåíò ( )K y N = = = å 2 2 148,7 16 138198, ; 180 Òàáëèöà 3.2.4.-11.
— Ïîðÿäîê ââåäåíèÿ äîç ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà îêñèòîöè- íà â âàííî÷êó (ñõåìà äâóõäîçîâîãî ëàòèíñêîãî êâàä- ðàòà) 1. s1 s2 u1 u2 2. u2 s1 s2 u1 3. u1 u2 s1 s2 4. s2 u1 u2 s1 Ïðåïàðàòû S U n K= + - = 2 2 2 = + - = 72,2 76,5 8 138198 1156 2 2 , , ; Ðåãðåññèÿ L L n ES U = + = = = ( ) , , 2 2 4 50 00 16 156 25 ; Íåïàðàëëåëüíîñòü L L n ES U = + - = 2 2 2 = + - = 29 40 20,6 8 156 25 4 84 2 2 , , , ; Ïîñòàíîâêè S S U U n K= + + + - =1 2 2 2 1 2 2 2 21,4 50,8 27 95 48 55 4 2 2 2 2 + + + - , , - =138198 162 246, , ; Ñòðîêè R R R R K= + + + - =1 2 4 2 2 3 2 4 2 = - = 5552 925 4 138198 6 25 , , , ; 181 Òàáëèöà 3.2.4.-12. — Îòâåòû èçîëèðîâàííîãî îðãàíà (ñì) íà ââåäåíèå ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà îêñèòîöèíà (ñõåìà äâóõäîçîâîãî ëàòèíñêîãî êâàäðàòà) Ñòðîêà Ñòîëáöû Ñóììà ñòðîê (R) R2 1. 6,50 12,45 9,75 12,5 R1 = 41,20 1697,44 2. 12,20 5,35 12,70 6,10 R2 = 36,35 1321,32 3. 6,40 12,30 5,25 12,85 R3 = 36,80 1354,24 4. 12,80 5,70 11,55 4,30 R4 = 34,35 1179,92 Ñóììà ñòîëáöîâ (Ñ) 37,90 35,80 39,25 35,75 R 2 5552,925=å C 2 1436,41 1281,64 1540,56 1278,063 C 2 5536 675=å , , Òàáëèöà 3.2.4.-14. — Ñâîäíàÿ òàáëèöà äèñïåðñèîííîãî àíàëèçà (äâóõäîçîâûé ëàòèíñêèé êâàäðàò) Èñòî÷íèê äèñïåðñèè (ïîêàçàòåëü) ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû (f) Ñóììà êâàäðàòîâ Ñðåäíèé êâàäðàò Ñóììà êâàäðàòîâ f æ è çç ö ø ÷÷ Íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå êðè- òåðèÿ Ôèøåðà Fíàáë. Êðèòè÷åñêîå çíà÷åíèå êðè- òåðèÿ Ôèøåðà Fêðèòè÷. Ïðåïàðàòû 1 1,156 1,156 Ðåãðåññèÿ 1 156,25 156,25 186,75 >13,75 (p = 0,01) Íåïàðàëëåëüíîñòü 1 4,84 4,84 5,78 <5,99 (p = 0,05) Ïîñòàíîâêè k f- = - = =1 4 1 3 ï. 162,246 54,082 Ñòðîêè n f- = =1 3 ñòð. 6,25 2,083 2,49 <9,78 (p = 0,01) Ñòîëáöû n f- = =1 3 ñò. 2,19 0,73 0,872 <9,78 (p = 0,01) Îòêëîíåíèå N f f f m- - - - - =1 6ï. ñòð. ñò. 5,02 0,837 Èòîã N m- - =1 15 175,705 11,71 n = 4 (÷èñëî îòâåòîâ íà äîçó); N = 16 (îáùåå ÷èñëî îòâåòîâ â îïûòå); m = 0 (÷èñëî óòðà÷åííûõ è çàìåíåííûõ çíà÷åíèé). Òàáëèöà 3.2.4.-13. — Ñóììû îòâåòîâ è êîíòðàñòû (ñõåìà äâóõäîçîâîãî ëàòèíñêîãî êâàäðàòà) Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö S Èñïûòóåìûé îáðàçåö U Ñóììà Ìàëàÿ äîçà S1 = 21,40 U1 = 27,95 Áîëüøàÿ äîçà S2 = 50,80 U2 = 48,55 Ñóììà S = 72,20 U = 76,5 y =å 148,70 Ëèíåéíûé êîíòðàñò LS = 29,40 LU = 20,6 L =å 50,00 Ñòîëáöû C C C C K= + + + - =1 2 4 2 2 3 2 4 2 = - = 5536 675 4 138198 219 , , , ; Èòîã y K= - = - =å ( ) , , ,2 1557 685 138198 175 705; Îòêëîíåíèå èòîã ïîñòàíîâêè= - - - - =ñòðîêè ñòîëáöû = - - - =175 705 162 246 6 25 219 5 02, , , , , . Çíà÷èìîñòü ðàçëè÷èé äèñïåðñèé ïðîâåðÿþò ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ Ôèøåðà. Îáÿçàòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ âûïîëíåíèå òðåáîâàíèé äëÿ ïîêàçàòå- ëåé Ðåãðåññèÿ, Íåïàðàëëåëüíîñòü, Ñòðîêè è Ñòîëáöû. Äëÿ Ðåãðåññèè íàáëþäàåìîå çíà÷å- íèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà äîëæíî áûòü áîëüøå êðè- òè÷åñêîãî (p = 0,01), à äëÿ ïîêàçàòåëåé Íåïàðàë- ëåëüíîñòü (p = 0,05), Ñòðîêè (p = 0,01), Ñòîëá- öû (p = 0,01) — ìåíüøå êðèòè÷åñêîãî. Ïîêàçàòåëü Ðåãðåññèÿ õàðàêòåðèçóåò äîçîçàâè- ñèìîñòü, Íåïàðàëëåëüíîñòü — ïàðàëëåëüíîñòü äâóõ ëèíèé ðåãðåññèè, à Ñòðîêè è Ñòîëáöû — ñáàëàíñèðîâàííîñòü îòâåòîâ èçîëèðîâàííîãî îðãàíà íà ïðîòÿæåíèè âñåãî îïûòà. Äëÿ òîãî ÷òîáû íàéòè Fíàáë. ñðåäíèå êâàäðà- òû ïîêàçàòåëåé äåëÿò íà ñðåäíèé êâàäðàò ïîêà- çàòåëÿ Îòêëîíåíèå. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñðàâíèâàþò ñ òàáëè÷íûìè êðèòè÷åñêèìè çíà÷å- íèÿìè êðèòåðèÿ Ôèøåðà (òàáëèöà 3 Ïðèëîæå- íèÿ). ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû f1 = 1 èëè 3, à f2 = 6. Äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîêàçàë ïðèãîä- íîñòü ðåçóëüòàòîâ îïûòà: ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà- ÷èìîñòü äîçîçàâèñèìîñòè (Ðåãðåññèÿ), ïàðàë- ëåëüíîñòü äâóõ ëèíèé ðåãðåññèè (Íåïàðàëëåëü- íîñòü) è îòñóòñòâèå ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìûõ ðàçëè÷èé ìåæäó ñòðîêàìè è ñòîëáöàìè (ñì. îä- íîèìåííûå ïîêàçàòåëè).
Âû÷èñëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè è åå äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö Ñîîòíîøåíèå äîç ðàâíî 2, ñëåäîâàòåëüíî I = =lg2,0 0 3010, ; t f f=1,958788 + 2,429953 / + 2,189891 / +2 + =4,630189 / +1,398179 / 2 4463 9 f f , ïðè f =6 è p = 0,05; b L L I n S U = + ´ = × = 2 50 00 0 3010 8 20 764; , , , y S n S = = = 2 72 20 8 9 0250; , , y U n U = = 2 9 5625;, ¢ = - =M y y bU U S 0 0259;, Îæèäàåìàÿ àêòèâíîñòü 5 ÌÅ/ìëAU = M M AU U U= ¢ + =lg 0 725;, Áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü RU = =10 5 31ÌÅ/ìë0 725, , C E E s t= - =/ ( )2 2 = - × =156 25 156 25 0 837 2 446 1033.2 , / ( , , , ) , Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà âû÷èñëÿþò ïî ôîðìóëå: CM C CM IU U ¢ ± - ¢ + = × ±( )( ) , ,1 1033 0 0259 2 2 ± × × +0 033 1033 0 0259 0 30102 2 , ( , , , ). Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà ñîñòàâëÿþò –0,0281 è 0,0816. Íèæíÿÿ è âåðõ- íÿÿ äîâåðèòåëüíàÿ ãðàíèöà ñîñòàâëÿåò 10lgÀU + -( , )0 0281 è 10lgÀU +0 0816, , ò.å. 4,69 ÌÅ/ìë è 6,03 ÌÅ/ìë ñîîòâåòñòâåííî. 3.2.5. Òðåõäîçîâûé ëàòèíñêèé êâàäðàò (íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè àíòèáèîòèêîâ ìåòîäîì äèôôóçèè â àãàð â ÷àøêàõ Ïåòðè) Áèîëîãè÷åñêóþ àêòèâíîñòü àíòèáèîòèêà îï- ðåäåëÿëè ïî çîíàì óãíåòåíèÿ ðîñòà ìèêðîîðãà- íèçìîâ.  êàæäóþ ÷àøêó Ïåòðè âíåñëè ïî 3 ðàñòâîðà ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è 3 ðàñòâîðà èñïûòóåìîãî îáðàçöà. Ñîîòíîøåíèå êîíöåíòðà- öèé 1:1,5.  êà÷åñòâå îòâåòà ïðèíèìàëè äèàìåòð çîíû óãíåòåíèÿ ðîñòà ìèêðîîðãàíèçìîâ â ìì. Ïîñëåäîâàòåëüíîñòü âíåñåíèÿ ðàñòâîðîâ â ëóí- êè èëè öèëèíäðû ïðèâåäåíà â òàáëèöå 3.2.5.-15. Äëÿ òîãî ÷òîáû ïðîâåðèòü ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà÷èìîñòü èñòî÷íèêîâ âàðèàöèè, ïðèãîäíîñòü ðåçóëüòàòîâ è âû÷èñëèòü äèñïåðñèþ îïûòà, ïðîâîäÿò äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîëó÷åííûõ äàííûõ. Ïðè ýòîì ðàññ÷èòûâàþò çíà÷åíèÿ äèñ- ïåðñèé äëÿ 10 èñòî÷íèêîâ (ñâîäíàÿ òàáëèöà 3.2.5.-18). Äëÿ ýòîãî íà îñíîâàíèè äàííûõ, ïðåäñòàâ- ëåííûõ â òàáëèöàõ 3.2.5.-16 è 3.2.5.-17, à òàêæå ïîïðàâî÷íîãî êîýôôèöèåíòà, âû÷èñëÿþò ñóì- ìû êâàäðàòîâ èñòî÷íèêîâ äèñïåðñèè. 182 Ïîïðàâî÷íûé êîýôôèöèåíò ( )K y N = = = å 2 2 620,2 36 10684,6678; Ïðåïàðàòû S U n K= + - = 2 3 2 = + - = 312,0 308,2 18 10684 6678 0 401 2 2 , , ; Ðåãðåññèÿ L L n ES U = + = = = ( ) , 2 2 4 25,2 24 26 46 ; Íåïàðàëëåëüíîñòü L L n ES U = + - = 2 2 2 = + - = 12,2 13,0 12 26 46 0 027 2 2 , , ; Êâàäðàòè÷íîñòü Q Q n S U = + × = ( )2 6 2 = - - × = = ( ) , 1,8 0,2 36 2 0 055 2 Q; Ðàçíîñòü êâàäðàòè÷íîñòåé Q Q n QS U = + - = 2 6 2 183 Òàáëèöà 3.2.5.-15. — Ïîðÿäîê âíåñåíèÿ ðàñòâîðîâ ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî ïðåïàðàòà àíòè- áèîòèêà â ÷àøêè Ïåòðè (ñõåìà òðåõäîçîâîãî ëàòèíñêîãî êâàäðàòà) ¹ ÷àøêè Êîíöåíòðàöèè ðàñòâîðîâ 1. s1 s2 s3 u1 u2 u3 2. u3 s1 s2 s3 u1 u2 3. u2 u3 s1 s2 s3 u1 4. u1 u2 u3 s1 s2 s3 5. s3 u1 u2 u3 s1 s2 6. s2 s3 u1 u2 u3 s1 Òàáëèöà 3.2.5.-16. — Äèàìåòð çîíû óãíåòåíèÿ ðîñòà ìèêðîîðãàíèçìîâ (òðåõäîçîâûé ëàòèíñêèé êâàäðàò, îï- ðåäåëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè àíòèáèîòèêîâ ìåòîäîì äèôôóçèè â àãàð â ÷àøêàõ Ïåòðè) Ñòðîêà Ñòîëáöû Ñóììà ñòðîê (R) R2 1. 16,4 17,6 18,2 16,2 17,2 18,4 R1 = 104,0 10816,00 2. 17,8 16,4 17,4 18,2 16,0 17,2 R2 = 103,0 10609,00 3. 17,0 18,4 16,6 17,2 18,8 15,4 R3 = 103,4 10691,56 4. 16,4 16,6 18,0 16,0 17,6 18,0 R4 = 102,6 10526,76 5. 18,2 16,0 17,4 18,6 16,2 17,4 R5 = 103,8 10774,44 6. 17,4 18,4 16,2 17,4 18,0 16,0 R6 = 103,4 10691,56 Ñóììà ñòîëáöîâ (Ñ) 103,2 103,4 103,8 103,6 103,8 102,4 R 2 64109,32=å C 2 10650,24 10691,56 10774,44 10732,96 10774,44 10485,76 C 2 64109,40=å Òàáëèöà 3.2.5.-17.
— Ñóììû îòâåòîâ è êîíòðàñòû (òðåõäîçîâûé ëàòèíñêèé êâàäðàò, îïðåäåëåíèå áèîëîãè- ÷åñêîé àêòèâíîñòè àíòèáèîòèêîâ ìåòîäîì äèôôóçèè â àãàð â ÷àøêàõ Ïåòðè) Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö S Èñïûòóåìûé îáðàçåö U Ñóììà Ìàëàÿ äîçà S1 = 97,6 U1 = 96,2 Ñðåäíÿÿ äîçà S2 = 104,6 U2 = 102,8 Áîëüøàÿ äîçà S3 = 109,8 U3 = 109,2 Ñóììà S = 312,0 U = 308,2 y =å S + U = 620,2 Ëèíåéíûé êîíòðàñò LS = 12,2 LU = 13,0 LS + LU = 25,2 Êâàäðàòè÷åñêèé êîíòðàñò QS = –1,8 QU = –0,2 QS + QU = –2,0 = + - = 1,8 0,2 36 0 055 0 0361 2 2 , , ; Ïîñòàíîâêè S S S U U U n K= + + + + + - =1 2 2 2 3 2 1 2 2 2 3 2 97,6 104,6 109,8 96,2 102,8 109,2 6 2 2 2 2 2 2 + + + + + - - =10684 6678 26,9789;, Ñòðîêè R n K= - = å 2 = - = 64109 32 6 10684 6678 0,2189; , , Ñòîëáöû C n K= - = å 2 = - = 64109 40 6 10684 6678 0 2322; , , , Èòîã 2 = - =å( )y K = - =10713,9600 10684 6678 29 2922;, , Îòêëîíåíèå èòîã ïîñòàíîâêè= - - - - =ñòðîêè ñòîëáöû = 29 2922 26 9789 0 2189 0 2322 18622., , , , ,- - - = Çíà÷èìîñòü ðàçëè÷èé äèñïåðñèé ïðîâåðÿþò ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ Ôèøåðà. Îáÿçàòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ âûïîëíåíèå òðåáîâàíèé äëÿ ïîêàçàòå- ëåé Ðåãðåññèÿ, Íåïàðàëëåëüíîñòü, Êâàäðàòè÷- íîñòü, Ðàçíîñòü êâàäðàòè÷íîñòåé, Ñòðîêè è Ñòîëáöû. Äëÿ Ðåãðåññèè íàáëþäàåìîå çíà÷å- íèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà äîëæíî áûòü áîëüøå êðè- òè÷åñêîãî (p = 0,01), à äëÿ ïîêàçàòåëåé Íåïà- ðàëëåëüíîñòü (p = 0,05), Ñòðîêè (p = 0,01) è Ñòîëáöû (p = 0,01) – ìåíüøå êðèòè÷åñêîãî. Ïîêàçàòåëü Ðåãðåññèÿ õàðàêòåðèçóåò äîçîçàâèñèìîñòü, Íå- ïàðàëëåëüíîñòü – ïàðàëëåëüíîñòü äâóõ ëèíèé ðåãðåññèè, Êâàäðàòè÷íîñòü è Ðàçíîñòü êâàä- ðàòè÷íîñòåé – ëèíåéíîñòü äîçîçàâèñèìîñòè, à Ñòðîêè è Ñòîëáöû – ñáàëàíñèðîâàííîñòü îòâå- òîâ íà ïðîòÿæåíèè âñåãî îïûòà. Äëÿ òîãî ÷òîáû íàéòè Fíàáë. ñðåäíèå êâàäðà- òû ïîêàçàòåëåé äåëÿò íà ñðåäíèé êâàäðàò ïîêà- çàòåëÿ Îòêëîíåíèå. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñðàâíèâàþò ñ òàáëè÷íûìè êðèòè÷åñêèìè çíà÷å- íèÿìè êðèòåðèÿ Ôèøåðà (òàáëèöà 3 Ïðèëîæå- íèÿ). ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû f1 = 1 èëè 5, à f2 = 20. Äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîêàçàë ïðèãîä- íîñòü ðåçóëüòàòîâ îïûòà: ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà- ÷èìîñòü äîçîçàâèñèìîñòè (Ðåãðåññèÿ), ïàðàë- ëåëüíîñòü äâóõ ëèíèé ðåãðåññèè (Íåïàðàëëåëü- íîñòü), ëèíåéíîñòü äîçîçàâèñèìîñòè (Êâàäðà- òè÷íîñòü è Ðàçíîñòü êâàäðàòè÷íîñòåé) è îò- 184 Òàáëèöà 3.2.5.-18. — Ñâîäíàÿ òàáëèöà äèñïåðñèîííîãî àíàëèçà (òðåõäîçîâûé ëàòèíñêèé êâàäðàò, îïðåäåëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè àíòèáèîòèêîâ ìåòîäîì äèôôó- çèè â àãàð â ÷àøêàõ Ïåòðè) Èñòî÷íèê äèñïåðñèè (ïîêàçàòåëü) ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû (f) Ñóììà êâàäðàòîâ Ñðåäíèé êâàäðàò Ñóììà êâàäðàòîâ f æ è çç ö ø ÷÷ Íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå êðèòå- ðèÿ Ôèøåðà Fíàáë. Êðèòè÷åñêîå çíà÷åíèå êðèòå- ðèÿ Ôèøåðà Fêðèòè÷. Ïðåïàðàòû 1 0,401 0,401 4,307 Ðåãðåññèÿ 1 26,46 26,46 284,18 >8,1 (p = 0,01) Íåïàðàëëåëüíîñòü 1 0,027 0,027 0,290 <4,35 (p = 0,05) Êâàäðàòè÷íîñòü 1 0,055 0,055 0,591 <4,35 (p = 0,05) Ðàçíîñòü êâàäðàòè÷íîñòåé 1 0,0361 0,0361 0,3877 <4,35 (p = 0,05) Ïîñòàíîâêè k fï- = - = =1 6 1 5 . 26,9789 5,39578 Ñòðîêè n fñòð- = =1 5 . 0,2189 0,04378 0,4702 <4,1 (p = 0,01) Ñòîëáöû n fñò- = =1 5 . 0,2322 0,04644 0,4988 <4,1 (p = 0,01) Îòêëîíåíèå N f fï ñòð- - - -1 . . - - =f mñò. 20 1,8622 0,09311 = s2 Èòîã N m- - =1 35 29,2922 0,83692 n = 6 (÷èñëî îòâåòîâ íà äîçó); N = 36 (îáùåå ÷èñëî îòâåòîâ â îïûòå); m = 0 (÷èñëî óòðà÷åííûõ è çàìåíåííûõ çíà÷åíèé). ñóòñòâèå ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìûõ ðàçëè÷èé ìå- æäó ñòðîêàìè è ñòîëáöàìè (ñì. îäíîèìåííûå ïîêàçàòåëè).
Âû÷èñëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè è åå äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö Ñîîòíîøåíèå êîíöåíòðàöèé ðàâíî 1,5, ñëå- äîâàòåëüíî I = =lg1,5 01761, ; t f f= 2,5638 + 5,49059 / + 2,72654 / +2 + + =31,2446 / 216745 2 8493 10 f f, / , ïðè f = 20 è p = 0,01; b L L I n S U = + - × = × × = ( ) , , 3 1 2 25,2 2 01761 12 5 9625; y S n S = = = 3 312,0 18 17 333;, y U n U = = 3 17 122, ; M y y b U U S` = - = -0,03540; Îæèäàåìàÿ àêòèâíîñòü 1000ÌÅ/ìã ;AU = M M AU U U= ¢ + =lg 2 9646, ; Áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü RU MU= = =10 10 921 722 ÌÅ/ìã ;2 9646, , C E E s t= - =/ ( )2 2 = - × =26 46 26 46 0 09311 2 849 10294.2 , / ( , , , ) , Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà âû÷èñëÿþò ïî ôîðìóëå: CM C CM IU U ¢ ± - ¢ + =( )( )1 2 2 = × - ±10294 0 03540, ( , ) ± × × + ×æ è ç ö ø ÷0 0294 10294 0 03540 8 3 017612 2 , , , , . Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà ñîñòàâëÿþò –0,08610 è 0,01325 Íèæíÿÿ è âåðõíÿÿ äîâåðèòåëüíàÿ ãðàíèöà ñîñòàâëÿåò 10lg 0 08610ÀU + -( , ) è 10lg 0 01325ÀU + , , ò.å. 820,09 ÌÅ/ìã è 1030,97 ÌÅ/ìã ñîîòâåòñòâåííî. 3.2.6. Äâîéíîé ïåðåêðåñò (íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èíñóëèíà ìåòîäîì À è Â) Áèîëîãè÷åñêóþ àêòèâíîñòü èíñóëèíà îïðå- äåëÿþò ïî åãî ãèïîãëèêåìè÷åñêîìó äåéñòâèþ.  êà÷åñòâå îòâåòà æèâîòíîãî (y) ïðèíèìàþò: – äëÿ êðîëèêà 1) ñóììó äâóõ êîíöåíòðàöèé ãëþêîçû â êðî- âè ÷åðåç 1 ÷ è 2,5 ÷ ïîñëå ïîäêîæíîé èíúåêöèè èíñóëèíà (âçÿòèå êðîâè èç êðàåâîé âåíû óõà, äî- ïóñêàåòñÿ ïîãðåøíîñòü + 5 ìèí) èëè 2) ñðåäíþþ âåëè÷èíó, íà êîòîðóþ ñíèæàåò- ñÿ êîíöåíòðàöèÿ ãëþêîçû â êðîâè ÷åðåç 1 è 2,5 ÷àñà ïîñëå ïîäêîæíîãî ââåäåíèÿ èíñóëè- íà, âûðàæåííóþ â ïðîöåíòàõ ïî îòíîøåíèþ ê èñõîäíîé (âçÿòèå êðîâè èç êðàåâîé âåíû óõà, äîïóñêàåòñÿ ïîãðåøíîñòü + 5 ìèí); – äëÿ ìûøè — êîíöåíòðàöèþ ãëþêîçû â êðîâè ÷åðåç 40 ìèí ïîñëå ïîäêîæíîé èíúåê- öèè (âçÿòèå êðîâè èç îðáèòàëüíîãî ñèíóñà).  îáîèõ ñëó÷àÿõ ñõåìà ðàñ÷åòîâ îäèíàêîâà. Íèæå ïðèâåäåí ïðèìåð îáðàáîòêè ðåçóëüòà- òîâ äâîéíîãî ïåðåêðåñòà íà 4 ãðóïïàõ áåëûõ ìûøåé (ïî 12 îñîáåé â ãðóïïå).  òàáëèöå 3.2.6-20 ïðèâåäåíû îòâåòû æèâîòíûõ íà ââåäå- íèå äâóõ äîç ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è äâóõ äîç èñïûòóåìîãî îáðàçöà èíñóëèíà (ñîîòíîøåíèå äîç 1:2,667). Äëÿ òîãî ÷òîáû ïðîâåðèòü ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà÷èìîñòü èñòî÷íèêîâ âàðèàöèè, ïðèãîäíîñòü ðåçóëüòàòîâ è âû÷èñëèòü äèñïåðñèþ îïûòà, ïðîâîäÿò äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîëó÷åííûõ äàííûõ. Ïðè ýòîì ðàññ÷èòûâàþò çíà÷åíèÿ äèñ- ïåðñèé äëÿ 11 èñòî÷íèêîâ (ñâîäíàÿ òàáëèöà 3.2.6.-22). Äëÿ ýòîãî íà îñíîâàíèè äàííûõ, ïðåäñòàâ- ëåííûõ â òàáëèöå 3.2.6.-20 è 3.2.6.-21, à òàêæå ïîïðàâî÷íîãî êîýôôèöèåíòà, âû÷èñëÿþò ñóì- ìû êâàäðàòîâ èñòî÷íèêîâ äèñïåðñèè. Ïîïðàâî÷íûé êîýôôèöèåíò ( )K y N = = = å 2 2 8096 96 682762 67;, 185 Òàáëèöà 3.2.6.-19. — Ñõåìà äâîéíîãî ïåðåêðåñòà ÃÐÓÏÏÀ 1 ÃÐÓÏÏÀ 2 ÃÐÓÏÏÀ 3 ÃÐÓÏÏÀ 4 I ÏÎÑÒÀÍÎÂÊÀ (äåíü I) s1 s2 u1 u2 II ÏÎÑÒÀÍÎÂÊÀ (äåíü II) u2 u1 s2 s1 Èòîã = ( ) , , ,y K2 721262 00 682762 67 38499 33;å - = - = Áëîêè B Ê= - = + + + - å( )2 2 2 2 2 209 137 187 2 K - =682762 67 14967 33;, , Ïðåïàðàòû S U n K= + - = + - 2 2 2 2 4098 3998 48 2 682762 67 10416;, ,= Äíè D D n KI II = + - = + - 2 2 2 2 4152 3944 48 2 - =682762 67 450 66;, , Ðåãðåññèÿ L L N S U = + = ( )2 = - = = ( ) , 1158 96 13968 38 ; 2 E 186 Òàáëèöà 3.2.6.-20.
— Îòâåòû ìûøåé íà èíúåêöèþ èíñóëèíà ïî ñõåìå äâîéíîãî ïåðåêðåñòà (êîíöåíòðàöèÿ ãëþ- êîçû (ìã%) â êðîâè æèâîòíûõ ÷åðåç 40 ìèí ïîñëå ââåäåíèÿ) Ãðóïïà 1 Ãðóïïà 2 Ãðóïïà 3 Ãðóïïà 4 y Ñóììà çà 2 äíÿ (B) y Ñóììà çà 2 äíÿ (B) y Ñóììà çà 2 äíÿ (B) y Ñóììà çà 2 äíÿ (B)s1 u2 s2 u1 u1 s2 u2 s1 125 84 209 81 78 159 120 82 202 89 84 173 76 61 137 87 90 177 89 72 161 78 106 184 91 65 156 78 113 191 104 87 191 72 74 146 76 81 157 74 105 179 129 61 190 66 132 198 90 71 161 80 85 165 87 76 163 54 87 141 112 60 172 72 69 141 102 73 175 60 88 148 102 74 176 71 121 192 80 53 133 87 99 186 64 48 112 79 128 207 123 86 209 67 100 167 120 67 187 73 101 174 126 80 206 73 95 168 82 57 139 98 78 176 91 42 133 72 97 169 68 40 108 86 71 157 90 73 163 79 119 198 83 75 158 65 57 122 107 86 193 74 113 187 Òàáëèöà 3.2.6.-21. — Ñóììû îòâåòîâ è êîíòðàñòû (äâîéíîé ïåðåêðåñò íà ìûøàõ) Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö S Èñïûòóåìûé îáðàçåö U Ñóììà Äåíü I Ìàëàÿ äîçà S1I = 1089 U1I = 1248 Áîëüøàÿ äîçà S2I = 944 U2I = 871 Ñóììà SI = 2033 UI = 2119 DI = 4152 Äåíü II Ìàëàÿ äîçà S1II = 1194 U1II = 1096 Áîëüøàÿ äîçà S2II = 871 U2II = 783 Ñóììà SII = 2065 UII = 1879 DII = 3944 Ñóììà îòâåòîâ çà 2 äíÿ S = 4098 U = 3998 y =å 8096 Ëèíåéíûå êîíòðàñòû Äåíü I LSI = –145 LUI = –377 LI = –522 Äåíü II LSII = –323 LUII = –313 LII = –636 Ñóììà LS = –468 LU = –690 Lå = -1158 Íåïàðàë ëåëüíîñòü L L n ES U = + - = 2 2 2 = + - = 468 690 48 13968 38 513 37 2 2 , , ; Äíè ðåãðåññèþ L L n EI II × = + - = 2 2 2 = + - = 522 636 48 13968 38 135 37 2 2 , , ; Äíè íåïàðàë ëåëüíîñòü× = = + + + - - L L L L n ESI SII UI UII 2 2 2 2 íåïàðàë ëåëüíîñòü äíè ðåãðåññèþ- × =( ) = + + + - 145 323 377 313 24 2 2 2 2 - - - =13968 38 513 37 135 37 610 05;, , , , Äíè ïðåïàðàòû S S U U n I II I II × = + + + - 2 2 2 2 - - - =K äíè ïðåïàðàòû = + + + - - 2033 2065 2119 1879 24 682762 67 2 2 2 2 , - - =450 66 10416 770 68;, , , Îòêëîíåíèå áëîêè(1) = - - - × -íåïàðàë ëåëüíîñòü äíè ïðåïàðàòû( ) - × =( )äíè ðåãðåññèþ 13547,91; Îòêëîíåíèå èòîã(2) = - - - - -áëîêè ïðåïàðàòû ðåãðåññèÿ - - × =äíè (äíè íåïàðàëëåëüíîñòü) 8398,75. Çíà÷èìîñòü ðàçëè÷èé äèñïåðñèé ïðîâåðÿþò ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ Ôèøåðà. Îáÿçàòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ âûïîëíåíèå òðåáîâàíèé äëÿ ïîêàçàòå- ëåé Ðåãðåññèÿ è Äíè · íåïàðàëëåëüíîñòü. Ðåãðåñ- ñèÿ õàðàêòåðèçóåò äîçîçàâèñèìîñòü, à Äíè · íå- ïàðàëëåëüíîñòü — ïîêàçàòåëü ãðóïïîâîé óñòîé- ÷èâîñòè, õàðàêòåðèçóþùèé ñîãëàñîâàííîñòü óãëîâ íàêëîíà ëèíèé äîçîçàâèñèìîñòè â ïåðâûé è âòîðîé äåíü. Äëÿ Ðåãðåññèè íàáëþäàåìîå çíà- ÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà äîëæíî áûòü áîëüøå êðèòè÷åñêîãî (p = 0,01), à äëÿ ïîêàçàòåëÿ Äíè · íåïàðàëëåëüíîñòü — ìåíüøå êðèòè÷åñêîãî (p = 0,05). Äëÿ òîãî ÷òîáû íàéòè Fíàáë., ñðåäíèå êâàäðà- òû ïîêàçàòåëåé Íåïàðàëëåëüíîñòü, Äíè · ïðåïà- ðàòû è Äíè · ðåãðåññèþ äåëÿò íà ñðåäíèé êâàä- ðàò ïîêàçàòåëÿ Îòêëîíåíèå (1), à âñå îñòàëü- íûå — íà ñðåäíèé êâàäðàò Îòêëîíåíèÿ (2). Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñðàâíèâàþò ñ òàáëè÷- íûìè êðèòè÷åñêèìè çíà÷åíèÿìè êðèòåðèÿ Ôè- øåðà (òàáëèöà 2 Ïðèëîæåíèÿ). ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû f1 = 1, à f2 = 44. 187 Òàáëèöà 3.2.6.-22. — Ñâîäíàÿ òàáëèöà äèñïåðñèîííîãî àíàëèçà (äâîéíîé ïåðåêðåñò íà ìûøàõ) Èñòî÷íèê äèñïåðñèè (ïîêàçàòåëü) ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû (f) Ñóììà êâàäðàòîâ Ñðåäíèé êâàäðàò Ñóììà êâàäðàòîâ f æ è çç ö ø ÷÷ Íàáëþäàåìîå çíà- ÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà Fíàáë. Êðèòè÷åñêîå çíà- ÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà Fêðèòè÷.
Íåïàðàëëåëüíîñòü 1 513,37 513,37 1,67 <4,06 (p = 0,05) Äíè · ïðåïàðàòû 1 770,68 770,68 2,50 <4,06 (p = 0,05) Äíè · ðåãðåññèþ 1 135,37 135,37 0,44 <4,06 (p = 0,05) Îòêëîíåíèå (1) N m 2 4 44- - = 13547,91 307,91 Áëîêè 2n – 1 = 47 14967,33 318,45 Ïðåïàðàòû 1 104,16 104,16 0,55 <4,06 (p = 0,05) Ðåãðåññèÿ 1 13968,38 13968,38 73,18 >7,24 (p = 0,01) Äíè 1 450,66 450,66 2,36 <4,06 (p = 0,05) Äíè · íåïàðàëëåëü- íîñòü 1 610,05 610,05 3,20 <4,06 (p = 0,05) Îòêëîíåíèå (2) (äèñïåðñèÿ îïûòà) N m 2 4 44- - = 8398,75 190,88 Èòîã N – 1 – m = 95 38499,33 N = 96 (îáùåå ÷èñëî îòâåòîâ â îïûòå); n = 24 (÷èñëî îòâåòîâ â ãðóïïå); m = 0 (÷èñëî óòðà÷åííûõ è çàìåíåííûõ çíà÷åíèé). Âû÷èñëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè è åå äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö Ñîîòíîøåíèå äîç ðàâíî 2,667, ñëåäîâàòåëü- íî I = =lg2 667 0 4260, , ; t f f=1,958788 + 2,429953 / + 2,189891 / +2 + 4,630189 / +1,398179 / 2 023 9 f f = , (f =44 è p = 0,05); b L L IN S U = + = - - × = - 2 2 468 690 0 4260 96 56 63; ( ) ( ) , , y S n S = = = 2 4098 48 85 38;, y U n U = = 2 83 29;, ¢ = - =M y y bU U S 0 0369;, AU =100 ÌÅ/ìë M MU U = ¢ + lgAU = 2 0369, . Áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü RU = =10 108 87 ÌÅ/ìë2 0369, , C E E s t= - =/ ( )2 2 = - × =13968 38 13968 38 190 88 2 02 10591.2 , / ( , , , ) , Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà âû÷èñëÿþò ïî ôîðìóëå: CM C CM I AU U U ¢ ± - ¢ + + =( )( )1 lg 2 2 = × ±10591 0 0369, , ± × × + +0 0591 10591 0 0369 0 4260 2 0002 2 , ( , , , ) , . Ëîãàðèôìè÷åñêèå äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàç- öà ñîñòàâëÿþò 1,9351 è 2,1431. Òàêèì îáðàçîì, áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü èñïûòóåìîãî îáðàçöà ðàâíà 108,9 ÌÅ/ìë. Åå äî- âåðèòåëüíûå ãðàíèöû ñîñòàâëÿþò 101,9351 – 102,1431, ò.å. 86,1–139,0 ÌÅ/ìë. 3.2.7. Îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ èñïûòàíèÿ íà ïðîëîíãèðîâàííîå (óäëèíåííîå) äåéñòâèå ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ èíñóëèíà è åãî àíàëîãîâ ñ èñïîëüçîâàíèåì êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà Ïðîëîíãèðîâàííîå äåéñòâèå ïðåïàðàòîâ èí- ñóëèíà è åãî àíàëîãîâ îïðåäåëÿþò ïóòåì ñðàâ- íåíèÿ èõ ãèïîãëèêåìè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ñ äåéñò- âèåì ðàñòâîðà ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà èíñóëèíà ÷åëîâåêà ïîñëå ïîäêîæíîé èíúåêöèè.  êà÷åñò- âå òåñò-îáúåêòà èñïîëüçóþò êðîëèêîâ, à â êà÷å- ñòâå îòâåòà — êîíöåíòðàöèþ ãëþêîçû â êðîâè æèâîòíûõ ÷åðåç 1,0; 1,5; 3,5 è 6,0 ÷ ïîñëå ââåäå- íèÿ (â % îò èñõîäíîãî óðîâíÿ).  òàáëèöå 3.2.7.-23 ïðèâåäåíû êîíöåíòðàöèè ãëþêîçû â êðîâè äâóõ ãðóïï êðîëèêîâ ïî 9 îñîáåé â êàæ- äîé äî è ïîñëå ââåäåíèÿ îäèíàêîâîé äîçû ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà èíñó- ëèíà (âçÿòèå êðîâè èç êðàåâîé âåíû óõà). Äëÿ êàæäîãî êðîëèêà â êàæäîé âðåìåííîé òî÷êå ðàññ÷èòûâàþò èíäèâèäóàëüíóþ îòíîñè- òåëüíóþ êîíöåíòðàöèþ ãëþêîçû â êðîâè â ïðî- öåíòàõ îò èñõîäíîãî óðîâíÿ äàííîãî æèâîòíîãî. Òàê êàê â òå÷åíèå 6 ÷ ñðåäíÿÿ îòíîñèòåëüíàÿ êîíöåíòðàöèÿ ãëþêîçû â êðîâè êðîëèêîâ, ïîëó- ÷èâøèõ ðàñòâîð ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, äîñòèãëà 103,7 %, òî â êà÷åñòâå êîíòðîëüíîé òî÷êè ïðè- íèìàþò âðåìÿ, êîãäà îíà äîñòèãëà 100 % (ìåæ- äó 4,5 è 6 ÷). 1. Ðàñ÷åò êîíòðîëüíîé âðåìåííîé òî÷êè: 1.1. Ó ãðóïïû êðîëèêîâ, ïîëó÷èâøèõ ñòàí- äàðòíîãî îáðàçöà, âû÷èñëÿþò èçìåíåíèå ñðåä- íåé îòíîñèòåëüíîé êîíöåíòðàöèè ãëþêîçû â êðîâè íà çàâåðøàþùåì ýòàïå îïûòà. Äëÿ ýòîãî âû÷èñëÿþò ðàçíîñòü ìåæäó ñðåäíèìè çíà÷åíèÿ- ìè îòíîñèòåëüíîé êîíöåíòðàöèè ãëþêîçû â êðî- âè ãðóïïû æèâîòíûõ, ïîëó÷èâøèõ ðàñòâîð ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, ÷åðåç 6,0 è 4,5 ÷ ïîñëå ââåäåíèÿ: 103 67 69 82, ,- = 33,85 (%). 1.2. Ðàçíîñòü ìåæäó ñðåäíèì èñõîäíûì óðîâíåì è ñðåäíåé êîíöåíòðàöèåé ãëþêîçû ÷å- ðåç 4,5 ÷ ïîñëå ââåäåíèÿ: 100 00 69 82 30,18, ,- = (%). 1.3.
Ñîñòàâëÿþò ñëåäóþùóþ ïðîïîðöèþ: 150 ÷ 33,85%, ® = x x÷ 30,18% 30,18 150 33,85 1,34 ÷® Þ = × = , ( ) ïðîøëî îò 4,5 ÷ äî êîíòðîëüíîé òî÷êè. 1.4. Êîíòðîëüíàÿ âðåìåííàÿ òî÷êà ðàâíà: 4 50 1,34 5,84, + = (÷). 2. Äëÿ êàæäîãî æèâîòíîãî ðàññ÷èòûâàþò îò- íîñèòåëüíóþ êîíöåíòðàöèþ ãëþêîçû â êðîâè â êîíòðîëüíîé âðåìåííîé òî÷êå. Íàïðèìåð, äëÿ êðîëèêà ¹ 1 â ïåðâîé ãðóïïå: 2.1. 96,64 55,46 41,18- = (%) çà 1,5 ÷ ñ 4,5 äî 6 ÷. Ñëåäîâàòåëüíî, çà âðåìÿ, ïðîøåäøåå îò 4,50 ÷ äî êîíòðîëüíîé âðåìåííîé òî÷êè 5,84 ÷, 188 êîíöåíòðàöèÿ ãëþêîçû â êðîâè äàííîãî æèâîò- íîãî âîçðîñëà íà 1,34 4118 150 36,79 × = , , (%). 2.2. Ïîýòîìó, êîíöåíòðàöèÿ ãëþêîçû â êðîâè êðîëèêà ¹ 1 â êîíòðîëüíîé âðåìåííîé òî÷êå ñî- ñòàâèëà 55,46 36,79 92,25+ = (%). Òàêèå æå ðàñ÷åòû ïðîâîäÿò è äëÿ îñòàëüíûõ æèâîòíûõ. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ïåðåíîñÿò â òàáëèöó 3.2.7.-25. Äëÿ òîãî ÷òîáû ïðîâåðèòü ðàâåíñòâî äèñ- ïåðñèé â äâóõ ãðóïïàõ, äåëÿò áóëüøóþ äèñïåð- ñèþ íà ìåíüøóþ: s s1 2 2 2 81599 51 446 159/ , / , ,= » , ÷òî ìåíüøå êðèòè÷åñêîãî çíà÷åíèÿ êðèòåðèÿ Ôèøåðà äëÿ f f1 8= =2 p = 0,05, ðàâíîãî 3,44 (òàáëèöà 3 Ïðèëîæåíèÿ). Ýòî çíà÷èò, ÷òî ðàçëè- ÷èå äâóõ äèñïåðñèé ñòàòèñòè÷åñêè íåäîñòîâåð- íî. Ïîýòîìó ïðîâîäÿò ñðàâíåíèå äâóõ ñðåäíèõ çíà÷åíèé îòíîñèòåëüíîé êîíöåíòðàöèè ãëþêî- çû â êðîâè 2 ãðóïï æèâîòíûõ ñ ïîìîùüþ êðèòå- ðèÿ Ñòüþäåíòà ïî ôîðìóëå: 189 Òàáëèöà 3.2.7.-23. — Îòâåòû (êîíöåíòðàöèÿ ãëþêîçû â êðîâè êðîëèêîâ â ìã%) äî è ïîñëå ââåäåíèÿ ñòàíäàðò- íîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî îáðàçöà èíñóëèíà Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö S ¹ ï/ï Âðåìÿ, ÷ 0 1,5 3 4,5 6 1. 119 30 33 66 115 2. 84 19 43 75 90 3. 85 32 37 55 87 4. 73 43 40 49 81 5. 91 24 71 83 95 6. 82 48 48 57 75 7. 91 21 36 48 92 8. 95 44 47 65 111 9. 93 25 20 65 95 Ñóììà Ñðåäíåå, ìã% 90,33 31,78 41,67 62,56 93,44 319,78 Ñðåäíåå, % 100,00 35,18 46,13 69,26 103,44 n = 9 Ñðåäíåå ñíèæåíèå, % 64,82 53,87 30,74 –3,44 Èñïûòóåìûé îáðàçåö U ¹ ï/ï Âðåìÿ, ÷ 0 1,5 3 4,5 6 1. 89 41 48 54 74 2. 102 36 41 43 68 3. 83 36 45 57 72 4. 82 47 20 34 61 5. 94 62 56 93 80 6. 79 40 41 52 48 7. 97 19 34 42 79 8. 110 47 44 89 73 9. 62 35 36 40 44 Ñóììà Ñðåäíåå, ìã% 88,67 40,33 40,56 56,00 61.44 287,00 Ñðåäíåå, % 100,00 45,48 45,74 63,16 69.29 n = 9 Ñðåäíåå ñíèæåíèå, % 54,52 54,26 36,84 30,71 | |t x x s f s f f f n n n n íàáë. 1 2 1 2 1 2 1 1 2 1 6 83,= - + + × + = 2 2 2 2 , ãäå f = n1 –1; t f fêðèòè÷. = + + +1958788 2 429953 2189891 2 , , / , / 4 630189 1398179 21203 9 , / , / , ,f f+ » ïðè f = n1 + n2 – 2 = 16 è p = 0,05. Ýòî ãîâîðèò î òîì, ÷òî â êîíòðîëüíîå âðåìÿ (5,84 ÷) ñðåäíÿÿ îòíîñèòåëüíàÿ êîíöåíòðàöèÿ ãëþêîçû â êðîâè êðîëèêîâ, ïîëó÷èâøèõ èñïû- òóåìûé îáðàçåö, áûëà äîñòîâåðíî íèæå, ÷åì òà- êîâàÿ â êðîâè æèâîòíûõ, ïîëó÷èâøèõ ðàñòâîð ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î íà- 190 Òàáëèöà 3.2.7.-24. — Êîíöåíòðàöèÿ ãëþêîçû â êðîâè êðîëèêîâ â % îò èñõîäíîãî óðîâíÿ Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö S ¹ ï/ï Âðåìÿ, ÷ 0 1,5 3 4,5 6 1. 100,00 25,21 27,73 55,46 96,64 2. 100,00 22,62 51,19 89,29 107,14 3. 100,00 37,65 43,53 64,71 102,35 4. 100,00 58,9 54,79 67,12 110,96 5. 100,00 26,37 78,02 91,21 104,4 6. 100,00 58,54 58,54 69,51 91,46 7. 100,00 23,08 39,56 52,75 101,1 8. 100,00 46,32 49,47 68,42 116,84 9. 100,00 26,88 21,51 69,89 102,15 Ñðåäíåå 100,00 36,17 47,15 69,82 103,67 n 9 9 9 9 f 8 8 8 8 s 14,915 16,838 13,085 7,486 t 2,306 2,306 2,306 2,306 Dx, p = 0,05 11,46 12,94 10,06 5,75 Èñïûòóåìûé îáðàçåö U ¹ ï/ï Âðåìÿ, ÷ 0 1,5 3 4,5 6 1. 100,00 46,07 53,93 60,67 83,15 2. 100,00 35,29 40,2 42,16 66,67 3. 100,00 43,37 54,22 68,67 86,75 4. 100,00 57,32 24,39 41,46 74,39 5. 100,00 65,96 59,57 98,94 85,11 6. 100,00 50,63 51,9 65,82 60,76 7. 100,00 19,59 35,05 43,3 81,44 8.
100,00 42,73 40 80,91 66,36 9. 100,00 56,45 58,06 64,52 70,97 Ñðåäíåå 100,00 46,38 46,37 62,94 75,06 n 9 9 9 9 f 8 8 8 8 s 13,628 11,99 19,192 9,431 t 2,306 2,306 2,306 2,306 Dx, p = 0,05 10,48 9,22 14,75 6,16 ëè÷èè ïðîëîíãèðîâàííîãî äåéñòâèÿ èñïûòóåìî- ãî îáðàçöà. Ðåçóëüòàòû îïûòà â ãðàôè÷åñêîì âèäå ïðè- âåäåíû íà ðèñóíêå 3.2.7.-5. Ïðèìå÷àíèå. Åñëè s s1 2 2 2 / ïðåâûøàåò êðè- òè÷åñêîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà, òî äëÿ âû- ÷èñëåíèÿ íàáëþäàåìîãî çíà÷åíèÿ êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà ñëåäóåò ïðèìåíÿòü ôîðìóëó: | |t x x s n s n íàáë. 1 2 1 2 1 2 = - +/ /2 2 ïðè 2 0,51 1 2 2 2 1 4 f n n s s s s = + - + + æ è ç ç ö ø ÷ ÷ ( )2 2 4 . Âû÷èñëåííîå çíà÷åíèå tíàáë. ñðàâíèâàþò ñ têðèòè÷., êàê óêàçàíî âûøå (÷èñëî ñòåïåíåé ñâî- áîäû f îêðóãëÿþò äî öåëîãî ÷èñëà). Êðèòè÷å- ñêîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà ìîæíî òàê- æå íàéòè â ïðèëîæåíèÿõ (òàáëèöà 2 Ïðèëîæå- íèÿ). Ïîäðîáíåå ñì. ðàçäåë 1.3.1 «Ñðàâíåíèå ñðåäíèõ çíà÷åíèé äâóõ íåçàâèñèìûõ âûáîðîê». Åñëè ðàñïðåäåëåíèå îòâåòîâ â ãðóïïàõ íå ÿâëÿåòñÿ íîðìàëüíûì, òî äëÿ ñðàâíåíèÿ äâóõ íåçàâèñèìûõ âûáîðîê ñëåäóåò âîñïîëüçîâàòüñÿ íåïàðàìåòðè÷åñêèì êðèòåðèåì Ìàííà – Óèòíè. Ïðåäâàðèòåëüíóþ ïðîâåðêó íà íîðìàëüíîñòü ïðîâîäÿò, êàê îïèñàíî â ðàçäåëå 2.3.1. 3.2.8. Ìîäåëü óãëîâûõ êîýôôèöèåíòîâ (íà ïðèìåðå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè âàêöèíû ïðîòèâ ãðèïïà) Ñîäåðæàíèå àíòèãåíà ãåìàããëþòèíèíà â äâóõ âàêöèíàõ ïðîòèâ ãðèïïà îïðåäåëÿëè ìå- òîäîì ðàäèàëüíîé èììóíîäèôôóçèè. Íà ýòèêåò- êàõ îáåèõ âàêöèí áûëà óêàçàíà àêòèâíîñòü 15 ìêã ãåìàããëþòèíèíà íà îäíó äîçó, ÷òî ñîîò- âåòñòâóåò ñîäåðæàíèþ 30 ìêã ãåìàããëþòèíè- íà/ìë. Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö èìåë óñòàíîâëåí- íóþ àêòèâíîñòü 39 ìêã ãåìàããëþòèíèíà/ìë. Èññëåäîâàëè 4 êîíöåíòðàöèè ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà è èñïûòóåìîãî ïðåïàðàòà, ðàññ÷èòàí- íûå, èñõîäÿ èç îæèäàåìûõ è îáîçíà÷åííûõ íà ýòèêåòêå çíà÷åíèé áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè; â êàæäîì ñëó÷àå ÷èñëî ïîâòîðíîñòåé ðàâíî 2. Êîíòðîëüíóþ ãðóïïó íå èñïîëüçîâàëè. Ïîñëå óñòàíîâëåíèÿ ðàâíîâåñèÿ ìåæäó âíóòðåííèì è âíåøíèì ðåàãåíòîì, èçìåðÿëè ïëîùàäü êîëü- 191 Òàáëèöà 3.2.7.-25. — Ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ ïðîëîíãèðîâàííîãî äåéñòâèÿ (%) Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö (S) Èñïûòóåìûé îáðàçåö (U) 0 4,5 ÷ 6 ÷ Êîíòðîëüíàÿ òî÷êà 5,84 ÷ 0 4,5 6 ÷ Êîíòðîëüíàÿ òî÷êà 5,84 ÷ 100,00 55,46 96,64 92,25 100,00 60,67 83,15 80,75 100,00 89,29 107,14 105,24 100,00 42,16 66,67 64,06 100,00 64,71 102,35 98,34 100,00 68,67 86,75 84,82 100,00 67,12 110,96 106,28 100,00 41,46 74,39 70,88 100,00 91,21 104,4 102,99 100,00 98,94 36,17 86,59 100,00 69,51 91,46 89,12 100,00 65,82 60,76 61,30 100,00 52,75 101,1 95,94 100,00 43,3 81,44 77,37 100,00 68,42 116,84 111,68 100,00 80,91 66,36 67,91 100,00 69,89 102,15 98,71 100,00 64,52 70,97 70,28 100,00 69,82 103,67 100,06 » 100,0 100,00 62,94 69,63 73,77 s2 51 446= , s2 81 599= , Ðèñóíîê 3.2.7.-5. — Ãèïîãëèêåìè÷åñêèå êðèâûå êðî- ëèêîâ â % îò èñõîäíîãî óðîâíÿ (îïðåäåëåíèå ïðîëîí- ãèðîâàííîãî äåéñòâèÿ) öåâûõ çîí îñàäêà. Ðåçóëüòàòû ïðèâåäåíû â òàá- ëèöå 3.2.8.-26. Ñóììû îòâåòîâ P S S S SS = + + + =1 2 3 4 108 2, ; P U U U UU = + + + =1 2 3 4 103 85, ; P U U U UU ¢ = ¢ + ¢ + ¢ + ¢ =1 2 3 4 85 8, . Ëèíåéíûå ïðîèçâåäåíèÿ L S S S SS = + + + =1 2 3 4 30111 2 3 4 , ; L U U U UU = + + + =1 2 2 4 29211 2 3 4 , ; L U U U UU ¢ = ¢ + ¢ + ¢ + ¢ =1 2 3 4 23411 2 3 4 , . Ñâîáîäíûå êîýôôèöèåíòû a d P LS S S= + - =( ) ,4 2 6 1410; a d P LU U U= + - =( ) ,4 2 6 116 7; a d P LU U U¢ ¢ ¢= + - =( ) ,4 2 6 139 8. Óãëîâûå êîýôôèöèåíòû b L d PS S S= - + =2 1 612( ) , ; b L d PU U U= - + =2 1 64 95( ) , ; b L d PU U U¢ ¢ ¢= - + =2 1 39 2( ) , .
Êîìáèíàöèè óñëîâèé G S S S SS = + + + =1 2 2 2 3 2 4 2 3114 3, ; G U U U UU = + + + =1 2 2 2 3 2 4 2 2909 4, ; G U U U UU ¢ = + + + =1 2 4 5 1917 3, . Íåëèíåéíîñòü J G P d b d d S S S S = - - - = 2 2 3 3 0 223, ; J G P d b d d U U U U = - - - = 2 2 3 3 2 227, ; J G P d b d d U U U U ¢ ¢ ¢ ¢ = - - - = 2 2 3 3 0 083, ; H n d d d I = - - = 4 2 2 0 00933 2 , ; a a a a h d d S U U ¢ = + + - =¢ ( ) ,2 1104; K n P P P hd S U U = + + =¢( ) , 2 14785 8. Äëÿ òîãî ÷òîáû ïðîâåðèòü ñòàòèñòè÷åñêóþ çíà÷èìîñòü èñòî÷íèêîâ âàðèàöèè, ïðèãîäíîñòü ðåçóëüòàòîâ è âû÷èñëèòü äèñïåðñèþ îïûòà, 192 Òàáëèöà 3.2.8.-26. — Ïëîùàäü êîëüöåâûõ çîí îñàäêà (îïðåäåëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè âàêöèíû ïðîòèâ ãðèïïà, ìîäåëü óãëîâûõ êîýôôèöèåíòîâ) Ãðóïïà 1 Ãðóïïà 2 Ãðóïïà 3 Ãðóïïà 4 Ãðóïïà 5 Ãðóïïà 6 Ãðóïïà 7 Ãðóïïà 8 s1 s2 s3 s4 u1 u2 u3 u4 ó 18 22,8 30,4 35,7 15,1 23,1 28,9 34,4 18 24,5 30,4 36,6 16,8 24,2 27,4 37,8 Ñðåäíåå 18 23,65 30,4 36,15 15,95 23,65 28,15 36,1 Ñóììà ñòîëáöîâ (Ñ) 36 47,3 60,8 72,3 31,9 47,3 56,3 72,2 C 2 1296 2237,29 3696,64 5227,29 1017,61 2237,29 3169,69 5212,84 Ãðóïïà 9 Ãðóïïà 10 Ãðóïïà 11 Ãðóïïà 12 Ñóììà ¢u1 ¢u2 ¢u3 ¢u4 ó 15,4 20,2 24,2 27,4 15,7 18,6 23,1 27 Ñðåäíåå 15,55 19,4 23,65 27,2 Ñóììà ñòîëáöîâ (Ñ) 31,1 38,8 47,3 54,4 Ñå = 595 7, C 2 967,21 1505,44 2237,29 2959,36 Ñå = 2 31763 95, n = 2 (÷èñëî îòâåòîâ â ãðóïïå); N = 22 (îáùåå ÷èñëî îòâåòîâ â îïûòå); d = 4 (÷èñëî äîç äëÿ êàæäîãî îáðàçöà); h = 3 (÷èñëî îáðàçöîâ â èñïûòàíèè, âêëþ÷àÿ ñòàíäàðòíûé îáðàçåö); m = 0 (÷èñëî óòðà÷åííûõ è çàìåíåííûõ çíà÷åíèé). ïðîâîäÿò äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîëó÷åííûõ äàííûõ. Ïðè ýòîì ðàññ÷èòûâàþò çíà÷åíèÿ äèñ- ïåðñèé äëÿ 6 èñòî÷íèêîâ (òàáëèöà 3.2.8.-27). Òî÷êà ïåðåñå÷åíèÿ = = + + - - =H a a a h d d aI S U U (( ) ( ) ) ,` 2 2 2 2 2 3 474; Íåëèíåéíîñòü n J J JS U U= + + =¢( ) ,5 090; Ïîñòàíîâêè S S U U n K= + + + - =1 2 2 2 1 2 2 2 1096 2, Ðåãðåññèÿ ïîñòàíîâêè òî÷êà ïåðåñå÷åíèÿ= - - - = - - =íåëèíåéíîñòü 1096 2 3 474 5 090 1087 6, , , , ; Èòîã y= =å( )2 1109,0; Îòêëîíåíèå èòîã ïîñòàíîâêè= - = 1109 0 1096 2 12 8, , ,- = . Çíà÷èìîñòü ðàçëè÷èé äèñïåðñèé ïðîâåðÿþò ñ ïîìîùüþ êðèòåðèÿ Ôèøåðà. Îáÿçàòåëüíûì ÿâëÿåòñÿ âûïîëíåíèå òðåáîâàíèé äëÿ ïîêàçàòå- ëåé Ðåãðåññèÿ, Òî÷êà ïåðåñå÷åíèÿ è Íåëèíåé- íîñòü. Ýòè òðåáîâàíèÿ çàêëþ÷àþòñÿ â òîì, ÷òî äëÿ Ðåãðåññèè íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå êðèòåðèÿ Ôèøåðà äîëæíî áûòü áîëüøå êðèòè÷åñêîãî (p = 0,01), à äëÿ Òî÷êè ïåðåñå÷åíèÿ è Íåëèíåéíî- ñòè – ìåíüøå êðèòè÷åñêîãî (p = 0,05). Äëÿ òîãî ÷òîáû íàéòè Fíàáë., ñðåäíèå êâàäðà- òû ïîêàçàòåëåé äåëÿò íà ñðåäíèé êâàäðàò ïîêà- çàòåëÿ Îòêëîíåíèå. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ñðàâíèâàþò ñ òàáëè÷íûìè êðèòè÷åñêèìè çíà÷å- íèÿìè êðèòåðèÿ Ôèøåðà (òàáëèöà 3 Ïðèëîæå- íèÿ). ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû f1 = 3, 2 è 6 ñîîò- âåòñòâåííî, à f2 = 36. Äèñïåðñèîííûé àíàëèç ïîêàçàë ïðèãîä- íîñòü ðåçóëüòàòîâ îïûòà. Âû÷èñëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè è åå äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö t = 2179, ïðè f =12 è p = 0,05; Óãëîâîé êîýôôèöèåíò ñòàíäàðòíîãî îáðàçöà S ¢ = - + ¢ + + =b L d d a d d dS S6 3 1 2 33 2 ( ) = × - × = 6 3011 60 1104 180 6 357 , , , . Óãëîâîé êîýôôèöèåíò èñïûòóåìîãî îáðàçöà U ¢ = - + ¢ + + =b L d d a d d dU U6 3 1 2 33 2 ( ) = × - × = 6 2921 60 1104 180 6 057 , , , . Óãëîâîé êîýôôèöèåíò èñïûòóåìîãî îáðàçöà U’ ¢ = - + ¢ + + =¢ ¢ b L d d a d d dU U6 3 1 2 33 2 ( ) = × - × = 6 2341 60 1104 180 4123 , , , . Ñîîòíîøåíèÿ àêòèâíîñòåé: ¢RU = 6,057/6,357 = 0,953; ¢ ¢RU = 4,123/6,357 = 0,649. Êîýôôèöèåíòû äèñïåðñèè äëÿ âû÷èñëåíèÿ äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö V nd d d h d 1 6 2 1 1 1 3 1 0 0444= + + + - æ è ç ö ø ÷ = ( ) ( ) ( ) , ; V d d h d 2 3 1 3 1 1 0 625= + + + - = ( ) ( ) ( ) , ; 193 Òàáëèöà 3.2.8.-27.
— Ñâîäíàÿ òàáëèöà äèñïåðñèîííîãî àíàëèçà (îïðåäåëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè âàê- öèíû ïðîòèâ ãðèïïà, ìîäåëü óãëîâûõ êîýôôèöèåíòîâ) Èñòî÷íèê äèñïåðñèè (ïîêàçàòåëü) ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû (f) Ñóììà êâàäðàòîâ Ñðåäíèé êâàäðàò Ñóììà êâàäðàòîâ f æ è çç ö ø ÷÷ Íàáëþäàåìîå çíà÷åíèå êðèòå- ðèÿ Ôèøåðà Fíàáë. Êðèòè÷åñêîå çíà÷åíèå êðèòå- ðèÿ Ôèøåðà Fêðèòè÷. Ðåãðåññèÿ h = 3 1087,6 362,5 339,4 >5,15 (p = 0,01) Òî÷êà ïåðåñå÷åíèÿ h - =1 2 3,474 1,737 1,626 <4,07 (p = 0,05) Íåëèíåéíîñòü h d( ) ( )- = - =2 3 4 2 6 5,090 0,848 0,794 <3,0 (p = 0,05) Ïîñòàíîâêè hd - = × - =1 3 4 1 11 1096,2 Îòêëîíåíèå hd n( ) ( )- = × × - =1 3 4 2 1 12 12,8 1,068 Èòîã nhd m- - =1 23 1096,2 C b b s t V S S = ¢ ¢ - = 2 2 2 2 1 = - × × = 6 357 6 357 1068 2179 0 0444 10056 2 2 2 , , , , , , ¢ = - = × =K C V( ) , , ,1 0 0056 0 625 0 00352 Äîâåðèòåëüíûå ãðàíèöû áèîëîãè÷åñêîé àê- òèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàçöà âû÷èñëÿþò ïî ôîðìóëå: CR K C CR K K CRU U U ¢ - ¢± - ¢ + + ¢ ¢- ¢( )( ) ( )1 1 22 . Äëÿ îáðàçöà U 0 955 0 0056 1913 0 0035 1913, , , , ( , )± × + × - = = ±0 955 0 063, , . Äëÿ îáðàçöà U¢ 0 649 0 0056 1 423 0 0035 1301, , , , ( , )± × + × - = = ±0 649 0 058, , . Ñîäåðæàíèå ãåìàããëþòèíèíà â 1 ìë âàêöè- íû íàõîäÿò ïóòåì óìíîæåíèÿ îòíîøåíèÿ àêòèâ- íîñòåé è äîâåðèòåëüíûõ èíòåðâàëîâ íà îæèäàå- ìóþ àêòèâíîñòü 30 ìêã/ìë. Ðåçóëüòàòû ïðèâåäå- íû â òàáëèöå 3.2.8.-28. Ïðèìå÷àíèå. Ïðè èñïîëüçîâàíèè êîíòðîëü- íîé ãðóïïû (ñõåìà «(hd) + 1») èìåþò ìåñòî ñëå- äóþùèå îòëè÷èÿ. Äèñïåðñèîííûé àíàëèç 1) H nhd nhd hd hd d I = - - + + 2 2 4 2 2)  ñâîäíîé òàáëèöå äèñïåðñèîííîãî àíà- ëèçà ïîÿâëÿåòñÿ äîïîëíèòåëüíûé èñòî÷íèê âà- ðèàöèè: Êîíòðîëü (ïîñëå Ðåãðåññèè). Êîíòðîëü H B aB= -( )2 ïðè f = 1. 3) Ïîñòàíîâêè n B G G KS U= + + + -( ...)2 ïðè f = hd. 4) Ðåãðåññèÿ ïîñòàíîâêè êîíòðîëü= - - - -òî÷êà ïåðåñå÷åíèÿ íåëèíåéíîñòü. 5) a a a h d d S U = + + - K ( )2 . 6) K n B P P hd S U = + + + + ( ...)2 1 . 7) ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû äëÿ ïîêàçàòåëÿ Îòêëîíåíèå ðàâíî ( )( )hd n+ -1 1 . 8) ×èñëî ñòåïåíåé ñâîáîäû äëÿ ïîêàçàòåëÿ Èòîã ðàâíî nhd n+ -1. Âû÷èñëåíèå áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè è åå äîâåðèòåëüíûõ ãðàíèö 1) a d B d ha h d d ¢ = + - - - + + ( ) ( ) ( ) 2 1 2 3 2 3 2 1 . 2) V nd d 1 6 2 1 = + ´ ( ) ´ + + + + - æ è ç ö ø ÷ 1 1 3 2 2 1 1d d d hd d( ) ( ) ( ) . 3) V d d d d hd d 2 3 1 3 1 2 1 = + + + + - ( ) ( )( ) ( ). 4. ÁÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÅ ÈÑÏÛÒÀÍÈß Ñ ÊÀ×ÅÑÒÂÅÍÍÛÌ (ÀËÜÒÅÐÍÀÒÈÂÍÛÌ) ÒÈÏÎÌ ÎÒÂÅÒΠÊà÷åñòâåííûå îòâåòû íå ïîääàþòñÿ íåïî- ñðåäñòâåííîìó èçìåðåíèþ, è ïîäëåæàò ó÷åòó ïî íàëè÷èþ èõ ñâîéñòâ ó îòäåëüíûõ ÷ëåíîâ èçó- ÷àåìîé ãðóïïû. Êà÷åñòâåííûå äàííûå ïîäðàçäåëÿþò íà íî- ìèíàëüíûå è ïîðÿäêîâûå. ×àñòíûì ñëó÷àåì êà- ÷åñòâåííûõ äàííûõ ÿâëÿþòñÿ äèõîòîìè÷åñêèå (àëüòåðíàòèâíûå) äàííûå; íàïðèìåð, «âñå èëè íè÷åãî», «æèçíü èëè ñìåðòü» â ìîäåëè îïðåäå- ëåíèÿ ñðåäíåé ñìåðòåëüíîé äîçû.  èñïûòàíèÿõ ñ êà÷åñòâåííûì òèïîì îòâå- òîâ ðåçóëüòàòîì èõ èíòåðïðåòàöèè ÷àùå âñåãî áûâàþò íå öèôðîâûå çíà÷åíèÿ, à íàëè÷èå èëè îòñóòñòâèå ïðèçíàêà». 4.1. Îöåíêà áèîëîãè÷åñêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàçöà ïðè êîñâåííîì îïðåäåëåíèè ýôôåêòèâíûõ äîç (îöåíêà ÅD 50 ñ èñïîëüçîâàíèåì ïðîáèò-ìåòîäà) ×àùå âñåãî ïðÿìîå îïðåäåëåíèå ýôôåêòèâ- íîé (ïîðîãîâîé) äîçû äëÿ îòäåëüíîãî æèâîòíî- ãî íåâîçìîæíî, è òîãäà êîëè÷åñòâåííîé õàðàê- òåðèñòèêîé àêòèâíîñòè èñïûòóåìîãî îáðàçöà â êàæäîì îïûòå ñëóæèò äîëÿ (ïðîöåíò) òåñò-îáúåêòîâ, äàâøèõ îòâåò. Çàâèñèìîñòü ýòîé äîëè îò äîçû èìååò âñåãäà âèä S-îáðàçíîé íå- ñèììåòðè÷íîé êðèâîé, êîòîðàÿ ïðè çàìåíå äîç èõ ëîãàðèôìàìè îáû÷íî ñòàíîâèòñÿ áîëåå èëè ìåíåå ñèììåòðè÷íîé.  êà÷åñòâå ïîêàçàòåëÿ, õà- 194 Òàáëèöà 3.2.8.-28.